DNA纯化试剂盒/PCR产物纯化试剂盒|PCR Purification Kit
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COA
已发表文献
MolPure® DNA Purification Kit采用MolPure® DNA Column P2和新型的溶液体系，适用于去除PCR反应体系以及各种反应体系（如酶切体系，连接体系等）中的dNTPs，多余的引物，缓冲体系和酶等，也可用作DNA的浓缩和纯化。纯化过程中不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便，15 min即可完成PCR产物纯化，纯化后的DNA纯度高，可直接用于酶切、连接、转化、测序等后续实验。
试剂盒组分
|
编号 |
组分名称 |
19106ES08 (5 T) |
19106ES50 (50 T) |
19106ES70 (200 T) |
|
19106-A |
DNA吸附柱P2 (MolPure® DNA Column P2) |
5个 |
50个 |
200个 |
|
19106-B |
2 mL收集管 (2 mL Collection Tube P2) |
5个 |
50个 |
200个 |
|
19106-C |
结合液BD (BD Buffer P2) |
2.5 mL |
25 mL |
100 mL |
|
19106-D |
漂洗液W* (Wash Buffer*) |
1.3 mL |
13 mL |
50 mL |
|
19106-E |
洗脱液 (Elution Buffer) |
1 mL |
10 mL |
20 mL |
|
19106–F |
缓冲液AC(AC Buffer P2) |
500 µL |
5 mL |
20 mL |
运输和保存方法
常温运输。室温保存，有效期12个月。
注意事项
1. Elution Buffer不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。TE（pH=8.0）或者水（pH>7.5）均可以使用，但是DNA的洗脱效率通常要比Elution Buffer低20%左右，注意TE中的EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
2. 回收纯化的DNA片段一般在100 bp到40 kb之间，过长或者过短片段的回收率会显著下降。
3. 如果待纯化的PCR反应体系中含有非常多的非特异性条带，建议使用MolPure® DNA Gel Extraction Kit DNA凝胶回收试剂盒(Cat#19101ES)。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
5. 本产品仅作科研用途！
实验前准备
1. 自备设备和试剂：台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴，无水乙醇，离心管等。
2. 除特殊指明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用可以达到13,000 rpm转速的传统台式离心机。
3. 首次使用前，在漂洗液W*（19101-E）瓶中加入4倍体积的无水乙醇，充分混匀后使用，并做好标记。如果发现漂洗液W*由于运输或保管不当造成容量严重不准，请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持漂洗液W*中的乙醇含量。
操作方法
1. PCR反应结束后，将反应液移至干净的1.5 mL离心管中，加入5倍体积的结合液BD，上下颠倒混匀。
【注】：通常取100 µL的PCR反应液进行产物纯化，若需纯化的PCR反应液不足100µL，请加入ddH2O补足到100 µL。
2.将DNA吸附柱P2装在2 mL收集管中，吸取100μl的缓冲液AC至吸附柱中，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液，将吸附柱重新放回收集管。
3.将步骤1的混合液转移到DNA吸附柱P2中，室温放置1 min，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液。
4.将DNA吸附柱P2放回收集管中，加入600 μL 漂洗液W*，12,000 rpm离心30 s，弃掉收集管中过滤液。
【注】：确保漂洗液W*已添加无水乙醇。
5.加入600 µL漂洗液W*，12,000 rpm室温离心30 s，弃掉收集管中过滤液。
6. 将DNA吸附柱P2放回收集管，空柱12,000 rpm室温离心2 min，室温晾干5 min。以除去残留的漂洗液W*。
7. 将DNA吸附柱P2放入新的离心管（自备）中，在DNA吸附柱G1中央加入50 µL洗脱液，室温放置2 min。然后12,000 rpm离心1min。收集滤液，即为DNA溶液。
【注】：可通过以下方式提高回收产量：①70℃预热洗脱液；②将DNA滤液再次上柱，室温放置2 min后，洗脱。
8. 取2-5 μL进行电泳检测浓度，纯化好的DNA可立即用于后续实验或于-20℃冻存。
HB221130
MolPure® DNA Purification Kit采用MolPure® DNA Column P2和新型的溶液体系，适用于去除PCR反应体系以及各种反应体系（如酶切体系，连接体系等）中的dNTPs，多余的引物，缓冲体系和酶等，也可用作DNA的浓缩和纯化。纯化过程中不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便，15 min即可完成PCR产物纯化，纯化后的DNA纯度高，可直接用于酶切、连接、转化、测序等后续实验。
试剂盒组分
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编号 |
