Sigma去糖基化试剂盒 使用心得


Sigma去糖基化试剂盒

Sigma-Aldrich 的天然蛋白去糖基化试剂盒(Native Protein Deglycosylation Kit,货号NDEGLY)可在天然条件下去除糖蛋白上的N连接寡糖。糖基化蛋白修饰通常位于折叠蛋白中不容易接近的位置,因此在未变性的情况下,不大可 能通过标准的肽N- 糖苷酶 F(PNGase F)处理来去除。如果您的下游分析需要折叠蛋白(如酶学分析或蛋白相互作用分析),那么这个试剂盒也许适合您。

此试剂盒包含了内糖苷酶F1、F2和F3,以及相应的反应缓冲液。与PNGase F相比,这些内糖苷酶对蛋白构象没那么敏感,更适合在蛋白未变性的情况下去除各种N连接寡糖。这三种内糖苷酶有着不同的连接特异性。F1能够去除低聚甘露 糖和混合寡糖结构,而F2和F3则分别能去除两个分支和三个分支的结构。

此试剂盒在去糖基化上的效果如何呢?美国西北大学的博士生A. Caulfield介绍了他的使用心得。

据Caulfield介绍,他们想要确定目的蛋白在去糖基化之后的生物学活性。糖基化的 去除可通过Western blot来评估,即蛋白条带的分子量减少。他们的目的蛋白包含N连接糖基化。此蛋白在HEK 293细胞中产生,并利用其N端的FLAG标签来纯化。之前他们试过PNGase,但无法让目的蛋白去糖基化。

在这一实验中,他们将2 ug目的蛋白与0.02个单位的内糖苷酶F1、F2或F3及其相应的缓冲液混合,在37°C孵育4小时。之后通过标准的SDS-PAGE和Western blot来评估去糖基化的程度。

正如他们预计的那样,蛋白被去糖基化,且各个样品之间的结果相当一致。有趣的是,内糖苷酶F1对他们的蛋白起作用,而F2和F3则*没效果。Caulfield认为,了解哪种酶能使蛋白去糖基化,将带来一些有关寡糖链性质的信息。

Caulfield认为这一试剂盒简单易用,适用于所有研究蛋白糖基化的研究人员。当然,随着蛋白底物不同,反应条件可能也需要调整。

Sigma-Aldrich提供了多种去糖基化试剂盒,包括GlycoProfile I In-Gel Deglycosylation Kit、GlycoProfile II Enzymatic In-Solution Deglycosylation Kit、GlycoProfile IV Chemical Deglycosylation Kit等,适用于溶液或PAGE胶中的糖蛋白,与下游多个分析(如质谱分析或功能研究)兼容。

arcticzymes尿嘧啶-DNA糖基化酶


arcticzymes尿嘧啶-DNA糖基化酶

Cod Uracil-DNA Glycosylase

鳕鱼尿嘧啶-DNA糖基化酶

来自Atlantic Cod的Cod Uracil-DNA糖基化酶(Cod UNG)是仅有可商购的UNG酶,其通过适度热处理*且不可逆地灭活。该酶在含有修饰的Cod UNG基因的重组大肠杆菌(ung-)菌株中产生。

Cod UNG酶的主要优点

  • 热不稳定
  • 在55°C时*不可逆地灭活
  • 使用Cod UNG可在RT-PCR中实现污染控制
  • PCR后不会降解PCR产物。这使得PCR产物的下游使用成为可能
  • 高纯度酶,无污染核酸酶测试

 

Product information

Article no.

Notes

Price

Cod UNG – Pack size: 100 U quantity

Pack size: 100 UConc.: 1U/µl

#70500-201

€92

Cod UNG Triton FREE – Pack size: 100 U quantity

Triton FREE
Pack size: 100 UConc.: 1U/µl

#70501-201

€92

Cod UNG – Pack size: 1000 U quantity

Pack size: 1000 UConc.: 1U/µl

#70500-202

€390

Cod UNG Triton FREE – Pack size: 1000 U quantity

Triton FREE
Pack size: 1000 UConc.: 1U/µl

#70501-202

€390

N/A

Pack size: 50 kUConc.: 50U/µl

#70500-150

REQUEST QUOTE

N/A

Pack size: 50 kUConc.: 1U/µl

#70500-151

REQUEST QUOTE

N/A

Glycerol-free
Pack size: 5000 UConc.: 50U/µl

#70510-105

REQUEST QUOTE

N/A

Glycerol-free
Pack size: 50 kUConc.: 50U/µl

#70510-150

REQUEST QUOTE

N/A

Pack size: 200 kUConc.: 50U/µl

#70500-160

REQUEST QUOTE

 

PCR携带预防

关于PCR预防的一般信息

PCR的高灵敏度,特别是qPCR,使得该方法易于污染,产生错误或不准确的结果。来自先前PCR的携带污染物被认为是假阳性结果的主要来源之一。由于气溶胶,污染移液管,表面,手套和试剂,污染物可能从先前的扩增反应中带走。

在扩增DNA和RNA时,有两种常见的策略可以防止污染物。一个是设置一个单独的实验室进行设置和放大,大限度地减少移液步骤的数量,并防止扩增后管子打开。然而,由于实际原因,这并不总是可行的。此外,它无法保证避免污染。

防止污染的另一种常见的策略是在PCR扩增期间用dUTP部分或*替代dTTP,从而产生含有尿嘧啶的DNA。在开始PCR之前,用尿嘧啶-DNA糖基化酶(UNG)处理PCR混合物。在初的变性步骤期间,温度升高至95℃,导致脱嘧啶位点的裂解和携带DNA的片段化。由于模板含有胸苷,因此不受UNG处理的影响。所有PCR都是用dUTP替代dTTP进行的先决条件。

使用我们的Cod UNG的好处是它在55˚C时不可逆转地灭活。Cod UNG是仅有兼容一步式RT-qPCR的UNG!

