重组肠激酶说明书
牛肠激酶，重组肠激酶，肠激酶，肠激酶代理，牛肠激酶，重组肠激酶代理
标签归档：肠激酶
putaibiotech重组肠激酶简介
putaibiotech重组肠激酶简介
规格：100U； 500U ；1000U； 10KU ；100KU； 1MU
一、 产品简介：
肠激酶（Enterokinase, light chain）是一种高度专一性识别 Asp-Asp-Asp- Asp-Lys 序列的蛋白酶，在 Lys 的 C 端水解多肽。它可以将胰蛋白酶原转变为 胰酶，也可以将带有这个识别序列的融合蛋白切开。本产品为采用重组酵母分 泌表达系统制备的高纯度、高活性的牛肠激酶，适用范围广（4-45℃，pH 4.5-9.5），并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。
二、 产品特性：
来源：毕赤酵母
性状：澄清、无色至淡黄色液体
活性：≥ 5.0 U/µl
纯度（蛋白电泳）：单一主条带
特异性：高度专一的识别 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列，在 Lys 的 C 端进行酶切。
三、产品用途：
重组肠激酶用于基因工程产品的开发，尤其适用于生物工程制药业及基因工程、 生物化学、分子生物学等研究。
四、使用方法：
按照酶活性定义，酶切条件举例： 20~50mM Tris-HCl ，pH 8.0-8.5 体系中： 酶：融合蛋白浓度 = 0.1-10U：1mg
最适温度 25-30℃，反应时间 4~24h，可用 SDS-PAGE 检测酶切效果。
五、储存稳定性：
-15℃以下 保存 2 年。杭州浦泰生物科技有限公司
六、产品优势：
无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原 料。
质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量 稳定。
纯度高：不含其他蛋白酶，无非特异性切割。
产量高：吨级罐生产，批产量可达 6 千万单位，适合工业客户生产。
符合法规要求：生产设备和生产环境符合相关法规要求，生产过程*遵循 NSF ISO 9001:2015 质量体系并符合 GMP 指导原则。
质量文件完整：按客户需求，可提供相关法规支持文件。
EK酶（肠激酶）*
EK酶（肠激酶）
本产品为牛肠激酶,纯度高（大于95%）,活性高,酶切特性高! 一支为:500U
重组肠激酶（rEK）是高纯度的牛肠激酶轻链亚基，它有着和天然提取的肠激酶同样特异的切割酶活性质
（切割位点AspAspAspAspLys ）。rEK表现了比天然酶更高的切割活性。我们重组表达的rEK带有6His纯
化标签，即不影响蛋白酶的切割活性，又可以在酶切后易于除去，迅速将剩余的酶去除掉，可以使rEK的
作用更加特异。
单位定义：
一个单位酶定义为25℃，pH8.0，1min切1nM胰蛋白酶原为蛋白酶所需要的酶量。
酶浓度： 2U/μl
建议酶切用量：
1μl的rEK在20℃，20mM Tris-HCl，100mM NaCl，pH7.6的条件下8h可以*切割融合蛋白Trx-PTH（25KD
）0.4mg。
建议酶切温度及酶切buffer：
25℃，20mM Tris-HCl，100mM NaCl，pH8.0。
产品特点：
1. 高活性，高纯度，特异性高；
2. 切割后蛋白的N端与天然蛋白N端相同；
保存条件： -20℃储存。
规格 价格（￥）
500u ￥600
1000u ￥1200
5000u ￥4200
10×5000u ￥40000
上海金畔生物科技有限公司
大肠杆菌表达重组肠激酶rEK(不带标签) 牛肠激酶|Enterokinase,Recombinant,Expressed in E.coli
大肠杆菌表达重组肠激酶rEK(不带标签) 牛肠激酶|Enterokinase,Recombinant,Expressed in E.coli
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
产品简介
重组肠激酶（rEK）是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段，氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致，有着和天然提取的肠激酶同样特异的酶切位点，切割位点Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签，同时重组肠激酶（rEK）具有比天然酶更高的切割活性。
翌圣重组肠激酶为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶，不含其他蛋白酶，可以在较宽pH范围（4.5-9.5）和较宽温度范围内有效切割融合蛋白，并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签，由于具有极高酶切活性，酶切反应使用量少，不影响下游蛋白应用，可不考虑除去。
产品信息
|
货号 |
20401JP60 / 20401JP70 / 20401JP76 / 20401JP80 / 20401JP90 |
|
规格 |
100 U / 200 U / 500 U / 1000 U / 5000 U |
产品性质
|
来源（Source） |
大肠杆菌表达 |
|
分子量（Molecular Weight） |
理论值25.85 kDa |
|
外观（Appearance） |
澄清、无色至淡黄色液体 |
|
酶浓度（Enzyme Concentration） |
≥5 U/uL |
|
活性定义（Activity Definition） |
一个活性单位定义为25°C，12-16 h，在25 mM Tris-HCl，Ph 8.0缓冲体系下，将500 μg带有肠激酶酶切位点的融合蛋白切开95%所需要的酶量 |
