KANEKA KanCapA 3G预装柱


 

 

KANEKA KanCapA 3G预装柱

KANEKA KanCapA™ 3G Prepacked Column

用于遗传研究

制造商: 

FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation

储存情况 : 

保持在2-10摄氏度。

 

产品编号

包装尺寸

价钱

分销商

111-01101

条形码

4548995064523

1毫升

价格表

22,000日元

分销商

117-01103

条形码

4548995064530

5毫升

价格表

67,000日元

分销商

115-01104

条形码

4548995064547

5mL x5

价格表

268,000日元

 

 

概述/应用

大纲 该产品仅供研究使用。不要将它管理给人类。
这是用于抗体和Fc融合嵌合蛋白纯化的Prepack柱。它装有固定有新型耐碱性蛋白A的纤维素载体,其特异性结合免疫球蛋白的Fc区。
由于KanCapA 3G具有与KanCapA相同的碱性耐受性,因此它可以执行100至300倍的CIP。此外,使用KanCapA 3G,可以在更温和的pH条件下(pH 4.2)进行抗体洗脱,因此可以更温和地纯化抗体。它还具有去除培养过程中产生的不必要蛋白质的能力。此外,KANEKA KanCapA 3G配体比KanCap A提高了更多,并且抗体的动态吸附能力得到改善。

 

产品列表

 

产品名称

KANEKA KanCapA™

用于遗传研究

KANEKA KanCapA™预包装柱

用于遗传研究

KANEKA KanCap™G预包装柱

用于遗传研究

KANEKA KanCap™L预包装柱

用于遗传研究

 

 

KANEKA KanCapA™ 3G 预装柱

 

上海金畔生物KANEKA KanCapA™ 3G 预装柱

KANEKA KanCapA™ 3G 预装柱 
KANEKA KanCapA™ 3G Prepacked Column

基因研究用 for Genetic Research

制造商:FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation(富士胶片和光)

储存条件:冷藏(冷冻运输)

◆性质·特征

KANEKA KanCapA™ 3G(填料)

基质

高度交联纤维素

配基

改良型蛋白A

结合方式

化学结合

动态吸附载量

≧58 mg/mL-resin(人多克隆IgG)

pH范围

2~13

原位清洗条件

0.1~0.5 mol/L氢氧化钠

平均粒径

65~85 μm

 

KANEKA KanCapA™ 3G(柱)

保存缓冲液

20%乙醇水溶液

停留时间

≧3 min(推荐4~10 min)

大压力

30 bar

填料填充量

1 mL

5 mL

内径×长度
(mm × mm)

8.0 × 20

8.0 × 100

大流速(mL/min)

0.84

4.19

 

 

 

● 高动态吸附载量

 

拥有不错的吸附载量,与传统产品以及Competitor A相比,能以更高效率获得目的产物。

 

 

比较动态吸附能力(DBC)

(人多克隆IgG)

 

 

 

 

● 可在温和条件下洗脱

 

能够在更温和的条件下纯化单克隆抗体与Fc融合蛋白等目的产物。

 

 

比较抗体洗脱pH值

(柠檬酸缓冲液)

 

 

 

● 优异的杂质去除特性

 

宿主细胞蛋白(HCP)的去除能力

 

 

 

多聚体的去除能力

 

 

 

样品:IgG1(CCCF),负荷量: 5 mg/mL-resin,洗脱:50 mmol/L 磷酸缓冲液(pH 4.5→3,梯度洗脱,10柱容量)

 

 

◆使用注意

 

为了维持柱的性能、防止微生物繁殖,未使用的产品请按产品说明书的要求进行储存。在系统中取出的产品,请使用Inlet stopper和Outlet stopper将两端紧密包裹封存。在此期间,请防止空气进入。

 

 

 

◆概况·应用实例

 

概况

 本产品是针对抗体以及Fc融合嵌合蛋白纯化用的预装柱。在免疫球蛋白Fc段填充固定了特异

 性结合新型耐碱性蛋白A的纤维素载体。
 KanCapA 3G拥有与KanCapA相同的耐碱性,能够进行100~300次的CIP。
 KANEKA KanCapA 3G的配体进一步改良,抗体的动态吸附容量提高。
 KanCapA 3G能在更温和的pH条件(实际值:pH 4.2)下洗脱抗体。去除在培养工序中