 

RT-qPCR中的PCR预防

Cod UNG是仅有兼容一步式RT-qPCR的UNG

在逆转录酶qPCR(RT-qPCR)中,RNA是初始模板。然而,污染物的问题在这里可能与常规PCR一样多。逆转录后,cDNA是PCR的模板。如果您的样品被先前PCR的PCR产物污染,则引物无法区分cDNA和DNA,从而导致错误结果。

在一步法RT-qPCR试剂盒中,将RNA加入含有逆转录酶和聚合酶的主混合物中,使cDNA合成和qPCR在同一试管中。 大肠杆菌 UNG / UDG的宜工作温度可达约。50˚C并且通常保持其活性达到约。70℃。该温度范围与一步法RT-qPCR方案中的残留预防不相容,因为  大肠杆菌  UNG / UDG将在逆转录期间去除掺入cDNA中的尿嘧啶,从而导致模板降解。

来自ArcticZymes的重组表达的Cod UNG初是从冷适应生物大西洋鳕鱼中分离的。Cod UNG在20˚C至40˚C的温度范围内具有高活性,在温度高于42˚C时会迅速失去活性,并且在55˚C时已经不可逆转地失活。由于Cod UNG的宜温度范围与大肠杆菌相比要低得多  UNG / UDG,Cod UNG兼容单管RT-qPCR。通过添加Cod UNG至终浓度0.01U /μl简单地进行残留预防,并在开始RT-qPCR之前在25℃引入5分钟的孵育步骤。或者,可以将浓度增加至0.04U /μl并省略预孵育步骤。Cod UNG将有效去除样品设置和循环仪升温过程中的残留污染。

在这里,我们显示Cod UNG可用于在含有dUTP而非dTTP的商业一步法RT-qPCR主混合物中进行残留物预防。用Cod UNG处理不影响靶cDNA,产生与未处理样品相同的Cq值。为了比较,用通用UNG处理导致显着的Cq延迟,证明与一步RT-qPCR不相容。

Cod UNG与一步式RT-qPCR兼容
图1. Cod UNG与一步法RT-qPCR中的通用UNG相比较。进行一步RT-qPCR,将Cod UNG和通用UNG与未处理的对照进行比较。用Cod UNG处理不影响靶cDNA,产生与未处理样品相同的Cq值。用通用UNG处理导致显着的Cq延迟,证明与一步RT-qPCR不相容。
Cod UNG有效去除残留的扩增子
图2. Cod UNG有效去除DNA。在进行一步RT-qPCR之前,将含有尿嘧啶的DNA的加标引入RNA样品中。没有引入预孵育步骤。用Cod UNG治疗成功地将加标的扩增子移除至检测限以下。

 

 

热敏型尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)是来源于嗜冷海洋细菌经大肠杆菌表达纯化的的重组蛋白,又称南极热敏UDG。该热敏UDG酶能有效地水解单链或双链 DNA 上的尿嘧啶,产生的缺嘧啶位点,在高温或高 pH 下,极易水解断裂。该酶对RNA无活性,主要用于PCR扩增产物的防污染。大肠杆菌来源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶较为耐热,经95℃10min处理仍会残留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性,导致含有dU碱基的PCR产物的降解。而来源于嗜冷海洋细菌的热敏UDG在50℃ 5min即*失活,在进行PCR扩增前,在PCR混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性),25℃10min即可消除PCR产物的残留污染,由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶(热敏性)在PCR循环的94℃变性一步便可被灭活,因此不会影响新的含dU的PCR产物。

 

应用

  • 去除单链或双链DNA中的尿嘧啶碱基
  • 去除 PCR 残存污染

活性定义

在标准反应体系下,37°C每分钟催化 60 pmol 尿嘧啶从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量为一个活性单位。

反应buffer

Heatlabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)与绝大多数的PCR 聚合酶反应缓冲液都是兼容的,但在高离子浓度(>100mM)下活性会受到抑制。

酶保存液

20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, , 50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。

储存

-20℃可保存2年,避免反复冻融。

热失活

50℃,10min。

 

 

 

Ludger-糖基化研究工具

Ludger是一家专门从事糖组学和糖基化分析技术的生物科技公司,支持生物制药的实现和药物转化。糖链分析技术用于FDA的生物制药质量控制和EMEA批准,支持IND申报。Ludger与世界各地ling xian的制药公司和生物技术公司均有合作。Ludger的产品涵盖了与ICH兼容的一系列生物医药糖基化分析试剂和检测试剂盒,包括多糖释放、标记和纯化、标记聚糖、多糖HPLC柱、内糖苷酶和糖蛋白标准。

主要产品线

一、多糖释放

为了更好地研究糖蛋白中的多肽部分和多糖部分的结构和功能,从而需要将多糖从糖蛋白中去除,依据糖链类型的差异,糖蛋白被分为N-连接糖蛋白、O-连接糖蛋白等。Ludger提供了PNGase F酶、O-糖苷酶等内切糖昔酶,唾液酸酶、半乳糖苷酶等外切糖昔酶,以及去糖基化试剂盒,用于酶促法去糖基化。此外,Ludger还提供了基于化学释放法的O糖肼解试剂盒以及O糖释放试剂盒。

产品订货信息(部分)

货号

产品名称

规格

E-PNG01

PNGase   F

60 µL

E-RPNG01

Recombinant   PNGase F

60   µL

E-EF01

Endo   F1

60   µL

E-EF02

Endo   F2

60   µL

E-EF03

Endo   F3

60   µL

E-EH02

Endo-H

60 µL

E-G001

O-Glycosidase

60 µL

E-XBG01

Endo-Beta-Galactosidase

60 µL

E-S001

Sialidase Au α-(2-3,6,8,9)

60 µL

E-BG07

Β-(1-4)-Galactosidase

60 µL

LL-HYDRAZ-A2

LudgerLiberateTM Hydrazinolysis   Glycan Release Kit

Kit

LL-ORELA-A2

LudgerLiberateTM Orela Glycan   Release Kit

Kit

二、多糖纯化

多糖释放后,是由很多分子量、结构不同的多糖混合而成。为了得到纯的多糖即均一性多糖,就需要进一步对这些粗多糖进行分离纯化。在(U)HPLCMS之前也需要对标记后的多糖进行纯化。Ludger提供用于释放后或标记后的多糖纯化工具。

产品订货信息(部分)

货号

产品名称

规格

LC-EB10-A6

EB10 cartridges

6 cartridges

LC-CEX-A6

LudgerClean CEX   Cartridges For O-Glycan Purification

6 cartridges

LC-EC50-24

EC50 Cartridges

24   cartridges

LC-EXO-96

LudgerClean   96-Well Post-Exoglycosidase Clean-Up Plate

1 x   96 well plate

LC-EC50-96

EC50 96-Well   Plate

1 x   96 well plate

LC-A-24

LudgerClean A   Cartridges

24 cartridges

LC-S-A48

LudgerClean   S-Plus (Saver Pack)

48 cartridges

LC-S-A6

LudgerClean S   Cartridges

6 cartridges

三、多糖标记

提供一系列多糖标记的所有领域试剂盒。包括N-多糖和O-多糖标记试剂盒、糖肽标记和富集试剂盒、唾液酸释放和标记试剂盒等。

产品订货信息(部分)

