Rat IL-4 ELISA Kit
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白细胞介素-4（IL-4），也称为B细胞刺激因子-1，是一种多效性细胞因子，诱导初始辅助性T细胞向Th2细胞分化，由肥大细胞、活化的T细胞和骨髓基质细胞产生。成熟的人IL-4与牛、小鼠和大鼠IL-4分别具有55%、39%和43%的氨基酸序列同一性。它是一种由T细胞产生的强效细胞因子，在较小程度上由肿瘤相关的自然杀伤细胞、嗜碱性粒细胞和肥大细胞产生。IL-4是分泌Th3的转化生长因子β的分化因子。IL-4通过信号转导子和转录激活子Stat6和一种名为4PS的170K蛋白的酪氨酸磷酸化激活两种不同的信号通路。
翌圣Rat IL-4 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的大鼠白介素4(Rat IL-4)。特异性抗大鼠白介素4抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的大鼠白介素4与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中大鼠白介素4的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 – 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
|
货号 |
98503ES48 / 98503ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
15.63-1000 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测物种 |
大鼠 |
|
检测时长 |
4.5小时 |
|
灵敏度 |
11.6 pg/mL |
|
稀释线性 |
85 – 117% |
|
回收率 |
76 – 123% |
|
板内差 |
2.0% |
|
板间差 |
3.0% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
|
浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
|
|
1000 |
2.821 |
2.716 |
2.768 |
2.777 |
|
500 |
2.148 |
2.029 |
2.088 |
2.056 |
|
250 |
1.322 |
1.245 |
1.283 |
1.326 |
|
125 |
0.802 |
0.775 |
0.788 |
0.767 |
|
62.5 |
0.432 |
0.414 |
0.423 |
0.423 |
|
31.25 |
0.252 |
0.243 |
0.247 |
0.238 |
|
15.625 |
0.145 |
0.142 |
0.144 |
0.147 |
|
0 |
0.060 |
0.058 |
0.059 |
/ |
- 灵敏度检测
IL-4的最低检测限为11.6 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定6次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测22次，评估酶标板间的精密度。
|
项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
||||
|
样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
6 |
6 |
6 |
22 |
22 |
22 |
|
|
平均值 |
468.10 |
122.28 |
32.29 |
468.08 |
123.19 |
32.10 |
|
标准差 |
12.47 |
2.48 |
0.43 |
15.75 |
2.68 |
1.07 |
|
变异系数（%） |
2.7 |
2.0 |
1.3 |
3.4 |
2.2 |
3.3 |
- 回收率检测
通过不同水平的IL-4添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
|
样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
82.4 |
75.7-89.5 |
|
血浆 |
118.4 |
112.0-123.2 |
|
细胞培养上清 |
89.2 |
82.4-93.6 |
- 稀释线性检测
|
血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
99.0 |
94.8-105.1 |
|
1:04 |
96.8 |
95.3-99.6 |
|
1:08 |
104.7 |
103.3-105.8 |
|
1:16 |
110.0 |
105.7-116.7 |
|
血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
98.7 |
95.1-104.8 |
|
1:04 |
100.1 |
94.5-107.5 |
|
1:08 |
103.6 |
97.5-106.9 |
|
1:16 |
92.4 |
85.2-104.5 |
|
细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
|
1:02 |
100.0 |
97.4-101.9 |
|
1:04 |
101.3 |
96.8-104.4 |
|
1:08 |
107.2 |
100.9-112.9 |
|
1:16 |
104.7 |
94.8-112.7 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
|
样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
|
血浆 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组大鼠白介素4。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
|
Recombinant Rat: |
Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
|
|
IL-1α |
IL-10 |
IL-4 |
IL-4 |
|
IL-1β |
IL-18 |
|
|
|
IL-2 |
IFN-γ |
|
|
|
IL-6 |
TNF-α |
|
|
检测简图
疑问解答
|
问题 |
造成原因 |
解决方法 |
|
标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
|
稀释方法不恰当 |
||
|
显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
|
移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
|
|
CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
|
受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
|
|
灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
Ver.CN20231106
白细胞介素-4（IL-4），也称为B细胞刺激因子-1，是一种多效性细胞因子，诱导初始辅助性T细胞向Th2细胞分化，由肥大细胞、活化的T细胞和骨髓基质细胞产生。成熟的人IL-4与牛、小鼠和大鼠IL-4分别具有55%、39%和43%的氨基酸序列同一性。它是一种由T细胞产生的强效细胞因子，在较小程度上由肿瘤相关的自然杀伤细胞、嗜碱性粒细胞和肥大细胞产生。IL-4是分泌Th3的转化生长因子β的分化因子。IL-4通过信号转导子和转录激活子Stat6和一种名为4PS的170K蛋白的酪氨酸磷酸化激活两种不同的信号通路。
翌圣Rat IL-4 ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒，用于定量测定血清、血浆中的大鼠白介素4(Rat IL-4)。特异性抗大鼠白介素4抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本，经过孵育，样本中存在的大鼠白介素4与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入检测抗体孵育结合，经洗涤，再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中大鼠白介素4的浓度成正比。加入终止液终止反应，在450 nm 波长(参考波长570 – 630 nm)测定吸光度值。
产品信息
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货号 |
98503ES48 / 98503ES96 |
|
规格 |
48 T / 96 T |
|
检测范围 |
15.63-1000 pg/mL |
|
检测方法 |
双抗夹心法 |
|
检测物种 |
大鼠 |
|
检测时长 |
4.5小时 |
|
灵敏度 |
11.6 pg/mL |
|
稀释线性 |
85 – 117% |
|
回收率 |
76 – 123% |
|
板内差 |
2.0% |
|
板间差 |
3.0% |
实验数据
- 标曲数据
