DNA纯化试剂盒/PCR产物纯化试剂盒|PCR Purification Kit

发表于2024年7月27日由上海金畔生物科技有限公司

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

MolPure^® DNA Purification Kit采用MolPure^® DNA Column P2和新型的溶液体系，适用于去除PCR反应体系以及各种反应体系（如酶切体系，连接体系等）中的dNTPs，多余的引物，缓冲体系和酶等，也可用作DNA的浓缩和纯化。纯化过程中不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便，15 min即可完成PCR产物纯化，纯化后的DNA纯度高，可直接用于酶切、连接、转化、测序等后续实验。

试剂盒组分

编号	组分名称	19106ES08 (5 T)	19106ES50 (50 T)	19106ES70 (200 T)
19106-A	DNA吸附柱P2 (MolPure^® DNA Column P2)	5个	50个	200个
19106-B	2 mL收集管 (2 mL Collection Tube P2)	5个	50个	200个
19106-C	结合液BD (BD Buffer P2)	2.5 mL	25 mL	100 mL
19106-D	漂洗液W^* (Wash Buffer^*)	1.3 mL	13 mL	50 mL
19106-E	洗脱液 (Elution Buffer)	1 mL	10 mL	20 mL
19106–F	缓冲液AC(AC Buffer P2)	500 µL	5 mL	20 mL

运输和保存方法

常温运输。室温保存，有效期12个月。

注意事项

1. Elution Buffer不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。TE（pH=8.0）或者水（pH>7.5）均可以使用，但是DNA的洗脱效率通常要比Elution Buffer低20%左右，注意TE中的EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

2. 回收纯化的DNA片段一般在100 bp到40 kb之间，过长或者过短片段的回收率会显著下降。

3. 如果待纯化的PCR反应体系中含有非常多的非特异性条带，建议使用MolPure^® DNA Gel Extraction Kit DNA凝胶回收试剂盒(Cat#19101ES)。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

5. 本产品仅作科研用途！

实验前准备

1. 自备设备和试剂：台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴，无水乙醇，离心管等。

2. 除特殊指明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用可以达到13,000 rpm转速的传统台式离心机。

3. 首次使用前，在漂洗液W^*（19101-E）瓶中加入4倍体积的无水乙醇，充分混匀后使用，并做好标记。如果发现漂洗液W^*由于运输或保管不当造成容量严重不准，请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持漂洗液W^*中的乙醇含量。

操作方法

1. PCR反应结束后，将反应液移至干净的1.5 mL离心管中，加入5倍体积的结合液BD，上下颠倒混匀。

【注】：通常取100 µL的PCR反应液进行产物纯化，若需纯化的PCR反应液不足100µL，请加入ddH2O补足到100 µL。

2.将DNA吸附柱P2装在2 mL收集管中，吸取100μl的缓冲液AC至吸附柱中，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液，将吸附柱重新放回收集管。

3.将步骤1的混合液转移到DNA吸附柱P2中，室温放置1 min，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液。

4.将DNA吸附柱P2放回收集管中，加入600 μL 漂洗液W*，12,000 rpm离心30 s，弃掉收集管中过滤液。

【注】：确保漂洗液W*已添加无水乙醇。

5.加入600 µL漂洗液W*，12,000 rpm室温离心30 s，弃掉收集管中过滤液。

6. 将DNA吸附柱P2放回收集管，空柱12,000 rpm室温离心2 min，室温晾干5 min。以除去残留的漂洗液W*。

7. 将DNA吸附柱P2放入新的离心管（自备）中，在DNA吸附柱G1中央加入50 µL洗脱液，室温放置2 min。然后12,000 rpm离心1min。收集滤液，即为DNA溶液。

【注】：可通过以下方式提高回收产量：①70℃预热洗脱液；②将DNA滤液再次上柱，室温放置2 min后，洗脱。

8. 取2-5 μL进行电泳检测浓度，纯化好的DNA可立即用于后续实验或于-20℃冻存。

HB221130

试剂盒组分

编号	组分名称	19106ES08 (5 T)	19106ES50 (50 T)	19106ES70 (200 T)
19106-A	DNA吸附柱P2 (MolPure^® DNA Column P2)	5个	50个	200个
19106-B	2 mL收集管 (2 mL Collection Tube P2)	5个	50个	200个
19106-C	结合液BD (BD Buffer P2)	2.5 mL	25 mL	100 mL
19106-D	漂洗液W^* (Wash Buffer^*)	1.3 mL	13 mL	50 mL
19106-E	洗脱液 (Elution Buffer)	1 mL	10 mL	20 mL
19106–F	缓冲液AC(AC Buffer P2)	500 µL	5 mL	20 mL

运输和保存方法

常温运输。室温保存，有效期12个月。

注意事项

2. 回收纯化的DNA片段一般在100 bp到40 kb之间，过长或者过短片段的回收率会显著下降。

3. 如果待纯化的PCR反应体系中含有非常多的非特异性条带，建议使用MolPure^® DNA Gel Extraction Kit DNA凝胶回收试剂盒(Cat#19101ES)。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

5. 本产品仅作科研用途！

实验前准备

1. 自备设备和试剂：台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴，无水乙醇，离心管等。

2. 除特殊指明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用可以达到13,000 rpm转速的传统台式离心机。

操作方法

1. PCR反应结束后，将反应液移至干净的1.5 mL离心管中，加入5倍体积的结合液BD，上下颠倒混匀。

【注】：通常取100 µL的PCR反应液进行产物纯化，若需纯化的PCR反应液不足100µL，请加入ddH2O补足到100 µL。

2.将DNA吸附柱P2装在2 mL收集管中，吸取100μl的缓冲液AC至吸附柱中，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液，将吸附柱重新放回收集管。

3.将步骤1的混合液转移到DNA吸附柱P2中，室温放置1 min，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液。

4.将DNA吸附柱P2放回收集管中，加入600 μL 漂洗液W*，12,000 rpm离心30 s，弃掉收集管中过滤液。

【注】：确保漂洗液W*已添加无水乙醇。

5.加入600 µL漂洗液W*，12,000 rpm室温离心30 s，弃掉收集管中过滤液。

6. 将DNA吸附柱P2放回收集管，空柱12,000 rpm室温离心2 min，室温晾干5 min。以除去残留的漂洗液W*。

7. 将DNA吸附柱P2放入新的离心管（自备）中，在DNA吸附柱G1中央加入50 µL洗脱液，室温放置2 min。然后12,000 rpm离心1min。收集滤液，即为DNA溶液。

【注】：可通过以下方式提高回收产量：①70℃预热洗脱液；②将DNA滤液再次上柱，室温放置2 min后，洗脱。

8. 取2-5 μL进行电泳检测浓度，纯化好的DNA可立即用于后续实验或于-20℃冻存。

HB221130

Q：这个试剂盒可不可以纯化从细胞中提取出的 DNA？

A：不可以。

Q：回收DNA片段范围是多少？

A：回收 DNA 长度范围：100 bp-40 kb。

Q：洗脱体积如何确定？

A: 洗脱体积越大，洗脱效率越高，但是想要DNA片段浓度高，可以减少洗脱体积。

Q: 洗脱液含有EDTA吗？

A: 不含EDTA，不影响下游酶切、连接反应；也可以选择用水洗脱。

[1] Wang H, Luo W, Wang X, et al. Testicular Nuclear Receptor 4 Regulates Proliferation and Apoptosis of Bladder Cancer via Bcl-2. Front Mol Biosci. 2021;8:670409. Published 2021 Sep 20. doi:10.3389/fmolb.2021.670409(IF:5.246)

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒闪光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒|Luciferase Reporter Gene Assay Kit

发表于2024年7月27日由上海金畔生物科技有限公司

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒闪光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒|Luciferase Reporter Gene Assay Kit

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已发表文献

产品描述

萤火虫萤光素酶（Firefly luciferase）是一种分子量约为61 kDa的蛋白，在ATP、镁离子和氧气存在的条件下，能够催化萤光素（luciferin）氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物荧光，该萤光可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示：

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒闪光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒|Luciferase Reporter Gene Assay Kit

图1：萤火虫萤光素酶检测原理图

Luciferase Reporter Gene Assay kit是一闪光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒，具有灵敏度高的特点，可以高灵敏的检测萤光素酶在哺乳动物细胞中的表达。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	11401JP60（100 T）	11401JP76（500 T）	11401JP80（1000 T）
11401-A	细胞裂解液	20 mL	5×20 mL	10×20 mL
11401-B	萤火虫萤光素酶检测试剂	10 mL	5×10 mL	10×10 mL

运输和保存方式

干冰运输。-20℃保存，有效期1年。

试剂盒内萤火虫萤光素酶检测试剂不能反复冻融，建议分装-20℃或-80℃保存。

注意事项

1）检测过程中需自备耗材和设备包括如下：PBS；100 μL移液器或者排枪；不透光白色酶标板；Luminometer发光计、多功能酶标仪或者其他能够检测生物发光的仪器；

2）反应温度：酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将所有试剂平衡至室温（20-25℃）再使用；

3）检测仪器：能检测化学发光的仪器都适用，但由于不同仪器的设置和灵敏度不同，测得的光信号值也会不同；

4）检测设置：Luminescence，350-700 nm，建议检测时间设为2-10 sec；

5）检测板：为防止孔间干扰，推荐使用不透光白色酶标板。黑色酶标板也可用，但因黑色会吸收光信号，可能会降低信号；

6）单管荧光测定仪测定，每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致；

7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套；

8）本产品仅作科研用途！

实验步骤

I.前处理

1.细胞

1）构建相应的载体。

2）转染步骤请参照相关的说明书。

3）将细胞裂解液充分混匀，按如下方式加入细胞裂解液，充分裂解细胞。

a: 对于贴壁细胞，吸尽细胞培养液，按照下表比例加入细胞裂解液，轻轻旋转培养皿或者培养板使裂解液完全覆盖细胞；

b: 对于悬浮细胞，离心弃去上清，按照下表比例加入裂解液。

细胞培养板	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板
裂解液加入量	100 μL	150 μL	200 μL	300 μL	500 μL

冰上孵育5 min，充分裂解细胞。

【注】：裂解产物可室温保存6 h；4℃保存16 h；-80℃可长期存放（裂解产物不能多次反复冻融），本试剂盒裂解液数量按照24孔板添加量进行配制，如需要更多可单独购买（CAT#11406）。

5）（选作）10000-16000 rpm离心1 min，取上清。

2.叶片组织（以烟草叶片为例，仅供参考）

1）构建相应的载体。

2）挑取转化有重组质粒的农杆菌单菌落，接种到2 mL LB液体培养基（添加相应抗生素）中，28℃ 220 rpm培养过夜。

3）农杆菌培养至OD600为1.0，1700× g离心5 min收集菌体后，用1/2MS液体培养基清洗菌体2次；用含有150 μmol/L乙酰丁香酮的1/2MS液体培养基将农杆菌的OD600调至1.0。

4）将待检测的农杆菌菌液进行混合，使每种菌液的OD600为0.5。

5）选取生长期为1个月左右完全伸展的烟草叶片，将混合好的菌液用1 mL注射器(去掉针头)从烟草叶背面进行注射。为保证实验结果的一致性，需要将对照载体和待检测目标载体的菌液注射在同一叶片的不同部位上, 以保证相同的生长背景。

