qa-bio Endo F Multi-Kit说明书

发表于2024年4月14日由上海金畔生物科技有限公司

Endo F Multi-Kit将在天然和变性条件下将N-连接的聚糖脱糖基化。每种酶对N-连接的聚糖释放具有不同的特异性。可以选择组合使用这三种酶以*去除糖蛋白或肽上存在的所有N-连接的聚糖，或者独立使用每种酶，从而确定存在的N-聚糖的类型。

KE-EFX3

产品描述

推荐使用Endo F Multi-kit对由于在蛋白质的三维结构中的聚糖位置而在非变性条件下对PNgase F裂解具有抗性的天然蛋白质进行去糖基化处理，因为已知这些酶对蛋白质构象的敏感性较低。

每一种酶的具有不同的N-连接的聚糖的特异性：
内切糖苷酶F1断裂这样的高甘露糖和某些杂合型N-聚糖
内切糖苷酶F2释放双触角和高甘露糖聚糖（以40X减小的速率）
内切糖苷酶F3将释放triantennarry和岩藻糖基双触角N-聚糖

应用：
–抗PNGase F切割的天然蛋白质的去糖基化–
聚糖类型的测定（高甘露糖，双触角，三/四臂触角）
–脱糖基化时通常会沉淀的脱糖基化蛋白
– X射线晶体学

这三种酶在寡糖的核心中的两个GlcNAc残基之间裂解天冬酰胺连接的（N-连接的）寡糖，生成截短的糖分子，其中一个N-乙酰氨基葡糖残基保留在天冬酰胺上，增强了蛋白质的溶解性。相反，PNGase F可以完整清除寡糖。

使用说明

1.向Eppendorf管中加入多达200μg糖蛋白。用去离子水将最终体积调整为34μl。
2.加入10μlEndo F2 / F3 5x反应缓冲液，250 mM乙酸钠pH 4.5。如果单独使用Endo F1酶，请使用Endo F1缓冲液，250 mM磷酸钠pH 5.5。
4.将2.0μl每种酶添加到反应中。在37°C下孵育3小时。
通过SDS-PAGE监控切割。

无内毒素质粒小量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit

发表于2024年3月22日由上海金畔生物科技有限公司

无内毒素质粒小量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

MolPure^® Endo-free Plasmid Mini Kit适用于从1-10 mL大肠杆菌LB培养液中快速提取20-50 µg纯净的质粒DNA，具有高效、快速、方便等特点。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度DNA。提取的DNA纯度高，内毒素残留极低(<0.1 EU/μg DNA)，细胞转染效果极佳，也可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

试剂盒组分

类别	编号	组分名称	19021ES50 (50 T)	19021ES70 (200 T)
Part I	19021-A	RNase A (10 mg/mL)	125 µL	500 µL
Part I	19021-B	去内毒素溶液ER (ER Solution E2)	5 mL	20 mL
Part II	19021-C	缓冲液RS^* (RS Buffer E2^*)	12.5 mL	50 mL
Part III	19021-D	缓冲液AC (AC Buffer E2)	5 mL	20 mL
	19021-E	DNA吸附柱E2 (MolPure^® DNA Column E2)	50个	200个
	19021-F	2 mL收集管 (2 mL Collection Tube E2)	50个	200个
	19021-G	裂解液LB (LB Buffer E2)	12.5 mL	50 mL
	19021-H	结合液BD (BD Buffer E2)	12.5 mL	50 mL
	19021-I	去蛋白液PL^* (PL Buffer E2^*)	16 mL	63 mL
	19021-J	漂洗液W^* (Wash Buffer^*)	13 mL	50 mL
	19021-K	洗脱液 (Elution Buffer)	10 mL	20 mL

运输与保存方法

Part I组分冰袋运输，-20℃保存；Part II组分冰袋运输，4℃保存；Part III组分常温运输，室温保存。

产品有效期12个月。

相关产品

液体样本、TRIzol+离心柱式提取产品，适用样本多样、提取操作简单、快速，全国多个仓库，大量现货！

产品名称	货号	规格
MolPure^® Plasmid Mini Kit 质粒小量提取试剂盒^HOT	19001ES50/70	50 T/200 T
TOP10 Chemically Competent Cell Top10化学感受态细胞^HOT	11801ES80/92	100×100μL
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞^HOT	11802ES80/92	100×100μL
Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒^HOT	10911ES20	20 T
Hieff Clone^® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒^HOT	10912ES10	10 T
Hieff Trans^TM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂^HOT	40802ES03	1 mL