|
内毒素检测（Endotoxin） |
用LAL法测定内毒素含量小于1 EU/μg |
|
质量保证（Quality assurance） |
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；不含其他蛋白酶，无非特异性切割 |
|
缓冲体系（Buffer） |
50 mM Tris-HCl，pH8.0，250 mM NaCl，2 mM Ca 2+，50%甘油 |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期2年。尽量避免反复冻融（5次以内，无活性损失）
使用方法（应用举例）
【注】该酶效力高且待切蛋白结构性质不同，建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。
1）反应体系
|
融合蛋白 |
0.05-0.1 mg（蛋白浓度：0.1-1 mg/mL） |
|
Enterokinase |
0.1-0.2 U |
|
缓冲体系 |
25 mM Tris-HCL 8.0 |
2）反应条件：25°C过夜酶切（注：完全酶切需要16-24 h）。
【注】重组肠激酶可使用25 mM Tris-HCl pH 8.0稀释成每1 μL含0.1 U的溶液使用。
4°C低温酶切条件：4°C能对底物进行有效酶切，但需要延长酶切时间至48-64 h 或者增加2-3倍酶量。
注意事项
- 本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。
- 不建议37℃条件下酶切，可能会有非特异性酶切出现。
- 在＞200 mM咪唑，或＞200 mM NaCl，或＞5%甘油，酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，为获得理想的酶切结果，请先将样品透析到25 mM Tris-HCl 8.0缓冲液中，然后再进行酶切实验；若不方便透析，可将样品稀释到咪唑含量在100 mM以下，NaCl浓度在50 mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白比例不变；若干扰因素很多，且不便去除，需要适当增加酶量或延长酶切时间，有助于得到理想的酶切效果。
- 磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用，痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性，因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。
- 本品是具有高酶活力重组肠激酶，切割蛋白使用量少，可不考虑除去。后续如需去除重组肠激酶，可用阴离子交换树脂（如DEAE-FF）对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下：
平衡缓冲液：25 mM Tris-HCl pH 8.0
洗脱缓冲液：25 mM Tris-HCl pH 8.0，含100 mM NaCl
6. 蛋白酶切效果不好，可适当增加酶量，或适当延长酶切时间。
7. 本产品仅作科研用途。
8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20231101
产品简介
重组肠激酶（rEK）是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段，氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致，有着和天然提取的肠激酶同样特异的酶切位点，切割位点Asp-Asp-Asp-Asp-Lys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签，同时重组肠激酶（rEK）具有比天然酶更高的切割活性。
翌圣重组肠激酶为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶，不含其他蛋白酶，可以在较宽pH范围（4.5-9.5）和较宽温度范围内有效切割融合蛋白，并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签，由于具有极高酶切活性，酶切反应使用量少，不影响下游蛋白应用，可不考虑除去。
产品信息
|
货号 |
20401JP60 / 20401JP70 / 20401JP76 / 20401JP80 / 20401JP90 |
|
规格 |
100 U / 200 U / 500 U / 1000 U / 5000 U |
产品性质
|
来源（Source） |
大肠杆菌表达 |
|
分子量（Molecular Weight） |
理论值25.85 kDa |
|
外观（Appearance） |
澄清、无色至淡黄色液体 |
|
酶浓度（Enzyme Concentration） |
≥5 U/uL |
|
活性定义（Activity Definition） |
一个活性单位定义为25°C，12-16 h，在25 mM Tris-HCl，Ph 8.0缓冲体系下，将500 μg带有肠激酶酶切位点的融合蛋白切开95%所需要的酶量 |
|
内毒素检测（Endotoxin） |
用LAL法测定内毒素含量小于1 EU/μg |
|
质量保证（Quality assurance） |
经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；不含其他蛋白酶，无非特异性切割 |
|
缓冲体系（Buffer） |
50 mM Tris-HCl，pH8.0，250 mM NaCl，2 mM Ca 2+，50%甘油 |
储存条件
-25~-15℃保存，有效期2年。尽量避免反复冻融（5次以内，无活性损失）
