小鼠抗GST-tag单克隆抗体 小鼠单克隆抗体|GST-tag,Mouse mAb

小鼠抗GST-tag单克隆抗体 小鼠单克隆抗体|GST-tag,Mouse mAb

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产品描述

融合蛋白表达中通常在蛋白N-端或C-端加上特定蛋白或多肽序列作为一种抗原表位(标签蛋白)以便于目的蛋白后续的定位、表达、检测及纯化。Glutathione S-Transferase (即谷胱甘肽S-转移酶,GST)是应用非常广泛的一种蛋白标签,来源于Schistosoma japonicum,分子量为26kDa,可应用于各种融合蛋白,可在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达,用GST亲和柱可简便地分离融合蛋白。 GST标签有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性。

GST抗体可以用于GST融合蛋白后续的表达、细胞内定位,纯化、以及定性或定量分析。

产品类型(Isotype)

小鼠单抗(mouse McAb IgG2a)

 

产品介绍

分子量(Molecular Weight) 26 kDa
反应性(Specificity) Recombinant protein,Schistosoma japonicum
应用(Application)

WB : 1:5000-1:50000

IP : 1:5000-1:50000

ELISA: 1:10000-1:50000

免疫原(Immunogen) Recombinant Protein
纯化方式 Protein A purification
储存缓冲液(Storage Buffer) PBS with 0.02% sodium azide and 50% glycerol pH 7.3。

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。-20℃保存,避免反复冻融。

注意事项

1)使用前请先离心,以免造成不必要的损失。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3)本产品仅作科研用途!
 

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10μl (>50次)

30903ES50

50μl (>250次)

 

 

小鼠抗GST-tag单克隆抗体 小鼠单克隆抗体|GST-tag,Mouse mAb

暂无内容

[1] Kang Y, Chen L. Structure and mechanism of NALCN-FAM155A-UNC79-UNC80 channel complex. Nat Commun. 2022;13(1):2639. Published 2022 May 12. doi:10.1038/s41467-022-30403-7(IF:14.919)
[2] Kang Y, Wu JX, Chen L. Structure of voltage-modulated sodium-selective NALCN-FAM155A channel complex. Nat Commun. 2020;11(1):6199. Published 2020 Dec 3. doi:10.1038/s41467-020-20002-9(IF:12.121)
[3] Tang C, Wu X, Ren Q, Yao M, Xu S, Yan Z. Hedgehog signaling is controlled by Rac1 activity. Theranostics. 2022;12(3):1303-1320. Published 2022 Jan 1. doi:10.7150/thno.67702(IF:11.556)
[4] Han L, Zhang F, Liu Y, et al. Uterus globulin associated protein 1 (UGRP1) binds podoplanin (PDPN) to promote a novel inflammation pathway during Streptococcus pneumoniae infection. Clin Transl Med. 2022;12(6):e850. doi:10.1002/ctm2.850(IF:11.492)
[5] Ai H, Cao Y, Jain A, et al. The ferroxidase LPR5 functions in the maintenance of phosphate homeostasis and is required for normal growth and development of rice. J Exp Bot. 2020;71(16):4828-4842. doi:10.1093/jxb/eraa211(IF:5.908)
[6] Wu Q, Huang Y, Gu L, Chang Z, Li GM. OTUB1 stabilizes mismatch repair protein MSH2 by blocking ubiquitination. J Biol Chem. 2021;296:100466. doi:10.1016/j.jbc.2021.100466(IF:5.157)
[7] Wang D, Tan KS, Arias-Moreno X, Tan W, Cheng G. Sirt3 increases CNPase enzymatic activity through deacetylation and facilitating substrate accessibility. Biochem Biophys Res Commun. 2021;571:181-187. doi:10.1016/j.bbrc.2021.07.079(IF:3.575)

产品描述

融合蛋白表达中通常在蛋白N-端或C-端加上特定蛋白或多肽序列作为一种抗原表位(标签蛋白)以便于目的蛋白后续的定位、表达、检测及纯化。Glutathione S-Transferase (即谷胱甘肽S-转移酶,GST)是应用非常广泛的一种蛋白标签,来源于Schistosoma japonicum,分子量为26kDa,可应用于各种融合蛋白,可在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达,用GST亲和柱可简便地分离融合蛋白。 GST标签有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性。

GST抗体可以用于GST融合蛋白后续的表达、细胞内定位,纯化、以及定性或定量分析。

产品类型(Isotype)

小鼠单抗(mouse McAb IgG2a)

 

产品介绍

分子量(Molecular Weight) 26 kDa
反应性(Specificity) Recombinant protein,Schistosoma japonicum
应用(Application)

WB : 1:5000-1:50000

IP : 1:5000-1:50000

ELISA: 1:10000-1:50000

免疫原(Immunogen) Recombinant Protein
纯化方式 Protein A purification
储存缓冲液(Storage Buffer) PBS with 0.02% sodium azide and 50% glycerol pH 7.3。

 

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。-20℃保存,避免反复冻融。

注意事项

1)使用前请先离心,以免造成不必要的损失。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3)本产品仅作科研用途!
 

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暂无内容

[1] Kang Y, Chen L. Structure and mechanism of NALCN-FAM155A-UNC79-UNC80 channel complex. Nat Commun. 2022;13(1):2639. Published 2022 May 12. doi:10.1038/s41467-022-30403-7(IF:14.919)
[2] Kang Y, Wu JX, Chen L. Structure of voltage-modulated sodium-selective NALCN-FAM155A channel complex. Nat Commun. 2020;11(1):6199. Published 2020 Dec 3. doi:10.1038/s41467-020-20002-9(IF:12.121)
[3] Tang C, Wu X, Ren Q, Yao M, Xu S, Yan Z. Hedgehog signaling is controlled by Rac1 activity. Theranostics. 2022;12(3):1303-1320. Published 2022 Jan 1. doi:10.7150/thno.67702(IF:11.556)
[4] Han L, Zhang F, Liu Y, et al. Uterus globulin associated protein 1 (UGRP1) binds podoplanin (PDPN) to promote a novel inflammation pathway during Streptococcus pneumoniae infection. Clin Transl Med. 2022;12(6):e850. doi:10.1002/ctm2.850(IF:11.492)
[5] Ai H, Cao Y, Jain A, et al. The ferroxidase LPR5 functions in the maintenance of phosphate homeostasis and is required for normal growth and development of rice. J Exp Bot. 2020;71(16):4828-4842. doi:10.1093/jxb/eraa211(IF:5.908)
[6] Wu Q, Huang Y, Gu L, Chang Z, Li GM. OTUB1 stabilizes mismatch repair protein MSH2 by blocking ubiquitination. J Biol Chem. 2021;296:100466. doi:10.1016/j.jbc.2021.100466(IF:5.157)
[7] Wang D, Tan KS, Arias-Moreno X, Tan W, Cheng G. Sirt3 increases CNPase enzymatic activity through deacetylation and facilitating substrate accessibility. Biochem Biophys Res Commun. 2021;571:181-187. doi:10.1016/j.bbrc.2021.07.079(IF:3.575)

小鼠抗GST-tag单克隆抗体 HRP标记小鼠单克隆抗体|GST-tag,Mouse mAb(HRP)

小鼠抗GST-tag单克隆抗体 HRP标记小鼠单克隆抗体|GST-tag,Mouse mAb(HRP)

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融合蛋白表达中通常在蛋白N-端或C-端加上特定蛋白或多肽序列作为一种抗原表位(标签蛋白)以便于目的蛋白后续的定位、表达、检测及纯化。Glutathione S-Transferase (即谷胱甘肽S-转移酶,GST)是应用非常广泛的一种蛋白标签,来源于Schistosoma japonicum,分子量为26kDa,可应用于各种融合蛋白,可在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达,用GST亲和柱可简便地分离融合蛋白。 GST标签有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性。

GST抗体可以用于GST融合蛋白后续的表达、细胞内定位,纯化、以及定性或定量分析。

 

产品介绍

产品类型(Isotype) 小鼠单抗(mouse McAb  IgG2a)
分子量(Molecular Weight) 26 kDa
反应性(Specificity) Recombinant protein, Schistosoma japonicum
应用(Application) WB : 1:5000-1:50000
免疫原(Immunogen) Recombinant Protein
纯化方式 Protein A purification
储存缓冲液(Storage Buffer) PBS with 0.02% thimerosal and 50% glycerol pH 7.3。

 

运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。-20℃保存,避免反复冻融。

注意事项

1)使用前请先离心,以免造成不必要的损失。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3)本产品仅作科研用途!

