Integral Molecular是一家研究驱动的生物技术公司，为未被开发的膜蛋白靶标（包括GPCR，离子通道，转运蛋白和病毒包膜）创造创新技术和治疗性抗体。整合膜蛋白包括关键的治疗靶，但由于其结构复杂性和不能在构象完整状态下从脂质膜中除去而难以研究。在Integral Molecular，我们开发创新技术和产品，以满足这些苛刻但重要的目标。
表位映射服务
即使对于复杂蛋白质和构象表位，高分辨率构象表位作图也成功> 95％。
表位数据如何帮助我？
一种可靠的表位作图方法使您能够根据作用机制取得先导候选物，并使用更强的保护单克隆抗体。
表位差异化作用机制
表位图加强知识产权
您的表位定位技术有何不同？
Integral Molecular专有的Shotgun Mutagenesis技术是唯yi能够以单一氨基酸分辨率可靠地绘制构象表位的高通量技术。
到目前为止，我们已经绘制了1,000多个表位，成功率> 95％，包括高度复杂的表位，例如：
- GPCR，转运蛋白和病毒结构蛋白上的表位。
- 构象表位。
- 多亚基蛋白的表位。
- 受体状态依赖性表位。
“Integral Molecular所做的表位作图极大地支持了我们的机制理解和我们专有抗体的知识产权主张。”
为什么这种方法如此成功？
Integral Molecular评估直接在完整细胞内与靶蛋白结合的抗体。使用专有的Shotgun Mutagenesis技术对每个单独的残基进行突变，以高通量创建突变体，从而解析结合特异性。
使用Shotgun Mutagenesis技术的表位作图：
- 自动创建数百到数千个点突变，覆盖靶蛋白中的每个残基，因此可以用单个氨基酸分辨率定位表位。
- 诱变为丙氨酸或任何其他所需的残基。
- 人细胞中单个突变体的天然表达，使得能够绘制构象表位。
- 每个突变体的高通量测试表达，抗体反应性和功能。
- 三维结构上的表位可视化。
你提供什么表位标测服务？
表位映射服务是按收费服务提供的，Integral Molecular提供对所有数据的访问，以便提供监管和知识产权申请。
表位映射服务包括：
- 分析设置报告，具有筛选客户MAb的优化条件。
- 丙氨酸扫描诱变靶蛋白。
- 对Ala扫描突变阵列进行MAb筛选。
- 终报告显示：
- 1.数据的图形表示。
- 2.确定关键的相互作用残基。
- 3.表位定位于靶蛋白结构（如果可用）。
自定义表位映射服务
为感兴趣的蛋白质靶标创建Ala扫描突变文库，并用于通过流式细胞术测试客户MAb /配体的结合以鉴定表位残基。
联系讨论您的项目。
预验证目标上的表位映射服务
Integral Molecular为表位作图服务提供了一系列预先验证的目标，包括：
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CXCR4
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传染病/肿瘤学
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HER2
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肿瘤科
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RSVF
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病毒学
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Zika prM / E.
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病毒学
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请联系获取预先验证目标的完整列表。
映射小分子结合位点
为感兴趣的蛋白质靶标创建Ala扫描突变文库。使用功能测定法在文库上筛选小分子以鉴定对结合或功能至关重要的氨基酸残基。
参见小分子作图的实例：在GPCR CXCR4上的GPCR TAS2R16作图上的作图 见附件
“Integral Molecular能够识别抗体的关键结合残基，在开发多年后未成功完成作图。”
“的团队，良好的沟通，承诺的结果，影响决策的结果。”
-CELL生物学领导发现肿瘤学计划
Integral Molecular如何执行其表位映射服务？
我们的表位作图方法利用Shotgun Mutagenesis，一种用于高通量诱变的专有平台。基本上，我们采用蛋白质的序列并合成将每个氨基酸分别突变为丙氨酸的变体（如果它已经是丙氨酸，则为丝氨酸）。然后将编码仅具有单个丙氨酸突变的全长蛋白质的这些变体中的每一个排列到384孔板的各个孔中并在人细胞中表达。使用高通量流式细胞仪，我们可以确定您的抗体与每种蛋白质变体的结合，并控制表达，运输和折叠中的缺陷。因此，该方法鉴定了对抗体与靶蛋白结合至关重要的氨基酸。
与其他方法（如肽图或H / D交换）相比，Shotgun Mutagenesis Epitope Mapping有哪些好处？
Shotgun Mutagenesis Epitope Mapping通过在全长蛋白的背景下单独突变靶蛋白的每个氨基酸，在人细胞中表达这些变体并测量抗体与每种变体的结合来起作用。使用该方法，可以在氨基酸分辨率下鉴定线性和构象表位。这与肽作图形成对比，肽作图确定抗体与短肽的结合，不依赖于蛋白质三级结构，从而排除其用于作图构象表位的用途。与H / D交换相比，Shotgun Mutagenesis Epitope Mapping不需要可溶形式的靶蛋白，并且依赖于易于解释的流式细胞术数据，简化了分析和解释。终，
您如何控制导致蛋白质错误折叠或表达和/或贩运缺陷的突变？
对照抗体用于验证突变的蛋白质表现出适当的运输，表达和折叠。通常，市售试剂抗体或由顾客针对相同靶标产生的非竞争抗体将用作对照。如果对于给定蛋白质不存在对照抗体，则可以将表位标签（FLAG，V5，HIS6等）添加至靶蛋白并用作表达和运输的对照。
表位映射项目的可交付成果是什么？
个可交付物是分析设置报告，显示在开始诱变之前使用野生型蛋白质构建体对每种抗体的*高通量筛选条件。完成项目后，将编制终报告，其中包括数据的图形表示，关键相互作用残基的识别以及映射到目标蛋白质结构上的表位（如果有的话）。如果需要，Integral Molecular很乐意协助客户准备用于出版，介绍或/监管备案的表位作图数据。
可以测试哪种蛋白质？
表位作图可以在任何可以在哺乳动物细胞中表达的蛋白质上进行，包括可溶性蛋白质和构象复杂蛋白质，如GPCR，离子通道，转运蛋白和病毒包膜蛋白。
Epitope Mapping项目的典型周转时间是多少？
定制表位作图项目通常需要3-4个月。
需要什么才能开始？
我们需要蛋白质序列和500μg每种抗体被映射。
Shotgun Mutagenesis可以使用哪种检测方法？
适用于微孔板形式的任何基于细胞的测定可用于Shotgun诱变。先前的项目通常包括钙通量，病毒感染和基于流式细胞术的免疫荧光测定。
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