hyglos去内毒素产品


hyglos去内毒素产品

简要描述:Hyglos is a leading German biotech company offering products for the capture, detection and decolonization of bacteria and bacterial components based on its advanced,

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Hyglos GmbH is a leading German biotech company offering products for the capture, detection and decolonization of bacteria and bacterial components based on its advanced, proprietary phage-ligand technology. It is owned by Hyglos Invest GmbH and Institut Mérieux, investors coming from science and industry. Hyglos’ core competency is to exploit the principles of bacteriophage biology for diagnostic, antimicrobial and research applications relating to:

  • Endotoxin removal
  • Endotoxin detection
  • Endotoxin-free proteins and reagents
  • Food and environmental microbiology
  • Human Diagnostics
  • Antimicrobials (e.g. MRSA)

 

货号 品名 包装 价格 品牌
311053

EndoTrap® blue  1ml 4369 hyglos
311063 EndoTrap® blue  5x1ml 12240 hyglos
311064 EndoTrap® blue  10ml 16150 hyglos
311075 EndoTrap® blue  50ml 71570 hyglos
321053

EndoTrap® red  1ml 4369 hyglos
321063 EndoTrap® red  5x1ml 12240 hyglos
321064 EndoTrap® red  10ml 16150 hyglos
321075 EndoTrap® red  50ml 71570 hyglos
800033

EndoTrap® Leakage ELISA 96t 15385 hyglos
800034 EndoTrap® HD 10ml 21760 hyglos
800035 EndoTrap® HD 50ml 92650 hyglos
800036 EndoTrap® HD 250ml 340000 hyglos
311067

EndoTrap® blue Regeneration Buffer 125ml 1190 hyglos
311108 EndoTrap® blue Equilibration Buffer 125ml 612 hyglos
321080 EndoTrap® red Regeneration Buffer 125ml 1190 hyglos
321081 EndoTrap® red Equilibration Buffer 125ml 612 hyglos
321082 EndoTrap® red Low Salt Equilibration Buffer 125ml 714 hyglos
800003 EndoTrap® red Regeneration Buffer, 10X 1000ml 11730 hyglos
800004 EndoTrap® blue Regeneration Buffer, 10X 1000ml 11730 hyglos
800006 Disposable Polypropylene Funnel 5pack 510 hyglos
800007 Empty Columns, Large 5pack 629 hyglos
800008 Empty Columns, Small 5pack 714 hyglos

Hyglos——专业检测与鉴定内毒素、再现屏蔽内毒素分子 中国*代理


Hyglos——专业检测与鉴定内毒素、再现屏蔽内毒素分子 中国*代理

简要描述:Hyglos GmbH代理,Hyglos GmbH中国代理,Hyglos GmbH上海代理,Hyglos GmbH代理,Hyglos GmbH
Hyglos GmbH专业代理-上海金畔生物科技有限公司,具体产品信息欢迎电询

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关键词:Hyglos,Hyglos GmbH ,EndoZyme,EndoLISA ,消除内毒素屏蔽试剂盒,内毒素检测,内毒素清除试剂盒,EndoTrap,无内毒素玻璃管,免疫磁珠分离试剂盒,无内毒素超纯水
 
Hyglos——专业检测与鉴定内毒素、再现屏蔽内毒素分子
Hyglos GmbH是一家成立于2009年,位于德国慕尼黑生物技术中心的高科技生物制品公司,Hyglos GmbH拥有*的技术从噬菌体中纯化分离特定的蛋白质,用以检测及清除生物制品中的细菌及细菌毒素,如LPS(脂多糖、内毒素)等。基于*无动物来源的噬菌体重组蛋白及重组鲎因子C (rFC),公司创新性开发出新一代的LAL内毒素检测方法,突破了常规LAL内毒素检测法依赖鲎血的溶解物的局限,为生物制药领域的科研与生产创造了新的契机。Hyglos在探索噬菌体生物学用于诊断、抗菌及研究应用中,开发了包括内毒素检测、消除内毒素屏蔽(克服Low Endotoxin Recovery (LER)潜在的威胁)、内毒素清除、无内毒素蛋白/试剂、疾病诊断、抗菌剂在内的高科技生物产品,适用于人类疾病诊断及食物安全检测。

公司主要产品:                                                                   
一、内毒素检测试剂盒
1、EndoZyme? 重组C因子检测法:
该检测方法是一种微板荧光终点检测法,用于体外定量检测食品、生物药品或药品原料、生产设备中的内毒素(LPS)。该检测试剂盒避免了常规LAL法检测内毒素时?葡聚糖影响LAL反应级联造成的假阳性现象及结果偏高的状况。该产品具有无动物来源成分、检测的高度敏感性(检出低至0.005-50 EU/ml),无假阳性,高度可靠性及产品批次间*性,保证检测的可重复性等优点,特别适用于简单条件下或缓冲体系中内毒素的检测。对于复杂样本/材料,请考虑使用下一产品。

2、EndoLISA? ELISA-内毒素检测试剂
EndoLISA? is该检测方法同样是一种微板荧光终点检测法,用于体外定量检测食品、生物药品或药品原料、环境样本中的内毒素(LPS)。在检测方法利用预植入微孔板中的能特异结合内毒素分子的噬菌体蛋白,通过特异性结合与洗涤步骤,尽可能地减少了样本中其他成分对检测结果的影响,因此具有更高的可重复性、更广的检测范围0.05 – 500 EU/ml及节省试剂(特别是日渐减少的鲎资源),可适用于简单条件、复杂条件以及高盐环境中下内毒素检测。

二、消除内毒素屏蔽试剂盒:
常规LAL检测内毒素时经常由于多种阳离子蛋白屏蔽内毒素活性,影响检测结果,称为内毒素屏蔽。Endo-RS? is a novel sample preparation method enabling complete endotoxin recovery in biopharmaceutical drug formulations containing non-ionic surfactants such as Polysorbate 20, Polysorbate 80 or Octylphenol ethoxylates. 非离子型表面活性剂是被*的导致Low Endotoxin Recovery (LER)的元凶. 大量的现象已经显示表面活性剂的理化特征可使内毒素分子无法接触到检测试剂,从而影响检测结果。The Endo-RS? 内毒素呈现试剂盒可以使全部内毒素活性呈现,内含一系列必要的试剂及操作指南,适用于去除每一个含有表面活性剂的生物药物中内毒素的屏蔽,使实验结果更为可靠