组分名称 |
19106ES08 (5 T) |
19106ES50 (50 T) |
19106ES70 (200 T) |
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19106-A |
DNA吸附柱P2 (MolPure® DNA Column P2) |
5个 |
50个 |
200个 |
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19106-B |
2 mL收集管 (2 mL Collection Tube P2) |
5个 |
50个 |
200个 |
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19106-C |
结合液BD (BD Buffer P2) |
2.5 mL |
25 mL |
100 mL |
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19106-D |
漂洗液W* (Wash Buffer*) |
1.3 mL |
13 mL |
50 mL |
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19106-E |
洗脱液 (Elution Buffer) |
1 mL |
10 mL |
20 mL |
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19106–F |
缓冲液AC(AC Buffer P2) |
500 µL |
5 mL |
20 mL |
运输和保存方法
常温运输。室温保存，有效期12个月。
注意事项
1. Elution Buffer不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。TE（pH=8.0）或者水（pH>7.5）均可以使用，但是DNA的洗脱效率通常要比Elution Buffer低20%左右，注意TE中的EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
2. 回收纯化的DNA片段一般在100 bp到40 kb之间，过长或者过短片段的回收率会显著下降。
3. 如果待纯化的PCR反应体系中含有非常多的非特异性条带，建议使用MolPure® DNA Gel Extraction Kit DNA凝胶回收试剂盒(Cat#19101ES)。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
5. 本产品仅作科研用途！
实验前准备
1. 自备设备和试剂：台式离心机、振荡仪、水浴锅或金属浴，无水乙醇，离心管等。
2. 除特殊指明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用可以达到13,000 rpm转速的传统台式离心机。
3. 首次使用前，在漂洗液W*（19101-E）瓶中加入4倍体积的无水乙醇，充分混匀后使用，并做好标记。如果发现漂洗液W*由于运输或保管不当造成容量严重不准，请用量筒定容后再加入4倍体积的无水乙醇。每次使用后将瓶盖盖紧，以保持漂洗液W*中的乙醇含量。
操作方法
1. PCR反应结束后，将反应液移至干净的1.5 mL离心管中，加入5倍体积的结合液BD，上下颠倒混匀。
【注】：通常取100 µL的PCR反应液进行产物纯化，若需纯化的PCR反应液不足100µL，请加入ddH2O补足到100 µL。
2.将DNA吸附柱P2装在2 mL收集管中，吸取100μl的缓冲液AC至吸附柱中，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液，将吸附柱重新放回收集管。
3.将步骤1的混合液转移到DNA吸附柱P2中，室温放置1 min，12,000 rpm离心1 min，弃掉收集管中的过滤液。
4.将DNA吸附柱P2放回收集管中，加入600 μL 漂洗液W*，12,000 rpm离心30 s，弃掉收集管中过滤液。
【注】：确保漂洗液W*已添加无水乙醇。
5.加入600 µL漂洗液W*，12,000 rpm室温离心30 s，弃掉收集管中过滤液。
6. 将DNA吸附柱P2放回收集管，空柱12,000 rpm室温离心2 min，室温晾干5 min。以除去残留的漂洗液W*。
7. 将DNA吸附柱P2放入新的离心管（自备）中，在DNA吸附柱G1中央加入50 µL洗脱液，室温放置2 min。然后12,000 rpm离心1min。收集滤液，即为DNA溶液。
【注】：可通过以下方式提高回收产量：①70℃预热洗脱液；②将DNA滤液再次上柱，室温放置2 min后，洗脱。
8. 取2-5 μL进行电泳检测浓度，纯化好的DNA可立即用于后续实验或于-20℃冻存。
HB221130
Q：这个试剂盒可不可以纯化从细胞中提取出的 DNA？
A：不可以。
Q：回收DNA片段范围是多少？
A：回收 DNA 长度范围：100 bp-40 kb。
Q：洗脱体积如何确定？
A: 洗脱体积越大，洗脱效率越高，但是想要DNA片段浓度高，可以减少洗脱体积。
Q: 洗脱液含有EDTA吗？
A: 不含EDTA，不影响下游酶切、连接反应；也可以选择用水洗脱。
[1] Wang H, Luo W, Wang X, et al. Testicular Nuclear Receptor 4 Regulates Proliferation and Apoptosis of Bladder Cancer via Bcl-2. Front Mol Biosci. 2021;8:670409. Published 2021 Sep 20. doi:10.3389/fmolb.2021.670409(IF:5.246)