使用方法（应用举例）
【注】该酶效力高且待切蛋白结构性质不同，建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。
1）反应体系
|
融合蛋白 |
0.05-0.1 mg（蛋白浓度：0.1-1 mg/mL） |
|
Enterokinase |
0.1-0.2 U |
|
缓冲体系 |
25 mM Tris-HCL 8.0 |
2）反应条件：25°C过夜酶切（注：完全酶切需要16-24 h）。
【注】重组肠激酶可使用25 mM Tris-HCl pH 8.0稀释成每1 μL含0.1 U的溶液使用。
4°C低温酶切条件：4°C能对底物进行有效酶切，但需要延长酶切时间至48-64 h 或者增加2-3倍酶量。
注意事项
- 本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。
- 不建议37℃条件下酶切，可能会有非特异性酶切出现。
- 在＞200 mM咪唑，或＞200 mM NaCl，或＞5%甘油，酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，为获得理想的酶切结果，请先将样品透析到25 mM Tris-HCl 8.0缓冲液中，然后再进行酶切实验；若不方便透析，可将样品稀释到咪唑含量在100 mM以下，NaCl浓度在50 mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白比例不变；若干扰因素很多，且不便去除，需要适当增加酶量或延长酶切时间，有助于得到理想的酶切效果。
- 磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用，痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性，因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。
- 本品是具有高酶活力重组肠激酶，切割蛋白使用量少，可不考虑除去。后续如需去除重组肠激酶，可用阴离子交换树脂（如DEAE-FF）对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下：
平衡缓冲液：25 mM Tris-HCl pH 8.0
洗脱缓冲液：25 mM Tris-HCl pH 8.0，含100 mM NaCl
6. 蛋白酶切效果不好，可适当增加酶量，或适当延长酶切时间。
7. 本产品仅作科研用途。
8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20231101
Q：该酶使用浓度是多少？
A：该酶效力高且待切蛋白结构性质不同，建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。
Q：如果需要去除重组肠激酶，该如何去除？
A：本品不含标签，后续如需去除重组肠激酶，可用阴离子交换树脂（eg.DEAE-FF） 对其进行洗脱。
Q：本品一定要去除吗？
A：本品是具有高酶活力重组肠激酶，切割蛋白使用量少，可不考虑除去。
Q：本品酶切效果不好怎么办？
A：蛋白酶切效果不好，可适当增加酶量，或适当延长酶切时间。
[1] Deng Z, Zeng Q, Tang J, et al. Anti-inflammatory effects of FS48, the first potassium channel inhibitor from the salivary glands of the flea Xenopsylla cheopis. J Biol Chem. 2021;296:100670. doi:10.1016/j.jbc.2021.100670(IF:5.157)
[2] Hong B, Chang Q, Zhai Y, Ren B, Zhang F. Functional Characterization of Odorant Binding Protein PyasOBP2 From the Jujube Bud Weevil, Pachyrhinus yasumatsui (Coleoptera: Curculionidae). Front Physiol. 2022;13:900752. Published 2022 Apr 27. doi:10.3389/fphys.2022.900752(IF:4.566)
牛肠激酶产品信息
牛肠激酶产品信息
简要描述：本产品为牛肠激酶,纯度高（大于95%）,活性高,酶切特性高! 一支为:500U
详细介绍
产品咨询
EK酶（肠激酶）
本产品为牛肠激酶,纯度高（大于95%）,活性高,酶切特性高! 一支为:500U
重组肠激酶（rEK）是高纯度的牛肠激酶轻链亚基，它有着和天然提取的肠激酶同样特异的切割酶活性质
（切割位点AspAspAspAspLys ）。rEK表现了比天然酶更高的切割活性。我们重组表达的rEK带有6His纯
化标签，即不影响蛋白酶的切割活性，又可以在酶切后易于除去，迅速将剩余的酶去除掉，可以使rEK的
作用更加特异。
单位定义：
一个单位酶定义为25℃，pH8.0，1min切1nM胰蛋白酶原为蛋白酶所需要的酶量。
酶浓度： 2U/μl
建议酶切用量：
1μl的rEK在20℃，20mM Tris-HCl，100mM NaCl，pH7.6的条件下8h可以*切割融合蛋白Trx-PTH（25KD
）0.4mg。
建议酶切温度及酶切buffer：
25℃，20mM Tris-HCl，100mM NaCl，pH8.0。
产品特点：
1. 高活性，高纯度，特异性高；
2. 切割后蛋白的N端与天然蛋白N端相同；
保存条件： -20℃储存。
规格 价格（￥）
500u ￥400
1000u ￥750
5000u ￥ 3500
10×5000u ￥30000