三、内毒素清除试剂盒
 
EndoTrap? 适用于从范围广泛的水溶性样本中清除内毒素分子 (LPS),包括蛋白质,抗体,疫苗。核酸,缓冲液及细胞提取液,在清除内毒素分子的同时良好地保存了样本本身的特征和功能。目前已经超过150位科学家使用了该产品,并发表相关论文,表明Hyglos 公司出品的EndoTrap? 相较于其它内毒素清除产品具有更为优越的性能(99.99%的内毒素清除率,样本回复率超过95%,无细胞毒性作用,操作简便,可重复使用十次以上)。

四、无内毒素试剂/耗材

1、EndoGrade? 无内毒素卵清蛋白
  

2、EndoGrade? 无内毒素超纯水

3、EndoGrade? 无内毒素玻璃管
适用于无内毒素要求实验以及EndoLISA? kit试剂的封装、检测,该管以无内毒素硼硅酸盐玻璃制成,配以铝螺盖,容量5毫升,高50mm,外径16.1mm,壁厚0.95mm,内毒素含量少于0.005 EU/ml,可重复使用。
 
4、免疫磁珠分离试剂盒 (IMS):
hyBeads? Streptavidin是一种超顺磁性产品,用于直接或间接磁性高效分离与纯化大量靶分子,如何算,抗体,蛋白,凝集素与糖类。

EndoTrap?
EndoTrap?是运用亲和层析法来高效去除内毒素,包括EndoTrap? blue, EndoTrap? red, 和EndoTrap? HD三个系列产品。EndoTrap?能广泛适应于各种溶液中的内毒素去除,比如蛋白,抗体,疫苗,核酸液及其他溶液,同时还能保持样本很高的回收效率。对样本PH值有宽泛的耐受性,等电点范围广。在不降低去除内毒素的效率下,整个操作系统至少可重复使用三次(一般来说可使用至十次)。

EndoTrap?原理

EndoTrap?优点
?  高度特异性及高效率的从复杂溶液中去除内毒素
?  利用重力原理快速简便的进行单次或大批量去除内毒素
?  可升级到全自动化液相色谱分析系统
?  平均样本回收率超过95%
?  对样本PH值有宽泛的耐受性,等电点范围广
?  适用于通常用的缓冲液及高盐缓冲液
?  可重复使用10次(EndoTrap? HD)
?  基质非多黏杆菌素polymyxin B,无毒性
?  可提供法规文件和毒性数据资料(EndoTrap? HD)

EndoTrap?三个系列产品简介
     EndoTrap? blue    EndoTrap? red    EndoTrap? HD
内毒素结合能力    2,000,000 EU/ml 柱    2,000,000 EU/ml柱    5,000,000 EU/ml柱
重复使用性    至少3次    至少3次    至少10次
样本PH范围    4-9    6-9    4-10
推荐使用    高盐溶液(>250 mM NaCl)    PBS缓冲液样本,钙离子螯合剂溶液    高盐溶液,全自动分析系统,生物医药生产
 
EndoGrade? 卵白蛋白,是从鸡卵白中经过离子交换而制得,纯度超过98%,内毒素含量低于1EU/mg,是目前商品化卵白蛋白中内毒素含量zui低的,有效避免了因残留内毒素导致的干扰问题。可广泛用于动物模型制作(体内注射,气化)或者体外(细胞增殖分析)科研实验。

产品名称    EndoGrade? Ovalbumin
其他名称    卵白蛋白,片清蛋白,过敏原Gal d2, Gal d II
Swiss-Prot No.    P01012
CAS No.    9006-59-1
分子量    大约45千道尔顿
消光系数    0.7 ml/mg/cm
来源    鸡卵白
制备方法    从鸡卵白中经过离子交换而得
纯度    通过SDS-PAGE检测,纯度超过98%
zui大溶解度    20 mg/ml
内毒素含量    OVA在1mg/mL浓度下,内毒素含量低于1EU/mg
微生物污染检测    根据质控规则已经做过污染检测
性状    干粉,不含盐分
保存条件    干粉保存在2-8度,溶解后保存在-20度
保质期    干粉在2-8度条件下,参考包装上的保质期;溶解后在-20度条件下可以稳定保存6个月

隆重推出内毒素检测产品EndoZyme?,本试剂盒是运用同源荧光技术,利用内毒素活化重组蛋白FactorC的性质,从而定量检测生物医药制品及仪器中残留的内毒素水平。具有高灵敏度(0.005 EU/ml),宽检测范围(0-50 EU/ml),批内批间差小,稳定性好的特点。
 
EndoZyme?检测原理:
   
EndoZyme?特性:
?  去除葡聚糖的干扰
?  不需要鲎的血液
?  与传统的LAL 法有高相关性
?  检测范围是0.005-50EU/mL
?  高可信性和高稳定性

EndoZyme?产品信息:
Cat. No.    Name    Description
609050    EndoZyme? 
 (2 × 96 tests)    2 × EndoZyme?  Plate (2 x 96 wells), 1 × 2.5 ml Enzyme, 1 × 2.5 ml Substrate, 2 × Endotoxin Standard, 2 × 100 ml Endotoxin-free Water, 2 × 12ml Assay Buffer

EndoLISA?内毒素检测试剂盒是世界上*基于ELISA技术检测内毒素的试剂盒,应用噬菌体结合蛋白来结合内毒素,亲和力高,用重组Fc蛋白来检测。具有高灵敏度和高特异性。检测范围0.05EU/mL-500Eu/mL。

EndoLISA?检测原理:
  

EndoLISA?特性:
?  灵敏度达到0.05EU/mL,检测范围达到500EU/mL。
?  高特异性,只结合内毒素,不受葡聚糖的干扰。
?  跟传统的LAL法*性,相关性很好。
?  复杂基质的抗干扰性很好,样本不需要稀释。
?  不需要鲎的血液,异质实验。
?  可高通量操作。

 EndoLISA?产品信息:
Cat. No.    Name    Description
609033    EndoLISA? (2 × 96 tests)    2 × EndoLISA? Plate, 2 × 60 ml Endotoxin-free Water, 2 × 2.5 ml 6× Binding Buffer, 2 × Endotoxin Standard, 2× 75 ml Wash Buffer,1× 2.5 ml Enzyme, 1 × 2.5 ml Substrate, 2 ×12 ml Assay Buffer, 2 × Cover foil

