产品描述

核糖核酸酶A（Ribonuclease A，RNase A），一种含4个二硫键的单链多肽，分子量约为13.7 kDa。作为一种核糖核酸内切酶（endoribonuclease），特异性降解单链RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）残基。具体来说，切割识别的是由某核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键，从而使得2’, 3’-环磷酸水解为对应的3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG经RNase A切割产生pG-pG-pCp 和A-PG）。
RNase A切割单链RNA活性最高，且在多种反应条件下均有活性：在低盐浓度（0-100 mM NaCl）下，可用来切割单链RNA、双链RNA以及RNA-DNA杂交形成的RNA链，然而高盐浓度（≥0.3 M）下，RNase A仅特异性切割单链RNA。
核糖核酸酶A（RNase A）最常见的应用在于质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除RNA，因此制备过程中DNase酶活性的存在与否是需要重视的污染之一，可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活DNase活性。另外，本品还可用于RNA酶保护分析、RNA序列分析等分子生物学实验。
本品以溶液形式提供，浓度为100 mg/mL。推荐工作浓度为1-100 μg/mL，因应用类型的不同而异。

运输与保存方法

冰袋运输。产品-20℃保存,有效期2年。保存缓冲液为50 mM Tris-HCl (pH 7.4)和50% (v/v)甘油。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

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HB210824

Q：产品应如何稀释？

A：正常建议稀释比例(终浓度)为 1：1000-1：20000，其中时间、温度、稀释比例为影响反应的正面因素。

Q：产品能否可以减少用量？

A：如希望减少用量，可酌情提高反应温度或延长时间。

Q：使用该产品进行消化反应的抑制因子有哪些？

A：在含有以下物质的体系中，全能核酸酶的活性会降低 50%或以上：>150 mM 一价阳离子，>100 mM

磷酸盐，>100 mM 硫酸铵，>100 mM 盐酸胍，>0.1% SDS，>1% Triton X-100，>1% Tween 20。

Q：怎样灭活全能核酸酶？如何去除？

A：采用 EDTA 螯合金属离子会可逆地抑制全能核酸酶活性，极端条件会造成不可逆失活，例如 100 mM NaOH，70℃处理 30 min 等。全能核酸酶可采用阴离子交换柱或气相色谱法从目的产物中分离出去。

Q：全能核酸酶与蛋白酶抑制剂混合物是否兼容？

A：全能核酸酶与不含 EDTA 的蛋白酶抑制剂混合物兼容。若含有 EDTA 且浓度>1 mM 时，会抑制核酸酶活性，建议：如果必须加 EDTA，按照 2 倍EDTA 浓度补加 Mg2+。

Q：产品的用量是多少？

A：需要根据重悬菌体所需裂解液的体积来确定需要酶的量。若普通蛋白纯化，则需要浓度为 25 U/mL；

核蛋白则需要 100 U/mL；病毒表达蛋白纯化需要浓度为 12.5 U/mL；疫苗产品需要量为 0.9-1.1 U/mL。

Q：产品的稳定性如何，如果不小心在室温放置几天后，酶活性会受到怎样的影响？

A：室温 2-3 天，对活力影响不大。

Q：全能核酸酶能在尿素环境消化核酸吗？

A：全能核酸酶在尿素浓度为 6 M 时活性先增加，随着时间延长活性又有降低；在尿素为 7M 时，全能核酸酶 15 分钟后出现变性并失活。但是在酶失活前多数核酸已经降解了。可通过提高全能核酸酶使用浓度补偿 7M 尿素的影响。

[1] Chen Q, Xin M, Wang L, et al. Inhibition of LDHA to induce eEF2 release enhances thrombocytopoiesis. Blood. 2022;139(19):2958-2971. doi:10.1182/blood.2022015620(IF:23.629)
[2] Chen K, Guo T, Li XM, et al. Translational Regulation of Plant Response to High Temperature by a Dual-Function tRNA^His Guanylyltransferase in Rice. Mol Plant. 2019;12(8):1123-1142. doi:10.1016/j.molp.2019.04.012(IF:10.812)