6）正常温室生长条件下，24-48 h即可取样观察。

7）取3-4片直径为6-8 mm的叶盘，放入2 mL的 EP 管（提前放入3-4个小钢珠）中，液氮中冷冻，使用破碎仪进行研磨破碎（45 Hz，30 s）。破碎完全后在EP管中加入100 μL裂解液。

8）冰上孵育5 min左右，充分裂解叶片。

9）10000-16000 rpm离心1 min，取上清。

3.原生质体（仅供参考）

构建相应的载体。

制备原生质体（参考相关文献：Yoo SD, Cho YH, Sheen J (2007). Arabidopsis mesophyll protoplasts: a versatile cell system for transient gene expression analysis. Nat Protoc 2, 1565–1572）。

在2 mL EP管中加入相应的载体（加入量需要摸索），加入100 μL原生质体悬浮液。轻摇混匀后，加入110 μL PEG-CaCl2溶液，轻弹混匀。在室温放置10-15 min。

4）加入440 μL W5溶液，上下颠倒以停止转化。

5）200× g 室温离心5 min，弃去上清，加入800 μL WI溶液重悬原生质体。

室温避光培养16-24 h。

7）将原生质体加入2 mL离心管中，离心收集原生质体，加入100 μL左右的裂解液。

8）冰上孵育5 min左右，充分裂解原生质体。

9）（选做）10000-16000 rpm离心1 min，取上清。

II.荧光检测

1）按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开，设定参数，测定时间为10 sec，测定间隔为2 sec。

2）取20 μL裂解液加入测量管中（保持每次样品的加样量一致），另外加入100 μL萤火虫萤光素酶检测试剂，震板混匀

2-3次，充分混匀后测定RLU（Relative light unit）。

3）分析数据。

①实验设计：根据不同实验目的，在每个培养板中都应设置对照组、实验组和空白对照组。为了保证实验准确性，理论上每个实验组（包括对照组）都应当减去空白对照组的萤火虫萤光素酶的发光测量值。

a.空白对照组：

背景F：未转染细胞+萤火虫萤光素酶检测试剂。

注：空白对照组的样品量必须与实验样品量相同，包含与实验样品相同的培养基/血清组合，并加上完全相同的检测试剂。

b.实验组：转染细胞经实验化合物处理(即实验组F)。

c.对照组：转染细胞不经处理，用以标准化结果(即对照组F)。

②计算结果：

实验组=实验组F-背景F。

对照组=对照组F-背景F。

表达倍数=实验组/对照组。

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HB220325

[1] Hao Y, Fan X, Shi Y, et al. Next-generation unnatural monosaccharides reveal that JPRRB O-GlcNAcylation regulates pluripotency of mouse embryonic stem cells. Nat Commun. 2019;10(1):4065. Published 2019 Sep 6. doi:10.1038/s41467-019-11942-y(IF:11.878)
[2] Wang X, Qin X, Yan M, et al. Loss of exosomal miR-3188 in cancer-associated fibroblasts contributes to HNC progression. J Exp Clin Cancer Res. 2019;38(1):151. Published 2019 Apr 8. doi:10.1186/s13046-019-1144-9(IF:11.161)
[3] Yin T, Liu Y, Yang M, Wang L, Zhou J, Huo M. Novel Chitosan Derivatives with Reversible Cationization and Hydrophobicization for Tumor Cytoplasm-Specific Burst Co-delivery of siRNA and Chemotherapeutics. ACS Appl Mater Interfaces. 2020;12(13):14770-14783. doi:10.1021/acsami.9b19373(IF:8.758)
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[6] Li S, Zhang L, Zhang G, et al. A nonautophagic role of ATG5 in regulating cell growth by targeting c-Myc for proteasome-mediated degradation. iScience. 2021;24(11):103296. Published 2021 Oct 16. doi:10.1016/j.isci.2021.103296(IF:5.458)
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[16] Wang Y, Bibi M, Min P, Deng W, Zhang Y, Du J. SOX2 promotes hypoxia-induced breast cancer cell migration by inducing NEDD9 expression and subsequent activation of Rac1/HIF-1α signaling. Cell Mol Biol Lett. 2019;24:55. Published 2019 Aug 22. doi:10.1186/s11658-019-0180-y(IF:3.367)
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产品描述

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒闪光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒|Luciferase Reporter Gene Assay Kit

图1：萤火虫萤光素酶检测原理图

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	11401JP60（100 T）	11401JP76（500 T）	11401JP80（1000 T）
11401-A	细胞裂解液	20 mL	5×20 mL	10×20 mL
11401-B	萤火虫萤光素酶检测试剂	10 mL	5×10 mL	10×10 mL

运输和保存方式

干冰运输。-20℃保存，有效期1年。

试剂盒内萤火虫萤光素酶检测试剂不能反复冻融，建议分装-20℃或-80℃保存。

注意事项

2）反应温度：酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将所有试剂平衡至室温（20-25℃）再使用；

3）检测仪器：能检测化学发光的仪器都适用，但由于不同仪器的设置和灵敏度不同，测得的光信号值也会不同；

4）检测设置：Luminescence，350-700 nm，建议检测时间设为2-10 sec；

5）检测板：为防止孔间干扰，推荐使用不透光白色酶标板。黑色酶标板也可用，但因黑色会吸收光信号，可能会降低信号；

6）单管荧光测定仪测定，每个样品与测定试剂混合后到测定前的时间应保持一致；

7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套；

8）本产品仅作科研用途！

实验步骤

I.前处理

1.细胞

1）构建相应的载体。

2）转染步骤请参照相关的说明书。

3）将细胞裂解液充分混匀，按如下方式加入细胞裂解液，充分裂解细胞。

a: 对于贴壁细胞，吸尽细胞培养液，按照下表比例加入细胞裂解液，轻轻旋转培养皿或者培养板使裂解液完全覆盖细胞；

b: 对于悬浮细胞，离心弃去上清，按照下表比例加入裂解液。

细胞培养板	96孔板	48孔板	24孔板	12孔板	6孔板
裂解液加入量	100 μL	150 μL	200 μL	300 μL	500 μL

冰上孵育5 min，充分裂解细胞。

5）（选作）10000-16000 rpm离心1 min，取上清。

2.叶片组织（以烟草叶片为例，仅供参考）

1）构建相应的载体。

2）挑取转化有重组质粒的农杆菌单菌落，接种到2 mL LB液体培养基（添加相应抗生素）中，28℃ 220 rpm培养过夜。

4）将待检测的农杆菌菌液进行混合，使每种菌液的OD600为0.5。

6）正常温室生长条件下，24-48 h即可取样观察。

8）冰上孵育5 min左右，充分裂解叶片。

9）10000-16000 rpm离心1 min，取上清。

3.原生质体（仅供参考）

构建相应的载体。

在2 mL EP管中加入相应的载体（加入量需要摸索），加入100 μL原生质体悬浮液。轻摇混匀后，加入110 μL PEG-CaCl2溶液，轻弹混匀。在室温放置10-15 min。

4）加入440 μL W5溶液，上下颠倒以停止转化。

5）200× g 室温离心5 min，弃去上清，加入800 μL WI溶液重悬原生质体。

室温避光培养16-24 h。

7）将原生质体加入2 mL离心管中，离心收集原生质体，加入100 μL左右的裂解液。

8）冰上孵育5 min左右，充分裂解原生质体。

9）（选做）10000-16000 rpm离心1 min，取上清。

II.荧光检测

1）按照仪器说明书要求将荧光测定仪打开，设定参数，测定时间为10 sec，测定间隔为2 sec。

2）取20 μL裂解液加入测量管中（保持每次样品的加样量一致），另外加入100 μL萤火虫萤光素酶检测试剂，震板混匀

2-3次，充分混匀后测定RLU（Relative light unit）。

3）分析数据。

a.空白对照组：

背景F：未转染细胞+萤火虫萤光素酶检测试剂。

注：空白对照组的样品量必须与实验样品量相同，包含与实验样品相同的培养基/血清组合，并加上完全相同的检测试剂。

b.实验组：转染细胞经实验化合物处理(即实验组F)。

c.对照组：转染细胞不经处理，用以标准化结果(即对照组F)。

②计算结果：

实验组=实验组F-背景F。

对照组=对照组F-背景F。

表达倍数=实验组/对照组。

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产品名称	货号	规格
Firefly Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit辉光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒	11404JP60/80	100/1000 T
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pGMLR-CMV Luciferase Reporter Plasmid（pGMLR-CMV海肾荧光素酶报告基因质粒）	11558JP03	1 μg
Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂	40802JP03	1 mL

HB220325

Q：11401 有很多，现在单要裂解液？

A：有货号 11406.

Q：该试剂盒中裂解后一定要离心吗？

A：可以选做。

Q：测定时间为 10 s，测定间隔为 2 s，为什么这样推荐？如果这样设置，96 孔板这样设置，会导致每孔时间相差很大。仪器可以同时出数据。工程师建议设置动力学检测，设置总时间。

A：不同仪器，设置时间可以不一样。单管手动检测，就按说明书设置会更好。

Q：酶标仪检测吗？

A：带有化学发光模块的可以。

Q：加入检测试剂后，产生的荧光稳定吗？多长时间内检测数据是准确的？

A：加入后海肾会有荧光猝灭的情况，越快越好，尽量 5min 内检测完成。

ELISA检测试剂盒（多款）

发表于2024年7月27日由上海金畔生物科技有限公司

ELISA检测试剂盒（多款）

简要描述：ELISA检测试剂盒，小鼠胰岛素检测试剂盒，牛胰岛素检测试剂盒，狗胰岛素检测试剂盒，马胰岛素检测试剂盒，猫胰岛素检测试剂盒

详细介绍

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供应专业检测试剂盒

人科研用产品
产品名称	规格	新报价
Adiponectin ELISA（脂联素）	1×96 wells	￥8,699
Lp（a） ELISA（载脂蛋白a）	1×96 wells	￥5,765
C-peptide ELISA（C肽）	1×96 wells	￥5,203
C-peptide, Ultrasensitive ELISA（超敏C肽）	1×96 wells	￥5,203
Insulin ELISA（胰岛素）	1×96 wells	￥3,791
Insulin ELISA – 10-pack （胰岛素——10盒）	10 x 96 wells	￥34,036
Insulin, Ultrasensitive ELISA（超敏胰岛素）	1×96 wells	￥4,242
Iso-Insulin ELISA（同工胰岛素）	1×96 wells	￥6,101
Leptin ELISA（瘦素）	1×96 wells	￥6,279
MPO ELISA（髓过氧化物酶）	1×96 wells	￥10,290
Oxidized LDL ELISA（氧化型低密度脂蛋白）	1×96 wells	￥10,747
Proinsulin ELISA（胰岛素原）	1×96 wells	￥6,279