更多产品信息请访问:http://www.hyglos.de/en/products-services.html

上海金畔生物科技有限公司
实验试剂一站式采购服务商
1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。
2:产品种类齐全,经营超过700多个品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。
3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。
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6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。
7:我们还是invitrogen,qiagen,Hyglos GmbHam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发,欢迎合作。

ichorbio可替代bioxcell,更低价格,更高纯度,更低内毒素

ichorbio可替代bioxcell,更低价格,更高纯度,更低内毒素……

ichorbio成立于英国牛津,专注于为广大研究者提供好的体内研究用抗体。目前ichorbio可提供140多种用于体内研究用的抗体及相关同型对照抗体。同时新增免疫检查点分子相关产品、科研用生物仿制药单克隆抗体、HLA-DR抗体、HLA-DQ抗体、体内抗体标记试剂盒。

 

产品优势

l   提供多种内毒素级别

l   内毒素含量更低

l   纯度更高

l   抗体聚集率更低

l   生产条件级别更高

l   不含病原体

Low endotoxin

Ultra-low endotoxin

<1 EU/mg

<0.75 /mg

>95%

>98%

<5%

<1%

cGMP生产车间,ISO 9001:2015认证

——

IDEXX BioResearch IMPACT测试

 

实验参数对比(vs.其他供应商)

l  Low endotoxin系列

ICHORBIO     LOW ENDOTOXIN ANTIBODIES

BX INVIVOMAB

内毒素水平

<1 EU/mg

<2 /mg

纯度

>95%

>95%

抗体聚集率

<5%

N/A

生产工艺

cGMP生产车间,ISO 9001:2015认证

Animal free facility

 

l  Ultra-low endotoxin系列

ICHORBIO ULTRA-LOW ENDOTOXIN ANTIBODIES

BIO X CELL INVIVOPLUS (TM) ANTIBODIES

BIOLEGEND GOINVIVO (TM)

内毒素水平

<0.75 EU/mg

<1 EU/mg

<1 EU/mg

纯度

>98%

>95%

N/A

抗体聚集率

<1%

<5%

<3%

生产工艺

cGMP生产车间,ISO 9001:2015认证

Animal free facility

ISO certified

不含病原体

IDEXX BioResearch IMPACT测试

IDEXX BioResearch IMPACT测试

IDEXX BioResearch IMPACT测试

 

检测靶标列表

 

Anti-4-1BB

Anti-CD20

Anti-CD56

Anti-HLA-DR

Anti-Ly-6G

Anti-CD103

Anti-CD209b

Anti-CD62E

Anti-ICAM-1

Anti-Ly-6G/Ly-6C

Anti-CD115

Anti-CD22

Anti-CD62L

Anti-IFN

Anti-MAdCAM-1

Anti-CD119

Anti-CD25

Anti-CD70

Anti-IFNAR1

Anti-MHC

Anti-CD11a

Anti-CD252

Anti-CD71

Anti-IgG

Anti-NK1.1

Anti-CD11b

Anti-CD262

Anti-CD73

Anti-IL-10

Anti-Notch-1

Anti-CD11c

Anti-CD275

Anti-CD8

Anti-IL-12

Anti-PD-1

ichorbio与bioxcell替换表:

TARGET CLONE NUMBER BIOXCELL货号 ICHORBIO货号
4 – 1 BB 3 H 3 BE 0239 I  CH 1036 
CD 115 AFS 98 BE 0213/BP 0213 I  CH 1068/I  CH 1068 UL 
CD 11 A FD 441 . 8 BE 0005 – 1 I  CH 1047 
CD 11 B M 1 / 70 BE 0007 I  CH 1049 
CD 19 1 D 3 BE 0150 I  CH 1052 
CD 20 2 H 7 BE 0276 I  CH 1012 
CD 209 B 22 D 1 BE 0220 I  CH 1077 
CD 25 7 F 7 B 6 BE 0014 I  CH 1163 
CD 28 37 . 51 BE 0015 – 1 I  CH 1055 
CD 28 CD 28 . 2 BE 0291 I  CH 1013 
CD 3 17 A 2 BE 0002 I  CH 1039 
CD 3 UCHT- 1 BE 0231 I  CH 1002 
CD 32 / CD 16 2 . 4 G 2 BE 0307 I  CH 1056 
CD 3 E 145 – 2 C 11 BE 0001-1/BP 0001-1 I  CH 1041/I  CH 1047 UL 
CD 4 GK 1 . 5 BE 0003 – 1/BP 0003 – 1 I  CH 1042/I  CH 1042 UL 
CD 4 OKT- 4 BE 0003 – 2 I  CH 1166 
CD 40 G 28 . 5 BE 0189 I  CH 1156 
CD 44 IM 7 BE 0039 I  CH 1115 
CD 47 B 6 H 12 BE 0019 – 1 I  CH 1014 
CD 54 YN 1 / 1 . 7 . 4 BE 0020 – 1 I  CH 1059 
CD 62 L MEL- 14 BE 0021 I  CH 1060 
CD 62 L DREG 56 CUS- HB- 300 I  CH 1017 
CD 8  BETA 53 – 5 . 8 BE 0223 I  CH 1046 
CD 80 16 – 10 A 1 BE 0024 I  CH 1037 
CD 86 GL 1 BE 0025 I  CH 1038 
CD 8 A 53 – 6 . 7 BE 0004 – 1/BP 0004 – 1 I  CH 1044/I  CH 1044 UL 
CD 8 A 2 . 43 BE 0061/BP 0061 I  CH 1045/I  CH 1045 UL 
CD 90 T 24 / 31 BE 0212 I  CH 1064 
CD 90 . 2 30 – H 12 BE 0066/BP 0066 I  CH 1066/I  CH 1066 UL 
CTLA- 4 UC 10 – 4 F 10 – 11 BE 0032 I  CH 1085 
CTLA- 4 9 H 10 BE 0131/BP 0131 I  CH 1084/I  CH 1084 UL 
CTLA- 4 9 D 9 BE 0164/BP 0164 I  CH 1096/I  CH 1096 UL 
GM- CSF MP 1 – 22 E 9 BE 0259 I  CH 1125 
H- 2 K Y- 3 BE 0172 I  CH 1142 
HLA- DR L 243 BE 0306 I  CH 1026 
IFN  BETA HDB- 4 A 7 BE 0102 I  CH 1110 
IFN  GAMMA H 22 BE 0312 I  CH 1109 
IFN  GAMMA XMG 1 . 2 BP 0055 I  CH 1141 
IFNAR 1 MAR 1 – 5 A 3 BE 0241 /BP 0241 I  CH 1122/I  CH 1122 UL 
IL- 1 A ALF- 161 BE 0243 I  CH 1099 
IL- 1 B B 122 BE 0246 I  CH 1100 
IL 1 R JAMA- 147 BE 0256 I  CH 1117 
LAG 3 C 9 B 7 W BE 0174/BP 0174 I  CH 1078/I  CH 1078 UL 
LY- 6 G/ LY- 6 C RB 6 – 8 C 5 BE 0075/BP 0075 I  CH 1131/I  CH 1131 UL 
MHC  CLASS  I W 6 / 32 BE 0079 I  CH 1023 
NK 1 . 1 PK 136 BE 0036 /BP 0036 I  CH 1128/I  CH 1128 UL 
PD- 1 RMP 1 – 14 BE 0146/BP 0146 ICH 1132  /
ICH 1132 UL
PD- 1 29 D. 1 A 12 BE 0273/BP 0273 I  CH 1091/I  CH 1091 UL 
PD- L 1 10 F. 9 G 2 BE 0101/BP 0101 I  CH 1086/I  CH 1086 UL 
PD- L 2 TY 25 BE 0112 I  CH 1139 
RANKL IK 22 / 5 BE 0191 I  CH 1114 
TCR  GAMMA  / DELTA UC 7 – 13 D 5 BE 0070 I  CH 1035 
TCR  V  GAMMA 2 UC 3 – 10 A 6 BE 0168 I  CH 1140 
TGF- B 1 , 2 , 3 1 D 11 . 1 BP 0057 I  CH 1090 
TIM- 3 RMT 3 – 23 BE 0115 I  CH 1133 
TNF  ALPHA TN 3 – 19 . 12 BE 0244 I  CH 1136 
TNFR 2 TR 75 – 54 . 7 BE 0247 I  CH 1137 