货号

产品名称

规格

LT-KAB-A2

2-AB Glycan   Labelling Kit

30 samples

LT-KPROC-24

Procainamide   glycan labelling kit

24 samples

LT-KPROC-96

Procainamide   glycan labelling kit

96 samples

LT-VTAG-C30

VTAG glycan   release & labelling kit

30 samples

LT-VTAG-24

Glycopeptide   Labelling And Enrichment Kit

25 samples

LT-PERMET-VP96

Permethylation   Kit (Without Methyl Iodide)

96 samples

LT-KDMB-A1

DMB Sialic Acid   Release & Labelling Kit

22 samples

LT-MONO-96

Monosaccharide   Release & Labelling Kit

96 samples

四、标准品

Ludger提供包括多糖、唾液酸、唾液酸酶、Alpha-Gal等各类标准品。使用系统适应性标准品使分析人员能够测试一个分析系统的整体功能,标准品或对照标准品用于验证部分或全部流程是否正常工作,参考标准品允许通过比较来表征。定量标准品用于确定样品中分析物的绝对数量以及量化过程中的效率。

产品订货信息(部分)

货号

产品名称

规格

CAB-C1-01

2AB Labelled   Core 1 O- Glycan, C1

100 pmol

CM-NEU5,9AC2-01

5-N-Acetyl-9-O-Acetyl   Neuraminic Acid Standard

800 pmol

CAPTS-A1-01

A1 Glycan   (A2G2S1, G2S1), APTS Labelled

20 pmol

CPROC-A1F-01

A1F Glycan   (FA2G2S1, G2FS1), Procainamide Labelled

20 pmol

BQ-GPEP-A2G2S2-10U

A2G2S2   Quantitative Glycopeptide Standard

3.49 nmol

CM-NEU5,9AC2-01

5-N-acetyl-9-O-acetyl   neuraminic acid standard

800 pmol

CM-SRP-01-C

Sialic Acid   Reference Panel

1.25 nmol

CM-NEU-AC-01

N-Acetylneuraminic   Acid Quantitave Standard

1 nmol

更多其它产品详情请查询Ludger网站或咨询Ludger中国代理上海金畔生物。

Ludger热卖产品

货号

产品名称

规格

品牌

LT-KDMB-A1

DMB sialic acid release & labelling   kit

22 samples

Ludger

LT-KAB-A2

2-AB Glycan Labeling Kit(金畔现货)

30 samples

Ludger

LS-UR2-2.1×100

LudgerSep uR2 UHPLC column – sialic acid(金畔现货)

2.1×100 mm

Ludger

LT-MONO-96

Monosaccharide release & labelling   kit

96 samples

Ludger

LC-S-A6

LudgerClean S Cartridges(金畔现货)

6 cartridges

Ludger

LT-KAB-VP24

LudgerTag 2-AB glycan labelling kits with   2PB(金畔现货)

2 Reaction Sets

Ludger

GCP-FET-50U-X4

Fetuin glycoprotein standard

4 x 50 μg

Ludger

LL-ORELA-A2

Ludger Liberate Orela Kit(金畔现货)

12 samples

Ludger

LS-R1-4.6×150

LudgerSep R1 HPLC Colu mn

4.6 x 150 mm

Ludger

LT-KAA-A2

2-AA glycan labelling kit

30 samples

Ludger

LT-KPROC-VP24

Procainamide glycan labelling kit (2PB   reductant)

24 samples

Ludger

CAB-IGG-01

IgG N glycan library, 2-AB Labelled

200 pmol

Ludger

LT-KPROC-24

Procainamide Glycan Labelling Kit

24 samples

Ludger

LT-KAA-VP24

2-AA glycan labelling kit (2PB   reductant)

24 samples

Ludger

LS-UR2-2.1×50

LudgerSep uR2 UHPLC Column – mono   saccharide(金畔现货)

2.1 x 50 mm

Ludger

GCP-FET-250U

Fetuin glycoprotein standard

250 μg

Ludger

BQ-GPEP-A2G2S2-10U

BioQuant A2G2S2 glycopeptide sta ndard

3.49 nmol

Ludger

KE-DGMX

Enzymatic DeGlycoMx Kit

Kit

Ludger

LZ-CER-HM-KIT

LudgerZymeTM Ceramide Glycanase Kit

55 μL

Ludger

E-BG07

Beta-(1-4)-galactosidase

0.18U/60 μL

Ludger

LS-N1-4.6×10

LudgerSep N1 amide guard column

4.6×10 mm,5 mm

Ludger

LS-N1-4.6×250

LudgerSep N1 amide HPLC Column

4.6×250 mm,5 mm

Ludger

LS-R-BPTX10

LudgerSep R BPT solve nt x10 Co ncen   trate

50 mL

Ludger

LT-VTAG-C30

VTAG glycan release & labelling kit

30 samples

Ludger

LZ-ACASE-KIT

Sialate O-acetylesterase kit

50 μL

Ludger

CM-NEUAC-100

N-acetylneuraminic acid quantitative   standard

100 nmol

Ludger

CM-NEUGC-100

N-glycolyneuraminic acid quantitative   standard

100 nmol

Ludger

CM-NEU5,9AC2-01

N-acety In euram inic acid qualitative   sta ndard

>800 pmol

Ludger

CAB-A1F-01

A1F glycan (FA2G2S1, G2FS1), 2-AB   labelled

100 pmol

Ludger

CAB-A2-01

A2 glycan (A2G2S2, G2S2), 2-AB labelled

100 pmol

Ludger

CN-MAN9-10U

Man-9 Glycan

10 μg

Ludger

CAB-C1S(3)1-02

2AB labelled sialylated core 1 O glycan

50 pmol

Ludger

CLIBN-IGG-01

IgG Glycan Library

25 μg

Ludger

CAB-NA2-01

NA2 Glycan (A2G2, G2), 2-AB Labelled

100 pmol

Ludger

CAB-MAN5-01

Man-5 glycan, 2-AB labelled

100 pmol

Ludger

CAB-C2S(3,3)2-02

2AB labelled di-sialylated core 2 O   glycan,

50 pmol

Ludger

LT-KAB-VP96

2-AB glycan labelling kit (2PB   reductant)

96 samples

Ludger

LT-KDMB-96

DMB Sialic Acid Release & Labelling   Kit

96 samples

Ludger

BQ-CAB-CHI-01

BioQuant chitotriose standard, 2-AB   Labelled

100 pmol

Ludger

CAB-C1-01

2AB labelled core 1 O- glycan, C1

100 pmol

Ludger

CAB-A3-01

A3 Glycan (A3G3S3), 2-AB Labelled

100 pmol

Ludger

LT-VTAG-24

Glycopeptide labelling and enrichment   kit

25 samples

Ludger

LTKDMB-A1

LudgerTag DMB Sialic Acid Release and   Labelling Kit

Kit

Ludger

BQ-CHITOTRIOSE-01

BioQua nt chitotriose sta ndard

5 nmol

Ludger

CPROC-IGG-02

IgG N-glyca n library, Proca in amide   Labelled

50 pmol

Ludger

LC-EB10-A6

LudgerClean EB10 cartridges

6 cartridges

Ludger

CN-NGA2-20U

NGA2 glycan (A2, G0)

20 μg

Ludger

E-EF02

En doglycosidase F2

60 μL

Ludger

作为Ludger在中国区域的代理,上海金畔生物将为中国客户提供全面的Ludger产品。欢迎大家随时联系我们!!!