大小鼠科研用产品
产品名称	规格	新报价
C-peptide, Rat ELISA（大鼠C肽）	1×96 wells	￥8,699
Insulin, Mouse ELISA（小鼠胰岛素）	1×96 wells	￥4,736
Insulin, Mouse ELISA 10-pack（小鼠胰岛素——10盒）	10 x 96 wells	￥42,567
Insulin, Mouse Ultrasensitive ELISA（小鼠超敏胰岛素）	1×96 wells	￥5,145
Insulin, Mouse Ultrasensitive ELISA 10-pack（小鼠超敏胰岛素——10盒）	10 x 96 wells	￥46,263
Insulin, Rat ELISA（大鼠胰岛素）	1×96 wells	￥3,869
Insulin, Rat ELISA 10-pack（大鼠胰岛素——10盒）	10 x 96 wells	￥34,755
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Insulin, Rat High Range ELISA – 10-pack（大鼠宽线性胰岛素——10盒）	10 x 96 wells	￥34,755
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Insulin, Rat Ultrasensitive ELISA 10-pack（大鼠超敏胰岛素——10盒）	10 x 96 wells	￥38,740
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其他物种科研用产品
产品名称	规格	新报价
Insulin, Bovine ELISA（牛胰岛素）	1×96 wells	￥6,069
Insulin, Canine ELISA（狗胰岛素）	1×96 wells	￥6,069
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Insulin, Feline ELISA（猫胰岛素）	1×96 wells	￥6,069
Insulin, Ovine ELISA（羊胰岛素）	1×96 wells	￥6,069
Insulin, Porcine ELISA（猪胰岛素）	1×96 wells	￥6,069
Insulin, Porcine High Range ELISA（宽线性猪胰岛素）	1×96 wells	￥6,069
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质控品
产品名称	规格	新报价
Control,Insulin Animal Low,Medium&High	3×0.5ml	￥1,155
Control,Diabetes antigen-Human Low and High	2×0.5ml	￥767
Control,Diabetes antigen-Human Low and High（unassayed）	2×0.5ml	￥1,155
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Control,Obesity A,B,C/Human	3×0.5ml	￥1,239
Diabetes Sample Buffer	1x30ml

细胞 /组织收集保存试剂盒

发表于2024年7月26日由上海金畔生物科技有限公司

一、细胞 /组织收集保存试剂盒

1、Collection and Transport Kit, Small

CTK10-S 适用于常规组织及细胞的收集、运输及保存，CTK10-S1适用于淋巴、血样或骨髓等组织样品的收集、运输及保存。样品体积zui大为120 mL. 试剂盒内含：

（1）125ml无菌收集盒，50/15ml锥形管或血样采集管（用于血样等液体样品）

（2）无菌转移液100ml*1瓶: Cat. #CTK10-S为ZTM:A2™ (Cat. #CTK20-M，含克林霉素，庆大霉素及两性霉素) ；Cat. #CTK10-S1为ZTM:A1™ (Cat. #CTK20-M1，含克林霉素，庆大霉素)

（3）无菌塑料组织转运袋

（4）各式标签及冰袋

2、Collection and Transport Kit, Medium

Medium kits CTK20-M适用于常规组织及细胞的收集、运输及保存，CTK20-M1适用于淋巴、血样或骨髓等组织样品的收集、运输及保存。样品体积zui大为500ml。

试剂盒内含：

（1）1L无菌收集盒或管（用于血样等液体样品）

（2）无菌转移液100ml*2瓶: CTK20-M为ZTM:A2™ (Cat. #CTK20-M，含克林霉素，庆大霉素及两性霉素) ；CTK20-M1为ZTM:A1™ (Cat. #CTK20-M1，含克林霉素，庆大霉素)

（3）无菌塑料组织转运袋

（4）各式标签及冰袋

3、Large Cell and Tissue Collection Kits

CTK30-L适用于常规组织及细胞的收集、运输及保存，CTK30-L1适用于淋巴、血样或骨髓等组织样品的收集、运输及保存。样品体积zui大为4.5 L。

试剂盒内含：

（1）4.5L无菌收集盒或管（用于血样等液体样品）

（2）无菌转移液500ml*1瓶: Cat. #CTK30-L为ZTM:A2™ (Cat. #CTK20-M，含克林霉素，庆大霉素及两性霉素) ； Cat. #CTK30-L1为ZTM:A1™ (Cat. #CTK20-M1，含克林霉素，庆大霉素)

（3）无菌塑料组织转运袋

（4）各式标签及冰袋

4、X-Large Cell and Tissue Collection Kits

CTK40-X适用于常规组织及细胞的收集、运输及保存， CTK40-X1适用于淋巴、血样或骨髓等组织样品的收集、运输及保存。样品体积zui大为8 L。

试剂盒内含：

（1）8L无菌收集盒或管（用于血样等液体样品）

（2）无菌转移液500ml*2瓶: CTK40-X为ZTM:A2™ (Cat. #CTK20-M，含克林霉素，庆大霉素及两性霉素) ； CTK40-X1为ZTM:A1™ (Cat. #CTK20-M1，含克林霉素，庆大霉素)

（3）无菌塑料组织转运袋

（4）各式标签及冰袋

5、血样/体液收集保存试剂盒

? CTK21-MB于血样或液体样本的收集、保存于转运，zui大体积可达1.5 L.

试剂盒内含无菌血样收集盒/管/袋，保护泡沫，生物冰袋等。

二、细胞培养液

1、M3基础培养液

? M3无血清、高营养的拥有产品的基础培养液，适用于多种人及哺乳动物细胞培养, 含多种生长因子、添加剂及优良的缓冲体系，可根据培养细胞的类型添加所需的血清等营养因子,根据是否含有抗生素及酚红指示剂，M3基础培养液可分为以下型号：

培养液	货号	抗生素	酚红
M3:BaseA	M300A	有	有
M3:BaseAC	M300AC	有	无
M3:BaseF	M300F	无	有
M3:BaseFC	M300FC	无	无
M3:10A	M310a	有	有
M3:10AC	M310AC	有	无
M3:D	M3DEF	无	有
M3:DC	M3DEC	无	无
SMX	MSMXS	无	有

M3base 基础培养液中，A型为含复合抗生素，适宜于有污染可能的细胞培养，但是对细胞有一定的伤害，F型不含抗生素；C型不含有酚红指示剂，适用于细胞标记实验，且酚红对部分细胞有生长影响及毒害作用。

M3：10为M3基础培养液添加10%胎牛血清，适宜于胚胎或成体干细胞培养、培养条件严格的间质细胞培养，贴壁细胞培养、多数肿瘤细胞的起始培养液，以及用于促进细胞株生长、分化的培养液等。

M3:D为培养液成分明确，不含任何不明成分生长因子及血清成分，可作为添加特定生长成分实验的对照实验培养液。

SMX为成分明确的生长因子复合物。

储存条件：2-8度避光保存，勿冰冻。

不同组织来源细胞分离培养的培养液选择

动物组织	物种	细胞类型及培养液选择
脂肪	大小鼠，仓鼠，兔	间充质干细胞，脂肪血管基质再生干细胞（10%血清M3培养液）；脂肪细胞（30%血清M3培养液）
骨髓	大小鼠，仓鼠，兔	造血干细胞，间充质干细胞，多种更新前体细胞，内皮细胞（20%血清M3培养液）
脑、脊髓、神经组织	大小鼠	前体细胞及分化（5%血清或10%血清的M3培养液）
肠道	大小鼠，仓鼠	原代上皮细胞/间质支持细胞（2%或10%血清M3培养液）
肾	大小鼠，仓鼠	原代上皮细胞/间质支持细胞（2%，5%或10%血清M3培养液）
肝	大小鼠，仓鼠	原代上皮细胞/间质支持细胞（2%，5%或10%血清M3培养液）
肌肉（外周、心肌、平滑肌）	大小鼠，仓鼠，兔	周细胞，间充质细胞，基质干细胞，可再生细胞（10%血清M3培养液）
胰腺及其它神经内分泌器官	大小鼠，仓鼠	胰岛beta细胞，胰泡细胞（5%血清M3培养液）
血液	大小鼠，仓鼠，兔	间质细胞，内皮细胞（20%血清M3培养液）
皮肤		表皮角质形成细胞，成纤维细胞，间质细胞（10%血清M3培养液）
肿瘤等	大小鼠，仓鼠	上皮细胞，间质细胞，淋巴细胞（10%血清M3培养液）

2、ACE™ 无血清培养液

ACE™是成分明确的，低蛋白 (<20mg/L)的无血清培养液,适宜于适应能力低的细胞培养，以获得良好的生存和生长能力。培养中可不需要二氧化碳, 减少了疫苗生产下游处理程序。同时不添加酚红，在杂交瘤细胞培养时比同类培养液产生更多的抗体。

三、冻存液及细胞处理液

1、CPZ™ 冻存培养液

? CPZ™冻存液含有临床级别的淀粉、右旋糖苷及配方（生长因子，%10胎牛血清，冷冻保存剂）。适宜于包括神经细胞在内的多种人及哺乳动物细胞冷冻保存。使用前添加DMSO至终浓度5% to 10% (v/v),（根据冻存细胞类型确定浓度）。冻存细胞（含少量培养液）体积应少于冻存液体积的20%，细胞数通常为1 -25 x 10⁶ cells/mL。将细胞轻柔重悬于冻存液后置于-80度冰箱至少12小时（放于程序冻存盒内使其温度以1度/分钟缓慢下降），然后转入–135度冰箱或液氮罐长期保存。

2、EZ-CPZ™ 冻存液

?EZ-CPZ™是一种无血清、无蛋白的冻存液，不含任何不明确的或动物来源的成分，适宜于临床或特殊使用目的的细胞冻存（如无血清培养细胞）。冻存于该冻存液的人或其他动物细胞复苏后保持良好的活性、生长性及分化潜能。可以与细胞悬液以1：1混匀冻存，细胞无需离心。使用前添加DMSO至终浓度5%。

3、ZSol™生物处理液

?ZSol™ 系列生物处理缓冲液无菌无酚红，所有成分均为美国药典级。该系列处理也包括ZSol:M™, ZSol:F™ 和ZSol:MH™。可用于来自人及动物的细胞、组织处理，也可用于疫苗、病毒、细菌等微生物及真核细胞源产品的生产。包括细胞分离、、基于正常或基因工程细胞的生物制品（蛋白、激素等）、制药、诊断以及科研。

ZSol:M™ 与ZSol:F™处理液适用于2°C-50°C范围的生物处理，ZSol:MH™处理液适用于低于37度条件下的生物处理。该处理液不能用于细胞冻存的目的。

4、ZTM™ 转运液

ZTM™转运液无菌，无酚红，化学成分明确，适宜于新鲜分离的组织或细胞的转运或临床细胞运输使用，含有可选择的抗生素及谷氨酰胺衍生物以支持活组织或细胞在运输中或短期保存时的活性，不含人或动物源成分。其中ZTM:A1™ 含有6.5 µg/mL克林达霉素和50 µg/mL庆大霉素， ZTM:A2™含有更多抗生素，包括13 µg/mL克林达霉素、100 µg/mL庆大霉素及2.5 µg/mL两性霉素B.