小鼠抗GST-tag单克隆抗体 HRP标记小鼠单克隆抗体|GST-tag,Mouse mAb(HRP)

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小鼠抗GST-tag单克隆抗体 HRP标记小鼠单克隆抗体|GST-tag,Mouse mAb(HRP)

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融合蛋白表达中通常在蛋白N-端或C-端加上特定蛋白或多肽序列作为一种抗原表位(标签蛋白)以便于目的蛋白后续的定位、表达、检测及纯化。Glutathione S-Transferase (即谷胱甘肽S-转移酶,GST)是应用非常广泛的一种蛋白标签,来源于Schistosoma japonicum,分子量为26kDa,可应用于各种融合蛋白,可在大肠杆菌和酵母菌等宿主细胞中表达,用GST亲和柱可简便地分离融合蛋白。 GST标签有助于保护重组蛋白免受胞外蛋白酶的降解并提高其稳定性。

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产品类型(Isotype) 小鼠单抗(mouse McAb  IgG2a)
分子量(Molecular Weight) 26 kDa
反应性(Specificity) Recombinant protein, Schistosoma japonicum
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GST Mouse mAb(GST小鼠单抗)(AF0174)

GST Mouse Monoclonal Antibody
GST Mouse mAb(GST小鼠单抗)(AF0174) 一键复制产品信息

产品编号: AF0174

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AF0174 GST Mouse Monoclonal Antibody 50μl 482.00元
来源 用途 交叉反应性 分子量
Mouse WB, ELISA 26KDa

WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; IHC, Immunohistochemistry; ICC, Immunocytochemistry; FC, Flow Cytometry; ELISA, Enzyme-linked Immunosorbent Assay; ChIP, Chromatin Immunoprecipitation Assay.
H, Human; M, Mouse; R, Rat; C, Chicken; Cw, Cow; Dg, Dog; Gp, Guinea pig; Hm, Hamster; Hr, Horse; Mk, Monkey; Pg, Pig; Rb, Rabbit; S, Sheep; Z, Zebrafish; All, all species expected.
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测或其它适当用途时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IP IF IHC ICC FC ELISA ChIP
1:1000 1:2000-1:4000

抗体详细信息如下:

About this Antibody
Name GST Mouse Monoclonal Antibody
Category Monoclonal antibody(mAb); Primary antibody
Isotype IgG1
Purification ProA affinity purified
About the Immunogen
Immunogen This antibody is produced by immunizing mice with GST protein.
Gene ID
SwissProt
Synonyms
Category Related Products
Background The glutathione S-transferase (GST) family of enzymes comprises a long list of cytosolic, mitochondrial, and microsomal proteins that are capable of multiple reactions with a multitude of substrates, both endogenous and xenobiotic. Mammalian cytosolic GSTs are dimeric both subunits being from the same class of GSTs. The monomers are in the range of 22–29 kDa. Glutathione S-transferase is used to create the “GST gene fusion system” in genetic engineering. Here, GST is used to purify and detect proteins of interest.

包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AF0174 GST Mouse Monoclonal Antibody 50μl
AZ050 Western一抗稀释液 50ml
说明书 1份

保存条件:
GST Mouse Monoclonal Antibody -20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
请根据抗体的实际用途选择相应的使用方法。
1. Western检测:
A. 按照推荐的稀释比例用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页:http://www.beyotime.com/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
4. 代表性图片:

GST Mouse mAb(GST小鼠单抗)(AF0174)
Fig. 1. Western blot analysis of GST on GST-tagged recombinant protein using anti-GST antibody at 1/5000 dilution.

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产品编号 产品名称 包装
P0006 Bradford蛋白浓度测定试剂盒 1000次
P0010 BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) 500次
P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒 500次
P0012A SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 1盒
P0012AC SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 1盒
P0013 Western及IP细胞裂解液 100ml
P0013B RIPA裂解液(强) 100ml
P0014B SDS-PAGE电泳液 10×1L
P0015 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
P0018 BeyoECL Plus(超敏ECL化学发光试剂盒) 共100ml
P0018A BeyoECL Star(特超敏ECL化学发光试剂盒) 共100ml
P0020 显影定影试剂盒 各1升
P0021B Western转膜液 10×1L
P0023A Western一抗稀释液 100ml
P0023B Western封闭液 100ml
P0023C6 Western洗涤液(10X) 10×100ml
P0023D Western二抗稀释液 100ml
P0025 Western一抗二抗去除液 250ml
P0252 QuickBlock™ Western封闭液 100ml
P0256 QuickBlock™ Western一抗稀释液 100ml
P0258 QuickBlock™ Western二抗稀释液 100ml
P0066 预染蛋白质分子量标准 200μl
P0068 彩色预染蛋白质分子量标准 200μl
P0071 BeyoColor™彩色预染蛋白质分子量标准 200μl
P0098 免疫染色固定液 100ml
P0102 免疫染色封闭液 100ml
P0103 免疫染色一抗稀释液 100ml
P0106L 免疫染色洗涤液(10X) 10×100ml
P0108 免疫荧光染色二抗稀释液 100ml
P0110 免疫染色(非荧光)二抗稀释液 100ml
P0260 QuickBlock™免疫染色封闭液 100ml
P0262 QuickBlock™免疫染色一抗稀释液 100ml
P0265 QuickBlock™免疫荧光染色二抗稀释液 100ml
P0267 QuickBlock™免疫组化染色二抗稀释液 100ml
P0126 抗荧光淬灭封片液 5ml
FFP24 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.2μm) 20张/包装
FFP32 PVDF膜(进口原装,6.6×8.5cm, 0.45μm) 20张/包装
FFP51 转印滤纸(7.5×10cm) 100片/包装
FF057 X-OMAT BT胶片(原柯达, 5×7英寸) 100张/盒
FFC58 压片暗盒(5×7英寸) 1个

GST Mouse mAb(GST小鼠单抗)(AF0174)
GST Mouse mAb(GST小鼠单抗)(AF0174)

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1. Hua Wang, Xiaoyong Chen, Ning Kong, Yajuan Jiao, Dage Sun, Sujie Dong, Wenzhen Qin, Huanjie Zhai, Lingxue Yu, Hao Zheng, Wu Tong, Hai Yu, Guangzhi Tong, Tongling Shan
TRIM21 inhibits porcine epidemic diarrhea virus proliferation by proteasomal degradation of the nucleocapsid protein
Arch Virol. 2021 Jul;166(7):1903-1911.;doi: 10.1007/s00705-021-05080-4. (IF 2.243)

GST Rabbit mAb(GST兔单抗)(AF2299)

GST Rabbit Monoclonal Antibody
GST Rabbit mAb(GST兔单抗)(AF2299) 一键复制产品信息

产品编号: AF2299

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AF2299 GST Rabbit Monoclonal Antibody 50μl 709.00元
来源 用途 交叉反应性 分子量
Rabbit WB, IP, IF, ICC kDa

       WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; IHC, Immunohistochemistry; ICC,
Immunocytochemistry; FC, Flow Cytometry; ELISA, Enzyme-linked Immunosorbent Assay; ChIP, Chromatin
Immunoprecipitation Assay.
       H, Human; M, Mouse; R, Rat; C, Chicken; Cw, Cow; Dg, Dog; Gp, Guinea pig; Hm, Hamster; Hr, Horse; Mk,
Monkey; Pg, Pig; Rb, Rabbit; S, Sheep; Z, Zebrafish; All, all species expected.
       配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测或其它适当用途时的一抗稀释。
       建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IP IF IHC ICC FC ELISA ChIP
1:1,000-1:5,000 1:10-1:50 1:50-1:200 1:50-1:200

抗体详细信息如下:

About this Antibody
Name GST Rabbit Monoclonal Antibody
Category Rabbit Monoclonal Antibody (RabMAb); Primary antibody
Isotype IgG
Purification Affinity purification
About the Immunogen
Immunogen Recombinant protein
Gene ID
SwissProt
Synonyms
Category Metabolism
Background The glutathione S-transferase (GST) family of enzymes comprises a long list of cytosolic, mitochondrial, and microsomal proteins that are capable of multiple reactions with a multitude of substrates, both endogenous and xenobiotic. Mammalian cytosolic GSTs are dimeric both subunits being from the same class of GSTs. The monomers are in the range of 22–29 kDa. Glutathione S-transferase is used to create the “GST gene fusion system” in genetic engineering. Here, GST is used to purify and detect proteins of interest.

包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AF2299 GST Rabbit Monoclonal Antibody 50μl
AZ050 Western一抗稀释液 50ml
说明书 1份

保存条件:
       GST Rabbit Monoclonal Antibody -20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
       如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。
       回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
       提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
       本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
       为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
请根据抗体的实际用途选择相应的使用方法。
1. Western检测:
a. 按照推荐的稀释比例用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
b. 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
c. 回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
d. 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3.  其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
4. 代表性图片:

GST Rabbit mAb(GST兔单抗)(AF2299)
Fig. 1. Western blot analysis of GST on GST tag recombinant protein lysates using anti-GST antibody at 1/1,000 dilution.