QA-Bio糖基化产品


QA-Bio糖基化产品

简要描述:QA-Bio代理,QA-Bio上海代理,QA-Bio北京代理,QA-Bio代理,QA-Bio一级代理,QA-Bio中国代理

详细介绍

产品咨询

QA-Bio代理,QA-Bio上海代理,QA-Bio北京代理,QA-Bio代理,QA-Bio一级代理,QA-Bio中国代理

具体图文说明书请客服咨询

  QA-bio糖基化研究专家

QA-bio公司是一家致力于提供糖基化研究工具的专业公司,所提供的糖基化研究产品涵盖糖苷内/外切酶,去糖基化酶,唾液酸产品,多糖产品纯化试剂盒,多糖标记试剂盒,HPLC柱及其缓冲液,同时公司还提供多糖分析服务。此外,公司还提供部分分子生物学产品。

公司主要产品:

一、去糖基化产品:可于糖蛋白在正常或变性条件下行使去糖基化功能。

1PNGase F 用于去除仅含N-链接糖蛋白的糖基,切下的糖基能保持完整性以备进一步研究。

2Endo F Multi试剂盒:样品难以被切除糖基或反应速度过慢,可使用本产品。两种试剂均可使切下的糖基能保持完整性以备进一步研究。

3Enzymatic DeGlycoMx 试剂盒:适用于糖基类型不明,或同时含有N-/O-连接糖基。

4Enzymatic CarboRelease 试剂盒:可用于切除所有N-连接糖基及大多数的O-连接糖基。

5Orela O-linked Glycan Release试剂盒:适用于切除O-连接糖基。

二、糖苷内切酶:用于特异性切除糖蛋白的完整糖基。

1PNGase F(重组及非重组酶):N连接糖蛋白切除。

2Endo F1切除含高甘露糖及部分杂糖的糖蛋白糖基。

3Endo F2切除含双头糖及高甘露糖的糖蛋白糖基。

4Endo F3切除含三头糖及岩藻糖基化的糖蛋白糖基。

5Endo H切除含天冬酰胺连接及高甘露糖基的糖蛋白糖基。

6O-Glycosidase切除O连接糖蛋白糖基:

7Endo-Beta-Galactosidase切除半乳糖苷糖蛋白糖基:

三、糖苷外切酶:

用于特异性切除多糖末端单糖,深入分析多糖结构。

1、唾液酸酶:

  

2beta-半乳糖苷酶:

3beta-氮乙酰氨基葡萄糖苷酶

4a-甘露糖苷酶

5a-岩藻糖苷酶:

四、糖基纯化产品:

用于酶消化或荧光标记后清除多糖,同时提供耗材及配件:

1Glycan Labeling Cleanup -FAST

2Glycan Labeling Cleanup Cartridge

3Glycosidase Cleanup Plate

4Glycan Cleanup Cartridges

5AA-Ac Cleanup cartridge

6Vacuum manifold in 96 plate format

五、糖基标记产品:

含荧光标记及载色基团标记,荧光标记产品包括2-AB2-AA、以及单糖、唾液酸等。

2-AB                     2-AA                AA-Ac

六、HPLC柱及其缓冲液:

用于生物制药工程中定量糖基化分析。

1、正相氨基酸柱:

2、反相柱:

3、强阴离子交换柱

七、唾液酸研究相关产品

1Sialic Acid Labeling kit:用于定量分析唾液酸

2SialiQuant Sialic Acid Quantitation Kit用于快速准确定量分析唾液酸。

3、唾液酸酶:

4、唾液酸醛缩酶:

5 CMP唾液酸合成酶:

八、标准糖基产品:QA-bio提供荧光标记或非标记的标准多糖:

A2 & A2F 多糖                              A3 多糖

  A4 多糖                          高甘露糖多糖

 Misc Glycans                     2-AB Labeled Glycans

  2-AA Labeled Glycans                    APTS Labeled N-Glycans

  Glycoprotein Standards                   Glycan Libraries

九、分子生物学产品:

1PCR Decontamination 试剂盒:

该试剂盒用于清除PCR扩增体系中混入的杂DNA(如细菌DNA),不影响PCR敏感性。

2gDNA 清除试剂盒:

该试剂盒用于反转录之前清除RNA中残留的基因组,提高实时定量PCR的敏感性。

3Cod尿嘧啶N-糖基化酶 (Cod UNG)

在实验室PCR反应中以dUTP代替dTTP,使得扩增产物片段中的T全部被U取代,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,并不影响PCR扩增条带。通过使用UNG酶能选择性断裂单链和双链DNAU碱基的糖苷键,降解反应体系中含UDNA,有效消除PCR产物的残留污染,大大降低扩增产物污染导致的假阳性,从而保证实验室PCR扩增的特异性和准确性。该酶在稍微加热时即可逆地失去活性。

4、特异性双链DNA内切酶

可在特异性单链(如PCR引物或探针)存在时特异性清除双链DNA分子。该酶属于热不稳定性酶,QA-bio提供可于55度及65度失活的特异性双链DNA内切酶。

5、核酸酶:

可在高浓度盐溶液条件下水解核酸(DNA/RNA),提高分离蛋白质的纯度。

6、碱性磷酸酶:

可用于DNA/RNA/蛋白脱磷酸化,与常规碱性磷酸酶作用后需清除步骤不同,QA-bio公司的碱性磷酸酶可加热至65度保持15分钟即可*失活。

QA-Bio代理,QA-Bio上海代理,QA-Bio北京代理,QA-Bio代理,QA-Bio一级代理,QA-Bio中国代理

上海金畔生物科技有限公司
杨建辉
上海市浦东绣川路5611102
021-50837765 传真 :  WWW.78BIO.COM 产品查询 CX.78BIO.COM
 