5、ZAPR™ 红细胞裂解液

?ZAPR™ 系列红细胞裂解液无菌，无酚红，所有成分均为美国药典级别，

四、细胞株

1、NCM356细胞株（Normal-Derived Colon Mucosa Cell Line，正常的结肠粘膜细胞株）：

来源于一名65岁男性黑人直肠腺癌患者的结肠粘膜上皮，未注入任何外源基因，表达细胞角蛋白、绒毛蛋白结肠上皮细胞抗原，不表达其它特定细胞株表面抗原。部分细胞表达黏液素合成酶及肿瘤相关抗原。不能在软琼脂上生长，无致瘤性。要求严格的生长条件，须在INCELL's 的M3:10^TM 培养液上做长期培养，倍增时间32-35小时。可广泛用于肠道细胞的研究，如消化道感染疾病、细胞信号转导，细胞因子表达，维生素转运及基因调控。

2、NCM460细胞株（Normal-Derived Colon Mucosa Cell Line，正常的结肠粘膜细胞株）：

来源于一名68岁正常西班牙男性的结肠粘膜上皮，未注入任何外源基因，表达细胞角蛋白、绒毛蛋白结肠上皮细胞抗原，不表达其它特定细胞株表面抗原。部分细胞表达黏液素合成酶及肿瘤相关抗原。不能在软琼脂上生长，无致瘤性。要求严格的生长条件，须在INCELL's 的M3:10^TM 培养液上做长期培养，倍增时间32-38小时。可广泛用于肠道细胞的研究，如消化道感染疾病、细胞信号转导，细胞因子表达，维生素转运，基因调控，蛋白表达，多种生长调控因子的磷酸化研究。

3、IBHK-4细胞株（A Baby Hamster Kidney Derived Cell Line，幼仓鼠肾脏细胞）

IBHK-4细胞株来源于仓鼠肾脏，常规于INCELL的ACE™培养基上悬浮生长，培养液需要无血清、无抗生素及动物源成分，培养时需要轻微摇晃。能在软琼脂上快速形成集落，因此有致瘤性。该细胞株可广泛应用于病毒培养，用于灭毒疫苗生产。

HEK293细胞残留DNA检测试剂盒|HEK293 Host Cell DNA Residue Detection Kit

发表于2024年7月26日由上海金畔生物科技有限公司

HEK293细胞残留DNA检测试剂盒|HEK293 Host Cell DNA Residue Detection Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

HEK293宿主细胞DNA残留检测试剂盒是用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中的HEK293残留DNA含量的试剂盒。

本试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理，可专一快速的检测HEK293细胞的残留DNA，其最低检测限可以达到fg水平；且试剂盒中含有UDG酶，可以消除扩增产物带来的污染。该试剂盒可与本公司的磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒（Cat#18461ES/18462ES）配套使用。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	41302ES50（50T）	41302ES60（100T）
41302-A	HEK293 qPCR mix (UDG plus)	0.8 mL	1.6 mL
41302-B	HEK293 Primer&probe mix	200 μL	400 μL
41302-C	DNA Dilution Buffer	2×2 mL	4×2 mL
41302-D	HEK293 DNA Control（30 ng/μL）	25 μL	50 μL

【注】：本试剂盒不含ROX参比染料，若您目前使用的Real Time PCR扩增仪需要添加ROX参比染料，推荐您购买本公司的50× ROX Reference Dye（Cat#10200ES）。

运输和保存方法

1. 所有组分均干冰运输，-20℃保存，有效期1年。

2. 收到货后，请检查共4个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。

注意事项

1. 使用本试剂前请仔细阅读本说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。

2. 加样和配液步骤尽量都在冰上操作。

3. 每个组分在使用前都应充分震荡混匀，低速离心。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本产品仅作科研用途。

适用机型

包含但不限于以下仪器：

Bio-Rad：CFX96 Optic Module；

Thermo Scientific：ABI 7500；ABI Quant Studio 5；ABI Step OnePlus.

使用方法

一、HEK293 DNA定量参考品的稀释和标准曲线的制备

用试剂盒中提供的DNA稀释液将DNA定量参考品进行梯度稀释，稀释浓度依次为300 pg/μL、30 pg/μL、3 pg/μL、300 fg/μL、30 fg/μL。

具体操作如下：

1. 将试剂盒中的DNA定量参考品和DNA稀释液置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，低速离心10 sec。

2. 取6支洁净的1.5 mL离心管，分别标记为3 ng/μL，①，②，③，④，⑤。

3. 在标记为3 ng/μL的1.5 mL离心管中加入90 μL DNA稀释液和10 μL DNA定量参考品（30 ng/μL），即稀释为3 ng/μL，振荡混匀后短时间快速离心10 sec，该浓度可分装置于–20℃短期保存（不超过3个月），使用时避免反复冻融。

4. 在 ①，②，③，④，⑤ 管中先分别加入90 μL DNA稀释液，再进行梯度稀释，稀释方法如下：

稀释管	稀释比例	终浓度
①	10 μL 3 ng/μL+90 μL DNA Dilution Buffer	300 pg/μL
②	10 μL ①+90 μL DNA Dilution Buffer	30 pg/μL
③	10 μL ②+90 μL DNA Dilution Buffer	3 pg/μL
④	10 μL ③+90 μL DNA Dilution Buffer	300 fg/μL
⑤	10 μL ④+90 μL DNA Dilution Buffer	30 fg/μL

【注】：

1. 每个浓度做3个复孔，该试剂可测试30 fg/μL-300 pg/μL线性范围。若需要，可适当扩大或缩小线性范围。

2. 为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将DNA定量参考品分装储存于–20℃。

3. 已融化未使用的 DNA 稀释液可保存于2-8 ℃ 7天，若长时间不用，请放置于–20℃。

4. 为确保模板完全混匀，每个梯度稀释时需轻微震荡混匀约1 min。

二、样本加标回收质控QC的制备

根据需要设置QC中的HEK293 DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的样本加标回收为例），具体操作如下：

取100 μL待测样本加入1.5 mL洁净的离心管中，再加入10 μL溶液③，混匀，标记为加标回收QC。
加标回收QC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备加标回收QC纯化液。

三、标准品回收质控QC的制备（可选）

根据需要设置QC中的HEK293 DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的标准品回收为例），具体操作如下：

取100 μL 溶液③加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为标准品回收QC。
标准品回收QC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备标准品回收QC纯化液。

四、阴性质控NCS的制备

根据实验设置阴性质控，具体操作如下：

取100 μL样本基质溶液（或DNA 稀释液）加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为阴性质控NCS。
阴性质控NCS和同批待测样本一起进行样本前处理，制备成阴性质控NCS纯化液。

五、无模板对照NTC的制备

根据实验设置无模板对照NTC，具体操作如下：

无模板对照NTC无需进行样本前处理，在qPCR法检测残留DNA含量阶段开始配置即可。
每管或孔中的NTC样本为20 μL Mix混合液（即16 μL HEK293 qPCR mix + 4μL HEK293 Primer&probe mix） + 20 μL DNA Dilution Buffer，建议配置3个重复孔的量。

六、反应体系

组分	体积（μL）
HEK293 qPCR mix (UDG plus)	16
HEK293 Primer&probe mix	4
DNA template	20
总体积	40

【注】：

1. 根据反应孔数计算本次所需的Mix混合液总量：Mix混合液 =（反应孔数+2）× (16+4) μL（含有2孔的损失量）。通常，每个样本做3个重复孔。

2. 加样完成密封好管子后，请先低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，再震荡混匀5 sec以上，完全混匀反应液，再低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，如有气泡，需将气泡排尽。

下图为参考板位：

HEK293细胞残留DNA检测试剂盒|HEK293 Host Cell DNA Residue Detection Kit

该示例是对HEK293残留DNA qPCR法检测操作的展示，检测样本包括：1个无模板对照NTC、5个浓度梯度的DNA标准曲线、3个样本加标回收QC（即加样回收QC）、3个待测样本、3个标准品回收QC（可选）、3个阴性质控NCS（1个即可）。建议每个样本做3个重复孔。

七、扩增程序参数设置（两步法）（以ABI公司7500 qPCR仪、软件版本2.0为例）

创建空白新程序，选择绝对定量检测模板。
创建1个检测探针，命名为“HEK293-DNA”，选择报告荧光基团为“FAM”，猝灭荧光基团为“none”。
在“Assign target (s) to the selected wells”面板中，将标准曲线孔的“Task”一栏设置为“Standard”，并且在“Quantity” 一栏分别赋值为“300000”、“30000”、“3000”、“300”、“30”（含义为每孔的DNA浓度，单位为fg/μL），并且在相应的“sample name”一栏中命名为“300 pg/μL”、“30 pg/μL”、“3 pg/μL”、“300 fg/μL”、“30 fg/μL”；将无模板对照NTC孔的“Task”一栏设置为“NTC”；将阴性质控NCS孔、待测样本孔、样本加标回收QC孔的“Task”一栏设置为“Unknown”，并且在相应的“Sample Name”一栏中分别命名为“NCS”、“TS”、“QC”，之后点击“Start Run”，开始仪器运行。

4. 扩增程序设置：设置反应体积40 μL。

循环步骤	温度（℃）	时间	循环数
扩增产物消化	37 ℃	5 min	1
预变性	95 ℃	10 min	1
变性	95 ℃	15 sec	40
退火/延伸（收集荧光）	60 ℃	60 sec	40

八、qPCR 结果分析

1.在“Analysis”的“Amplification Plot”面板中，系统会自动给出Threshold，有时系统给出的Threshold离基线太近，导致复孔之间Ct相差甚远，可手动调节Threshold 至合适位置，点击“Analyze”。此时可在“Multicomponent Plot”初步查看扩增曲线的形态是否正常。

2. 在“Analysis”的“Standard Curve”面板中，可读取标准曲线的R²、扩增效率（Eff%）、斜率（Slope）、截距（Intercept）等。正常的标曲：R²＞0.99；扩增效率在90%≤Eff%≤110%范围内；Slope在–3.4左右。

3. 在“Analysis”的“View well table”面板中，“Quantity”一栏可读取无模板对照NTC、阴性质控NCS、待测样本TS、样本加标回收QC的检测值，单位为fg/μL，后续可在检测报告中将单位换算成pg/μL或pg/mL。

HB221226

HEK293宿主细胞DNA残留检测试剂盒是用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中的HEK293残留DNA含量的试剂盒。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	41302ES50（50T）	41302ES60（100T）
41302-A	HEK293 qPCR mix (UDG plus)	0.8 mL	1.6 mL
41302-B	HEK293 Primer&probe mix	200 μL	400 μL
41302-C	DNA Dilution Buffer	2×2 mL	4×2 mL
41302-D	HEK293 DNA Control（30 ng/μL）	25 μL	50 μL

【注】：本试剂盒不含ROX参比染料，若您目前使用的Real Time PCR扩增仪需要添加ROX参比染料，推荐您购买本公司的50× ROX Reference Dye（Cat#10200ES）。

运输和保存方法

1. 所有组分均干冰运输，-20℃保存，有效期1年。

2. 收到货后，请检查共4个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。

注意事项

1. 使用本试剂前请仔细阅读本说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。

2. 加样和配液步骤尽量都在冰上操作。

3. 每个组分在使用前都应充分震荡混匀，低速离心。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5. 本产品仅作科研用途。

适用机型

包含但不限于以下仪器：

Bio-Rad：CFX96 Optic Module；

Thermo Scientific：ABI 7500；ABI Quant Studio 5；ABI Step OnePlus.