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P0010 BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) 500次
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P0012A SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 1盒
P0012AC SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 1盒
P0013 Western及IP细胞裂解液 100ml
P0013B RIPA裂解液(强) 100ml
P0014B SDS-PAGE电泳液 10×1L
P0015 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
P0018 BeyoECL Plus(超敏ECL化学发光试剂盒) 共100ml
P0018A BeyoECL Star(特超敏ECL化学发光试剂盒) 共100ml
P0020 显影定影试剂盒 各1升
P0021B Western转膜液 10×1L
P0023A Western一抗稀释液 100ml
P0023B Western封闭液 100ml
P0023C6 Western洗涤液(10X) 10×100ml
P0023D Western二抗稀释液 100ml
P0025 Western一抗二抗去除液(强碱性) 250ml
P0066 预染蛋白质分子量标准(19-117kD) 200μl
P0068 彩色预染蛋白质分子量标准(10-180kD) 200μl
P0071 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(6.5-270kD) 200μl
P0075 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(10-170kD) 200μl
P0078 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(15-120kD) 200μl
P0098 免疫染色固定液 100ml
P0102 免疫染色封闭液 100ml
P0103 免疫染色一抗稀释液 100ml
P0106 免疫染色洗涤液 250ml
P0108 免疫荧光染色二抗稀释液 100ml
P0110 免疫染色(非荧光)二抗稀释液 100ml
P0126 抗荧光淬灭封片液 5ml
P0252 QuickBlock™ Western封闭液 100ml
P0256 QuickBlock™ Western一抗稀释液 100ml
P0258 QuickBlock™ Western二抗稀释液 100ml
P0260 QuickBlock™免疫染色封闭液 100ml
P0262 QuickBlock™免疫染色一抗稀释液 100ml
P0265 QuickBlock™免疫荧光染色二抗稀释液 100ml
P0267 QuickBlock™免疫组化染色二抗稀释液 100ml
FFP24 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.2μm) 20张/包装
FFP32 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.45μm) 20张/包装
FFP51 转印滤纸(7.5×10cm) 100片/包装
FF057 X-OMAT BT胶片(原柯达, 5×7英寸) 100张/盒
FFC58 压片暗盒(5×7英寸) 1个

GST Rabbit mAb(GST兔单抗)(AF2299)
GST Rabbit mAb(GST兔单抗)(AF2299)

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GST Rabbit mAb(GST兔单抗)(AF2299)

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GST Tag Mouse Monoclonal Antibody(GST Tag 小鼠单抗)(AF5063)

GST Tag Mouse Monoclonal Antibody
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产品编号: AF5063

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使用说明
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AF5063 GST Tag Mouse Monoclonal Antibody 50μl 456.00元
来源 用途 交叉反应性 理论分子量 实际分子量
Mouse WB, IP, IF

WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; IHC, Immunohistochemistry; ICC, Immunocytochemistry; FC, Flow Cytometry; ChIP, Chromatin Immunoprecipitation Assay; ChIP-seq, ChIP-sequencing.
H, Human; M, Mouse; R, Rat; C, Chicken; Cw, Cow; Dg, Dog; Gp, Guinea pig; Hm, Hamster; Hr, Horse; Mk, Monkey; Pg, Pig; Rb, Rabbit; S, Sheep; Z, Zebrafish; All, all species expected.
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测或其它适当用途时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IP IF IHC ICC FC ChIP ChIP-seq
1:1000-1:2000 1:20-1:100 1:50-1:200

抗体详细信息如下:

About this Antibody
Name GST Tag Mouse Monoclonal Antibody
Category Mouse Monoclonal Antibody(mAb); Primary antibody
Isotype IgG
Purification method Affinity purification
Positive samples
Cellular location
Customer validation WB (Human)
About the Immunogen
Immunogen Recombinant protein of GST tag
Sequence
Gene ID
SwissProt
Synonyms
Category polypeptide protein tag
Background

包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AF5063 GST Tag Mouse Monoclonal Antibody 50μl
AZ050 Western一抗稀释液 50ml
说明书 1份

保存条件:
GST Tag Mouse Monoclonal Antibody -20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
请根据抗体的实际用途选择相应的使用方法。
1.Western检测:
a.按照推荐的稀释比例用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
b.把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
c.回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
d.按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2.免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页:http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3.其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
4.代表性图片:

GST Tag Mouse Monoclonal Antibody(GST Tag 小鼠单抗)(AF5063)

Fig1. Western blot analysis of over-expressed GST fusion protein in 293 cell using GST Tag Mouse Monoclonal Antibody at different dilution. Each lane was loaded with 2µg cell lysate. Secondary antibody: HRP-labeled Goat Anti-Mouse IgG(H+L) (A0216) at 1:1000 dilution. Blocking buffer: QuickBlock™ Blocking Buffer (P0231). Detection: BeyoECL Star (P0018A). Exposure time: 1s.

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产品编号 产品名称 包装
E6001 MiniProGel™蛋白制胶与电泳系统(4胶) 1套
E6005 MiniProGel™蛋白制胶与电泳系统(2胶) 1套
E6050 MiniBlot™蛋白转膜系统 1套
E6150 MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(2胶/2膜) 1套
E6155 MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(4胶/2膜) 1套
E6159 MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(4胶/4膜) 1套
E6080 BeyoPower™中电流电源(300V/600mA/100W) 1套
E6085 BeyoPower™高电流电源(300V/2000mA/200W) 1套
E6600 TissueMaster™手持式组织研磨仪 1套
EI600 BeyoImager™ 600化学发光成像系统 1套
FFP24 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.2μm) 20张/包装
FFP32 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.45μm) 20张/包装
FFP51 转印滤纸(7.5×10cm) 100张/包装
FFX050-FFX055 Western洗膜盒 1个/包装
P0006 Bradford蛋白浓度测定试剂盒 1000次
P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒 500次
P0012A SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 可制30-50块胶
P0012AC SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 可制30-50块胶
P0013 Western及IP细胞裂解液 100ml
P0013B-P0013D RIPA裂解液(强、中、弱) 100ml
P0014A/P0014B SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, Powder) 1L/10L
P0014C/P0014D SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, 10X) 100ml/500ml
P0015/P0015L SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml/15ml
P0015F SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) 2ml
P0017F BeyoBlue™考马斯亮蓝超快染色液 250ml
P0018A BeyoECL Star(特超敏ECL化学发光试剂盒) 100ml/500ml
P0018F BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒) 100ml/500ml
P0018S/P0018M BeyoECL Plus (超敏ECL化学发光试剂盒) 100ml/500ml
P0021A Western转膜液 1L
P0021S PVDF膜浸润活化液 250ml
P0022 丽春红染色液 120ml
P0023A Western一抗稀释液 100ml/500ml
P0023B Western封闭液 100ml/500ml
P0023C Western洗涤液 250ml
P0023D Western二抗稀释液 100ml/500ml
P0025 Western一抗二抗去除液 250ml
P0059 Recombinant 16-Tag Protein 200μl/1ml
P0066 预染蛋白质分子量标准(19-117kD) 200μl
P0068 彩色预染蛋白质分子量标准(10-180kD) 200μl
P0071 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(6.5-270kD) 200μl
P0075 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(10-170kD) 200μl
P0078 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(15-120kD) 200μl
P0095 免疫染色通透液(Saponin) 100ml/500ml
P0096 免疫染色通透液(Triton X-100) 100ml/500ml
P0097 免疫染色强力通透液 100ml/500ml
P0098 免疫染色固定液 100ml/500ml
P0099 4%多聚甲醛固定液 100ml/500ml
P0102 免疫染色封闭液 100ml
P0103 免疫染色一抗稀释液 100ml
P0106 免疫染色洗涤液 250ml
P0108 免疫荧光染色二抗稀释液 100ml
P0220-P0235 QuickBlock™封闭液 100ml
P0252 QuickBlock™ Western封闭液 100ml/500ml
P0256 QuickBlock™ Western一抗稀释液 100ml/500ml
P0258 QuickBlock™ Western二抗稀释液 100ml/500ml
P0260 QuickBlock™免疫染色封闭液 100ml
P0262 QuickBlock™免疫染色一抗稀释液 100ml
P0265 QuickBlock™免疫荧光染色二抗稀释液 100ml
P0267 QuickBlock™免疫组化染色二抗稀释液 100ml
P0280 InstantView™ SDS-PAGE蛋白染色及上样缓冲液(5X) 1ml
P0050-P0058 BeyoGel™ SDS-PAGE预制胶(Tris-Gly, 12孔) 10块/50块
P0448-P0472 BeyoGel™ Plus PAGE预制胶(Tris-Gly, 10孔/15孔) 10块/50块
P0501-P0528 BeyoGel™ Plus PAGE预制胶(Hepes, 10孔/15孔) 10块/50块
P0552 BeyoGel™ Plus SDS-PAGE Hepes电泳液(20X) 100ml/500ml
P0670-P0678 SDS-PAGE下层胶预混液 250ml/500ml
P0683 SDS-PAGE上层胶预混液 250ml/500ml
P0686-P0695 SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒 可制30-50块胶
P1005-P1031 蛋白酶抑制剂混合物(50X/100X) 1ml/5ml
P1045-P1066 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(50X) 1ml/2ml/5ml/10ml
P1081-P1097 磷酸酶抑制剂混合物(50X) 2ml/10ml
P1112/P1113 去乙酰化酶抑制剂混合物(100X) 1ml/5ml
R0121 AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 25ml/100ml

GST Tag Mouse Monoclonal Antibody(GST Tag 小鼠单抗)(AF5063)
GST Tag Mouse Monoclonal Antibody(GST Tag 小鼠单抗)(AF5063)

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GST Tag Rabbit mAb(GST Tag兔单抗)(AG8054)

GST Tag Rabbit Monoclonal Antibody
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产品编号: AG8054

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
AG8054 GST Tag Rabbit Monoclonal Antibody 50μl 456.00元
来源 用途 交叉反应性 理论分子量 实际分子量
Rabbit WB, FC, IF/ICC, IP All

WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence; IHC, Immunohistochemistry; ICC, Immunocytochemistry; FC, Flow Cytometry; ChIP, Chromatin Immunoprecipitation Assay; ChIP-seq, ChIP-sequencing.