我们公司zui大优势是强大的采购,
1:基本什么都能进口,血清,抗体,耗材,还有部分限制进口的,
2 货品全,现经营过700多个品牌,基本所有生物试剂耗材都可以进口,特别是冷偏的产品那就更有优势,
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5:良好的信誉,大部分客户我们提供货到付款服务,客户包括清华,北大 交大 复旦,中山等100多所大学,ROCHE,阿斯利康,国药 fisher500多家公司
6:我们还是santa,Advanced Biotechnologies Inc;Athens Research & Technology, bangs, BBInternational, crystalchem, dianova, FD Neurotechnologies, Inc. FormuMax Scientific, Inc; Genebridege; Glycotope Biotechnology GmbH; iduron; Innovative Research of America Ludger neuroprobe; omicronbio; Polysciences; prospecbi; QA-BIOquickzymeRESEARCH DIETS, INCsterlitechsysyTriLink BioTechnologies, IncMIDLAND BIOPRODUCTS-biochem;zyagen;……几十家国外公司代理
7:我们还从事invitrogenqiagen; abcam ;sigma;neb; roche;merck; rnd; BD; GE; pierce; BioLegend….等*批发                                          

QA-Bio品牌代理

QA-Bio

简要描述:

QA-Bio是一家致力于提供糖基化研究工具的公司,所提供的糖基化研究产品涵盖糖苷内/外切酶,去糖基化没,唾液酸产品,多糖产品纯化试剂盒,多糖标记试剂盒等,同时提供多糖分析服务。

QA-Bio是一家致力于提供糖基化研究工具的公司,所提供的糖基化研究产品涵盖糖苷内/外切酶,去糖基化没,唾液酸产品,多糖产品纯化试剂盒,多糖标记试剂盒等,同时提供多糖分析服务。


产品列表:


No.

品牌

货号

名称

规格

1

QA-Bio

E-PNG01

PNGase F

60 µL

2

QA-Bio

E-EF01

Endo F1

60 µL

3

QA-Bio

E-S001

Sialidase Au

60 µL

4

QA-Bio

E-BG07

Beta Galactosidase

60 µL

5

QA-Bio

KE-DG01

Enzymatic CarboRelease Kit

1 Kit

6

QA-Bio

LL-ORELA-A2

Orela O-Linked Glycan Release Kit

1 Kit

7

QA-Bio

LT-KDMB-A1

DMB Sialic Acid Labeling Kit

1 Kit

8

QA-Bio

KE-SIALIQ

Sialic Acid Quantitation Kit

1 Kit

9

QA-Bio

LT-MONO-96

Monosaccharide Analysis Kit

1 Kit

10

QA-Bio

LT-VTAG-24

V-Tag Glycopeptide Labeling Kit

1 Kit

11

QA-Bio

KE-EFX3

Endo F Multi-Kit

1 Kit

12

QA-Bio

E-AG02

Alpha Galactosidase

60 µL

13

QA-Bio

LL-MR-A2

Ludger Liberate Membrane Release kit

1 Kit

14

QA-Bio

E-S001

Sialidase Au

60 µL

15

QA-Bio

E-AM02

Core Alpha Mannosidase

60 µL

BioGrammatics糖基化毕赤酵母表达体系

 

 

 

BioGrammatics糖基化毕赤酵母表达体系

Pichia酵母菌属的巴斯德毕赤酵母是当今常用的单细胞真核表达体系,是载体构建、表达、发酵和纯化重组蛋白和肽的优良体系。BioGrammatics毕赤酵母的生命科学研究利用领域有着悠久的历史和丰富的经验,通过与Research Corporation Technologies(RCT)合作开发出GlycoSwitch®技术利用该技术可以在毕赤酵母中表达的蛋白加以改性糖基化修饰。糖基化可影响蛋白质折叠,稳定性和蛋白质 – 蛋白质相互作用因此利用GlycoSwitch®技术可设计具有更多“人类”糖基化特征的蛋白质研发适用于人类的的生物药物,以及改良常规重组蛋白质。目前BioGrammatics可提供的基于毕赤酵母的产品包括快速简单的蛋白质表达分子表达工具下的菌株设计强大严格调控的启动子,的分泌基因组操作)大规模高细胞密度酵母发酵(> 700 g / l wcw200k升)特定的酵母发酵条件设计、真核蛋白质加工(折叠,分泌,糖基化)酵母遗传学分析等服务。

SuperMan5 (his)

Description:

GlycoSwitch® strain, Man5 N-linked oligosaccharide structures (histidine auxotroph)

描述:

GlycoSwitch ®应变,曼5 N-连接的寡糖的结构(组氨酸营养缺陷型)

 

 

SuperMan5(his-),Och1-破坏与pGAP-甘露糖苷酶表达盒,杀稻瘟素抗性)。GS115(his4-),来自里氏木霉的α1,2-甘露糖苷酶,由具有杀稻瘟素抗性基因的质粒上的GAP启动子调节,破坏SuperMan5基因组中的Och1基因。

Catalog Number

Description

Units

Price

PS005-01

Pichia pastoris strain as YPD agar culture stab

1 stab

$400.00

 

PS005-02

Pichia pastoris strain as electrocompetent cells

5 transformations

$350.00

 

BioGrammatics公司产品:

一、毕赤酵母表达载体

重组蛋白在毕赤酵母中的表达常见于表达载体整合到毕赤酵母基因组中,基因组整合导致目的基因在毕赤酵母中稳定表达。通过大规模的表达菌株发酵可生产大量的目的蛋白质。基于目的蛋白和基因的自身特异性,在载体设计时需要考虑以下因素:1)胞内表达或者分泌表达;2)适宜的启动子(诱导型,组成型,强,弱);3)选择标记;4)特定基因/ (开放阅读框)ORF序列;5)表达盒在毕赤酵母基因组中适的位置。

BioGrammatics在毕赤酵母表达载体研究领域拥有丰富的经验,创建并测试了大量的表达载体,以优化数百种基因的表达和用于特定的应用,包括细胞内和细胞外表达,膜蛋白的表达,高水平蛋白质生产以及蛋白质在代谢途径中的表达和支持重组蛋白质产物宜加工程度的蛋白质。

BioGrammatics采用的pJ载体(pJ – vectors, Jeannies vectors)是4-5kb的质粒,带有氨苄青霉素筛选基因和“无缝”克隆方案。克隆方案基于在其识别序列之外切割的IIS型限制酶,因此,可在终表达载体中去除限制酶结合位点,并且可以在不多加入不需要的密码子的情况下加入ORF。

Product

Description

pJANs1

extracellular expression vector, S. cerevisiae α mating factor leader,

nourseothricin selection

pJAZs1

extracellular expression vector, S. cerevisiae α mating factor leader,

 zeocin selection

pJAGs1

extracellular expression vector, S. cerevisiae α mating factor leader,

 G418 selection

pJAN

intracellular expression vector, nourseothricin selection

pJAZ

intracellular expression vector, zeocin selection

pJAG

intracellular expression vector, G418 selection

 

