Tth DNA聚合酶 Tth DNA Polymerase (5 U/μL)
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COA
已发表文献
Tth DNA Polymerase是一种从嗜热菌Thermus thermophilus HB8中发现的耐热DNA聚合酶。在Mg2+存在的条件下，该酶具有5′-3′ DNA聚合酶活性和5′-3′ 核酸外切酶活性，无3′-5′ 核酸外切酶活性，可广泛用于PCR扩增反应。在Mn2+存在的条件下，该酶在55-70℃条件下表现出较强的逆转录活性，可用于一步法RT-PCR反应。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
14607ES72 (250 U) |
14607ES80 (1250 U) |
||
|
14607-A |
Tth DNA Polymerase (5 U/μL) |
50 μL |
250 μL |
|
14607–B |
5×Tth RT-PCR Buffer |
1 mL |
4×1.25 mL |
|
14607–C |
10×Tth PCR Buffer (with Mg2+) |
500 μL |
2×1.25 mL |
|
14607-D |
50mM Mg(OAc)2 |
250 μL |
1.25 mL |
|
14607-E |
dNTP Mixture (10 mM each) |
150 μL |
750 μL |
运输与保存方法
干冰运输。-20℃以下储存，有效期2年。
单位定义
用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 74℃，30 分钟内，摄入 10 nmol 的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为 1 个活性单位（U）。
注意事项
1）Buffer 在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！
使用方法
推荐PCR反应操作流程：
1、反应体系配制
|
组分 |
体积（μL） |
|
10×Tth PCR Buffer (with Mg2+) |
5 |
|
Tth DNA Polymerase (5 U/μL) |
0.5 |
|
dNTP Mixture (10 mM each) |
1 |
|
上游 Primer 10μM |
2 |
|
下游 Primer 10μM |
2 |
|
Template DNA |
50 pg- 1μg |
|
ddH2O |
to 50 |
【注】：可根据具体实验调整Tth DNA Polymerase、上下游引物和的dNTP Mixture用量。
2、PCR反应程序
|
循环步骤 |
温度（ºC） |
时间 |
循环数 |
|
预变性 |
94 |
30 sec-5 min |
1 |
|
变性 |
94 |
|
|
|
退火 |
50-70 |
30 sec |
35 |
|
延伸 |
72 |
60 sec/kb |
|
|
终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
【注】：可根据具体实验调整反应条件。
推荐RT-PCR反应操作流程：
1、反应体系配制
|
组分 |
体积（μL） |
|
5×Tth RT-PCR Buffer |
10 |
|
Tth DNA Polymerase (5 U/μL) |
1.5 |
|
50mM Mg(OAc)2 |
2.5 |
|
dNTP Mixture (10 mM each) |
1.5 |
|
上游 Primer 10μM |
2 |
|
下游 Primer 10μM |
2 |
|
Template RNA |
50 pg- 1μg |
|
ddH2O |
to 50 |
【注】：可根据具体实验调整Tth DNA Polymerase、上下游引物和的dNTP Mixture用量。
2、RT-PCR反应程序
|
循环步骤 |
温度（ºC） |
时间 |
循环数 |
|
逆转录 |
55-70 |
30 min |
1 |
|
预变性 |
94 |
30 sec-5 min |
1 |
|
变性 |
94 |
|
|
|
退火 |
50-70 |
30 sec |
35 |
|
延伸 |
72 |
60 sec/kb |
|
|
终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
【注】：可根据具体实验调整反应条件。
HB221123
Tth DNA Polymerase是一种从嗜热菌Thermus thermophilus HB8中发现的耐热DNA聚合酶。在Mg2+存在的条件下，该酶具有5′-3′ DNA聚合酶活性和5′-3′ 核酸外切酶活性，无3′-5′ 核酸外切酶活性，可广泛用于PCR扩增反应。在Mn2+存在的条件下，该酶在55-70℃条件下表现出较强的逆转录活性，可用于一步法RT-PCR反应。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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14607ES72 (250 U) |
14607ES80 (1250 U) |
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14607-A |
Tth DNA Polymerase (5 U/μL) |
50 μL |
250 μL |
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14607–B |
5×Tth RT-PCR Buffer |
1 mL |
4×1.25 mL |
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14607–C |
10×Tth PCR Buffer (with Mg2+) |
500 μL |
2×1.25 mL |
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14607-D |
50mM Mg(OAc)2 |
250 μL |
1.25 mL |
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14607-E |
dNTP Mixture (10 mM each) |
150 μL |
750 μL |
运输与保存方法
干冰运输。-20℃以下储存，有效期2年。
单位定义
用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 74℃，30 分钟内，摄入 10 nmol 的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为 1 个活性单位（U）。
注意事项
1）Buffer 在融解时，如果出现少量沉淀属正常现象，请颠倒混匀后使用。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3）本产品仅作科研用途！
使用方法
推荐PCR反应操作流程：
1、反应体系配制
|
组分 |
体积（μL） |
|
10×Tth PCR Buffer (with Mg2+) |
5 |
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Tth DNA Polymerase (5 U/μL) |
0.5 |
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dNTP Mixture (10 mM each) |
1 |
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上游 Primer 10μM |
2 |
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下游 Primer 10μM |
2 |
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Template DNA |
50 pg- 1μg |
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ddH2O |
to 50 |
【注】：可根据具体实验调整Tth DNA Polymerase、上下游引物和的dNTP Mixture用量。
2、PCR反应程序
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循环步骤 |
温度（ºC） |
时间 |
循环数 |
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预变性 |
94 |
30 sec-5 min |
1 |
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变性 |
94 |
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退火 |
50-70 |
30 sec |
35 |
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延伸 |
72 |
60 sec/kb |
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终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
【注】：可根据具体实验调整反应条件。
推荐RT-PCR反应操作流程：
1、反应体系配制
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组分 |
体积（μL） |
|
5×Tth RT-PCR Buffer |
10 |
|
Tth DNA Polymerase (5 U/μL) |
1.5 |
|
50mM Mg(OAc)2 |
2.5 |
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dNTP Mixture (10 mM each) |
1.5 |
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上游 Primer 10μM |
2 |
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下游 Primer 10μM |
2 |
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Template RNA |
50 pg- 1μg |
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ddH2O |
to 50 |
【注】：可根据具体实验调整Tth DNA Polymerase、上下游引物和的dNTP Mixture用量。
2、RT-PCR反应程序
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循环步骤 |
温度（ºC） |
时间 |
循环数 |
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逆转录 |
55-70 |
30 min |
1 |
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预变性 |
94 |
30 sec-5 min |
1 |
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变性 |
94 |
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退火 |
50-70 |
30 sec |
35 |
|
延伸 |
72 |
60 sec/kb |
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终延伸 |
72 |
10 min |
1 |
【注】：可根据具体实验调整反应条件。
HB221123
暂无内容
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