H, Human; M, Mouse; R, Rat; Ar, Arabidopsis; B, Bovine; C, Chicken; Cerastium, Ce; Cw, Cow; Dg, Dog; Gp, Guinea pig; Hm, Hamster; Hr, Horse; Mk, Monkey; Ph, Pharbitis; Pg, Pig; Rb, Rabbit; Rc, Rice; S, Sheep; Z, Zebrafish; All, all species expected.

配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测或其它适当用途时的一抗稀释。

建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IP IF IHC ICC FC ChIP ChIP-seq
1:1,000-1:2,000 1:50-1:100 1:50-1:100 1:50-1:100 1:50-1:100

抗体详细信息如下:

About this Antibody
Name GST Tag Rabbit Monoclonal Antibody
Category Recombinant Rabbit Monoclonal Antibody (mAb); Primary antibody; 标签抗体
Isotype IgG
Purification method Protein A affinity purification
Positive samples
Cellular location
Customer validation
About the Immunogen
Immunogen Recombinant full length protein within Schistosoma japonicum GST aa 1-218.
Sequence
Gene ID
SwissProt P08515
Synonyms
Category
Background Epitope tags are useful for the labeling and detection of proteins using immunoblotting, immunoprecipitation, and immunostaining techniques. Because of their small size, they are unlikely to affect the tagged protein’s biochemical properties. Glutathione S-transferase (GST) is a widely used fusion partner, since it provides both an easily detectable Tag and a simple purification process with little effect on the biological function of the protein of interest. Numerous vectors containing GST-Tag have been developed for both prokaryotic and eukaryotic systems over the past decade.

包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AG8054 GST Tag Rabbit Monoclonal Antibody 50µl
AZ050 Western一抗稀释液 50ml
说明书 1份

保存条件:

GST Tag Rabbit Monoclonal Antibody -20℃保存,需避免反复冻融。Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效,Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。

注意事项:

如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。

回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000×g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。

提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
请根据抗体的实际用途选择相应的使用方法。
1.Western检测:
a.按照推荐的稀释比例用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
b.把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
c.回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
d.按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2. 免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页:http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3. 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
4. 代表性图片。

GST Tag Rabbit mAb(GST Tag兔单抗)(AG8054) Predicted MW: Depend on fusion protein with GST tag Lane 1: 293 cell lysates transfected with N-terminal GST tagged gene. Lane 2: 293 cell lysates transfected with C-terminal GST tagged gene. Lane 3: two fusion proteins, one (45KD) with GST tag on C-terminal, the other (83KD) with GST tag on N-terminal. Lane 4: Mock 293 cell lysates. Lane 1&2: 2 μg per lane Lane 3: 20 ng per lane Lane 4: 10 μg per lane 2nd Ab: GAR HRP(H+L) 1:5,000 Exposure: 30s
GST Tag Rabbit mAb(GST Tag兔单抗)(AG8054) GST tag was immunoprecipitated from 0.2mg of 293 whole cell lysates transfected with C-terminal GST tagged gene with GST-tag Rabbit Monoclonal Antibody at 1:50 dilution. 2nd Ab: GAR HRP for IP 1:500 Lane 1: GST-tag Rabbit Monoclonal Antibody IP in 293 whole cell lysates transfected with C-terminal GST tagged gene Lane 2: PBS instead of GST-tag Rabbit Monoclonal Antibody in 293 whole cell lysates transfected with C-terminal GST tagged gene Lane 3: 293 whole cell lysate transfected with C-terminal GST tagged gene, 2μg (input) Exposure: 10s
GST Tag Rabbit mAb(GST Tag兔单抗)(AG8054) GST-tag Rabbit Monoclonal Antibody staining GST tag in 293 cells transfected with N-terminal GST tagged gene by IF/ICC . Cells were fixed with paraformaldehyde, permeabilized with 0.1% Triton X-100 and blocked with 10% goat serum for half an hour at room temperature. Samples were incubated with primary antibody (1:100) at 4°C. An Alexa Fluor® 594-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG polyclonal was used as the secondary antibody (1:500). DAPI (blue) was used as the nuclear counter stain. Control: PBS and secondary antibody, An Alexa Fluor® 594-conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (1:500).
GST Tag Rabbit mAb(GST Tag兔单抗)(AG8054) Overlay histogram showing 293 cells transfected with C-terminal (Red) and N-terminal (Blue) GST tagged gene stained with GST-tag Rabbit Monoclonal Antibody. The cells were fixed with 4% paraformaldehyde (10 min) and then permeabilized with 0.1% Triton X-100 for 15 min. The cells were then incubated in the antibody (GST-tag Rabbit Monoclonal Antibody, 1:100 dilution) in 1x PBS/1% BSA for 30 min at room temperature. The secondary antibody used was a Goat Anti-Rabbit Alexa Fluor® 488 (IgG H+L) at 1:2,000 dilution for 20 min at room temperature. Unlabelled sample (Black) was used as a control.
GST Tag Rabbit mAb(GST Tag兔单抗)(AG8054)

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产品编号 产品名称 包装
E6001 MiniProGel™蛋白制胶与电泳系统(4胶) 1套
E6005 MiniProGel™蛋白制胶与电泳系统(2胶) 1套
E6050 MiniBlot™蛋白转膜系统 1套
E6150 MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(2胶/2膜) 1套
E6155 MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(4胶/2膜) 1套
E6159 MiniProGel™蛋白制胶、电泳与转膜系统(4胶/4膜) 1套
E6080 BeyoPower™中电流电源(300V/600mA/100W) 1套
E6085 BeyoPower™高电流电源(300V/2000mA/200W) 1套
E6600 TissueMaster™手持式组织研磨仪 1套
EI600 BeyoImager™ 600化学发光成像系统 1套
FFP24 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.2μm) 20张/包装
FFP32 PVDF膜(进口分装, 6.6×8.5cm, 0.45μm) 20张/包装
FFP51 转印滤纸(7.5×10cm) 100张/包装
FFX050-FFX055 Western洗膜盒 1个/包装
P0006 Bradford蛋白浓度测定试剂盒 1000次
P0006C Bradford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型) 800次
P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒 500次
P0012A SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 可制30-50块胶
P0012AC SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒 可制30-50块胶
P0013 Western及IP细胞裂解液 100ml
P0013B-P0013D RIPA裂解液(强、中、弱) 100ml
P0014A/P0014B SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, Powder) 1L/10L
P0014C/P0014D SDS-PAGE电泳液(Tris-Gly, 10X) 100ml/500ml
P0015/P0015L SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml/15ml
P0015F SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) 2ml
P0017F BeyoBlue™考马斯亮蓝超快染色液 250ml
P0018A BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒) 100ml/500ml
P0018F BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒) 100ml/500ml
P0021A Western转膜液 1L
P0021S PVDF膜浸润活化液 250ml
P0022 丽春红染色液 120ml
P0023A Western一抗稀释液 100ml/500ml
P0023B Western封闭液 100ml/500ml
P0023C Western洗涤液 250ml
P0023D Western二抗稀释液 100ml/500ml
P0025 Western一抗二抗去除液 250ml
P0059 Recombinant 16-Tag Protein 200μl/1ml
P0066 预染蛋白质分子量标准(19-117kD) 200μl
P0068 彩色预染蛋白质分子量标准(10-180kD) 200μl
P0071 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(6.5-270kD) 200μl
P0075 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(10-170kD) 200μl
P0078 BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(15-120kD) 200μl
P0095 免疫染色通透液(Saponin) 100ml/500ml
P0096 免疫染色通透液(Triton X-100) 100ml/500ml
P0097 免疫染色强力通透液 100ml/500ml
P0098 免疫染色固定液 100ml/500ml
P0099 4%多聚甲醛固定液 100ml/500ml
P0102 免疫染色封闭液 100ml
P0103 免疫染色一抗稀释液 100ml
P0106 免疫染色洗涤液 250ml
P0108 免疫荧光染色二抗稀释液 100ml
P0220-P0235 Quickblock™封闭液 100ml
P0252 QuickBlock™ Western封闭液 100ml/500ml
P0256 QuickBlock™ Western一抗稀释液 100ml/500ml
P0258 QuickBlock™ Western二抗稀释液 100ml/500ml
P0260 QuickBlock™免疫染色封闭液 100ml
P0262 QuickBlock™免疫染色一抗稀释液 100ml
P0265 QuickBlock™免疫荧光染色二抗稀释液 100ml
P0267 QuickBlock™免疫组化染色二抗稀释液 100ml
P0280 InstantView™ SDS-PAGE蛋白染色及上样缓冲液(5X) 1ml
P0050-P0058 BeyoGel™ SDS-PAGE预制胶(Tris-Gly, 12孔) 10块/50块
P0448-P0472 BeyoGel™ Plus PAGE预制胶(Tris-Gly, 10孔/15孔) 10块/50块
P0501-P0528 BeyoGel™ Plus PAGE预制胶(Hepes, 10孔/15孔) 10块/50块
P0552 BeyoGel™ Plus SDS-PAGE Hepes电泳液(20X) 100ml/500ml
P0670-P0678 SDS-PAGE下层胶预混液 250ml/500ml
P0683 SDS-PAGE上层胶预混液 250ml/500ml
P0686-P0695 SDS-PAGE凝胶超快速配制试剂盒 可制30-50块胶
P1005-P1031 蛋白酶抑制剂混合物(50X/100X) 1ml/5ml
P1045-P1066 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(50X) 1ml/2ml/5ml/10ml
P1081-P1097 磷酸酶抑制剂混合物(50X) 2ml/10ml
P1112/P1113 去乙酰化酶抑制剂混合物(100X) 1ml/5ml
R0121 AllProtect™动物组织核酸、蛋白稳定保存液 25ml/100ml