 产生的无用蛋白(HCP或凝聚体)的能力也十分不错

特点

 1. 耐碱性以及使用寿命长
 2. 化洗脱pH 
 3. 吸附载量高
 4. 优异的杂质去除性能
 5. 对应高流速操作,便于从小试到生产的放大工艺
 6. 预填充,即开即用

使用方法

 抗体纯化,纯化Fc融合嵌合蛋白

 

 

 

 

 

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
111-01101 KANEKA KanCapA™ 3G Prepacked Column 1 mL 基因研究用
117-01103 KANEKA KanCapA™ 3G Prepacked Column 5 mL 基因研究用
115-01104 KANEKA KanCapA™ 3G Prepacked Column 5 mL×5 基因研究用

Geldex 75 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

Geldex 75 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Geldex 75 PG Chromatography Column是将介质Geldex 75 PG装填于层析柱YXK16/70中的即用型凝胶过滤层析柱,省去了自行装填层析柱的麻烦和柱效不高的风险,介质和层析柱的完美结合使层析变得高效简单。Geldex 75 PG Chromatography Column凝胶过滤预装柱广泛用于实验室工艺开发、样品的少量制备以及检测,适合于多肽、重组蛋白以及及抗体等领域的生物分子的分离纯化。

凝胶过滤预装柱具有以下特点:即开即用流速快分辨率高柱床体积稳定物理化学耐受性好

 

产品性质

预装介质

Geldex 75 PG

分离范围

3-70 kDa (球蛋白)

平均颗大小

34 µm

柱床高度

60±1cm

柱床体积

120 mL

最大耐压

0.3 MPa

建议流速

0.51.5 mL/min

保存溶

20%乙醇,4~30℃

 

运输和保存方法

1.使用后的Geldex 75 PG Chromatography Column应储存于 20%乙醇中,为了防止乙醇挥发以及微生物生长,建议3个月更换一次新鲜的20%乙醇。

2.放置在4~8冷库中保存效果更好有效期5年。

 

注意事项

1. 层析柱外壳使用的是聚丙烯酸材质,不可使层析柱外壳接触浓度大于40%的有机溶剂,如乙醇、乙腈、丙酮等,也不可使用高浓度的有机溶剂如70%乙醇擦拭外壳,否则会导致风裂。

2. 层析柱堵塞严重的时候可以使用反向清洗的方法,但是反向冲洗需要降低流速至正常流速的一半以下。

3. 层析柱体为玻璃制品,使用时应轻拿轻放,防止摔碎或影响柱效。

4. 为了避免堵塞层析柱,所有样品和缓冲液需要用 0.45 μm 膜过滤。

5. 为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

6. 层析柱放置在无阳光直射的地方。

7. 层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

8. 了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

9. 产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 将层析柱接入层析系统

1)打开包装,取出层析柱

2)检查层析柱是否完好,以及层析柱在运输过程中是否进气变干。

3)将层析柱垂直固定在层析系统旁,注意柱头向上。

4)启动层析系统,确保排净层析系统内的气泡,并设置层析系统报警压为 0.3 MPa,然后调整并保持 0.2 mL/min 的流速运行。

5)打开层析柱的上下封口帽,抬高底部出口管道的出口位置,使其高于顶部进口管道的进口位置,观测到管道进口处没有了气泡后将进口管道与层析系统连接。

2 纯化流程

2.1 层析柱预处理

对层析柱进行预处理,即采用0.1~0.5 MNaOH对层析柱处理4小时以上以达到清洗、消毒和去除热源的目的再用蒸馏水冲洗2个柱体积。

2.2 平衡

使用2~3倍柱体积的上样平衡液平衡柱子,建议在平衡缓冲液中加入至少0.15 MNaCl

2.3 样品准备

样品需要过0.45 μm以下的滤膜,粘度太高时可以适当稀释,蛋白浓度一般不超过70 mg/mL

2.4 上样

一般加载 0.5~2% 柱体积的样品量,根据分离效果可以适当调整上样体积。 

2.5 洗脱

继续用平衡缓冲液冲洗层析柱,收集流出的不同组分,至不再有生物分子流出,一般需要1~1.5个柱体积。

3 清洗与再生

1)先用1倍柱体积的 1 M NaCl 去除。

2)对于变性的蛋白的去除,采用 1 M NaOH20 cm/h流速冲洗2个柱体积。

3)对于脂类或脂蛋白的去除,用 4倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。

4)对于无机污染物的去除,采用0.5 M的醋酸冲洗2个柱体积。

5)最后用4倍柱体积的蒸馏水冲洗

 