HB201030

试剂盒组分

类别	编号	组分名称	19021ES50 (50 T)	19021ES70 (200 T)
Part I	19021-A	RNase A (10 mg/mL)	125 µL	500 µL
Part I	19021-B	去内毒素溶液ER (ER Solution E2)	5 mL	20 mL
Part II	19021-C	缓冲液RS^* (RS Buffer E2^*)	12.5 mL	50 mL
Part III	19021-D	缓冲液AC (AC Buffer E2)	5 mL	20 mL
	19021-E	DNA吸附柱E2 (MolPure^® DNA Column E2)	50个	200个
	19021-F	2 mL收集管 (2 mL Collection Tube E2)	50个	200个
	19021-G	裂解液LB (LB Buffer E2)	12.5 mL	50 mL
	19021-H	结合液BD (BD Buffer E2)	12.5 mL	50 mL
	19021-I	去蛋白液PL^* (PL Buffer E2^*)	16 mL	63 mL
	19021-J	漂洗液W^* (Wash Buffer^*)	13 mL	50 mL
	19021-K	洗脱液 (Elution Buffer)	10 mL	20 mL

运输与保存方法

Part I组分冰袋运输，-20℃保存；Part II组分冰袋运输，4℃保存；Part III组分常温运输，室温保存。

产品有效期12个月。

相关产品

液体样本、TRIzol+离心柱式提取产品，适用样本多样、提取操作简单、快速，全国多个仓库，大量现货！

产品名称	货号	规格
MolPure^® Plasmid Mini Kit 质粒小量提取试剂盒^HOT	19001ES50/70	50 T/200 T
TOP10 Chemically Competent Cell Top10化学感受态细胞^HOT	11801ES80/92	100×100μL
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞^HOT	11802ES80/92	100×100μL
Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒^HOT	10911ES20	20 T
Hieff Clone^® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒^HOT	10912ES10	10 T
Hieff Trans^TM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂^HOT	40802ES03	1 mL

HB201030

Q：加入去内毒素试剂后，溶液没有变得浑浊？

A：可能是本身内毒素低，也可能是加入 ER 溶液后，因为体系的 PH 差异、抑制物等，使得内毒素的凝集状态反应不一样。

Q：无内毒素质粒小提检测浓度很高？

A：客户的菌液量用了 20ml，太多了，导致 RNase 作用不足。

Q: 质粒浓度低

A: （1）拷贝数低或者大于10kb的质粒应加大菌体使用量，并按比例增加后续buffer的用量（2）细菌可能没有充分裂解

Q: 裂解液有沉淀

A: 裂解液中含有NaOH，可能盐离子析出，可 37℃温浴复溶至溶液澄清再使用。

Q：质粒跑胶出现小于100bp小条带

A：可能RNA未去除干净（样本太多或者添加了RNase的缓冲液 RS酶活下降）或者裂解时间太长导致质粒受到破坏。

Q: 内毒素清除离心后分层不彻底

A: 提升离心温度；加大离心转速；增加离心时间。

Q: 提取的产量低

A: 中低拷贝质粒：长片段、表达型载体常以低拷贝为主，建议加大菌体使用量，菌液过夜培养

菌种问题：菌种保存中质粒丢失，养菌前先划线活化，稳定产量

菌体未充分裂解：在buffer种充分重悬，避免成团

试剂准备有误：有沉淀析出的溶液需要加热；加入的乙醇体积不准

洗脱不充分：洗脱液预热，二次洗脱

Q: 有基因组污染

A: 培养时间太长：培养时间建议控制在12-16h；裂解不充分。

Q: 下游结果不理想

A: 盐离子污染；乙醇污染；质粒降解；层析柱膜脱落。

[1] Han P, Cao P, Yue J, et al. Knockdown of hnRNPA1 Promotes NSCLC Metastasis and EMT by Regulating Alternative Splicing of LAS1L exon 9. Front Oncol. 2022;12:837248. Published 2022 Jun 23. doi:10.3389/fonc.2022.837248(IF:5.738)
[2] Zhang J, Wang W, Feng N, Jiang X, Zhu S, Chen YQ. Ndufa6 regulates adipogenic differentiation via Scd1. Adipocyte. 2021;10(1):646-657. doi:10.1080/21623945.2021.2007590(IF:4.534)
[3] Zhu S, Zhang J, Wang W, Jiang X, Chen YQ. Blockage of NDUFB9-SCD1 pathway inhibits adipogenesis : Blockage of NDUFB9-SCD1 pathway inhibits adipogenesis. J Physiol Biochem. 2022;78(2):377-388. doi:10.1007/s13105-022-00876-7(IF:4.158)