 

动态浊度法内毒素检测鲎试剂 内毒素检测试剂|Kinetic Turbidimetric LAL Assays

动态浊度法内毒素检测鲎试剂 内毒素检测试剂|Kinetic Turbidimetric LAL Assays

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品,鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。

动态浊度法内毒素检测鲎试剂(Kinetic Turbidimetric LAL Assays)是通过检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度所需要的反应时间,或是检测浊度增加速度来检测内毒素的方法。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C因子,引起一系列酶促反应,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。随着凝胶的形成,反应液的吸光度(OD值,浊度)增加,OD值增加的速度与内毒素浓度成正相关。换言之,OD值上升某一预设限值(启动OD)所需要的时间(定义为启动时间)与内毒素浓度成负相关,启动时间的对数与内毒素浓度的对数成线性关系,据此,可以定量供试品的内毒素浓度。

 

产品组分

编号

组分

规格

60401-A

鲎试剂

1.7 mL

60401-B

鲎试剂溶解液

3.0 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。4℃避光保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 该试剂盒用于体外细菌内毒素的定量检测,严禁试剂以任何途径进入机体。

2. 接触试剂及供试品的所有器皿必须是除热原的。试验过程应防止微生物的污染。

3. 该说明书中的除热原指内毒素浓度小于 0.005 EU/mL。

4. 供试品的 pH 值应在 6.0-8.0 之间,若超出此范围,需用除热原的缓冲液、0.1 M 氢氧化钠或 0.1 M 盐酸调节。

5. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时,须进行干扰试验,参见【供试品的干扰试验】。

6. 本产品仅作科研用途!

 

所需材料和设备

1. 试剂:内毒素工作标准品、鲎试剂、细菌内毒素检查用水。

2. 器材:

除热原试管、除热原吸头、除热原加样槽、除热原96孔微板。

旋涡混合器、移液器、多道移液器、试管架。

带温育系统的动态光度测定仪器及配套软件,例如,微板鲎试仪ELx808及软件TALgent 或Gen5。

 

操作方法

1. 动态光度测定仪器的设定,以微板鲎试仪ELx808为例:

预热仪器,设置温育温度为37℃,设置模板及程序。设定读板波长为340 nm、630 nm,设定动力学参数:读板90-120分钟, 每读板间隔30-150 s。

2. 内毒素标准溶液配制

2.1 标准曲线所采用的内毒素浓度可以为2至10倍稀释的系列(如0.5,0.25,0.125,0.0625 EU/mL 或10,1,0.1,0.01 EU/mL))。

2.2 取内毒素工作标准品1支,用砂轮沿安瓿颈部划痕,开启,加入适量(建议在0.5 mL-1.2 mL之间)细菌内毒素检查用水,置旋涡混合器上剧烈振摇5分钟。

2.3 将上述内毒素溶液进一步用细菌内毒素检查用水稀释成所需浓度,每稀释一步均应在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟。稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟,用前在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟,配置时间超过4小时的内毒素溶液应丢弃。(参见《内毒素工作标准品使用说明书》)。

3. 阴性对照为细菌内毒素检查用水。

4. 鲎试剂的溶解:按标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要用旋涡混合器剧烈

振摇。溶解的鲎试剂应在10分钟内使用。若采用多道移液器,将溶解的鲎试剂转移到除热原加样槽,并轻轻摇匀。

5. 实验操作(微板鲎试仪ELx808):

5.1 取除热原微板,在各孔中分别加入100 μL细菌内毒素检查用水、内毒素标准溶液,或供试品。

5.2 将微板放置于鲎试仪中,37℃温育10分钟。

5.3 温育结束,用移液器或多道移液器加入100 μL 鲎试剂(避免产生气泡!),中速振摇10 秒混匀,在340 nm波长处,每30秒(到60秒)读一次,读板120分钟。

 

数据处理

设定启动OD(可以设为0.02, 一般可以在0.02到0.04之间),软件自动给出其启动时间(T)。

建立标准曲线:lgT = b lgC + a,其中T为启动时间,C为内毒素的浓度,b为直线斜率,a为Y轴截距。

当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效:

1. 标准曲线的浓度点≥ 3,标准曲线的相关系数r ≤ -0.980,

2. 标准曲线最低点的T值小于阴性对照的T值,

3. 供试品平行管的平均值在标准曲线的区间内。

 

【供试品的干扰试验】

1. 当对新药或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时,必须进行干扰试验;

2. 当鲎试剂、供试品的来源、配方、生产工艺改变,或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时,必须重新进

行干扰试验;

3. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时,须进行干扰试验。

4. 步骤如下:

4.1 选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm),作为供试品干扰试验中添加的内毒素浓度,如采用标准曲线为10,1,0.1,0.01 EU/mL 系列时, 可以用供试品配制0.1 EU/mL 内毒素浓度作为实验的供试品阳性对照。

4.2 用供试品溶液配制浓度为λm 的内毒素溶液(即含λm 内毒素的供试品阳性对照),测量出该溶液的内毒素浓度,称为Cs;

4.3 测量出未添加外源内毒素的供试品溶液内毒素浓度,称为Ct;

4.4 计算该试验条件下的回收率R=(Cs–Ct)/λm × 100%

4.5 当R在50%~200%之间,则认为在此试验条件下供试品溶液不存在明显干扰作用。

4.6 当R在50%~200%之外,需对供试品进行系列稀释或进行其它处理消除干扰, 每一稀释溶液都重复步骤2-4, 直到内毒素的回收率R在50%~200%之间。选择回收率R最接近100%的稀释倍数进行内毒素检测。

(参见《中华人民共和国药典》2020 版中《细菌内毒素检查法》)

 

HB220607

动态浊度法内毒素检测鲎试剂 内毒素检测试剂|Kinetic Turbidimetric LAL Assays

暂无内容

[1] Li J, Qin X, Shi J, et al. A systematic CRISPR screen reveals an IL-20/IL20RA-mediated immune crosstalk to prevent the ovarian cancer metastasis. Elife. 2021;10:e66222. Published 2021 Jun 11. doi:10.7554/eLife.66222(IF:8.146)
[2] Li H, Li J, Shi H, et al. Structural characterization and immunoregulatory activity of a novel acidic polysaccharide from Scapharca subcrenata. Int J Biol Macromol. 2022;210:439-454. doi:10.1016/j.ijbiomac.2022.04.204(IF:6.953)
[3] Ni J, Chen H, Zhang C, et al. Characterization of Alpinia officinarum Hance polysaccharide and its immune modulatory activity in mice. Food Funct. 2022;13(4):2228-2237. Published 2022 Feb 21. doi:10.1039/d1fo03949k(IF:5.396)

产品描述

鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品,鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。

动态浊度法内毒素检测鲎试剂(Kinetic Turbidimetric LAL Assays)是通过检测反应混合物的浊度到达某一预先设定的吸光度所需要的反应时间,或是检测浊度增加速度来检测内毒素的方法。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C因子,引起一系列酶促反应,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。随着凝胶的形成,反应液的吸光度(OD值,浊度)增加,OD值增加的速度与内毒素浓度成正相关。换言之,OD值上升某一预设限值(启动OD)所需要的时间(定义为启动时间)与内毒素浓度成负相关,启动时间的对数与内毒素浓度的对数成线性关系,据此,可以定量供试品的内毒素浓度。

 

产品组分

编号

组分

规格

60401-A

鲎试剂

1.7 mL

60401-B

鲎试剂溶解液

3.0 mL

 

运输与保存方法

冰袋运输。4℃避光保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 该试剂盒用于体外细菌内毒素的定量检测,严禁试剂以任何途径进入机体。

2. 接触试剂及供试品的所有器皿必须是除热原的。试验过程应防止微生物的污染。

3. 该说明书中的除热原指内毒素浓度小于 0.005 EU/mL。

4. 供试品的 pH 值应在 6.0-8.0 之间,若超出此范围,需用除热原的缓冲液、0.1 M 氢氧化钠或 0.1 M 盐酸调节。

5. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时,须进行干扰试验,参见【供试品的干扰试验】。

6. 本产品仅作科研用途!

 

所需材料和设备

1. 试剂:内毒素工作标准品、鲎试剂、细菌内毒素检查用水。

2. 器材:

除热原试管、除热原吸头、除热原加样槽、除热原96孔微板。

旋涡混合器、移液器、多道移液器、试管架。

带温育系统的动态光度测定仪器及配套软件,例如,微板鲎试仪ELx808及软件TALgent 或Gen5。

 

操作方法

1. 动态光度测定仪器的设定,以微板鲎试仪ELx808为例:

预热仪器,设置温育温度为37℃,设置模板及程序。设定读板波长为340 nm、630 nm,设定动力学参数:读板90-120分钟, 每读板间隔30-150 s。

2. 内毒素标准溶液配制

2.1 标准曲线所采用的内毒素浓度可以为2至10倍稀释的系列(如0.5,0.25,0.125,0.0625 EU/mL 或10,1,0.1,0.01 EU/mL))。

2.2 取内毒素工作标准品1支,用砂轮沿安瓿颈部划痕,开启,加入适量(建议在0.5 mL-1.2 mL之间)细菌内毒素检查用水,置旋涡混合器上剧烈振摇5分钟。

2.3 将上述内毒素溶液进一步用细菌内毒素检查用水稀释成所需浓度,每稀释一步均应在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟。稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟,用前在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟,配置时间超过4小时的内毒素溶液应丢弃。(参见《内毒素工作标准品使用说明书》)。

3. 阴性对照为细菌内毒素检查用水。

4. 鲎试剂的溶解:按标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要用旋涡混合器剧烈

振摇。溶解的鲎试剂应在10分钟内使用。若采用多道移液器,将溶解的鲎试剂转移到除热原加样槽,并轻轻摇匀。

5. 实验操作(微板鲎试仪ELx808):

5.1 取除热原微板,在各孔中分别加入100 μL细菌内毒素检查用水、内毒素标准溶液,或供试品。

5.2 将微板放置于鲎试仪中,37℃温育10分钟。

5.3 温育结束,用移液器或多道移液器加入100 μL 鲎试剂(避免产生气泡!),中速振摇10 秒混匀,在340 nm波长处,每30秒(到60秒)读一次,读板120分钟。