                                          HB220526

 

Geldex 75 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

暂无内容

Geldex 75 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

暂无内容

Geldex 75 PG Chromatography Column是将介质Geldex 75 PG装填于层析柱YXK16/70中的即用型凝胶过滤层析柱,省去了自行装填层析柱的麻烦和柱效不高的风险,介质和层析柱的完美结合使层析变得高效简单。Geldex 75 PG Chromatography Column凝胶过滤预装柱广泛用于实验室工艺开发、样品的少量制备以及检测,适合于多肽、重组蛋白以及及抗体等领域的生物分子的分离纯化。

凝胶过滤预装柱具有以下特点:即开即用流速快分辨率高柱床体积稳定物理化学耐受性好

 

产品性质

预装介质

Geldex 75 PG

分离范围

3-70 kDa (球蛋白)

平均颗大小

34 µm

柱床高度

60±1cm

柱床体积

120 mL

最大耐压

0.3 MPa

建议流速

0.51.5 mL/min

保存溶

20%乙醇,4~30℃

 

运输和保存方法

1.使用后的Geldex 75 PG Chromatography Column应储存于 20%乙醇中,为了防止乙醇挥发以及微生物生长,建议3个月更换一次新鲜的20%乙醇。

2.放置在4~8冷库中保存效果更好有效期5年。

 

注意事项

1. 层析柱外壳使用的是聚丙烯酸材质,不可使层析柱外壳接触浓度大于40%的有机溶剂,如乙醇、乙腈、丙酮等,也不可使用高浓度的有机溶剂如70%乙醇擦拭外壳,否则会导致风裂。

2. 层析柱堵塞严重的时候可以使用反向清洗的方法,但是反向冲洗需要降低流速至正常流速的一半以下。

3. 层析柱体为玻璃制品,使用时应轻拿轻放,防止摔碎或影响柱效。

4. 为了避免堵塞层析柱,所有样品和缓冲液需要用 0.45 μm 膜过滤。

5. 为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

6. 层析柱放置在无阳光直射的地方。

7. 层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

8. 了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

9. 产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 将层析柱接入层析系统

1)打开包装,取出层析柱

2)检查层析柱是否完好,以及层析柱在运输过程中是否进气变干。

3)将层析柱垂直固定在层析系统旁,注意柱头向上。

4)启动层析系统,确保排净层析系统内的气泡,并设置层析系统报警压为 0.3 MPa,然后调整并保持 0.2 mL/min 的流速运行。

5)打开层析柱的上下封口帽,抬高底部出口管道的出口位置,使其高于顶部进口管道的进口位置,观测到管道进口处没有了气泡后将进口管道与层析系统连接。

2 纯化流程

2.1 层析柱预处理

对层析柱进行预处理,即采用0.1~0.5 MNaOH对层析柱处理4小时以上以达到清洗、消毒和去除热源的目的再用蒸馏水冲洗2个柱体积。

2.2 平衡

使用2~3倍柱体积的上样平衡液平衡柱子,建议在平衡缓冲液中加入至少0.15 MNaCl

2.3 样品准备

样品需要过0.45 μm以下的滤膜,粘度太高时可以适当稀释,蛋白浓度一般不超过70 mg/mL

2.4 上样

一般加载 0.5~2% 柱体积的样品量,根据分离效果可以适当调整上样体积。 

2.5 洗脱

继续用平衡缓冲液冲洗层析柱,收集流出的不同组分,至不再有生物分子流出,一般需要1~1.5个柱体积。

3 清洗与再生

1)先用1倍柱体积的 1 M NaCl 去除。

2)对于变性的蛋白的去除,采用 1 M NaOH20 cm/h流速冲洗2个柱体积。

3)对于脂类或脂蛋白的去除,用 4倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。

4)对于无机污染物的去除,采用0.5 M的醋酸冲洗2个柱体积。

5)最后用4倍柱体积的蒸馏水冲洗

 

                                          HB220526

 

Geldex 75 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

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Geldex 75 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