二、毕赤酵母表达菌株

BioGrammatics提供BG和GlycoSwitch®菌株两种毕赤酵母表达菌株系列。其中BG菌株来源于野生巴斯德毕赤酵母菌株,初于1940年由加利福尼亚的Herman Phaff分离。我们使用Illumina HiSeq技术对Phaff菌株进行单菌落分离,成为BioGrammatics起始的原始菌株BG08,BG08在经过改良以消除细胞质杀伤质粒的能力产生野生型表达菌株BG10。此后除了BG09之外,BG系列中的所有后续菌株均通过的BG10基因组操作衍生而来。 而BG09是BG08的一个特定变体,已开发用于在特定的胰蛋白酶切割位点标记13C同位素后进行质谱分析。

除BG系列外,BioGrammatics还是RCT的GlycoSwitch®菌株经销商。 GlycoSwitch®菌株系列源于20世纪70年代的巴斯德毕赤酵母GS115菌株,是Phaff菌株的突变分离株之一,选择用于组氨酸营养缺陷型培养。初的GlycoSwitch®Man5菌株来源于比利时根特大学和法兰德斯生物技术研究所(VIB)的Roland Contreras博士,Nico Callewaert博士及其同事的合作分离。 SuperMan5菌株是由BioGrammatics研发的GlycoSwitch®Man5的后续修饰菌株,其突变体och1基因座的所有同源性区域基因已被去除以防止其通过同源重组而逆转为野生型。

Product

Description

Pichia pastoris SuperMan5 strain (HIS+)

GlycoSwitch® strain, Man5 N-linked oligosaccharide structures

Pichia pastoris SuperMan5 strain (his)

GlycoSwitch® strain, Man5 N-linked oligosaccharide structures (histidine auxotroph)

Pichia pastoris BG10 strain

Wild type Pichia pastoris expression strain (killer plasmid free)

Pichia pastoris BG11 strain

Derivative of Pichia pastoris BG10 strain, aox1Δ, MutS (methanol utilization slow)

Pichia pastoris BG09 strain

Derivative of Pichia pastoris BG08 strain, arg4Δ::nourseothricinR, lys2Δ::hygromycinR(arginine, lysine auxotroph)

Pichia pastoris BG12 strain

Derivative of Pichia pastoris BG10 strain, his4Δ (histidine auxotroph)

Pichia pastoris SuperMan5 strain (HIS+, pep4Δ)

GlycoSwitch® strain, Man5 N-linked oligosaccharide structures (PEP4 protease deletion)

 

 

 

 

三、具有修饰糖基化的毕赤酵母菌株 – GlycoSwitch®技术。

GlycoSwitch系列菌株是与BioGrammatics与Research Corporation Technologies(RCT)合作,提供个可进行糖基化修饰的毕赤酵母表达载体。糖基化可影响蛋白质折叠,稳定性和蛋白质 – 蛋白质相互作用,因可用于设计生成具有更多“人类”糖基化的蛋白质和生物制药,以及改良其他类别的重组蛋白质。其核心GlycoSwitch®菌株具有中心聚糖加工酶(OCH1),可阻止聚糖延伸,并表达外源甘露糖苷酶以将现有聚糖修剪成更均匀的Man5结构。此外,BioGrammatics还可提供基于GlycoSwitch®技术的定制化研发合同服务,使用BioGrammatics公司的丰富的Pichia专业技术为客户提供特定应用的量身定制糖蛋白。

Product

Description

Pichia pastoris SuperMan5 strain (HIS+)

GlycoSwitch® strain, Man5 N-linked oligosaccharide structures

Pichia pastoris SuperMan5 strain (his)

GlycoSwitch® strain, Man5 N-linked oligosaccharide structures (histidine auxotroph)

GlycoSwitch Expression Vector Kit

 

pGlycoSwitch®–GnT–I–HIS

Histidine selection vector for expression of GlcNAc transferase I activity in Pichia pastoris

pGlycoSwitch®–ManII/1

G418 selection vector for expression of Mannosidase II activity in Pichia pastoris

pGlycoSwitch®–GnT–II

Hygromycin selection vector for expression of GlcNAc transferase II activity in Pichia pastoris

pGlycoSwitch®–GalT/1

Nourseothricin selection vector for expression of Gal transferase I activity in Pichia pastoris

Pichia pastoris  SuperMan5 strain (HIS+, pep4Δ)

GlycoSwitch® strain, Man5 N-linked oligosaccharide structures (PEP4 protease deletion)

pGlycoSwitch®–GnT–I

Zeocin selection vector for expression of GlcNAc transferase I activity in Pichia pastoris

 

四、毕赤酵母表达系统培养基

该系列产品于毕赤酵母表发体系发酵培养或扩增,包括干粉和浓缩液,用于配制100ml和2.5L的培养液。

货号

    

 

PD001-100

1 g/ml stock solution, prepares 2.5 liters of YPD-nourseothricin plates

100 mg

PM001-100

pouch of powdered medium, prepares 100 ml

1 pouch

PM001-500

pouch of powdered medium, prepares 500 ml

1 pouch

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发,欢迎合作。

 

QA-bio-糖基化研究专家

QA-bio糖基化研究专家

QA-bio公司是一家致力于提供糖基化研究工具的专业公司,所提供的糖基化研究产品涵盖糖苷内/外切酶,去糖基化酶,唾液酸产品,多糖产品纯化试剂盒,多糖标记试剂盒,HPLC柱及其缓冲液,同时公司还提供多糖分析服务。此外,公司还提供部分分子生物学产品。

 

 

公司主要产品:

一、去糖基化产品:可于糖蛋白在正常或变性条件下行使去糖基化功能。

1PNGase F 用于去除仅含N-链接糖蛋白的糖基,切下的糖基能保持完整性以备进一步研究。

2Endo F Multi试剂盒:样品难以被切除糖基或反应速度过慢,可使用本产品。两种试剂均可使切下的糖基能保持完整性以备进一步研究。

 

3Enzymatic DeGlycoMx 试剂盒:适用于糖基类型不明,或同时含有N-/O-连接糖基。

4Enzymatic CarboRelease 试剂盒:可用于切除所有N-连接糖基及大多数的O-连接糖基。

 

5Orela O-linked Glycan Release试剂盒:适用于切除O-连接糖基。

 