使用方法

一、HEK293 DNA定量参考品的稀释和标准曲线的制备

用试剂盒中提供的DNA稀释液将DNA定量参考品进行梯度稀释，稀释浓度依次为300 pg/μL、30 pg/μL、3 pg/μL、300 fg/μL、30 fg/μL。

具体操作如下：

1. 将试剂盒中的DNA定量参考品和DNA稀释液置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，低速离心10 sec。

2. 取6支洁净的1.5 mL离心管，分别标记为3 ng/μL，①，②，③，④，⑤。

4. 在 ①，②，③，④，⑤ 管中先分别加入90 μL DNA稀释液，再进行梯度稀释，稀释方法如下：

稀释管	稀释比例	终浓度
①	10 μL 3 ng/μL+90 μL DNA Dilution Buffer	300 pg/μL
②	10 μL ①+90 μL DNA Dilution Buffer	30 pg/μL
③	10 μL ②+90 μL DNA Dilution Buffer	3 pg/μL
④	10 μL ③+90 μL DNA Dilution Buffer	300 fg/μL
⑤	10 μL ④+90 μL DNA Dilution Buffer	30 fg/μL

【注】：

1. 每个浓度做3个复孔，该试剂可测试30 fg/μL-300 pg/μL线性范围。若需要，可适当扩大或缩小线性范围。

2. 为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将DNA定量参考品分装储存于–20℃。

3. 已融化未使用的 DNA 稀释液可保存于2-8 ℃ 7天，若长时间不用，请放置于–20℃。

4. 为确保模板完全混匀，每个梯度稀释时需轻微震荡混匀约1 min。

二、样本加标回收质控QC的制备

根据需要设置QC中的HEK293 DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的样本加标回收为例），具体操作如下：

取100 μL待测样本加入1.5 mL洁净的离心管中，再加入10 μL溶液③，混匀，标记为加标回收QC。
加标回收QC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备加标回收QC纯化液。

三、标准品回收质控QC的制备（可选）

根据需要设置QC中的HEK293 DNA标准品浓度（以制备加3 pg/μL DNA量的标准品回收为例），具体操作如下：

取100 μL 溶液③加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为标准品回收QC。
标准品回收QC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备标准品回收QC纯化液。

四、阴性质控NCS的制备

根据实验设置阴性质控，具体操作如下：

取100 μL样本基质溶液（或DNA 稀释液）加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为阴性质控NCS。
阴性质控NCS和同批待测样本一起进行样本前处理，制备成阴性质控NCS纯化液。

五、无模板对照NTC的制备

根据实验设置无模板对照NTC，具体操作如下：

无模板对照NTC无需进行样本前处理，在qPCR法检测残留DNA含量阶段开始配置即可。
每管或孔中的NTC样本为20 μL Mix混合液（即16 μL HEK293 qPCR mix + 4μL HEK293 Primer&probe mix） + 20 μL DNA Dilution Buffer，建议配置3个重复孔的量。

六、反应体系

组分	体积（μL）
HEK293 qPCR mix (UDG plus)	16
HEK293 Primer&probe mix	4
DNA template	20
总体积	40

【注】：

1. 根据反应孔数计算本次所需的Mix混合液总量：Mix混合液 =（反应孔数+2）× (16+4) μL（含有2孔的损失量）。通常，每个样本做3个重复孔。

下图为参考板位：

HEK293细胞残留DNA检测试剂盒|HEK293 Host Cell DNA Residue Detection Kit

七、扩增程序参数设置（两步法）（以ABI公司7500 qPCR仪、软件版本2.0为例）

创建空白新程序，选择绝对定量检测模板。
创建1个检测探针，命名为“HEK293-DNA”，选择报告荧光基团为“FAM”，猝灭荧光基团为“none”。
在“Assign target (s) to the selected wells”面板中，将标准曲线孔的“Task”一栏设置为“Standard”，并且在“Quantity” 一栏分别赋值为“300000”、“30000”、“3000”、“300”、“30”（含义为每孔的DNA浓度，单位为fg/μL），并且在相应的“sample name”一栏中命名为“300 pg/μL”、“30 pg/μL”、“3 pg/μL”、“300 fg/μL”、“30 fg/μL”；将无模板对照NTC孔的“Task”一栏设置为“NTC”；将阴性质控NCS孔、待测样本孔、样本加标回收QC孔的“Task”一栏设置为“Unknown”，并且在相应的“Sample Name”一栏中分别命名为“NCS”、“TS”、“QC”，之后点击“Start Run”，开始仪器运行。

4. 扩增程序设置：设置反应体积40 μL。

循环步骤	温度（℃）	时间	循环数
扩增产物消化	37 ℃	5 min	1
预变性	95 ℃	10 min	1
变性	95 ℃	15 sec	40
退火/延伸（收集荧光）	60 ℃	60 sec	40

八、qPCR 结果分析

HB221226

HEK293细胞残留DNA检测试剂盒|HEK293 Host Cell DNA Residue Detection Kit

暂无内容

BioGenes ECOLI 360 HCP ELISA试剂盒

发表于2024年7月26日由上海金畔生物科技有限公司

BioGenes中国代理, BioGenes上海代理， BioGenes北京代理，BioGenes广东代理， BioGenes江苏代理BioGenes湖北代理,BioGenes天津代理, BioGenes黑龙江代理, BioGenes内蒙古代理, BioGenes吉林代理, BioGenes福建代理, BioGenes江苏代理, BioGenes浙江代理, BioGenes四川代理,

BioGenes是定制免疫测定和抗体开发的服务提供商，致力于质量和服务。

BioGenes成立于1992年，总部位于德国柏林，是一家*的合作伙伴，为40个国家的600多家客户提供服务。该公司与制药，生物技术公司，CMO和体外诊断公司保持着长期合作关系。

BioGenes为生物制品的质量控制提供高度定制的解决方案，从药物发现和药物开发到生物制品的生产，以及用于诊断目的。  

该公司专注于复杂的定制单克隆，多克隆和抗*型抗体开发，并在高灵敏度和强大的ELISAs和宿主细胞蛋白（HCP）检测的开发，优化，预验证和生产方面拥有良好的记录。

此外，BioGenes还提供增强型通用360-HCP ELISA试剂盒，并为客户提供全面的分析服务。

CHO|360-HCP ELISA Kits and Components

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒和组件

CHO | 360-HCP ELISA是增强的通用宿主细胞蛋白（HCP）测定。它被设计为覆盖更广泛的中国仓鼠卵巢（CHO）宿主细胞蛋白（HCP），而不是其他商业上可获得的通用HCP测定。

CHO | 360-HCP ELISA基于*的分析设计，采用单独制备的HCP抗原和来自两个物种的抗体：

抗原由从CHO-K1和CHO-S的模拟发酵获得的总和分级的HCP制备
通过免疫山羊（试剂盒类型A，B）和兔子（试剂盒类型C，D）产生特异性抗体

该方法产生四种不同的HCP ELISA试剂盒，它们共同制备增强的通用CHO | 360-HCP试验。

根据相应的ICH-指南ICH Q2（R1）（“分析程序的验证：文本和方法”），在BioGenes中对CHO | 360-HCP ELISA方法进行鉴定，由于该方法的性质作为生物测定，略有偏差。

在1D和2D分析中，通过覆盖≥80％的CHO | 360-HCP抗原分布证明了所有四种抗体制剂（A至D）的高特异性。对于每个CHO | 360-HCP ELISA试剂盒（A至D），在测定工作范围内的三个加标样品中，在接受标准100±30％的加标抗原内估计满意的回收率。CHO | 360-HCP ELISA试剂盒（A至D）的高灵敏度，由验证参数LOD，LOQ和工作范围描述，如下所示：

LOD：0.5 – 1.0 ng / mL
LOQ：2 – 3 ng / mL
工作范围：2 – 100 ng / mL

类型	种类	HCP
A型	山羊	总HCP
B型	山羊	分级HCP
C型	兔子	总HCP
D型	兔子	分级HCP

Ecoli|360 HCP ELISA ELISA Kit for the Determination of Ecoli-HCP in process-derived Samples

ECOLI 360 HCP ELISA试剂盒测定加工样品中的大肠杆菌-HCP

1个预定用途

提供的Ecoli 360 HCP ELISA试剂盒是一种夹心ELISA，将以微测试板的形式进行。该方法适用于大肠杆菌-hcp的体外定量测定。 (ST细胞蛋白)在与过程相关的样品的重组生产过程中进行了相应的大肠杆菌细胞系。这个试剂盒包含了所有必要的试剂来执行HCP ELISA。测定法涵盖的初步工作范围为2纳克/毫升至100纳克/毫升的大肠杆菌-HCP。

2.工具包中提供的试剂和材料

3所需但未提供工具包的材料和设备

·用于稀释洗涤缓冲液(10倍)的超纯水(至少双蒸馏质量)

·微测试板清洗后去除残余液体的吸水性纸巾

适用于制备标准、控制和样品的反应管

适用于洗涤缓冲器的容器

·适用于多通道有效管道输送的试剂库

·在孵化过程中覆盖微测试板的盖子

·轨道微测试板振动筛(约500转/分)和旋涡混合器

·微型平板垫圈(可交替进行手动清洗)

·精密吸管(体积可调，从10升至5000升)，有适当的针尖

·多通道吸管(100升)，有适当的针尖

·在450 nm(参考波长620-690 nm)测量光密度的微型平板阅读器

4.试剂的储存

所有供应的试剂(1至8)应冷藏在2-10°C，并应在过期前使用。

5试验原理

Ecoli 360 HCP ELISA是基于96孔微测试板(1x8F条格式)的夹心酶联免疫分析法。可能含有大肠杆菌-hcp杂质的样品在微测试板井中孵化。预包被多克隆山羊大肠杆菌-HCP特异性捕获抗体，并配以不同大肠杆菌-HCP标准浓度的校准曲线。孵化后洗盘子在去除未结合组分的步骤中，添加一种特异性生物素结合的大肠杆菌-HCP特异性检测器抗体。经进一步洗涤后，结合检测器抗体又与Th反应。 E酶结合物(链霉亲和素-共轭过氧化物酶)作为示踪剂。在后一步洗涤后，以四甲基联苯胺(TMB)为酶底物进行显色反应，得到a b。颜色。在底物孵育时间结束时，通过加入硫酸，将蓝色转化为黄色，并测量光密度，使反应停止。波长450 nm(参考波长620~690 nm)。井内光密度与井内大肠杆菌-HCP浓度成正比.大肠杆菌-HCP浓度的测定现在的样品可以根据相应的大肠杆菌-HCP校准曲线进行计算.

警告及预防措施

-该试剂盒只供体外研究之用，只供合资格的人员使用。

-在开始化验前，仔细阅读说明书。

-批号及有效期。不要混合不同批次的试剂。不要使用过期试剂。

-遵守实验室的良好做法和安全准则。必要时戴上实验室外套、一次性手套和防护眼镜。

-试剂盒的某些试剂含有Proclin 300作为防腐剂。这些试剂可能会引起眼睛和皮肤的刺激，应该小心处理。如与眼睛或皮肤接触，立即冲洗。有水。

-储存受光保护的基板溶液。

-停止溶液由0.5摩尔硫酸组成。这种试剂具有腐蚀性，可能会引起眼睛和皮肤的刺激。应该小心处理。如与眼睛或皮肤接触，请冲洗i。和水混合在一起。

-剩余的试剂盒试剂和准备好的溶液必须按照国家要求的安全准则和条例作为潜在危险废物处理。

7样品的处理和贮存过程中HCP的稳定性还没有被研究过。因此，样品应冷藏(2°-10°C)或冷冻(等于或 -20°C以下)取决于样品中重组产品的温度要求。一般来说，应避免重复冻结/解冻样品。

8试剂制备

8.1冲洗缓冲液(1x)的制备，在使用前用超纯水稀释洗涤缓冲液10x(2)1：10(例如100 mL 10 x浓缩液和900 mL超纯水)。洗涤缓冲器(1x)i 在室温下是稳定的，可在一天内使用两周。

8.2本试剂盒中提供的HCP标准是从大肠杆菌BL 21或W 3110细胞裂解物中制备的。种姓蛋白质浓度 R标准按Bradford蛋白法进行调整。大肠杆菌360 hcp ELISA的标准浓度应立即从试剂盒的大肠杆菌hcp标准(4)中制备。在做化验之前。

8 ELISA标准(S1至S8)在测定缓冲液(3)范围内(约2 ng/mL~100 ng/mL大肠杆菌-HCP)按以下稀释方案制备。标准应b e只在准备日使用。

8.3检测器抗体工作液(1x)的制备用检测缓冲液(3)稀释检测器抗体100 x溶液(5)1：100。对于一个微试板，100 x精矿中的120升是毫升。 Xed用12 mL分析缓冲液。本工作解决方案只应在编写之日使用。

8.4酶共轭工作液(1x)的制备，用测定缓冲液(3)稀释酶共轭物100 x溶液(6)1：100。对于一个微试板，100 x精矿中有120升是混合的。 d用12 mL分析缓冲液。本工作解决方案只应在编写之日使用。

9样品制备，如有聚集物，应通过离心除去，以确保适当的分析性能。一般情况下，所有的样品工作稀释剂只适用于准备的日子。样品应在测定前用分析缓冲液(3)稀释。低稀释度为1：2。宜样品稀释度必须由用户确定。对于每种样品类型，视HCP含量而定，并考虑到检测工作范围。

10检测程序

所有ELISA步骤均在室温(18-26°C)下进行.