 

数据处理

设定启动OD(可以设为0.02, 一般可以在0.02到0.04之间),软件自动给出其启动时间(T)。

建立标准曲线:lgT = b lgC + a,其中T为启动时间,C为内毒素的浓度,b为直线斜率,a为Y轴截距。

当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效:

1. 标准曲线的浓度点≥ 3,标准曲线的相关系数r ≤ -0.980,

2. 标准曲线最低点的T值小于阴性对照的T值,

3. 供试品平行管的平均值在标准曲线的区间内。

 

【供试品的干扰试验】

1. 当对新药或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时,必须进行干扰试验;

2. 当鲎试剂、供试品的来源、配方、生产工艺改变,或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时,必须重新进

行干扰试验;

3. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时,须进行干扰试验。

4. 步骤如下:

4.1 选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm),作为供试品干扰试验中添加的内毒素浓度,如采用标准曲线为10,1,0.1,0.01 EU/mL 系列时, 可以用供试品配制0.1 EU/mL 内毒素浓度作为实验的供试品阳性对照。

4.2 用供试品溶液配制浓度为λm 的内毒素溶液(即含λm 内毒素的供试品阳性对照),测量出该溶液的内毒素浓度,称为Cs;

4.3 测量出未添加外源内毒素的供试品溶液内毒素浓度,称为Ct;

4.4 计算该试验条件下的回收率R=(Cs–Ct)/λm × 100%

4.5 当R在50%~200%之间,则认为在此试验条件下供试品溶液不存在明显干扰作用。

4.6 当R在50%~200%之外,需对供试品进行系列稀释或进行其它处理消除干扰, 每一稀释溶液都重复步骤2-4, 直到内毒素的回收率R在50%~200%之间。选择回收率R最接近100%的稀释倍数进行内毒素检测。

(参见《中华人民共和国药典》2020 版中《细菌内毒素检查法》)

 

HB220607

动态浊度法内毒素检测鲎试剂 内毒素检测试剂|Kinetic Turbidimetric LAL Assays

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[1] Li J, Qin X, Shi J, et al. A systematic CRISPR screen reveals an IL-20/IL20RA-mediated immune crosstalk to prevent the ovarian cancer metastasis. Elife. 2021;10:e66222. Published 2021 Jun 11. doi:10.7554/eLife.66222(IF:8.146)
[2] Li H, Li J, Shi H, et al. Structural characterization and immunoregulatory activity of a novel acidic polysaccharide from Scapharca subcrenata. Int J Biol Macromol. 2022;210:439-454. doi:10.1016/j.ijbiomac.2022.04.204(IF:6.953)
[3] Ni J, Chen H, Zhang C, et al. Characterization of Alpinia officinarum Hance polysaccharide and its immune modulatory activity in mice. Food Funct. 2022;13(4):2228-2237. Published 2022 Feb 21. doi:10.1039/d1fo03949k(IF:5.396)

BioDtech品牌代理

BioDtech

简要描述:

我们的产品使科学家能够通过中和(或)清除内毒素来消除内毒素污染的影响,并在内毒素检测方面达到很高的准确性,特别是在重组蛋白和血液制品等复杂样品中。

我们的产品使科学家能够通过中和(或)清除内毒素来消除内毒素污染的影响,并在内毒素检测方面达到很高的准确性,特别是在重组蛋白和血液制品等复杂样品中。


BioDtech, Inc. (BDTI) was formed in September 2003 to accelerate the development of technologically advanced products geared toward the endotoxin market.


品牌

货号

名称

规格

BioDtech

EDF-1001.01

EndoDtec-F™

1mg

BioDtech

ESP-9001.01

Endotoxin Sample Preparation

1 kit

BioDtech

EZP-2001.01

EndoZap-R™

1mg

BioDtech

EBR-3001.01

EndoBind-R™ (1 ml column)

1ml colum

BioDtech

EBR-3005.01

EBR-3005.01 – EndoBind-R™

5ml colum

BioDtech

EBR-3001.11

EBR-3001.11 – EndoBind-R™ Single-Use

1ml colum

BioDtech

EBR-3001.61

EBR-3001.61 – EndoBind-R™ Single-Use

6*1 colum

BioDtech

EBR-3010.02

EndoBind-R™ (10 ml bulk media)

10ml bulk media

Hyglos HD – 清除高清内毒素 说明书

世界*实验材料供应商 Hyglos上海金畔生物为其中国代理, Hyglos在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, Hyglos就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

Hyglos中国代理Hyglos上海代理, Hyglos北京代理,Hyglos广东代理, Hyglos江苏代理Hyglos湖北代理,Hyglos天津,Hyglos黑龙江代理,Hyglos内蒙古代理,Hyglos吉林代理,Hyglos福建代理, Hyglos江苏代理, Hyglos浙江代理, Hyglos四川代理,

 

Hyglos GmbH是一家成立于2009年,位于德国慕尼黑生物技术中心的高科技生物制品公司,Hyglos GmbH拥有*的技术从噬菌体中纯化分离特定的蛋白质,用以检测及清除生物制品中的细菌及细菌毒素,如LPS(脂多糖、内毒素)等。基于*无动物来源的噬菌体重组蛋白及重组鲎因子C (rFC),公司创新性开发出新一代的LAL内毒素检测方法,突破了常规LAL内毒素检测法依赖鲎血的溶解物的局限,为生物制药领域的科研与生产创造了新的契机。Hyglos在探索噬菌体生物学用于诊断、抗菌及研究应用中,开发了包括内毒素检测、消除内毒素屏蔽(克服Low Endotoxin Recovery (LER)潜在的威胁)、内毒素清除、无内毒素蛋白/试剂、疾病诊断、抗菌剂在内的高科技生物产品,适用于人类疾病诊断及食物安全检测。

 

EndoTrap® HD – High-Definition Endotoxin Removal

EndoTrap®HD – 清除高清内毒素

EndoTrap产品系列将于2017年12月31日停止使用

EndoTrap®HD的新性能数据 

一项新的研究描述了来自不同供应商的四种内毒素去除树脂(包括EndoTrap®)的效率。由Hyglos提供的EndoTrap®HD 与其他测试的树脂相比,是显示去除内毒素的zui有效的树脂