无内毒素质粒大量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit

发表于2024年3月22日由上海金畔生物科技有限公司

无内毒素质粒大量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

MolPure^® Endo-free Plasmid Maxi Kit适用于从150-300 mL大肠杆菌LB培养液中快速提取0.5-2 mg纯净的高拷贝质粒DNA，提取率高达80-90%，具有高效、快速、方便等特点。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，配合本公司独特的裂解液配方可以可最大限度的回收高纯度DNA。提取的DNA纯度高，内毒素残留极低(<0.1 EU/μg DNA)，细胞转染效果极佳，也可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

试剂盒组分

类别	编号	组分名称	19036ES10 (10 T)
Part I	19036-A	RNase A (10 mg/mL)	750 µL
Part I	19036-B	去内毒素溶液ER (ER Solution E1)	25 mL
Part II	19036-C	缓冲液RS^* (RS Buffer E1^*)	77 mL
Part III	19036-D	DNA吸附柱E1 (MolPure^® DNA Column E1)	10 个
	19036-E	50 mL收集管 (50 mL Collection Tube E1)	20 个
	19036-F	裂解液LB (LB Buffer E1)	77 mL
	19036-G	结合液BD (BD Buffer E1)	77 mL
	19036-H	去蛋白液PL^* (PL Buffer E1^*)	63 mL
	19036-I	漂洗液W^* (Wash Buffer^*)	50 mL
	19036-J	洗脱液 (Elution Buffer)	20 mL

运输与保存方法

Part I组分冰袋运输，-20℃保存；Part II组分冰袋运输，4℃保存；Part III组分常温运输，室温保存。

产品有效期12个月。

实验操作流程图

无内毒素质粒大量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit

相关产品

液体样本、TRIzol+离心柱式提取产品，适用样本多样、提取操作简单、快速，全国多个仓库，大量现货！

产品名称	货号	规格
TOP10 Chemically Competent Cell Top10化学感受态细胞^HOT	11801ES80/92	100×100 μL
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞^HOT	11802ES80/92	100×100 μL
Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒^HOT	10911ES20	20 T
Hieff Clone^® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒^HOT	10912ES10	10 T
Hieff Trans^TM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂^HOT	40802ES03	1 mL

HB210802

试剂盒组分

类别	编号	组分名称	19036ES10 (10 T)
Part I	19036-A	RNase A (10 mg/mL)	750 µL
Part I	19036-B	去内毒素溶液ER (ER Solution E1)	25 mL
Part II	19036-C	缓冲液RS^* (RS Buffer E1^*)	77 mL
Part III	19036-D	DNA吸附柱E1 (MolPure^® DNA Column E1)	10 个
	19036-E	50 mL收集管 (50 mL Collection Tube E1)	20 个
	19036-F	裂解液LB (LB Buffer E1)	77 mL
	19036-G	结合液BD (BD Buffer E1)	77 mL
	19036-H	去蛋白液PL^* (PL Buffer E1^*)	63 mL
	19036-I	漂洗液W^* (Wash Buffer^*)	50 mL
	19036-J	洗脱液 (Elution Buffer)	20 mL

运输与保存方法

Part I组分冰袋运输，-20℃保存；Part II组分冰袋运输，4℃保存；Part III组分常温运输，室温保存。

产品有效期12个月。

实验操作流程图

无内毒素质粒大量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit

相关产品

液体样本、TRIzol+离心柱式提取产品，适用样本多样、提取操作简单、快速，全国多个仓库，大量现货！

产品名称	货号	规格
TOP10 Chemically Competent Cell Top10化学感受态细胞^HOT	11801ES80/92	100×100 μL
DH5α Chemically Competent Cell DH5α化学感受态细胞^HOT	11802ES80/92	100×100 μL
Hieff Clone^® Plus One Step Cloning Kit 一步法快速克隆试剂盒^HOT	10911ES20	20 T
Hieff Clone^® Plus Multi One Step Cloning Kit 多片段一步法快速克隆试剂盒^HOT	10912ES10	10 T
Hieff Trans^TM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂^HOT	40802ES03	1 mL