允许所有材料和试剂的试剂盒在使用前达到室温。

在达到室温之前，不要打开预涂的微测试板(1)的箔袋。检测中未使用的剩余平板条应用干燥剂重新包装到袋中。丙把袋子紧紧地丢在冰箱里。

在所有孵化步骤中，盘子应盖上一个盖子(不提供试剂盒)，以防止溶液蒸发和污染。

与标准和样本一起孵化：

用100毫升/水井的大肠杆菌HCP标准和检测标准以及稀释的样品填充盘子，用连续摇床孵育2小时。标准、化验控制和样品应至少要用复制件进行分析。推荐三份。

洗涤:

取出水井的内容物，用250升/水井的洗涤缓冲液(1倍)清洗盘子4x。洗完后，倒置盘，用强力敲击压榨板，将剩余的液体弃掉。折纸。

与检测器抗体孵育：

用100毫升/井的检测器抗体工作液(1倍)灌入平板，用持续摇动法孵育1.5小时。

洗涤:

取出水井的内容物，用250升/水井的洗涤缓冲液(1倍)清洗盘子4x。洗完后，倒置盘，用强力敲击压榨板，将剩余的液体弃掉。折纸。

酶结合物孵育：

用100微升/井的酶共轭工作液(1x)灌满盘子，用连续摇动培养20分钟。

洗涤:

取出水井的内容物，用250升/水井的洗涤缓冲液(1倍)清洗盘子4x。洗完后，倒置盘，用强力敲击压榨板，将剩余的液体弃掉。折纸。

与底物溶液孵育并停止：

加入100升/孔的底物溶液(7)，用连续摇床孵育15分钟。如果15分钟后显色过低，则底物孵育时间可延长至 30分钟通过在板中直接添加100升/井的停止溶液(8)来停止显色反应，从而产生黄色产品。

量度:

用多通道微板阅读器测量450 nm(OD 450)处的光密度，并给出测定的原始数据。推荐的参考波长为620~690 nm。

11 计算( calculation的名词复数 )

为了产生标准曲线和计算测定对照和样品，平均每个标准的相应复制OD 450值。生成一条标准曲线。合适的软件，适采用四参数或五参数方程的非线性回归模式.根据校准曲线计算的未知样品的浓度必须乘以。用样品的稀释系数进行ED。

12 ELISA性能特征

12.1由于纯化于固定化大肠杆菌-hcp上的多克隆抗体(山羊)的特异性，大肠杆菌-hcp酶联免疫吸附试验被认为是对大肠杆菌-hcp，evd特异的。分别进行1D和2D-Westernblot分析。

12.2分析灵敏度检测限(LOD)为低的大肠杆菌-HCP浓度，可与试验空白区分开来，测定限为0.1~0.5ng/mL。这，这个，那，那个检测限是通过计算HCP浓度来确定的，该浓度对应于高于测定空白平均OD 450的三个标准差的OD 450值。

12.3工作范围大肠杆菌-HCP-ELISA的工作范围为2~100 ng/mL。

13 发现并修理故障，解决纷争

下面列出了分析效果不足的可能原因(解释)。A.整个盘子没有反应

·省略孵化步骤或试剂·错误地使用试剂

*ELISA组分/试剂准备不足。

*ELISA组分/试剂的储存或准备不足

·试剂在使用前不得达到室温

·测量光密度的波长不当。C.对整个平板的高反应性和/或检测背景。

·不适当的洗涤步骤

*ELISA组分/试剂的储存或准备不足

·试剂的过度孵育，例如在停止前先用底物溶液孵育，结果不准确(复制的CV太高)

·不适当的洗涤步骤

*标准、样品和化验对照样品混合不足

不适当的样品制备(样品中的碎片或聚集物通过增加不性而干扰检测性能，应通过离心去除)。

货号	品名	欧元价
IP 103	CHO\|360-HCP ELISA Kit Type C	495
IP 104	CHO\|360-HCP ELISA Kit Type D	495
IP 111	Anti-CHO antibody Type A	450
IP 112	Anti-CHO antibody Type B	450
IP 113	Anti-CHO antibody Type C	450
IP 114	Anti-CHO antibody Type D	450
IP 120	CHO\|360-HCP Standard	1200
IP 130	CHO\|360-HCP Assay Buffer	150
IP 102	CHO\|360-HCP ELISA Kit Type B	495
IP 101	CHO\|360-HCP ELISA Kit Type A	495

CHO | 360-HCP ELISA启动子套装 IP 001

€1,485.00

*酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。
起动装置为客户提供了所有必要的组件，可以快速，轻松地为特定过程选择合适的套件类型（A，B，C或D）

入门套件包括四个完整的即用型套件：

1x A型，1x B型，1x C型，1x D型

每种套件类型包含：

预涂96孔微量测试板
标准CHO-HCP
抗体结合物
酶结合物
洗涤缓冲液
分析缓冲液
底物缓冲液
停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒A型 IP 101

€495.00

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

预涂96孔微量测试板
标准CHO-HCP
抗体缀合物A型
酶结合物
洗涤缓冲液
分析缓冲液
底物缓冲液
停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒B型 IP 102

€495.00

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

预涂96孔微量测试板
标准CHO-HCP
抗体缀合物B型
酶结合物
洗涤缓冲液
分析缓冲液
底物缓冲液
停止解决方案

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒C型IP 103

即用型套件包括：

预涂96孔微量测试板
标准CHO-HCP
抗体缀合物C型
酶结合物
洗涤缓冲液
分析缓冲液
底物缓冲液
停止解决方案

€495.00

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

CHO | 360-HCP ELISA试剂盒D型 IP 104

€495.00

酶免疫测定法测定CHO细胞中的HCP。

即用型套件包括：

预涂96孔微量测试板
标准CHO-HCP
抗体缀合物D型
酶结合物
洗涤缓冲液
分析缓冲液
底物缓冲液
停止解决方案

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

4：富有竞争良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。

培养细胞RNA提取试剂盒|MolPure® Cell RNA Kit

发表于2024年7月26日由上海金畔生物科技有限公司

培养细胞RNA提取试剂盒|MolPure® Cell RNA Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

MolPure^® Cell RNA Kit 适用于从 96、24、12、6 孔板培养细胞 (< 1×10⁶)总 RNA 提取。MolPure^® DNA清除/RNA吸附通用柱为本公司特有新型材料，配合本公司独特的缓冲液配方可最大限度将细胞代谢物、蛋白等杂质去除。提取过程不需要用到有毒的酚、氯仿、β-巯基乙醇等有机溶剂，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便，< 8 min即可完成培养细胞总RNA的提取。提取的 RNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种下游应用实验，如 RT-PCR、RT-qPCR、体外转录、分子克隆等。

产品组分

编号	组分名称	19231JP08 (5 T)	19231JP50 (50 T)
19231-A	DNA清除/RNA吸附通用柱(MolPure^® DNA removing/RNA binding Column C2)	10个	100个
19231-B	2 mL收集管 (2 mL Collection Tube C2)	10个	100个
19231-C	裂解液LB (LB Buffer C2)	3 mL	30 mL
19231-D	去蛋白液PL (PL Buffer C2)	4 mL	40 mL
19231-E	结合液BD^* (BD Buffer C2^*)	1 mL	10 mL
19231-F	漂洗液W^* (Wash Buffer C2^*)	1.3 mL	13 mL
19231-G	RNase-free H₂O	1 mL	5 mL

运输和保存方法

常温运输。室温避光保存，有效期24个月。2-8℃可保存更长时间。

注意事项

1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

2. 注意观察各溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季等室温为低温环境时），可37℃温浴复溶至溶液澄清，避免影响使用效果。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途！

实验前准备

1. 自备设备和试剂：台式离心机、水浴锅或金属浴，1.5 mL RNase-free离心管，液氮，无水乙醇等。

2. 本试剂盒可以抑制RNase活性，不需要低温离心，所有的离心步骤常温进行。

3. 首次使用前，在结合液BD^*（19231-E）瓶中加入标签指定量的无水乙醇（5 T/50 T分别加入2.4 mL/24 mL无水乙醇），充分混匀后使用，并做好标记。

4. 首次使用前，在漂洗液W^*（19231-F）瓶中加入标签指定量的无水乙醇（5 T/50 T分别加入5.2 mL/52 mL无水乙醇），

充分混匀后使用，并做好标记。

操作方法

一、样本预处理

针对贴壁细胞：不需消化，直接裂解；或离心收集细胞后，加入350 μL裂解液LB (< 1×10⁶个细胞)，用移液器反复吹打混匀(直到看不到细胞团为止)。
针对悬浮细胞：直接离心收集细胞，加入350 μL裂解液LB (< 1×10⁶个细胞)，用移液器反复吹打混匀(直到看不到细胞团为止)。

二、RNA提取

1. 将处理好的匀浆液加到DNA清除/RNA吸附通用柱上(柱子放在2 mL收集管内)，13,000 rpm离心1 min，收集含有RNA的滤液。

2. 估算滤液体积后加入等体积的结合液BD^*(请先确认已加入无水乙醇!)，立即轻柔吹打混匀。

3. 将上述混合液全部加入新的DNA清除/RNA吸附通用柱中，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液。

4. 加入700 μL去蛋白液，室温30 s，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液，将DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管中。

5. 加入500 µL漂洗液W^*(请先确认已加入无水乙醇!)，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液。

6. 重复一遍步骤5，将DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管内。

7. 空柱13,000 rpm离心2 min，除去残留漂洗液W^*。

8. 将DNA清除/RNA吸附通用柱放入新的1.5 mL RNase-free离心管中，在膜中央加入30–50 µL RNase-free H₂O，室温放置1 min，然后13,000 rpm离心1 min，收集滤液，即为RNA溶液。样品可置于-80℃长期保存。