二、糖苷内切酶:用于特异性切除糖蛋白的完整糖基。

1PNGase F(重组及非重组酶):N连接糖蛋白切除。

2Endo F1切除含高甘露糖及部分杂糖的糖蛋白糖基。

3Endo F2切除含双头糖及高甘露糖的糖蛋白糖基。

4Endo F3切除含三头糖及岩藻糖基化的糖蛋白糖基。

5Endo H切除含天冬酰胺连接及高甘露糖基的糖蛋白糖基。

 

6O-Glycosidase切除O连接糖蛋白糖基:

7Endo-Beta-Galactosidase切除半乳糖苷糖蛋白糖基:

三、糖苷外切酶:

用于特异性切除多糖末端单糖,深入分析多糖结构。

1、唾液酸酶:

   

2beta-半乳糖苷酶:

3beta-氮乙酰氨基葡萄糖苷酶

4a-甘露糖苷酶

5a-岩藻糖苷酶:

 

四、糖基纯化产品:

用于酶消化或荧光标记后清除多糖,同时提供耗材及配件:

1Glycan Labeling Cleanup -FAST

2Glycan Labeling Cleanup Cartridge

3Glycosidase Cleanup Plate

4Glycan Cleanup Cartridges

5AA-Ac Cleanup cartridge

6Vacuum manifold in 96 plate format

 

五、糖基标记产品:

含荧光标记及载色基团标记,荧光标记产品包括2-AB2-AA、以及单糖、唾液酸等。

2-AB                     2-AA                AA-Ac

 

六、HPLC柱及其缓冲液:

用于生物制药工程中定量糖基化分析。

1、正相氨基酸柱:

2、反相柱:

3、强阴离子交换柱

 

七、唾液酸研究相关产品

1Sialic Acid Labeling kit:用于定量分析唾液酸

2SialiQuant Sialic Acid Quantitation Kit用于快速准确定量分析唾液酸。

3、唾液酸酶:

4、唾液酸醛缩酶:

5 CMP唾液酸合成酶:

 

八、标准糖基产品:QA-bio提供荧光标记或非标记的标准多糖:

A2 & A2F 多糖                              A3 多糖

 

 A4 多糖                          高甘露糖多糖

 Misc Glycans                     2-AB Labeled Glycans

  2-AA Labeled Glycans                    APTS Labeled N-Glycans

  Glycoprotein Standards                   Glycan Libraries

 

九、分子生物学产品:

1PCR Decontamination 试剂盒:

该试剂盒用于清除PCR扩增体系中混入的杂DNA(如细菌DNA),不影响PCR敏感性。

2gDNA 清除试剂盒:

该试剂盒用于反转录之前清除RNA中残留的基因组,提高实时定量PCR的敏感性。

3Cod尿嘧啶N-糖基化酶 (Cod UNG)

在实验室PCR反应中以dUTP代替dTTP,使得扩增产物片段中的T全部被U取代,形成了含dU碱基的PCR扩增产物,并不影响PCR扩增条带。通过使用UNG酶能选择性断裂单链和双链DNAU碱基的糖苷键,降解反应体系中含UDNA,有效消除PCR产物的残留污染,大大降低扩增产物污染导致的假阳性,从而保证实验室PCR扩增的特异性和准确性。该酶在稍微加热时即可逆地失去活性。

4、特异性双链DNA内切酶

可在特异性单链(如PCR引物或探针)存在时特异性清除双链DNA分子。该酶属于热不稳定性酶,QA-bio提供可于55度及65度失活的特异性双链DNA内切酶。

 

5、核酸酶:

可在高浓度盐溶液条件下水解核酸(DNA/RNA),提高分离蛋白质的纯度。

6、碱性磷酸酶:

可用于DNA/RNA/蛋白脱磷酸化,与常规碱性磷酸酶作用后需清除步骤不同,QA-bio公司的碱性磷酸酶可加热至65度保持15分钟即可*失活。

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

 

糖苷内切酶 H 是一种重组糖苷酶,能够对 N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构进行切割,去除糖蛋白中的 N-连接高甘露糖。糖苷内切酶 H 克隆自褶皱链霉菌(Streptomyces plicatus)。并在酵母中重组表达。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括糖苷内切酶S(Cat#20413JP)酵母重组表达的N-糖苷酶 F(Cat#20415JP比活性:750000 U/mL酵母重组表达的N-糖苷酶 F(Cat#20407JP比活性:100000 U/mL

 

产品信息

 

货号

20414JP92/20414JP97

规格

10000 U /50000 U

组分信息

组分编号

组分名称

20414JP92

20414JP97

A

Endo H

10000 U

50000 U

B1

Buffer 1(10×)

100 μL

500 μL

B2

Buffer 2(10×)

200 μL

1000 μL

 

产品性质

 

中文别名(Chinese synonym)

糖苷内切酶 H

英文别名(English synonym)

Endo H

来源(Source)

酵母

分子量(Molecular weight)

60 kDa

比活性(Specific activity)

1000000 U/mL

缓冲液组分(Buffer)

20 mM Tris,50 mM NaCl,5 mM EDTA  PH7.5

酶活定义(Unit Definition)

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

储存条件

 

-15~-25℃保存,有效期1年。

 

使用说明

 

  1. 变性条件下蛋白质去糖基化

1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;

2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;

3)加入2 μL的Buffer 2,8μL去离子水,总反应体积20 μL;

4)加入1-2 μL的Endo H,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。

5)65℃ 下热失活10分钟。

  1. 非变性条件下蛋白质去糖基化

1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。

2)加入 2~5 μL 的 EndoH, 轻轻混匀。

3)37°C 孵育 4-24 h。

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加Endo H的量和延长孵育时间。

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240205

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

暂无内容

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

暂无内容

产品简介

 

糖苷内切酶 H 是一种重组糖苷酶,能够对 N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构进行切割,去除糖蛋白中的 N-连接高甘露糖。糖苷内切酶 H 克隆自褶皱链霉菌(Streptomyces plicatus)。并在酵母中重组表达。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括糖苷内切酶S(Cat#20413JP)酵母重组表达的N-糖苷酶 F(Cat#20415JP比活性:750000 U/mL酵母重组表达的N-糖苷酶 F(Cat#20407JP比活性:100000 U/mL

 

产品信息

 

货号

20414JP92/20414JP97

规格

10000 U /50000 U

组分信息

组分编号

组分名称

20414JP92

20414JP97

A

Endo H

10000 U

50000 U

B1

Buffer 1(10×)

100 μL

500 μL

B2

Buffer 2(10×)

200 μL

1000 μL

 

产品性质

 

中文别名(Chinese synonym)

糖苷内切酶 H

英文别名(English synonym)

Endo H

来源(Source)

酵母

分子量(Molecular weight)

60 kDa

比活性(Specific activity)