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产品编号: AG768

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AG768 GST抗体(小鼠单抗) >20次 998.00元
来源 用途 抗体识别位点
Mouse WB, IP, IF GST tag

      WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence.
      本GST抗体(GST antibody)为进口分装,用经过适当修饰的GST(Glutathione S-transferase)融合蛋白作为抗原制备得到的单克隆抗体。克隆号为26H1。
      本GST抗体广泛地用于GST tag融合表达蛋白的检测。本抗体可以检测位于融合蛋白N-terminal的GST tag,也可以检测位于融合蛋白C-terminal的GST tag。
      GST tag常用于融合蛋白的纯化和检测。
      DNA重组技术使给目标蛋白带上特定tag成为可能,这些常用的tag包括myc、HA、Flag、His、GST等。带上tag后,通常不会影响目标蛋白的生物活性和细胞内定位。但检测和tag融合表达的目标蛋白时,使用商业化的相应tag抗体就可以完成,大大方便了很多实验检测。
      GST抗体可以用于检测和GST tag融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测GST tag融合表达蛋白等。
      配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
      建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IP IF
1:1000 1:200 1:800

      本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AG768-1 GST抗体(小鼠单抗) 20μl
AG768-2 Western一抗稀释液 20ml
说明书 1份

保存条件:
      GST抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项: 
      对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
      在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
      回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.Western检测:
A.按照1:1000用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B.把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C.回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D.按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2.免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3.其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。

GST抗体(小鼠单抗)(AG768)
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FREE RADICAL BIO MED. 2018 Mar;117:58-65. (IF 6.17)

2. Zhou L, Hao Z, Wang G, Xu G.
Cereblon suppresses the formation of pathogenic protein aggregates in a p62-dependentmanner.
Hum Mol Genet. 2018 Feb 15;27(4):667-678. (IF 5.1)

3. Zhang M, Wang H, Li D, Xu X.
A novel focal adhesion kinase from Marsupenaeus japonicus and its response to WSSV infection.
Dev Comp Immunol. 2009 Apr;33(4):533-9. (IF 3.192)

4. Yang Q, Jiang YS, Xu HZ, Yan ChenY, Wang L, Lu LQ.
Prokaryotic expression and immunodot-blot detection of Taura syndrome virus capsid proteins VP2 and VP3.
AFR J BIOTECHNOL. 2011 Sep;10(55):11751-7. (IF 0.573)

5. Wang QL, Wu Q, Tao YY, Liu CH, E-Nezami H.
Salvianolic acid B modulates the expression of drug-metabolizing enzymes in HepG2 cells.
HEPATOB PANCREAT DIS. 2011 Oct;10(5):502-8. (IF 2.428)

6. Wang J, Wu Z, Jin Q.
COPI Is Required for Enterovirus 71 Replication.
PLoS One. 2012;7(5):2012;7(5):e38035. (IF 2.74)

7. Tao Q, Xiao J, Wang Y, Fang K, Li N, Hu M, Zhou Y, Zhao J.
Identification of Genes Expressed During Toxoplasma gondii Infection by in Vivo-Induced Antigen Technology (IVIAT) with Positive Porcine Sera.
J Parasitol. 2014 Aug;100(4):470-9. (IF 1.109)

8. Yu W, Gao XJ, Liu Y, Wang Q.
Fusion expression of cecropin B-like antibacterial peptide in Pichia GS115 and its antibacterial mechanism.
Biotechnol Lett. 2016 Feb;38(2):305-12. (IF 1.977)

9. Chen T, Huang B, Zhao Q, Dong H, Zhu S, Zhao Z, Lv L, Yan M, Han H
Molecular characterization and functional analysis of Eimeria tenella malate dehydrogenase.
Parasitol Res. 2018 May 8. (IF 1.641)

lanleys GST (6D5) 抗体说明书

 

lanleys GST (6D5) 抗体说明书 

GST (6D5) 抗体

 

Mab1011

 

 

背景

谷胱甘肽 S-转移酶 (GST) (EC 2.5.1.18) 是一种酶,可催化还原形式的谷胱甘肽 (GSH) 与异生物质底物结合,从而使内源性化合物解毒。由寄生蠕虫日本血吸虫编码的 GST与其哺乳动物对应物几乎没有同源性,已被广泛用作大肠杆菌中外源蛋白表达和纯化的融合模式。GST-tag 易于检测,对目标蛋白的生物学功能影响很小。或者,可以通过特定位点上的酶促切割去除 GST 标签,该位点由精心设计的质粒载体表达。

 

来源

这是一种小鼠单克隆抗体,是针对S. japonicum来源的全长 GST 产生的。

 

基因符号

消费税 ( S. japonicum )

 

同种型

IgG 1

 

纯度

从 1 × PBS 溶液中冻干的纯化抗体

 

特异性

该抗体可单独检测 GST 标签及其融合蛋白。

 

分子量

26 kDa (消费税)

 

应用

蛋白质印迹(WB,稀释范围:1:1,000 – 10,000)。其他应用程序尚未测试。

 

贮存

抵达后将冻干粉储存在 2 – 8°C。准备使用时,用 0.1 ml dH 2 O再水化,如果不清楚则离心。如需长期储存,请分装并保存在 -20°C 或以下。避免重复冷冻和解冻循环。

 

数据

>> 蛋白质印迹法:表达 GST 融合重组蛋白的大肠杆菌细菌裂解物。

 

重要的提示

本产品仅供研究使用,不得用于人类治疗或诊断程序。

GST标签蛋白纯化磁珠 GSTSep Glutathione MagBeads

GST标签蛋白纯化磁珠 GSTSep Glutathione MagBeads

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

 

GST标签蛋白纯化磁珠是一种专为高效、快速纯化谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白而设计的一种新型超顺磁性微球产品,具有快速磁响应性、丰富羟基官能团和粒径相对集中等特点。该磁珠可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行GST 融合蛋白的纯化。

本品特异性好,性价比高,可以一步从细菌、酵母菌或哺乳动物天然细胞裂解物中纯化谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。GST是重组蛋白制备过程中常用的一种标签蛋白,以辅助目的蛋白表达、检测、纯化。

时,在使用磁性分离法的Pull-down实验中,充当“诱饵蛋白”的重组GST融合蛋白通过亲和作用与磁珠结合,当目标蛋白与固相载体混合时,就可被诱饵蛋白吸附,在磁力下,目标蛋白就从表达体系中分离出来,使用该磁珠进行GST Pull-down实验,由于磁性分离不需要多次离心和较长的孵育时间,与传统的层析法相比,操作更简单、快速和自动化。

 

产品性质

 

基质

磁性琼脂糖微球

配体

Glutathione (谷胱甘肽)

载量

5-10 mg GST标签融合蛋白/ mL磁珠

粒径

30-100 μm

磁珠浓度

磁珠悬浮于保护液中,含量为20%

储存缓冲液

20%乙醇的1×PBS

 

运输保存方法

 

冰袋运输。4℃长期储存,有效期2年。

 

注意事项

 

1.磁珠保存过程中避免冷冻干燥和高速离心等操作。

2.磁珠使用前,请充分震荡,使磁珠保持均匀的悬浮状态。

3.使用过的磁珠重复使用时,建议纯化同一种蛋白,纯化不同种蛋白时,建议使用新磁珠,以避免交叉污染。

4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5.本产品仅作科研用途!