EndoTrap®HD可从 各种样品(如 蛋白质,抗体,疫苗,核酸,缓冲液和细胞提取物)的水溶液中去除内毒素(脂多糖/ LPS),并具有优异的样品回收率。

EndoTrap®HD树脂专门设计用于满足制药和生物技术行业对生物制造过程中内毒素去除以及任何需要zui高内毒素去除率的应用。
EndoTrap®HD满足工业应用的所有要求,并且可以轻松集成到早期或后期的纯化过程中。此外,Hyglos的高分辨率矩阵也可用于预填充色谱柱的小规模纯化。

EndoTrap®HD的内毒素去除效率:

样品 样品浓度 
[毫克/毫升]
zui初的LPS水平
[EU / ml]
EndoTrap®HD后的LPS水平
[EU / ml]
LPS去除效率
[%]
样品回收率
[%]
BSA 10 2687.60 <0.15 > 99.99 98.0
MAK  1 1004.95 <0.15 > 99.99 95.1
噬菌体蛋白 1 1322.15 <0.15 > 99.99 100.0
1 750.27 <0.15 > 99.99 100.0

EndoTrap®HD功能:

  • 同类*的内毒素结合能力> 5,000,000 EU / ml
  • 去除超过99.99%的LPS
  • 的样品回收率> 95%
  • 无毒噬菌体来源的配体,无细胞毒性作用
  • 重复使用超过10次
  • pH样品范围:4-10
  • 适合高盐条件
  • 适用于例如 TRIS,HEPES,MOPS或类似的缓冲样品
  • 在使用前直接用0.1mM钙(镁)新鲜富集时可以使用PBS缓冲液
  • EndoTrap®泄漏ELISA  用于配体泄漏监测
  • 法规支持文件(EndoTrap®HD)可根据要求提供

可作为树脂(请求缓冲区)。

相关产品如下:

EndoTrap®HD 1/1

编号。800053 
1×1ml柱,125ml平衡缓冲液,125ml再生缓冲液,
125ml存储缓冲液

EndoTrap®HD 5/1

编号。800063 
5×1ml柱,125ml 5×平衡缓冲液,125ml 5×再生缓冲液,
125ml 5×存储缓冲液

EndoTrap®HD 10

编号。800034 
10毫升沉降树脂

EndoTrap®HD 50

编号。800035 
50毫升沉降树脂

EndoTrap®HD 250

编号。800036 
250毫升沉降树脂

EndoTrap®HD散装

编号。800037 
散装树脂

用于EndoTrap HD / blue的EndoTrap®泄漏ELISA

编号。800033 
12×8条纹,1瓶POD抗体,
1瓶标准,20 ml ABTS底物,随时可用

内毒素高效去除纯化树脂 高效去除内毒素纯化树脂|Endotoxin Removal Agarose Resin,High Performance

内毒素高效去除纯化树脂 高效去除内毒素纯化树脂|Endotoxin Removal Agarose Resin,High Performance

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括蛋白、多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上,进行特异性去除内毒素,经纯化可将样品中内毒素降低至0.1 EU/mL,且样品回收率高。

 

产品信息

货号

20518ES10/ 20518ES60/20518ES76

规格

10 mL /100 mL / 500 mL

 

产品性质

基质(Matrix)

4%琼脂糖微球

配体(Ligand)

修饰过的多粘菌素B

粒径(Bead size)

45-165 µm

载量(Capacity)

2000000 EU/mL基质

最大压力(PressureMax

0.1 MPa, 1bar

pH稳定范围(pH range)

5-10

储存缓冲液(Buffer)

20%乙醇

 

储存条件

2~8℃保存,有效期2年。

 

需准备试剂

所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理,防止在使用过程中引入内毒素。

平衡液20 mM 磷酸盐,150 mM NaCl,pH7.4

再生液1% Triton X-114的平衡液

【注】平衡液和洗脱液可根据样品性质进行改变,建议pH7-8, NaCl约150 mM-500 mM。

 

使用说明

【注】a 样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子;

   b 内毒素结合柱子的最佳pH为6-9,因此样品pH最好控制在7-8;

   c 样品最好控制在适当的离子强度,减少非特异吸附,NaCl约150 mM-500 mM。

样品纯化1 mL树脂为例

1)装柱:充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin,用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中,注意避免产生气泡,打开下出口去掉保护液,用3 mL再生液进行清洗,控制流速在0.25 mL/min,或<10滴/min温度控制在2~8重复至少2次,确保柱中无内毒素。

2)平衡:3 mL的平衡液平衡柱管内壁及树脂,流干,流速约0.5 mL/min,温度控制在2~8重复至少两次。

 3)过柱及检测将样品加到平衡好的树脂中,调节流速在0.25 mL/min,或<10滴/min,当流出液流出约1 mL 时,开始收集流出液,流干后加入1 mL平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率。

【注】如果样品中内毒素含量仍高于目标值,继续重复1-3。

 

注意事项

1.本品可耐受试剂:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1 M尿素,300 mM咪唑;0.05% Tween 20,10 mM DTT等。

2.本产品仅作科研用途

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

附表 问题及解决方案

问题

原因分析

推荐解决方案

内毒素去除效率低

样品pH值不在内毒素结合范围内

0.1 M NaOH或0.1 M HCl调节至pH7-8

样品与树脂接触时间短

减少流速,增加样品接触时间

去除或检测系统被内毒素污染

所有试验用品均需无热源产品

内毒素与目的蛋白结合较强

优化样品pH,使样品与内毒素分离

增加接触时间

样品被污染

树脂纯化过其他样品

不用使用过的树脂去除不同样品内毒素

样品回收率低

样品非特异性吸附在树脂上

增加样品和平衡液的NaCl浓度

目的蛋白与内毒素结合一起被去除

优化样品pH,使样品与内毒素分离

 

Ver.CN20230719

Q:为什么内毒素去除效率低?

A:可能是样品pH 值不在内毒素结合范围内;建议用 0.1MNaOH 或 0.1M HCl 调节至 pH7-8。

Q:为什么样品被污染?

A:树脂纯化过其他样品;不用使用过的树脂去除不同样品内毒素。

Q:为什么样品回收率低?

A:可能是样品非特异性吸附在树脂上;建议增加样品和平衡液的NaCl 浓度。

Q:本品可耐受哪些试剂?