暂无内容

Geldex 200 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

Geldex 200 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Geldex 200 PG Chromatography Column是将介质Geldex 200 PG装填于层析柱YXK16/70中的即用型凝胶过滤层析柱,省去了自行装填层析柱的麻烦和柱效不高的风险,介质和层析柱的完美结合使层析变得高效简单。Geldex 200 PG Chromatography Column凝胶过滤预装柱广泛用于实验室工艺开发、样品的少量制备以及检测,适合于多肽、重组蛋白以及及抗体等领域的生物分子的分离纯化。

凝胶过滤预装柱具有以下特点:即开即用流速快分辨率高柱床体积稳定物理化学耐受性好

 

产品性质

预装介质

Geldex 200 PG

分离范围

10600 kDa (球蛋白)

平均颗大小

34 µm

柱床高度

60±1cm

柱床体积

120 mL

最大耐压

0.3 MPa

建议流速

0.51.5 mL/min

保存溶

20%乙醇,4~30℃

 

运输和保存方法

1.使用后的Geldex 200 PG Chromatography Column应储存于20%乙醇中,为了防止乙醇挥发以及微生物生长,建议3个月更换一次新鲜的20%乙醇。

2.放置在4~8冷库中保存效果更好有效期5年。

 

注意事项

1. 层析柱外壳使用的是聚丙烯酸材质,不可使层析柱外壳接触浓度大于40%的有机溶剂,如乙醇、乙腈、丙酮等,也不可使用高浓度的有机溶剂如70%乙醇擦拭外壳,否则会导致风裂。

2. 层析柱堵塞严重的时候可以使用反向清洗的方法,但是反向冲洗需要降低流速至正常流速的一半以下。

3. 层析柱体为玻璃制品,使用时应轻拿轻放,防止摔碎或影响柱效。

4. 为了避免堵塞层析柱,所有样品和缓冲液需要用 0.45 μm 膜过滤。

5. 为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

6. 层析柱放置在无阳光直射的地方。

7. 层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

8. 了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

9. 产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 将层析柱接入层析系统

1)打开包装,取出层析柱

2)检查层析柱是否完好,以及层析柱在运输过程中是否进气变干。

3)将层析柱垂直固定在层析系统旁,注意柱头向上。

4)启动层析系统,确保排净层析系统内的气泡,并设置层析系统报警压为 0.3MPa,然后调整并保持 0.2 mL/min 的流速运行。

5)打开层析柱的上下封口帽,抬高底部出口管道的出口位置,使其高于顶部进口管道的进口位置,观测到管道进口处没有了气泡后将进口管道与层析系统连接。

2 纯化流程

2.1 层析柱预处理

对层析柱进行预处理,即采用0.1~0.5 MNaOH对层析柱处理4小时以上以达到清洗、消毒和去除热源的目的再用蒸馏水冲洗2个柱体积。

2.2 平衡

使用2~3倍柱体积的上样平衡液平衡柱子,建议在平衡缓冲液中加入至少0.15 MNaCl

2.3 样品准备

样品需要过0.45 μm以下的滤膜,粘度太高时可以适当稀释,蛋白浓度一般不超过70 mg/mL

2.4 上样

一般加载 0.5~2% 柱体积的样品量,根据分离效果可以适当调整上样体积。 

2.5 洗脱

继续用平衡缓冲液冲洗层析柱,收集流出的不同组分,至不再有生物分子流出,一般需要1~1.5个柱体积。

3 清洗与再生

1)先用1倍柱体积的1 M NaCl 去除。

2)对于变性的蛋白的去除,采用1 M NaOH20 cm/h流速冲洗2个柱体积。

3)对于脂类或脂蛋白的去除,用4倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。

4)对于无机污染物的去除,采用0.5 M的醋酸冲洗2个柱体积。

5)最后用4倍柱体积的蒸馏水冲洗

 

                                          HB220526

 

Geldex 200 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

暂无内容

Geldex 200 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

暂无内容

Geldex 200 PG Chromatography Column是将介质Geldex 200 PG装填于层析柱YXK16/70中的即用型凝胶过滤层析柱,省去了自行装填层析柱的麻烦和柱效不高的风险,介质和层析柱的完美结合使层析变得高效简单。Geldex 200 PG Chromatography Column凝胶过滤预装柱广泛用于实验室工艺开发、样品的少量制备以及检测,适合于多肽、重组蛋白以及及抗体等领域的生物分子的分离纯化。