 

使用方法

 

  • 缓冲液配制

1.平衡/洗杂液:PBS, pH 7.4 (140 mM NaCI, 2.7 mM KCI, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.4)

2.洗脱液:50 mM Tris-HCl, 10 mM-20 mM还原型谷胱甘肽,pH 8.0

二、样本制备

【注】样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质。

2.1细菌或酵母表达的蛋白

1)将培养液转移到离心杯中,7,000 rpm (7,500 xg),离心15 min收集菌体,然后按照菌体:平衡液=1: 10 W/V)加入平衡液,加入终浓度为1 mMPMSF。加入溶菌酶,使其工作浓度为0.2-0.4 mg/mL。如果表达的宿主细胞内含pLysSpLysE可以不加溶菌酶

2)同时可加入其他蛋白酶抑制剂,但不能影响目的蛋白与磁珠的结合。

3)将菌体沉淀悬浮起来,(如果菌液浓度高,也可考虑加入10 μg/mL RNase A5 μg/mL DNase I,,冰上超声破碎细胞,至菌液基本保持澄清。

4)将澄清的破碎液转移至离心管中10,000 rpm (15,000 xg),4离心20-30 min 取上清,置于冰上备用或-20保存。

2.2酵母、昆虫和哺乳细胞分泌表达可溶性蛋白

1)将细胞培养液转移至离心杯5,000 rpm (3,800 xg),离心10 min收集菌体得上清即可直接使用

2)对于大量体积的上清,需加入硫酸铵沉淀浓缩后,然后Lysis Buffer透析后才能上样

三、磁珠准备

1.可根据目标蛋白产量和磁珠载量信息来准备适量的磁珠(磁珠体积为总体积的20%),将磁珠反复颠倒,充分混匀,使用移液器取适量的磁珠悬浮液,置于离心管中,将离心管置于磁分离器上,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器吸弃清液。

2.将离心管从磁分离器上取下来,加入与悬浮液等体积的平衡液,使用枪头反复吹打5次,将离心管置于磁分离器上,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器吸弃清液,重复洗涤2次。

四、GST标签蛋白纯化

1. 结合 备好的样本加入到处理好的磁珠中,反复颠倒混匀。将离心管置于混合仪上,室温孵育30 min以上(也可根据结合效果调整延长孵育时间

2. 洗杂 将离心管置于磁分离器,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器移出上清液,保留,以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液,使用枪头反复吹打5次,将离心管置于磁分离器上,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器吸弃上清液。至少重复上述步骤2次。

3. 洗脱 在上述离心管中加入3-5倍磁珠体积的洗脱液,用移液器吹打5次,然后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管,5-10 min后,置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,吸取上清液,收集洗脱组分,即为目标蛋白。重复操作两次,分别收集洗脱组分,留待检测。

4.磁珠保存 使用后的磁珠用1 mL洗脱液重悬磁珠,然后置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,吸弃上清液。该操作重复两次。 再加入1 mL平衡液,悬浮磁珠,然后置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,吸弃上清液。再加入4倍磁珠体积的20%乙醇,置于4℃保存。

五、Pull-Down 实验

1.磁珠结合诱饵蛋白 将含有GST标签诱饵蛋白的样品加入到备好的磁珠中,颠倒混匀。将离心管置于混合仪上,室温孵育30 min以上(时间可根据结合效果调整)。

2.洗杂 将离心管置于磁分离器,大约1min,待溶液变澄清后,用移液器移出上清液,保留,以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液,使用枪头反复吹打5-10次,将离心管置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,用移液器吸弃上清液。重复上述步骤2次。 即得到GST诱饵蛋白-磁珠复合物。

3.目标蛋白与诱饵蛋白-磁珠复合物结合 将含有目标蛋白的样品加入到处理好的诱饵蛋白-磁珠复合物中,颠倒混匀。将离心管置于混合仪上,室温孵育30 min以上(时间根据结合效果调整)。

4.洗杂 将离心管置于磁分离器,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器移出上清液,保留,以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液,使用枪头反复吹打5-10次,将离心管置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,用移液器吸弃上清液。重复上述步骤2次。 目标蛋白通过与诱饵蛋白的结合,从混合体系中被捕获。

5.目的蛋白的洗脱  在上述离心管中加入3-5倍磁珠体积的洗脱液,用移液器吹打5次,然后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管,5-10 min后, 置于磁分离器上,大约1 min待溶液变澄清后,吸取上清液,收集洗脱组分,即得到靶蛋白和目标蛋白复合物。再重复操作两次,分别收集洗脱组分,留待检测

 

 

HB220315

Q:目标蛋白回收率低怎么办?

A:1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间;

  2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度;

  3)添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;

  4)增加磁珠用量;

  5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数;

  6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。

Q:如何提高目标蛋白纯度?

A:1)适当提高样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度;

  2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;

  3)在样品溶液和缓冲液中加入表面活性剂等物质;

  4)延长清洗的时间,增加清洗次数。

GST标签蛋白纯化磁珠 GSTSep Glutathione MagBeads

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GST标签蛋白纯化磁珠是一种专为高效、快速纯化谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白而设计的一种新型超顺磁性微球产品,具有快速磁响应性、丰富羟基官能团和粒径相对集中等特点。该磁珠可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行GST 融合蛋白的纯化。

本品特异性好,性价比高,可以一步从细菌、酵母菌或哺乳动物天然细胞裂解物中纯化谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。GST是重组蛋白制备过程中常用的一种标签蛋白,以辅助目的蛋白表达、检测、纯化。

时,在使用磁性分离法的Pull-down实验中,充当“诱饵蛋白”的重组GST融合蛋白通过亲和作用与磁珠结合,当目标蛋白与固相载体混合时,就可被诱饵蛋白吸附,在磁力下,目标蛋白就从表达体系中分离出来,使用该磁珠进行GST Pull-down实验,由于磁性分离不需要多次离心和较长的孵育时间,与传统的层析法相比,操作更简单、快速和自动化。

 

产品性质

 

基质

磁性琼脂糖微球

配体

Glutathione (谷胱甘肽)

载量

5-10 mg GST标签融合蛋白/ mL磁珠

粒径

30-100 μm

磁珠浓度

磁珠悬浮于保护液中,含量为20%

储存缓冲液

20%乙醇的1×PBS

 

运输保存方法

 

冰袋运输。4℃长期储存,有效期2年。

 

注意事项

 

1.磁珠保存过程中避免冷冻干燥和高速离心等操作。

2.磁珠使用前,请充分震荡,使磁珠保持均匀的悬浮状态。

3.使用过的磁珠重复使用时,建议纯化同一种蛋白,纯化不同种蛋白时,建议使用新磁珠,以避免交叉污染。

4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5.本产品仅作科研用途!

 

使用方法

 

  • 缓冲液配制

1.平衡/洗杂液:PBS, pH 7.4 (140 mM NaCI, 2.7 mM KCI, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.4)

2.洗脱液:50 mM Tris-HCl, 10 mM-20 mM还原型谷胱甘肽,pH 8.0

二、样本制备

【注】样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质。

2.1细菌或酵母表达的蛋白

1)将培养液转移到离心杯中,7,000 rpm (7,500 xg),离心15 min收集菌体,然后按照菌体:平衡液=1: 10 W/V)加入平衡液,加入终浓度为1 mMPMSF。加入溶菌酶,使其工作浓度为0.2-0.4 mg/mL。如果表达的宿主细胞内含pLysSpLysE可以不加溶菌酶

2)同时可加入其他蛋白酶抑制剂,但不能影响目的蛋白与磁珠的结合。

3)将菌体沉淀悬浮起来,(如果菌液浓度高,也可考虑加入10 μg/mL RNase A5 μg/mL DNase I,,冰上超声破碎细胞,至菌液基本保持澄清。

4)将澄清的破碎液转移至离心管中10,000 rpm (15,000 xg),4离心20-30 min 取上清,置于冰上备用或-20保存。

2.2酵母、昆虫和哺乳细胞分泌表达可溶性蛋白

1)将细胞培养液转移至离心杯5,000 rpm (3,800 xg),离心10 min收集菌体得上清即可直接使用

2)对于大量体积的上清,需加入硫酸铵沉淀浓缩后,然后Lysis Buffer透析后才能上样

三、磁珠准备

1.可根据目标蛋白产量和磁珠载量信息来准备适量的磁珠(磁珠体积为总体积的20%),将磁珠反复颠倒,充分混匀,使用移液器取适量的磁珠悬浮液,置于离心管中,将离心管置于磁分离器上,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器吸弃清液。

2.将离心管从磁分离器上取下来,加入与悬浮液等体积的平衡液,使用枪头反复吹打5次,将离心管置于磁分离器上,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器吸弃清液,重复洗涤2次。