A20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1M 尿素,300mM 咪唑;0.05% Tween 20, 10mM DTT 等

Q:如何确定需要使用的填料体积

A可根据填料的内毒素载量,可检测自己样品中的内毒素含量确定;如果实在无条件检测自己样品中的内毒素的含量,初次实验可按照填料:样品体积比=1:1或1:2上样

[1] Xia B, Shen X, He Y, et al. SARS-CoV-2 envelope protein causes acute respiratory distress syndrome (ARDS)-like pathological damages and constitutes an antiviral target. Cell Res. 2021;31(8):847-860. doi:10.1038/s41422-021-00519-4(IF:25.617)
[2] Li J, Qin X, Shi J, et al. A systematic CRISPR screen reveals an IL-20/IL20RA-mediated immune crosstalk to prevent the ovarian cancer metastasis. Elife. 2021;10:e66222. Published 2021 Jun 11. doi:10.7554/eLife.66222(IF:8.146)
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[4] Hassan Z, Wang J, Qin Y, et al. Functional characterization of an interleukin 20 like homologue in grass carp Ctenopharyngodon idella. Fish Shellfish Immunol. 2021;115:43-57. doi:10.1016/j.fsi.2021.05.009(IF:4.581)
[5] Zhang A, Jian X, Wang D, Ren J, Wang X, Zhou H. Characterization and bioactivity of grass carp (Ctenopharyngodon idella) interleukin-21: Inducible production and involvement in inflammatory regulation. Fish Shellfish Immunol. 2020;99:19-26. doi:10.1016/j.fsi.2020.01.059(IF:4.581)
[6] Qiu X, Wang D, Lv M, et al. Identification and functional characterization of interleukin-12 receptor beta 1 and 2 in grass carp (Ctenopharyngodon idella). Mol Immunol. 2022;143:58-67. doi:10.1016/j.molimm.2022.01.007(IF:4.407)
[7] Yin L, Ren J, Wang D, et al. Functional characterization of three fish-specific interleukin-23 isoforms as regulators of Th17 signature cytokine expression in grass carp head kidney leukocytes. Fish Shellfish Immunol. 2019;92:315-321. doi:10.1016/j.fsi.2019.06.028(IF:3.298)
[8] Zang L, Wang J, Ren Y, et al. Activated toll-like receptor 4 is involved in oridonin-induced phagocytosis via promotion of migration and autophagy-lysosome pathway in RAW264.7 macrophages. Int Immunopharmacol. 2019;66:99-108. doi:10.1016/j.intimp.2018.11.014(IF:3.118)

产品简介

Endotoxin Removal Agarose Resin是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括蛋白、多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上,进行特异性去除内毒素,经纯化可将样品中内毒素降低至0.1 EU/mL,且样品回收率高。

 

产品信息

货号

20518ES10/ 20518ES60/20518ES76

规格

10 mL /100 mL / 500 mL

 

产品性质

基质(Matrix)

4%琼脂糖微球

配体(Ligand)

修饰过的多粘菌素B

粒径(Bead size)

45-165 µm

载量(Capacity)

2000000 EU/mL基质

最大压力(PressureMax

0.1 MPa, 1bar

pH稳定范围(pH range)

5-10

储存缓冲液(Buffer)

20%乙醇

 

储存条件

2~8℃保存,有效期2年。

 

需准备试剂

所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理,防止在使用过程中引入内毒素。

平衡液20 mM 磷酸盐,150 mM NaCl,pH7.4

再生液1% Triton X-114的平衡液

【注】平衡液和洗脱液可根据样品性质进行改变,建议pH7-8, NaCl约150 mM-500 mM。

 

使用说明

【注】a 样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子;

   b 内毒素结合柱子的最佳pH为6-9,因此样品pH最好控制在7-8;

   c 样品最好控制在适当的离子强度,减少非特异吸附,NaCl约150 mM-500 mM。

样品纯化1 mL树脂为例

1)装柱:充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin,用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中,注意避免产生气泡,打开下出口去掉保护液,用3 mL再生液进行清洗,控制流速在0.25 mL/min,或<10滴/min温度控制在2~8重复至少2次,确保柱中无内毒素。

2)平衡:3 mL的平衡液平衡柱管内壁及树脂,流干,流速约0.5 mL/min,温度控制在2~8重复至少两次。

 3)过柱及检测将样品加到平衡好的树脂中,调节流速在0.25 mL/min,或<10滴/min,当流出液流出约1 mL 时,开始收集流出液,流干后加入1 mL平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率。

【注】如果样品中内毒素含量仍高于目标值,继续重复1-3。

 

注意事项

1.本品可耐受试剂:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1 M尿素,300 mM咪唑;0.05% Tween 20,10 mM DTT等。

2.本产品仅作科研用途

3.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

附表 问题及解决方案

问题

原因分析

推荐解决方案

内毒素去除效率低

样品pH值不在内毒素结合范围内

0.1 M NaOH或0.1 M HCl调节至pH7-8

样品与树脂接触时间短

减少流速,增加样品接触时间

去除或检测系统被内毒素污染

所有试验用品均需无热源产品

内毒素与目的蛋白结合较强

优化样品pH,使样品与内毒素分离

增加接触时间

样品被污染

树脂纯化过其他样品

不用使用过的树脂去除不同样品内毒素

样品回收率低

样品非特异性吸附在树脂上

增加样品和平衡液的NaCl浓度

目的蛋白与内毒素结合一起被去除

优化样品pH,使样品与内毒素分离

 

Ver.CN20230719

Q:为什么内毒素去除效率低?

A:可能是样品pH 值不在内毒素结合范围内;建议用 0.1MNaOH 或 0.1M HCl 调节至 pH7-8。

Q:为什么样品被污染?

A:树脂纯化过其他样品;不用使用过的树脂去除不同样品内毒素。

Q:为什么样品回收率低?

A:可能是样品非特异性吸附在树脂上;建议增加样品和平衡液的NaCl 浓度。

Q:本品可耐受哪些试剂?

A20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1M 尿素,300mM 咪唑;0.05% Tween 20, 10mM DTT 等

Q:如何确定需要使用的填料体积

A可根据填料的内毒素载量,可检测自己样品中的内毒素含量确定;如果实在无条件检测自己样品中的内毒素的含量,初次实验可按照填料:样品体积比=1:1或1:2上样

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