凝胶过滤预装柱具有以下特点:即开即用流速快分辨率高柱床体积稳定物理化学耐受性好

 

产品性质

预装介质

Geldex 200 PG

分离范围

10600 kDa (球蛋白)

平均颗大小

34 µm

柱床高度

60±1cm

柱床体积

120 mL

最大耐压

0.3 MPa

建议流速

0.51.5 mL/min

保存溶

20%乙醇,4~30℃

 

运输和保存方法

1.使用后的Geldex 200 PG Chromatography Column应储存于20%乙醇中,为了防止乙醇挥发以及微生物生长,建议3个月更换一次新鲜的20%乙醇。

2.放置在4~8冷库中保存效果更好有效期5年。

 

注意事项

1. 层析柱外壳使用的是聚丙烯酸材质,不可使层析柱外壳接触浓度大于40%的有机溶剂,如乙醇、乙腈、丙酮等,也不可使用高浓度的有机溶剂如70%乙醇擦拭外壳,否则会导致风裂。

2. 层析柱堵塞严重的时候可以使用反向清洗的方法,但是反向冲洗需要降低流速至正常流速的一半以下。

3. 层析柱体为玻璃制品,使用时应轻拿轻放,防止摔碎或影响柱效。

4. 为了避免堵塞层析柱,所有样品和缓冲液需要用 0.45 μm 膜过滤。

5. 为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

6. 层析柱放置在无阳光直射的地方。

7. 层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

8. 了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

9. 产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 将层析柱接入层析系统

1)打开包装,取出层析柱

2)检查层析柱是否完好,以及层析柱在运输过程中是否进气变干。

3)将层析柱垂直固定在层析系统旁,注意柱头向上。

4)启动层析系统,确保排净层析系统内的气泡,并设置层析系统报警压为 0.3MPa,然后调整并保持 0.2 mL/min 的流速运行。

5)打开层析柱的上下封口帽,抬高底部出口管道的出口位置,使其高于顶部进口管道的进口位置,观测到管道进口处没有了气泡后将进口管道与层析系统连接。

2 纯化流程

2.1 层析柱预处理

对层析柱进行预处理,即采用0.1~0.5 MNaOH对层析柱处理4小时以上以达到清洗、消毒和去除热源的目的再用蒸馏水冲洗2个柱体积。

2.2 平衡

使用2~3倍柱体积的上样平衡液平衡柱子,建议在平衡缓冲液中加入至少0.15 MNaCl

2.3 样品准备

样品需要过0.45 μm以下的滤膜,粘度太高时可以适当稀释,蛋白浓度一般不超过70 mg/mL

2.4 上样

一般加载 0.5~2% 柱体积的样品量,根据分离效果可以适当调整上样体积。 

2.5 洗脱

继续用平衡缓冲液冲洗层析柱,收集流出的不同组分,至不再有生物分子流出,一般需要1~1.5个柱体积。

3 清洗与再生

1)先用1倍柱体积的1 M NaCl 去除。

2)对于变性的蛋白的去除,采用1 M NaOH20 cm/h流速冲洗2个柱体积。

3)对于脂类或脂蛋白的去除,用4倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。

4)对于无机污染物的去除,采用0.5 M的醋酸冲洗2个柱体积。

5)最后用4倍柱体积的蒸馏水冲洗

 

                                          HB220526

 

Geldex 200 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

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Geldex 200 PG凝胶层析预装柱 凝胶过滤层析柱

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丁基琼脂糖4FF弱疏水层析预装柱5mL Butyl 4FF

丁基琼脂糖4FF弱疏水层析预装柱5mL Butyl 4FF

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Butyl Agarose 4FF 4%的琼脂糖基架上偶联丁基脂肪链而成的,配基疏水性弱,优化后的配基密度适合疏水性较强的生物分子的分离纯化。

本品Butyl 4FF Chromatography Column是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mLButyl Agarose 4FF填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作

 

产品性质

基质

4%的高度交联的琼脂糖

粒径

45165 µm

功能基团

-CH2-CH2-CH2-CH3(丁基)

载量

7 mg lgG 26 mg HSA/mL

建议流速

300 cm/h

pH范围

3-13

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm5 mL

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期4年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

3)将样品加到平衡好的预装柱中,收集流出液。

4)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

5)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

6)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

丁基琼脂糖4FF弱疏水层析预装柱5mL Butyl 4FF

暂无内容

丁基琼脂糖4FF弱疏水层析预装柱5mL Butyl 4FF

暂无内容

 