四、GST标签蛋白纯化

1. 结合 备好的样本加入到处理好的磁珠中,反复颠倒混匀。将离心管置于混合仪上,室温孵育30 min以上(也可根据结合效果调整延长孵育时间

2. 洗杂 将离心管置于磁分离器,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器移出上清液,保留,以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液,使用枪头反复吹打5次,将离心管置于磁分离器上,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器吸弃上清液。至少重复上述步骤2次。

3. 洗脱 在上述离心管中加入3-5倍磁珠体积的洗脱液,用移液器吹打5次,然后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管,5-10 min后,置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,吸取上清液,收集洗脱组分,即为目标蛋白。重复操作两次,分别收集洗脱组分,留待检测。

4.磁珠保存 使用后的磁珠用1 mL洗脱液重悬磁珠,然后置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,吸弃上清液。该操作重复两次。 再加入1 mL平衡液,悬浮磁珠,然后置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,吸弃上清液。再加入4倍磁珠体积的20%乙醇,置于4℃保存。

五、Pull-Down 实验

1.磁珠结合诱饵蛋白 将含有GST标签诱饵蛋白的样品加入到备好的磁珠中,颠倒混匀。将离心管置于混合仪上,室温孵育30 min以上(时间可根据结合效果调整)。

2.洗杂 将离心管置于磁分离器,大约1min,待溶液变澄清后,用移液器移出上清液,保留,以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液,使用枪头反复吹打5-10次,将离心管置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,用移液器吸弃上清液。重复上述步骤2次。 即得到GST诱饵蛋白-磁珠复合物。

3.目标蛋白与诱饵蛋白-磁珠复合物结合 将含有目标蛋白的样品加入到处理好的诱饵蛋白-磁珠复合物中,颠倒混匀。将离心管置于混合仪上,室温孵育30 min以上(时间根据结合效果调整)。

4.洗杂 将离心管置于磁分离器,大约1 min待溶液变澄清后,用移液器移出上清液,保留,以备取样检测。向离心管中加入5倍悬浮液体积的洗杂液,使用枪头反复吹打5-10次,将离心管置于磁分离器上,大约1 min,待溶液变澄清后,用移液器吸弃上清液。重复上述步骤2次。 目标蛋白通过与诱饵蛋白的结合,从混合体系中被捕获。

5.目的蛋白的洗脱  在上述离心管中加入3-5倍磁珠体积的洗脱液,用移液器吹打5次,然后在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管,5-10 min后, 置于磁分离器上,大约1 min待溶液变澄清后,吸取上清液,收集洗脱组分,即得到靶蛋白和目标蛋白复合物。再重复操作两次,分别收集洗脱组分,留待检测

 

 

HB220315

Q:目标蛋白回收率低怎么办?

A:1)延长粗蛋白与磁珠的孵育时间;

  2)适当降低样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度;

  3)添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;

  4)增加磁珠用量;

  5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数;

  6)在样品溶液和其它缓冲液中添加表面活性剂等物质。

Q:如何提高目标蛋白纯度?

A:1)适当提高样品溶液和Binding/Wash Buffer中的还原型谷胱甘肽浓度;

  2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂,防止目标蛋白降解;

  3)在样品溶液和缓冲液中加入表面活性剂等物质;

  4)延长清洗的时间,增加清洗次数。

GST标签蛋白纯化磁珠 GSTSep Glutathione MagBeads

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GST标签蛋白纯化预装柱5ML GST蛋白纯化预装柱|GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column

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产品简介

 

GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF是一种GST标签蛋白纯化树脂,可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。在结构上,该树脂是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,通过12个原子的间隔臂,用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。

GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 5 mL是装填了GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF的一种中压预装柱,规格5 mL,预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA 等,方便客户操作。

 

产品信息

 

货号

20510JP08/20510JP25

规格

5 mL /5×5 mL

 

产品性质

 

基质(Matrix)

高度交联的4%琼脂糖微球

配体(Ligand)

通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽

粒径(Bead size)

45-165 µm

载量(Capacity)

>10 mg GST蛋白40 kDa)/mL基质

最大压力(PressureMax

0.3 MPa,3 bar

pH稳定范围(pH range)

3-12

储存缓冲液(Buffer)

20%乙醇PBS

 

储存条件

 

2~8℃保存,有效期2年。

 

需准备试剂

 

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤除菌。

平衡/洗杂缓冲140 mM NaCl,2.7 mM KCl,10 mM Na2HPO41.8 mM KH2PO4pH 7.4

洗脱缓冲用平衡液配制10 mM 还原型谷胱甘肽现配现用

【注】平衡/洗杂缓冲液洗脱缓冲液中可加入1-10 mM DTT。

 

使用说明

 

【注】样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子。

1. 样品纯化(以Akta为例)

1)准备将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)清洗:3-5倍柱体积去离子水冲洗层析柱中储存液。

3平衡:5倍柱体积的平衡Buffer平衡层析柱,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

4上样将样品加到平衡好的层析柱中,推荐流速1-5 mL/min,保证目的蛋白与树脂充分接触,提高目的蛋白的回收率,收集流出液,待检测。
   :样品的粘度增加使得即使上样体积很少,也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5洗杂10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,直到紫外吸收达到一个稳定的基线,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液,待检测。

6洗脱用洗脱Buffer 采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液足够将目的蛋白洗脱下来。也可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

7清洗与保存:依次使用3倍柱体积的平衡Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%乙醇中,置于4℃保存,防止填料被细菌污染。

2. SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。

3.   填料清洗

GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生,但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集,会造成流速和结合载量性能下降,此时需对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变形物质

2倍柱体积的6 M盐酸胍溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH 7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH 7.4清洗。

 

注意事项

 

1.请勿冷冻保存本产品。

2.所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。

3.本产品仅作科研用途

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

附表 问题及解决方案

 

问题

可能原因

推荐解决方案

 

柱子反压过高

 

填料被堵塞

清洗树脂

裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,或离心去除

样品太黏稠

样品中含高浓度的核酸,延长破碎时间直至粘度降低,或添加DNaseI (终浓度为5 µg/mL),Mg2+(终浓度1 mM),冰上孵育10-15 min

缓冲液太黏稠

有机试剂或蛋白稳定试剂(如甘油等)可能会引起反压增高,降低操作流速

 

 

 

 

洗脱组分中无目的蛋白

GST标签蛋白变性了

使用温和的裂解条件,实验条件以经验为准

过度的裂解使目的蛋白变性

目的蛋白聚集产生沉淀

在细胞裂解前溶液中加入DTT,终浓度为1-10 mM

融合蛋白改变了GST的构象,影响了目的蛋白的结合力

测定pGEX中GST的结合力,对载体进行超声处理,检测其结合力。如果载体中GST有很高的亲和力,有可能是改变融合蛋白的构象从而降低了GST标签蛋白的亲和力

降低结合温度至4℃,充分清洗

柱子平衡时间太短,目的蛋白不是在pH 6.5-pH 8.0范围内结合

pH 6.5-pH 8.0的buffer进行充分的平衡,如PBS

 

 

 

目的蛋白没有完全洗脱下来

洗脱体积太少

增加洗脱液体积,减小洗脱流速。

洗脱液中谷胱甘肽浓度太低

增加洗脱液中还原型谷胱甘肽浓度,可尝试用20-40 mM还原型谷胱甘肽洗脱

pH影响洗脱

在不增加洗脱液中谷胱甘肽量时,提高洗脱液中pH至pH 8-9会有改善

增加洗脱液中离子强度,如0.1-0.2 M NaCl

洗脱液中谷胱甘肽被氧化

使用新鲜配制的洗脱液

加入DTT

非特异性疏水作用影响目的蛋白的溶解和洗脱

洗脱液中加入非离子型洗涤剂,如0.1%的Triton X-100或者2%正辛基-β-D-吡喃葡糖苷Tween-20

 

 

 

 

 

 

电泳或Western Blot检测中发现多条带

Mr 70000蛋白与目的蛋白一起纯化下来

Mr 70000蛋白可能是大肠杆菌基因DnaK的产物,可以在目的蛋白中加入50 mM Tris-HCl,2 mM ATP,10 mM MgSO4pH 7.4在37℃加热10min去除

可通过ATP-琼脂糖胶或离子交换来去除目的蛋白溶液中的dnaK蛋白

GST融合蛋白已经发生降解

在裂解液中加入蛋白酶抑制剂,如加入1 mM PMSF

可能是蛋白酶对目的蛋白部分降解造成的,可使用蛋白酶缺陷型宿主菌(如lon-ompT

细胞破碎过度

减少细胞破碎时间,超声前加入溶菌酶(菌液体积的0.1倍10 mg/mL溶菌酶,25 mM Tris-HCl,pH 8.0),避免发泡导致蛋白酶变性,过度超声破碎增加宿主内源蛋白与GST融合目的蛋白的共纯化。

共价共纯化

包括促进蛋白正确折叠的分子伴侣的共纯化,如:DnaK(Mr~70000),DnaJ(Mr~37000),GrpE(Mr~40000),GroEL(Mr~57000),GroJP(Mr~10000)

抗体与E. coli的各种蛋

白反应

抗体吸附E. coli蛋白:GST-抗体;超声处理去除GST抗体,可以用Western Blot检测

Ver.CN20230921

Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?