HB210802

Q：提取性能和效果如何？

A：提取体积大，产量高：150~300 mL，0.5~2 mg，提取率高达 80-90%，内毒素含量极低（<0.1 EU/

μg DNA），细胞转染效果极佳。

Q：加入去内毒素溶液ER 后冰浴不澄清怎么办？

A：冰浴 5 min，冰浴过程中，颠倒混匀 2-3 次至溶液变清亮透明（或稍有浑浊），不澄清可能跟菌的

种类和状态有关系。

Q：如何检测产物内毒素去除情况？

A：推荐我们的产品（60401）动态浊度法内毒素检测鲎试剂

Q: 内毒素清除离心后分层不彻底

A: 提升离心温度；加大离心转速；增加离心时间。

Q: 提取的产量低

A: 中低拷贝质粒：长片段、表达型载体常以低拷贝为主，建议加大菌体使用量，菌液过夜培养

菌种问题：菌种保存中质粒丢失，养菌前先划线活化，稳定产量

菌体未充分裂解：在buffer种充分重悬，避免成团

试剂准备有误：有沉淀析出的溶液需要加热；加入的乙醇体积不准

洗脱不充分：洗脱液预热，二次洗脱

Q: 有基因组污染

A: 培养时间太长：培养时间建议控制在12-16h；裂解不充分。

Q: 下游结果不理想

A: 盐离子污染；乙醇污染；质粒降解；层析柱膜脱落。

无内毒素质粒大量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit

暂无内容

Endo S 糖苷内切酶S

发表于2024年3月14日由上海金畔生物科技有限公司

Endo S 糖苷内切酶S

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Endo S，中文名是糖苷内切酶S，基因来源酿脓链球菌（Streptococcus pyogenes），是一种高度特异性糖苷内切酶，可以从野生型 IgG 重链的壳二糖核心结构之间切除N-连接糖。本产品纯度在95%以上，活性高，稳定性好，无糖苷外切酶污染，无蛋白水解活性。为方便后续操作，带有组氨酸（His）标签，易于从反应中去除。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	20413JP80	20413JP90
20413-A	Endo S	1000 U	5×1000 U
20413-B	10×Buffer	1 mL	5×1 mL

产品性质

中文别名（Chinese synonym）	糖苷内切酶S
英文别名（English synonym）	Endo S
来源（Source）	大肠杆菌表达
纯度（Purity）	经SDS-PAGE检测，纯度> 95%
储存溶液（Buffer）比活性（Specific activity）	PBS pH 7.5 8,000 U/mg
酶活单位定义（Unit Definition）	一个单位的定义是在总反应体积为10 μL的情况下，在37 °C反应1小时，能将5 μg天然小鼠IgG中的95%的N-连接糖去除。

运输与保存方法

冰袋运输；-20 ℃保存；有效期 12个月。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

反应体系

组分	体积 (μL)
IgG	V
Endo S	1
10×Buffer	1
H2O	to 10

【注】：37 ℃孵育1 h后跑胶，上样量为2-3 μg，对照组为原蛋白。

实验示例

Endo S 糖苷内切酶S

IgG在Endo S酶条件下的酶切电泳图

泳道-：对照，未加Endo S酶；泳道+：加Endo S酶。

HB220128

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	20413JP80	20413JP90
20413-A	Endo S	1000 U	5×1000 U
20413-B	10×Buffer	1 mL	5×1 mL

产品性质

中文别名（Chinese synonym）	糖苷内切酶S
英文别名（English synonym）	Endo S
来源（Source）	大肠杆菌表达
纯度（Purity）	经SDS-PAGE检测，纯度> 95%
储存溶液（Buffer）比活性（Specific activity）	PBS pH 7.5 8,000 U/mg
酶活单位定义（Unit Definition）	一个单位的定义是在总反应体积为10 μL的情况下，在37 °C反应1小时，能将5 μg天然小鼠IgG中的95%的N-连接糖去除。