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Butyl Agarose 4FF 4%的琼脂糖基架上偶联丁基脂肪链而成的,配基疏水性弱,优化后的配基密度适合疏水性较强的生物分子的分离纯化。

本品Butyl 4FF Chromatography Column是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mLButyl Agarose 4FF填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作

 

产品性质

基质

4%的高度交联的琼脂糖

粒径

45165 µm

功能基团

-CH2-CH2-CH2-CH3(丁基)

载量

7 mg lgG 26 mg HSA/mL

建议流速

300 cm/h

pH范围

3-13

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm5 mL

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期4年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

3)将样品加到平衡好的预装柱中,收集流出液。

4)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

5)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

6)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

丁基琼脂糖4FF弱疏水层析预装柱5mL Butyl 4FF

暂无内容

丁基琼脂糖4FF弱疏水层析预装柱5mL Butyl 4FF

暂无内容

苯基琼脂糖FF(HS)强疏水层析预装柱5mL Phenyl FF(HS)

苯基琼脂糖FF(HS)强疏水层析预装柱5mL Phenyl FF(HS)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Phenyl Agarose FF(HS)是一种高取代的芳香族疏水层析介质,它是 6%的琼脂糖基架上偶联苯基而成的,结合载量较高,配基疏水性强,适合疏水性较的生物分子的分离纯化。

本品Phenyl FF(HS) Chromatography Column, 5 mL是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mLPhenyl Agarose FF(HS)填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

45165 µm

功能基团

苯基

载量

30 mg lgG 36 mg HSA/mL

建议流速

300-600 cm/h

pH范围

3-13

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm5 mL

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期4年。

 

 注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

3)将样品加到平衡好的预装柱中,收集流出液。

4)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

5)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

6)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

苯基琼脂糖FF(HS)强疏水层析预装柱5mL Phenyl FF(HS)

暂无内容

苯基琼脂糖FF(HS)强疏水层析预装柱5mL Phenyl FF(HS)

暂无内容

 

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Phenyl Agarose FF(HS)是一种高取代的芳香族疏水层析介质,它是 6%的琼脂糖基架上偶联苯基而成的,结合载量较高,配基疏水性强,适合疏水性较的生物分子的分离纯化。

本品Phenyl FF(HS) Chromatography Column, 5 mL是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mLPhenyl Agarose FF(HS)填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

45165 µm

功能基团

苯基

载量

30 mg lgG 36 mg HSA/mL

建议流速

300-600 cm/h

pH范围

3-13

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm5 mL

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期4年。

 

 注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

3)将样品加到平衡好的预装柱中,收集流出液。

4)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

5)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

6)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

苯基琼脂糖FF(HS)强疏水层析预装柱5mL Phenyl FF(HS)

暂无内容

苯基琼脂糖FF(HS)强疏水层析预装柱5mL Phenyl FF(HS)

暂无内容

Q 6FF强阴离子交换预装柱1mL

Q 6FF强阴离子交换预装柱1mL

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

Q强阴离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-N+(CH3)3

本品Q强阴离子交换预装柱是Q强阴离子交换层析填料FF的中压预装柱,规格为1 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

45-165 µm

离子交换类型

强阴离子

载量

~0.18-0.25 mmol Cl/mL 基质

耐压

0.3 MPa

建议流速

400-700 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

0.7×2.5 cm(1 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点 1 个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阴离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl或HCOO

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl或CH3COO

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl或CH3COO

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl

11.12

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

 

Q 6FF强阴离子交换预装柱1mL

暂无内容

Q 6FF强阴离子交换预装柱1mL

暂无内容

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

Q强阴离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-N+(CH3)3

本品Q强阴离子交换预装柱是Q强阴离子交换层析填料FF的中压预装柱,规格为1 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

45-165 µm

离子交换类型

强阴离子

载量

~0.18-0.25 mmol Cl/mL 基质

耐压

0.3 MPa

建议流速

400-700 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

0.7×2.5 cm(1 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点 1 个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阴离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl或HCOO

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl或CH3COO

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl或CH3COO

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl

11.12

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

 