A:可能是目的蛋白聚集产生沉淀,建议在细胞裂解前溶液中加入 DTT,终浓度为 1-10 mM。

Q:为什么柱子反压过高?

A:可能是填料被堵塞,建议清洗树脂。

Q:为什么电泳或 Western Blot 检测中发现多条带?

A:可能是Mr 70000 蛋白与目的蛋白一起纯化下来。Mr 70000 蛋白可能是大肠杆菌基因DnaK 的产物,建议可以在目的蛋白中加入 50 mM Tris-HCl,2 mM ATP,10 mM MgSO4,pH 7.4 在 37℃加热 10min 去除。

Q:为什么目的蛋白没有完全洗脱下来?

A:可能是非特异性疏水作用影响目的蛋白的溶解和洗脱,建议在洗脱液中加入非离子型洗涤剂,如 0.1%的 Triton X-100 或者 2%正辛基-β-D-吡喃葡糖苷 Tween-20。

Q:洗脱液怎么配?

A按说明书用平衡缓冲液配制还原性谷胱甘肽(货号:60342)即可,配完后需要检测PH是否跟平衡缓冲液一致,部分谷胱甘肽溶解后ph会偏酸。

[1] Yang B, Wang Y, Tian M, et al. Fg12 ribonuclease secretion contributes to Fusarium graminearum virulence and induces plant cell death. J Integr Plant Biol. 2021;63(2):365-377. doi:10.1111/jipb.12997(IF:4.885)

产品简介

 

GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF是一种GST标签蛋白纯化树脂,可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。在结构上,该树脂是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,通过12个原子的间隔臂,用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。

GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 5 mL是装填了GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF的一种中压预装柱,规格5 mL,预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA 等,方便客户操作。

 

产品信息

 

货号

20510JP08/20510JP25

规格

5 mL /5×5 mL

 

产品性质

 

基质(Matrix)

高度交联的4%琼脂糖微球

配体(Ligand)

通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽

粒径(Bead size)

45-165 µm

载量(Capacity)

>10 mg GST蛋白40 kDa)/mL基质

最大压力(PressureMax

0.3 MPa,3 bar

pH稳定范围(pH range)

3-12

储存缓冲液(Buffer)

20%乙醇PBS

 

储存条件

 

2~8℃保存,有效期2年。

 

需准备试剂

 

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤除菌。

平衡/洗杂缓冲140 mM NaCl,2.7 mM KCl,10 mM Na2HPO41.8 mM KH2PO4pH 7.4

洗脱缓冲用平衡液配制10 mM 还原型谷胱甘肽现配现用

【注】平衡/洗杂缓冲液洗脱缓冲液中可加入1-10 mM DTT。

 

使用说明

 

【注】样品在上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子。

1. 样品纯化(以Akta为例)

1)准备将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)清洗:3-5倍柱体积去离子水冲洗层析柱中储存液。

3平衡:5倍柱体积的平衡Buffer平衡层析柱,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

4上样将样品加到平衡好的层析柱中,推荐流速1-5 mL/min,保证目的蛋白与树脂充分接触,提高目的蛋白的回收率,收集流出液,待检测。
   :样品的粘度增加使得即使上样体积很少,也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5洗杂10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,直到紫外吸收达到一个稳定的基线,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液,待检测。

6洗脱用洗脱Buffer 采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液足够将目的蛋白洗脱下来。也可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

7清洗与保存:依次使用3倍柱体积的平衡Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%乙醇中,置于4℃保存,防止填料被细菌污染。

2. SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。

3.   填料清洗

GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生,但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集,会造成流速和结合载量性能下降,此时需对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变形物质

2倍柱体积的6 M盐酸胍溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH 7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS,pH 7.4清洗。

 

注意事项

 

1.请勿冷冻保存本产品。

2.所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。

3.本产品仅作科研用途

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

附表 问题及解决方案

 

问题

可能原因

推荐解决方案

 

柱子反压过高

 

填料被堵塞

清洗树脂

裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上样前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,或离心去除

样品太黏稠

样品中含高浓度的核酸,延长破碎时间直至粘度降低,或添加DNaseI (终浓度为5 µg/mL),Mg2+(终浓度1 mM),冰上孵育10-15 min

缓冲液太黏稠

有机试剂或蛋白稳定试剂(如甘油等)可能会引起反压增高,降低操作流速

 

 

 

 

洗脱组分中无目的蛋白

GST标签蛋白变性了

使用温和的裂解条件,实验条件以经验为准

过度的裂解使目的蛋白变性

目的蛋白聚集产生沉淀

在细胞裂解前溶液中加入DTT,终浓度为1-10 mM

融合蛋白改变了GST的构象,影响了目的蛋白的结合力

测定pGEX中GST的结合力,对载体进行超声处理,检测其结合力。如果载体中GST有很高的亲和力,有可能是改变融合蛋白的构象从而降低了GST标签蛋白的亲和力

降低结合温度至4℃,充分清洗

柱子平衡时间太短,目的蛋白不是在pH 6.5-pH 8.0范围内结合

pH 6.5-pH 8.0的buffer进行充分的平衡,如PBS

 

 

 

目的蛋白没有完全洗脱下来

洗脱体积太少

增加洗脱液体积,减小洗脱流速。

洗脱液中谷胱甘肽浓度太低

增加洗脱液中还原型谷胱甘肽浓度,可尝试用20-40 mM还原型谷胱甘肽洗脱

pH影响洗脱

在不增加洗脱液中谷胱甘肽量时,提高洗脱液中pH至pH 8-9会有改善

增加洗脱液中离子强度,如0.1-0.2 M NaCl

洗脱液中谷胱甘肽被氧化

使用新鲜配制的洗脱液

加入DTT

非特异性疏水作用影响目的蛋白的溶解和洗脱

洗脱液中加入非离子型洗涤剂,如0.1%的Triton X-100或者2%正辛基-β-D-吡喃葡糖苷Tween-20

 

 

 

 

 

 

电泳或Western Blot检测中发现多条带

Mr 70000蛋白与目的蛋白一起纯化下来

Mr 70000蛋白可能是大肠杆菌基因DnaK的产物,可以在目的蛋白中加入50 mM Tris-HCl,2 mM ATP,10 mM MgSO4pH 7.4在37℃加热10min去除

可通过ATP-琼脂糖胶或离子交换来去除目的蛋白溶液中的dnaK蛋白

GST融合蛋白已经发生降解

在裂解液中加入蛋白酶抑制剂,如加入1 mM PMSF

可能是蛋白酶对目的蛋白部分降解造成的,可使用蛋白酶缺陷型宿主菌(如lon-ompT

细胞破碎过度

减少细胞破碎时间,超声前加入溶菌酶(菌液体积的0.1倍10 mg/mL溶菌酶,25 mM Tris-HCl,pH 8.0),避免发泡导致蛋白酶变性,过度超声破碎增加宿主内源蛋白与GST融合目的蛋白的共纯化。

共价共纯化

包括促进蛋白正确折叠的分子伴侣的共纯化,如:DnaK(Mr~70000),DnaJ(Mr~37000),GrpE(Mr~40000),GroEL(Mr~57000),GroJP(Mr~10000)

抗体与E. coli的各种蛋

白反应

抗体吸附E. coli蛋白:GST-抗体;超声处理去除GST抗体,可以用Western Blot检测

Ver.CN20230921

Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?

A:可能是目的蛋白聚集产生沉淀,建议在细胞裂解前溶液中加入 DTT,终浓度为 1-10 mM。

Q:为什么柱子反压过高?

A:可能是填料被堵塞,建议清洗树脂。

Q:为什么电泳或 Western Blot 检测中发现多条带?

A:可能是Mr 70000 蛋白与目的蛋白一起纯化下来。Mr 70000 蛋白可能是大肠杆菌基因DnaK 的产物,建议可以在目的蛋白中加入 50 mM Tris-HCl,2 mM ATP,10 mM MgSO4,pH 7.4 在 37℃加热 10min 去除。

Q:为什么目的蛋白没有完全洗脱下来?

A:可能是非特异性疏水作用影响目的蛋白的溶解和洗脱,建议在洗脱液中加入非离子型洗涤剂,如 0.1%的 Triton X-100 或者 2%正辛基-β-D-吡喃葡糖苷 Tween-20。

Q:洗脱液怎么配?

A按说明书用平衡缓冲液配制还原性谷胱甘肽(货号:60342)即可,配完后需要检测PH是否跟平衡缓冲液一致,部分谷胱甘肽溶解后ph会偏酸。

[1] Yang B, Wang Y, Tian M, et al. Fg12 ribonuclease secretion contributes to Fusarium graminearum virulence and induces plant cell death. J Integr Plant Biol. 2021;63(2):365-377. doi:10.1111/jipb.12997(IF:4.885)