运输与保存方法

冰袋运输；-20 ℃保存；有效期 12个月。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

反应体系

组分	体积 (μL)
IgG	V
Endo S	1
10×Buffer	1
H2O	to 10

【注】：37 ℃孵育1 h后跑胶，上样量为2-3 μg，对照组为原蛋白。

实验示例

Endo S 糖苷内切酶S

IgG在Endo S酶条件下的酶切电泳图

泳道-：对照，未加Endo S酶；泳道+：加Endo S酶。

HB220128

暂无内容

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

发表于2024年3月14日由上海金畔生物科技有限公司

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

糖苷内切酶 H 是一种重组糖苷酶，能够对 N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构进行切割，去除糖蛋白中的 N-连接高甘露糖。糖苷内切酶 H 克隆自褶皱链霉菌（Streptomyces plicatus）。并在酵母中重组表达。本产品带his标签，常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

另外，我司还提供其他类型的糖苷酶，包括糖苷内切酶S（Cat#20413JP），酵母重组表达的N-糖苷酶 F（Cat#20415JP，比活性：750000 U/mL），酵母重组表达的N-糖苷酶 F（Cat#20407JP，比活性：100000 U/mL）。

产品信息

货号	20414JP92/20414JP97
规格	10000 U /50000 U

组分信息

组分编号	组分名称	20414JP92	20414JP97
A	Endo H	10000 U	50000 U
B1	Buffer 1（10×）	100 μL	500 μL
B2	Buffer 2（10×）	200 μL	1000 μL

产品性质

中文别名（Chinese synonym）	糖苷内切酶 H
英文别名（English synonym）	Endo H
来源（Source）	酵母
分子量（Molecular weight）	60 kDa
比活性（Specific activity）	1000000 U/mL
缓冲液组分（Buffer）	20 mM Tris，50 mM NaCl，5 mM EDTA PH7.5
酶活定义（Unit Definition）	1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中，37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

储存条件

-15~-25℃保存，有效期1年。

使用说明

变性条件下蛋白质去糖基化

1）在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白（1-20 μg），至终体积10 μL；

2）100℃温度下煮沸10 min使其变性，冰上冷却，离心10秒；

3）加入2 μL的Buffer 2，8μL去离子水，总反应体积20 μL；

4）加入1-2 μL的Endo H，轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。

5）65℃ 下热失活10分钟。

非变性条件下蛋白质去糖基化

1）在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白（1-20 μg）至最终体积为 20 μL。

2）加入 2~5 μL 的 EndoH, 轻轻混匀。

3）37°C 孵育 4-24 h。

注意：在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化，在非变性条件下可能需要增加Endo H的量和延长孵育时间。

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240205

产品简介

产品信息

货号	20414JP92/20414JP97
规格	10000 U /50000 U

组分信息

组分编号	组分名称	20414JP92	20414JP97
A	Endo H	10000 U	50000 U
B1	Buffer 1（10×）	100 μL	500 μL
B2	Buffer 2（10×）	200 μL	1000 μL

产品性质

中文别名（Chinese synonym）	糖苷内切酶 H
英文别名（English synonym）	Endo H
来源（Source）	酵母
分子量（Molecular weight）	60 kDa
比活性（Specific activity）	1000000 U/mL
缓冲液组分（Buffer）	20 mM Tris，50 mM NaCl，5 mM EDTA PH7.5
酶活定义（Unit Definition）	1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中，37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

储存条件

-15~-25℃保存，有效期1年。

使用说明

变性条件下蛋白质去糖基化

1）在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白（1-20 μg），至终体积10 μL；

2）100℃温度下煮沸10 min使其变性，冰上冷却，离心10秒；

3）加入2 μL的Buffer 2，8μL去离子水，总反应体积20 μL；

4）加入1-2 μL的Endo H，轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。

5）65℃ 下热失活10分钟。

非变性条件下蛋白质去糖基化

1）在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白（1-20 μg）至最终体积为 20 μL。

2）加入 2~5 μL 的 EndoH, 轻轻混匀。

3）37°C 孵育 4-24 h。

注意：在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化，在非变性条件下可能需要增加Endo H的量和延长孵育时间。

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240205

暂无内容

日本Sanplatec官网代理商

三博特日本ATTO电泳槽日本东洋advantec滤纸中国代理商

标签归档：endo

qa-bio Endo F Multi-Kit说明书

产品描述

使用说明

无内毒素质粒小量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Mini Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

无内毒素质粒大量提取试剂盒|MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Endo S 糖苷内切酶S

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献