数据拟合绘制标准曲线，生成的标曲用于实验数据分析。
标准曲线图
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浓度（pg/mL） |
显色值 |
平均值 |
校准值 |
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|
1000 |
2.821 |
2.716 |
2.768 |
2.777 |
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500 |
2.148 |
2.029 |
2.088 |
2.056 |
|
250 |
1.322 |
1.245 |
1.283 |
1.326 |
|
125 |
0.802 |
0.775 |
0.788 |
0.767 |
|
62.5 |
0.432 |
0.414 |
0.423 |
0.423 |
|
31.25 |
0.252 |
0.243 |
0.247 |
0.238 |
|
15.625 |
0.145 |
0.142 |
0.144 |
0.147 |
|
0 |
0.060 |
0.058 |
0.059 |
/ |
- 灵敏度检测
IL-4的最低检测限为11.6 pg/mL，通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。
- 精密度检测
酶标板内精密度
3个已知浓度的样本酶标板内重复测定6次，评估酶标板内的精密度。
酶标板间精密度
3个已知浓度的样本酶标板间重复检测22次，评估酶标板间的精密度。
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项目 |
板内精密度 |
板间精密度 |
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样本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
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6 |
6 |
6 |
22 |
22 |
22 |
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平均值 |
468.10 |
122.28 |
32.29 |
468.08 |
123.19 |
32.10 |
|
标准差 |
12.47 |
2.48 |
0.43 |
15.75 |
2.68 |
1.07 |
|
变异系数（%） |
2.7 |
2.0 |
1.3 |
3.4 |
2.2 |
3.3 |
- 回收率检测
通过不同水平的IL-4添加于样本中来测定回收率，其回收率如下:
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样本类型 |
平均回收率(%) |
范围（%） |
|
血清 |
82.4 |
75.7-89.5 |
|
血浆 |
118.4 |
112.0-123.2 |
|
细胞培养上清 |
89.2 |
82.4-93.6 |
- 稀释线性检测
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血清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
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1:02 |
99.0 |
94.8-105.1 |
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1:04 |
96.8 |
95.3-99.6 |
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1:08 |
104.7 |
103.3-105.8 |
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1:16 |
110.0 |
105.7-116.7 |
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血浆稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
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1:02 |
98.7 |
95.1-104.8 |
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1:04 |
100.1 |
94.5-107.5 |
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1:08 |
103.6 |
97.5-106.9 |
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1:16 |
92.4 |
85.2-104.5 |
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细胞培养上清稀释比例 |
平均期望值(%) |
范围（%） |
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1:02 |
100.0 |
97.4-101.9 |
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1:04 |
101.3 |
96.8-104.4 |
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1:08 |
107.2 |
100.9-112.9 |
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1:16 |
104.7 |
94.8-112.7 |
- 样本值
应用本试剂盒，检测若干健康志愿者的样本，志愿者的用药史不详。
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样本类型 |
样本数目 |
平均值（pg/mL） |
样本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
|
血浆 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
细胞培养上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得15.63 pg/mL
- 测定特异性
本试剂盒识别天然和重组大鼠白介素4。下述因子进行了特异性的评估，没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。
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Recombinant Rat: |
Recombinant Human: |
Recombinant Mouse: |
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IL-1α |
IL-10 |
IL-4 |
IL-4 |
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IL-1β |
IL-18 |
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IL-2 |
IFN-γ |
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IL-6 |
TNF-α |
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检测简图
疑问解答
|
问题 |
造成原因 |
解决方法 |
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标曲不好 |
移液量不准确 |
检查移液器，按时校准，仔细操作，充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。 |
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稀释方法不恰当 |
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|
显色值偏低 |
孵育时间太短 |
给予足够的孵育时间，样本和溶解的标准品隔夜后更换。 |
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移液量不足或稀释不当 |
校准移液器和规范操作 |
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CV偏高 |
酶标板清洗不当 |
使用正确的洗涤工序；如果使用洗板机，检查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
准备新鲜洗液 |
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灵敏度较低 |
试剂盒储存不当 |
按照产品组分表进行保存。 |
Ver.CN20231106
暂无内容
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