【注】：可通过以下方式提高回收产量：①65℃预热RNase-free H₂O；②将RNA滤液再次上柱，室温放置1 min后，洗脱。

HB230104

[1] Cai Z, Zhang Y, Zhang W, et al. Arsenic retention in erythrocytes and excessive erythrophagocytosis is related to low selenium status by impaired redox homeostasis. Redox Biol. 2022;52:102321. doi:10.1016/j.redox.2022.102321(IF:11.799)
[2] Wang Y, Zhu GQ, Tian D, et al. Comprehensive analysis of tumor immune microenvironment and prognosis of m6A-related lncRNAs in gastric cancer. BMC Cancer. 2022;22(1):316. Published 2022 Mar 24. doi:10.1186/s12885-022-09377-8(IF:4.430)
[3] Wang Y, Li N, Tian D, et al. Analysis of m6A-Related lncRNAs for Prognosis Value and Response to Immune Checkpoint Inhibitors Therapy in Hepatocellular Carcinoma. Cancer Manag Res. 2021;13:6451-6471. Published 2021 Aug 16. doi:10.2147/CMAR.S322179(IF:3.989)
[4] Cui Z, Li Y, Liu G, Jiang Y. miR-103a-3p Silencing Ameliorates Calcium Oxalate Deposition in Rat Kidney by Activating the UMOD/TRPV5 Axis. Dis Markers. 2022;2022:2602717. Published 2022 Feb 23. doi:10.1155/2022/2602717(IF:3.434)
[5] Wang L, Tang Y, Wu H, Shan G. TCF12 activates MAGT1 expression to regulate the malignant progression of pancreatic carcinoma cells. Oncol Lett. 2022;23(2):62. doi:10.3892/ol.2021.13180(IF:2.967)
[6] Lou Y, Huang Z, Wu H, Zhou Y. Tranilast attenuates lipopolysaccharide‑induced lung injury via the CXCR4/JAK2/STAT3 signaling pathway. Mol Med Rep. 2022;26(1):220. doi:10.3892/mmr.2022.12736(IF:2.952)
[7] Ni X, Feng Y, Fu X. Role of salt‑inducible kinase 2 in the malignant behavior and glycolysis of colorectal cancer cells. Mol Med Rep. 2021;24(5):822. doi:10.3892/mmr.2021.12460(IF:2.952)
[8] Li Y, Qin G, Du J, Yue P, Zhang Y, Hou N. circRNA LDLRAD3 Enhances the Malignant Behaviors of NSCLC Cells via the miR-20a-5p-SLC7A5 Axis Activating the mTORC1 Signaling Pathway. J Healthc Eng. 2022;2022:2373580. Published 2022 Jan 6. doi:10.1155/2022/2373580(IF:2.682)
[9] Yu X, Jiang N, Li J, Li X, He S. Upregulation of BRD7 protects podocytes against high glucose-induced apoptosis by enhancing Nrf2 in a GSK-3β-dependent manner. Tissue Cell. 2022;76:101813. doi:10.1016/j.tice.2022.101813(IF:2.466)
[10] Lei C, Hou Y, Chen J. Specificity protein 1-activated bone marrow stromal cell antigen 2 accelerates pancreatic cancer cell proliferation and migration. Exp Ther Med. 2021;22(6):1459. doi:10.3892/etm.2021.10894(IF:2.447)

产品组分

编号	组分名称	19231JP08 (5 T)	19231JP50 (50 T)
19231-A	DNA清除/RNA吸附通用柱(MolPure^® DNA removing/RNA binding Column C2)	10个	100个
19231-B	2 mL收集管 (2 mL Collection Tube C2)	10个	100个
19231-C	裂解液LB (LB Buffer C2)	3 mL	30 mL
19231-D	去蛋白液PL (PL Buffer C2)	4 mL	40 mL
19231-E	结合液BD^* (BD Buffer C2^*)	1 mL	10 mL
19231-F	漂洗液W^* (Wash Buffer C2^*)	1.3 mL	13 mL
19231-G	RNase-free H₂O	1 mL	5 mL

运输和保存方法

常温运输。室温避光保存，有效期24个月。2-8℃可保存更长时间。

注意事项

1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

2. 注意观察各溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季等室温为低温环境时），可37℃温浴复溶至溶液澄清，避免影响使用效果。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途！

实验前准备

1. 自备设备和试剂：台式离心机、水浴锅或金属浴，1.5 mL RNase-free离心管，液氮，无水乙醇等。

2. 本试剂盒可以抑制RNase活性，不需要低温离心，所有的离心步骤常温进行。

3. 首次使用前，在结合液BD^*（19231-E）瓶中加入标签指定量的无水乙醇（5 T/50 T分别加入2.4 mL/24 mL无水乙醇），充分混匀后使用，并做好标记。

4. 首次使用前，在漂洗液W^*（19231-F）瓶中加入标签指定量的无水乙醇（5 T/50 T分别加入5.2 mL/52 mL无水乙醇），

充分混匀后使用，并做好标记。

操作方法

一、样本预处理

针对贴壁细胞：不需消化，直接裂解；或离心收集细胞后，加入350 μL裂解液LB (< 1×10⁶个细胞)，用移液器反复吹打混匀(直到看不到细胞团为止)。
针对悬浮细胞：直接离心收集细胞，加入350 μL裂解液LB (< 1×10⁶个细胞)，用移液器反复吹打混匀(直到看不到细胞团为止)。

二、RNA提取

1. 将处理好的匀浆液加到DNA清除/RNA吸附通用柱上(柱子放在2 mL收集管内)，13,000 rpm离心1 min，收集含有RNA的滤液。

2. 估算滤液体积后加入等体积的结合液BD^*(请先确认已加入无水乙醇!)，立即轻柔吹打混匀。

3. 将上述混合液全部加入新的DNA清除/RNA吸附通用柱中，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液。

4. 加入700 μL去蛋白液，室温30 s，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液，将DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管中。

5. 加入500 µL漂洗液W^*(请先确认已加入无水乙醇!)，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液。

6. 重复一遍步骤5，将DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管内。

7. 空柱13,000 rpm离心2 min，除去残留漂洗液W^*。

【注】：可通过以下方式提高回收产量：①65℃预热RNase-free H₂O；②将RNA滤液再次上柱，室温放置1 min后，洗脱。

HB230104

Q：需要加入 β-巯基乙醇吗？

A：扩全程长克隆需要，定量就不用。

Q：19231 可以提取 200nt 的吗？

A：可以的。

Q：试剂盒里面有苯酚之类的吗？

A：没有苯酚。

Q：该试剂盒可以提取几千个细胞吗？

A：只验证过最少 10 的 4 次方个，更少效果可能不好。

Q：19231 和 19221 有什么区别？

A：样本区别：19231 针对培养细胞；19221 针对细胞和组织都可以；单个样本：时间上 19221：30min；19231：11min。

C24P1 STR多重PCR试剂盒毛细管电泳STR分型PCR试剂盒

发表于2024年7月25日由上海金畔生物科技有限公司

C24P1 STR多重PCR试剂盒毛细管电泳STR分型PCR试剂盒

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

本试剂盒适用于毛细管电泳STR分型。本产品所用Taq酶采用抗体封闭，具有较好的扩增灵敏度和特异性。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	13208ES60 (100 T)
13208-A	5×C24P1 Buffer	500 μL
13208-B	B-Taq HS (5 U/μL)	50 μL

运输与保存方式

冰袋运输。-20°C保存，有效期1年。

反应体系（以25 μL为例）

组分	体积（μL）	终浓度
5×C24P1 Buffer	5	1×
Primer mix	X	0.1-0.5 μM
B-Taq HS (5 U/μL)	0.5	2.5 U
1 M MgCl₂	X	1.5-6.0 mM
10 mM dNTP	0.5	200 μM each
模板DNA	X	1-20 ng
无菌超纯水	up to 25	–

【注】:上表中DNA量和引物浓度均为推荐浓度，可根据具体实验情况进行调整最适浓度；STR分型建议模板量控制在1 ng左右。常规PCR实验控制在20 ng左右。

标准扩增程序

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	94°C	8 min	1
变性	94°C	30 s	35
退火	60°C	30 s
延伸	70°C	1 min
终延伸	70°C	1 min	1

【注】:退火/延伸温度、终延伸时间可根据实验要求适当调整。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220628

本试剂盒适用于毛细管电泳STR分型。本产品所用Taq酶采用抗体封闭，具有较好的扩增灵敏度和特异性。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	13208ES60 (100 T)
13208-A	5×C24P1 Buffer	500 μL
13208-B	B-Taq HS (5 U/μL)	50 μL

运输与保存方式

冰袋运输。-20°C保存，有效期1年。

反应体系（以25 μL为例）

组分	体积（μL）	终浓度
5×C24P1 Buffer	5	1×
Primer mix	X	0.1-0.5 μM
B-Taq HS (5 U/μL)	0.5	2.5 U
1 M MgCl₂	X	1.5-6.0 mM
10 mM dNTP	0.5	200 μM each
模板DNA	X	1-20 ng
无菌超纯水	up to 25	–

【注】:上表中DNA量和引物浓度均为推荐浓度，可根据具体实验情况进行调整最适浓度；STR分型建议模板量控制在1 ng左右。常规PCR实验控制在20 ng左右。

标准扩增程序

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	94°C	8 min	1
变性	94°C	30 s	35
退火	60°C	30 s
延伸	70°C	1 min
终延伸	70°C	1 min	1

【注】:退火/延伸温度、终延伸时间可根据实验要求适当调整。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

HB220628

暂无内容

体液外泌体快速抽提试剂盒|Quick exosome isolation Kit(for Body Fluids)

发表于2024年7月25日由上海金畔生物科技有限公司

体液外泌体快速抽提试剂盒|Quick exosome isolation Kit(for Body Fluids)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Exosome（外泌体）是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中；Exosome携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息，不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用，更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。

本试剂盒采用独特的分离技术，可以快速从体液如脑脊液、羊水、唾液、肺泡灌洗液及鼻腔盥洗液等体液中获得大量完整的外泌体颗粒，适用于下游的细胞共培养、电镜分析、Western Blot、荧光定量（qPCR）和高通量测序等应用。

产品组分

编号	组分	产品编号/规格
		41204JP10	41204JP30
41204-A	Exosome isolation solution（Body Fluids）	10 T (5 mL)	30 T (15 mL)

运输和保存方法

室温运输，本试剂盒可于室温稳定保存24个月。

注意事项

1、使用前请将外泌体抽提试剂（41204-A）充分混匀。

2、产品只针对体液样本，不适用其它血清/血液或者是细胞培养上清中外泌体的抽提；如果需要进行细胞上清外泌体分离，请选用细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒。

3、如果想要进一步纯化外泌体，可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5、本产品仅作科研用途！

操作方法

样品预处理：

1、收集新鲜的样品，置于冰上待用；若为冻存的样品，可于冰箱取出后放于25℃水浴中解冻，待完全融化后置于冰上待用。

2、取1 mL（单次样品量不能低于1 mL）体液样品转移至离心管中，4℃，3000 × g离心10 min，弃沉淀，并将上清转移至新的离心管中。

3、将转移的上清，4 ℃，10,000 × g离心20 min，弃沉淀，将上清液转移至新的离心管中。

外泌体分离：

1、向预处理后的样品中，按照下表加入Exosome isolation solution （其他样品量根据表中试剂用量进行等比例变换）。

Body Fluids	41204-A 试剂用量
2.0 mL	0.5 mL
4.0 mL	1.0 mL

2、盖紧离心管盖，涡旋振荡1 min，放置于4℃冰箱静置2 h。

3、取出装有混合液的离心管，4℃，10,000×g离心60 min，弃上清（尽可能吸净上清液），收集富含外泌体的沉淀。

4、吸取一定量体积的1×PBS溶液均匀吹打离心沉淀物，待其充分悬浮于PBS后，将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。