Q 6FF强阴离子交换预装柱1mL

暂无内容

Q 6FF强阴离子交换预装柱1mL

暂无内容

Q 6FF强阴离子交换预装柱5mL

Q 6FF强阴离子交换预装柱5mL

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。Q强阴离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-N+(CH3)3本品Q强阴离子交换预装柱是Q强阴离子交换层析填料FF的中压预装柱,规格为5 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

45-165 µm

离子交换类型

强阴离子

载量

~0.18-0.25 mmol Cl/mL 基质

耐压

0.3 MPa

建议流速

400-700 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm(5 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点1个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阴离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl或HCOO

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl或CH3COO

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl或CH3COO

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl

11.12

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

 

Q 6FF强阴离子交换预装柱5mL

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暂无内容

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。Q强阴离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-N+(CH3)3本品Q强阴离子交换预装柱是Q强阴离子交换层析填料FF的中压预装柱,规格为5 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

45-165 µm

离子交换类型

强阴离子

载量

~0.18-0.25 mmol Cl/mL 基质

耐压

0.3 MPa

建议流速

400-700 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm(5 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点1个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阴离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl或HCOO

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl或CH3COO

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl或CH3COO

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl

11.12

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

 

Q 6FF强阴离子交换预装柱5mL

暂无内容

Q 6FF强阴离子交换预装柱5mL

暂无内容

SP 6FF强阳离子交换预装柱1mL

SP 6FF强阳离子交换预装柱1mL

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

SP强阳离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-SO3

本品SP强阳离子交换预装柱是SP强阳离子交换层析填料FF的中压预装柱,规格为1 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

45-165 µm

离子交换类型

强阳离子

载量

~0.18-0.25 mmol H+/mL 基质

耐压

0.3 MPa

建议流速

400-700 cm/h

pH范围

4-13(长期)/ 3-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇,0.2M NaAc

柱子尺寸

0.7×2.5 cm(1 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点 1 个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阳离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或 Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或 Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或 Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或 Li+

5.76

5.6-6.6

MJP

50

Na+或 Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPJP

50

Na+或 Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Cl

8.33

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

HB220708

 

 

SP 6FF强阳离子交换预装柱1mL

暂无内容

SP 6FF强阳离子交换预装柱1mL

暂无内容

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

SP强阳离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-SO3

本品SP强阳离子交换预装柱是SP强阳离子交换层析填料FF的中压预装柱,规格为1 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

45-165 µm

离子交换类型

强阳离子

载量

~0.18-0.25 mmol H+/mL 基质

耐压

0.3 MPa

建议流速

400-700 cm/h

pH范围

4-13(长期)/ 3-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇,0.2M NaAc

柱子尺寸

0.7×2.5 cm(1 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点 1 个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阳离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或 Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或 Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或 Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或 Li+

5.76

5.6-6.6

MJP

50

Na+或 Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPJP

50

Na+或 Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Cl

8.33

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

HB220708

 

 

SP 6FF强阳离子交换预装柱1mL

暂无内容

SP 6FF强阳离子交换预装柱1mL

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SP 6FF强阳离子交换预装柱5mL

SP 6FF强阳离子交换预装柱5mL

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

SP强阳离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-SO3

本品SP强阳离子交换预装柱是SP强阳离子交换层析填料FF的中压预装柱,规格为5 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

45-165 µm

离子交换类型

强阳离子

载量

~0.18-0.25 mmol H+/mL 基质

耐压

0.3 MPa

建议流速

400-700 cm/h

pH范围

4-13(长期)/ 3-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇,0.2M NaAc

柱子尺寸

1.6×2.5 cm(5 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点1个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阳离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或 Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或 Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或 Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或 Li+

5.76

5.6-6.6

MJP

50

Na+或 Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPJP

50

Na+或 Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Cl

8.33

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

HB220708

 

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离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

SP强阳离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-SO3

本品SP强阳离子交换预装柱是SP强阳离子交换层析填料FF的中压预装柱,规格为5 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

45-165 µm

离子交换类型

强阳离子

载量

~0.18-0.25 mmol H+/mL 基质

耐压

0.3 MPa

建议流速

400-700 cm/h

pH范围

4-13(长期)/ 3-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇,0.2M NaAc

柱子尺寸

1.6×2.5 cm(5 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点1个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阳离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或 Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或 Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或 Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或 Li+

5.76

5.6-6.6

MJP

50

Na+或 Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPJP

50

Na+或 Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Cl

8.33

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

HB220708

 

SP 6FF强阳离子交换预装柱5mL

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