【注】加入PBS的量，建议根据初始样本的体积决定，初始样本体积：1×PBS体积=10:1。

5、将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃，12,000×g离心2 min，弃沉淀，保留上清液，该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。

【注】此时如果依然可以看到明显的沉淀，建议重复步骤5，多次离心至无明显沉淀。

6、纯化后的外泌体可于4℃保存3天，-80℃ 长期保存，建议对外泌体进行分装后保存，避免反复冻融。

外泌体纯化（可选）：

鉴于体液中杂蛋白较多，如果后续需要进行细胞共培养或者高通量测序，建议进一步纯化外泌体。可以使用密理博100kD的孔径的超滤管于4℃以14,000×g离心10-30 min，内管中即为纯化后的外泌体颗粒；除此之外，还可以使用抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

外泌体除菌（可选）：

获得的外泌体后期需要与细胞共培养，可以使用0.22 μm的滤器进行过滤除菌。初次尝试时，外泌体浓度在10-100 μg/mL内做梯度摸索，选择一个较为合适的条件。

相关产品

应用	货号	名称	规格
外泌体提取	41201JP25	Hieff^® Quick exosome isolation kit（for Cell Culture Media）细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒	25 mL
外泌体提取	41202JP30	Hieff^® Quick exosome isolation kit（for Serum/Plasma）血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒	20 mL
外泌体定量	20118JP60	Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印迹及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液	100 mL
外泌体定量	20201JP76	BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白浓度测定试剂盒（增强型）	500 T(100 mL)
外泌体鉴定（Western Blot）	41203JP05	Exosome identification kit for Western Blot 外泌体鉴定试剂盒	5 T
	36232JP10	Precast Protein Improve Gels,,8%,10 wells 8% 高分辨率梯度预制胶,10孔	1盒（10块）
	36233JP10	Precast Protein Improve Gels,,10%,10 wells 10%高分辨率梯度预制胶,10孔	1盒（10块）
	36234JP10	Precast Protein Improve Gels,,12%,10 wells 12%高分辨率梯度预制胶,10孔	1盒（10块）
	36235JP10	Precast Protein Improve Gels,,15%,10 wells 15%高分辨率梯度预制胶,10孔	1盒（10块）
	20352JP76	GoldBand 3-color High Range Protein Marker（10-245kDa）三色预染蛋白质分子量标准	2×250 μL
外泌体标记	40726JP10	DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针	10 mg
外泌体标记	40757JP25	DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针	25 mg

HB210915

产品组分

编号	组分	产品编号/规格
		41204JP10	41204JP30
41204-A	Exosome isolation solution（Body Fluids）	10 T (5 mL)	30 T (15 mL)

运输和保存方法

室温运输，本试剂盒可于室温稳定保存24个月。

注意事项

1、使用前请将外泌体抽提试剂（41204-A）充分混匀。

3、如果想要进一步纯化外泌体，可以使用相应抗体包被的磁珠进行亲和纯化。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5、本产品仅作科研用途！

操作方法

样品预处理：

1、收集新鲜的样品，置于冰上待用；若为冻存的样品，可于冰箱取出后放于25℃水浴中解冻，待完全融化后置于冰上待用。

2、取1 mL（单次样品量不能低于1 mL）体液样品转移至离心管中，4℃，3000 × g离心10 min，弃沉淀，并将上清转移至新的离心管中。

3、将转移的上清，4 ℃，10,000 × g离心20 min，弃沉淀，将上清液转移至新的离心管中。

外泌体分离：

1、向预处理后的样品中，按照下表加入Exosome isolation solution （其他样品量根据表中试剂用量进行等比例变换）。

Body Fluids	41204-A 试剂用量
2.0 mL	0.5 mL
4.0 mL	1.0 mL

2、盖紧离心管盖，涡旋振荡1 min，放置于4℃冰箱静置2 h。

3、取出装有混合液的离心管，4℃，10,000×g离心60 min，弃上清（尽可能吸净上清液），收集富含外泌体的沉淀。

4、吸取一定量体积的1×PBS溶液均匀吹打离心沉淀物，待其充分悬浮于PBS后，将悬液转移至新的1.5 mL离心管中。

【注】加入PBS的量，建议根据初始样本的体积决定，初始样本体积：1×PBS体积=10:1。

5、将含有重悬液的1.5 mL离心管于4℃，12,000×g离心2 min，弃沉淀，保留上清液，该上清液即富含外泌体颗粒的溶液。

【注】此时如果依然可以看到明显的沉淀，建议重复步骤5，多次离心至无明显沉淀。

6、纯化后的外泌体可于4℃保存3天，-80℃ 长期保存，建议对外泌体进行分装后保存，避免反复冻融。

外泌体纯化（可选）：

外泌体除菌（可选）：

相关产品

应用	货号	名称	规格
外泌体提取	41201JP25	Hieff^® Quick exosome isolation kit（for Cell Culture Media）细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒	25 mL
外泌体提取	41202JP30	Hieff^® Quick exosome isolation kit（for Serum/Plasma）血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒	20 mL
外泌体定量	20118JP60	Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印迹及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液	100 mL
外泌体定量	20201JP76	BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白浓度测定试剂盒（增强型）	500 T(100 mL)
外泌体鉴定（Western Blot）	41203JP05	Exosome identification kit for Western Blot 外泌体鉴定试剂盒	5 T
	36232JP10	Precast Protein Improve Gels,,8%,10 wells 8% 高分辨率梯度预制胶,10孔	1盒（10块）
	36233JP10	Precast Protein Improve Gels,,10%,10 wells 10%高分辨率梯度预制胶,10孔	1盒（10块）
	36234JP10	Precast Protein Improve Gels,,12%,10 wells 12%高分辨率梯度预制胶,10孔	1盒（10块）
	36235JP10	Precast Protein Improve Gels,,15%,10 wells 15%高分辨率梯度预制胶,10孔	1盒（10块）
	20352JP76	GoldBand 3-color High Range Protein Marker（10-245kDa）三色预染蛋白质分子量标准	2×250 μL
外泌体标记	40726JP10	DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针	10 mg
外泌体标记	40757JP25	DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针	25 mg

HB210915

体液外泌体快速抽提试剂盒|Quick exosome isolation Kit(for Body Fluids)

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脂联素酶联免疫吸附试剂盒

发表于2024年7月25日由上海金畔生物科技有限公司

美国Crystal Chem—生物检测试剂盒专业供应商

Crystal Chem创建于1989年，从成立之初即致力于研发、制造及销售试剂盒的研发和供应。随着25年的发展，Crystal Chem已经确立了其行业的地位，众多生命科学研究人员使用该公司产品，并在杂志发表大量的学术论文。目前，Crystal Chem供应的ELISA试剂盒主要涉及生物和食品安全检测领域及食品过敏原，以及糖尿病、肥胖症、内分泌、心血管疾病检测试剂盒，同时提供多款高品质生化制剂产品。

脂联素酶联免疫吸附试剂盒 Adiponectin ELISA Kit

使用脂联素人ELISA仅用10μL样品量定量血清和血浆中人脂连蛋白的水平。

强调

试剂盒仅使用10μL样品
动态范围为2 – 100 ng / mL
高灵敏度（0.3 ng / mL）

目录＃	80571
样本大小	10μL
样本类型	血清，血浆
测试	96well
灵敏度	0.3 ng / ml
分析范围	2 – 100 ng / ml
	CV：<10％
存储	2-8℃
方法	ELISA

crystalchem产品列表：

货号	品名	价格	品牌
90080	Ultra Sensitive Mouse Insulin ELISA Kit	5491	crystalchem
90082	Ultra Sensitive Mouse Insulin ELISA Kit (10 Kit Pack)	45518	crystalchem
90060	Ultra Sensitive Rat Insulin ELISA kit	5347	crystalchem
90062	Ultra Sensitive Rat Insulin ELISA Kit (10 Kit Pack)	45518	crystalchem
90010	Rat Insulin ELISA Kit	5347	crystalchem
90020	Mouse Insulin Standard 2ng (Use with Rat Insulin ELISA Kit, 90010)	939	crystalchem
90186	Rabbit Insulin ELISA Kit	6864	crystalchem
90156	Dog Insulin ELISA Kit	7153	crystalchem
90336	Hamster Insulin ELISA Kit	6864	crystalchem
90030	Mouse Leptin ELISA Kit	5708	crystalchem
90040	Rat Leptin ELISA Kit	5708	crystalchem
80470	Mouse Total Bile Acids Assay Kit	5708	crystalchem
80460	Rat Total Bile Acids Assay Kit	5708	crystalchem
80500	Dog Total Bile Acids Assay Kit	5708	crystalchem
80269	Human Total Bile Acids Assay Kit	5708	crystalchem
80310	Mouse Hemoglobin A1c (HbA1c) Assay Kit	5708	crystalchem
80300	Rat Hemoglobin A1c (HbA1c) Assay Kit	5708	crystalchem
80099	Human Hemoglobin A1c (HbA1c) Assay Kit	4552	crystalchem
80420	Mouse Glycated Serum Proteins (GSP) Assay Kit	5708	crystalchem
80430	Rat Glycated Serum Proteins (GSP) Assay Kit	5708	crystalchem
80109	Glycated Serum Proteins (GSP) Assay Kit	5708	crystalchem
80350	Mouse Creatinine Assay Kit	3613	crystalchem
80340	Rat Creatinine Assay Kit	3613	crystalchem
80189	Human Creatinine Assay Kit	3613	crystalchem
80440	Mouse Homocysteine Assay Kit (Fl)	7153	crystalchem
80444	Mouse Homocysteine Assay Kit (Ab)	7153	crystalchem
80450	Rat Homocysteine Assay Kit (Fl)	7153	crystalchem
80454	Rat Homocysteine Assay Kit (Ab)	7153	crystalchem
80490	Homocysteine Assay Kit (Fl)	6430	crystalchem
80494	Homocysteine Assay Kit (Ab)	6430	crystalchem
80249	Adenosine Deaminase (ADA) Kit	5708	crystalchem
80069	LDL-Cholesterol Assay Kit	5708	crystalchem
79980	Mouse LDL-Cholesterol Assay Kit	5708	crystalchem
79960	Rat LDL-Cholesterol Assay Kit	5708	crystalchem
80059	HDL-Cholesterol Assay Kit	5708	crystalchem
79990	Mouse HDL-Cholesterol Assay Kit	5708	crystalchem
79970	Rat HDL-Cholesterol Assay Kit	5708	crystalchem
80229	5' Nucleotidase Assay Kit	5708	crystalchem
80630	Mouse Albumin ELISA Kit	5708	crystalchem
80662	Rat Albumin ELISA Kit	5708	crystalchem
80695	Albumin ELISA Kit	5708	crystalchem
80390	Rat Urinary (NAG) Assay Kit	5708	crystalchem
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80159	Lithium Assay Kit	5708	crystalchem
80169	Potassium Assay Kit	5708	crystalchem
80179	Sodium Assay Kit	5708	crystalchem
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80279	D-Dimer Assay Kit	5708	crystalchem
80550	Rat Testosterone ELISA Kit	7586	crystalchem
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80558	Rat Progesterone ELISA Kit	7586	crystalchem
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80560	Rat Prolactin ELISA Kit	7586	crystalchem
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80567	Horse Estrone-3-Sulfate ELISA Kit	7586	crystalchem
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80584	ALS (Acid Labile Subunit) ELISA Kit	7586	crystalchem
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80600	Mouse Monoclonal Isotyping Kit (10 tests)	3107	crystalchem

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

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