1000000 U/mL

缓冲液组分(Buffer)

20 mM Tris,50 mM NaCl,5 mM EDTA  PH7.5

酶活定义(Unit Definition)

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

储存条件

 

-15~-25℃保存,有效期1年。

 

使用说明

 

  1. 变性条件下蛋白质去糖基化

1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;

2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;

3)加入2 μL的Buffer 2,8μL去离子水,总反应体积20 μL;

4)加入1-2 μL的Endo H,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。

5)65℃ 下热失活10分钟。

  1. 非变性条件下蛋白质去糖基化

1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。

2)加入 2~5 μL 的 EndoH, 轻轻混匀。

3)37°C 孵育 4-24 h。

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加Endo H的量和延长孵育时间。

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240205

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

暂无内容

Endo H 糖苷内切酶H(重组糖苷酶/去糖基化酶)

暂无内容

PNGase F(N-糖酰胺酶F/肽N-糖苷酶 F) 去糖基化酶

PNGase F(N-糖酰胺酶F/肽N-糖苷酶 F) 去糖基化酶

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品简介

 

  1. 糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。翌圣N-糖苷酶 F (PNGase F)酵母中重组表达比活性:100000 U/mL,可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化

   另外,我司还提供其他类型糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶 FCat#20415JP比活性:750000 U/mL),内切糖苷酶HCat#20414JP),内切糖苷酶SCat#20413JP)。

 

产品信息

 

编号

组分名称

组分成分

20407JP01

20407JP02

20407-A

PNGase F

PNGase F

15000 U

75000 U

20407-B1

Buffer 110×)

5% SDS; 400 mM DTT

150 μL

750 μL

20407B2

Buffer 210×)

200 mM Tris, PH 7.5

300 μL

1500 μL

20407B3

10% NP-40

10% NP-40 in MilliQ-H2O

300 μL

1500 μL

 

产品性质

 

中文别名Chinese synonym)

N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F

英文别名(English synonym)

PNGase F

来源(Source)

酵母重组表达

分子量(Molecular weight)

36 kDa

比活性(Specific activity)

100000 U/mL

缓冲液组分(Buffer)

20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50% Glycerol

酶活定义(Unit Definition)

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

储存条件

 

-25~-15℃保存,有效期1年。

 

使用方法

 

1、变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在水中加入1 μL Buffer 1目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;

2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却离心10秒

  1. 加入2 μL的Buffer 22 μL的10%NP-406 μL去离子水,总反应体积20 μL
  2. 加入1-2 μL的PNGase,轻轻混匀。37℃孵育1-3 h。

 

2、非变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。

2)加入 2~5 μL 的 PNGase F, 轻轻混匀。

3)37°C 孵育 4-24 h。

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。

 

注意事项

 

1. PNGase F建议搭配我司提供的配套缓冲液使用,按我司说明书建议的操作量配套缓冲液足够。如您由于使用体系造成配套缓冲液不足,可咨询当地销售进行购买(Cat#20407-B, 包含20407-B1(750 μL)、20407-B2(1500 μL)、20407-B3(1500 μL))

2. 本产品仅作科研用途

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240119

 

PNGase F(N-糖酰胺酶F/肽N-糖苷酶 F) 去糖基化酶

暂无内容

PNGase F(N-糖酰胺酶F/肽N-糖苷酶 F) 去糖基化酶

暂无内容

产品简介

 

  1. 糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。翌圣N-糖苷酶 F (PNGase F)酵母中重组表达比活性:100000 U/mL,可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化

   另外,我司还提供其他类型糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶 FCat#20415JP比活性:750000 U/mL),内切糖苷酶HCat#20414JP),内切糖苷酶SCat#20413JP)。

 

产品信息

 

编号

组分名称

组分成分

20407JP01

20407JP02

20407-A

PNGase F

PNGase F

15000 U

75000 U

20407-B1

Buffer 110×)

5% SDS; 400 mM DTT

150 μL

750 μL

20407B2

Buffer 210×)

200 mM Tris, PH 7.5

300 μL

1500 μL

20407B3

10% NP-40

10% NP-40 in MilliQ-H2O

300 μL

1500 μL

 

产品性质

 

中文别名Chinese synonym)

N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F

英文别名(English synonym)

PNGase F

来源(Source)

酵母重组表达

分子量(Molecular weight)

36 kDa

比活性(Specific activity)

100000 U/mL

缓冲液组分(Buffer)

20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50% Glycerol

酶活定义(Unit Definition)

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

储存条件

 

-25~-15℃保存,有效期1年。

 

使用方法

 

1、变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在水中加入1 μL Buffer 1目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;

2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却离心10秒

  1. 加入2 μL的Buffer 22 μL的10%NP-406 μL去离子水,总反应体积20 μL
  2. 加入1-2 μL的PNGase,轻轻混匀。37℃孵育1-3 h。

 

2、非变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。

2)加入 2~5 μL 的 PNGase F, 轻轻混匀。

3)37°C 孵育 4-24 h。

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。

 

注意事项

 

1. PNGase F建议搭配我司提供的配套缓冲液使用,按我司说明书建议的操作量配套缓冲液足够。如您由于使用体系造成配套缓冲液不足,可咨询当地销售进行购买(Cat#20407-B, 包含20407-B1(750 μL)、20407-B2(1500 μL)、20407-B3(1500 μL))

2. 本产品仅作科研用途

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240119

 

PNGase F(N-糖酰胺酶F/肽N-糖苷酶 F) 去糖基化酶

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PNGase F(N-糖酰胺酶F/肽N-糖苷酶 F) 去糖基化酶

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热烈庆祝成为英国Ludger公司糖基化研究中国代理


热烈庆祝上海金畔生物成为英国Ludger公司糖基化研究中国代理

简要描述:Ludger生物科学公司是一家专注于测量与控制生物医药糖基化的公司.公司技术是用在FDA的质量控制和EMEA批准的生物制药,可用于支持IND申报.

详细介绍

产品咨询

英国Ludger  中国区*代理

Ludger生物科学公司是一家专注于测量与控制生物医药糖基化的公司.公司技术是用在FDA的质量控制和EMEA批准的生物制药,可用于支持IND申报.Ludger的客户包括世界各地的制药公司和生物技术公司.

Ludger药品生产涵盖了全面的与ICH兼容的生物医药糖基化分析试剂和检测试剂盒.产品包括多糖释放、标记和纯化、标记聚糖、多糖HPLC柱,内糖苷酶和糖蛋白标准.同时Ludger将继续开发新的产品,以确保为您提供更高品质产品.

另外我们可以为您设计和执行优化的糖基化分析方案.
多糖定性分析服务包括: 唾液酸分析(NeuAc vs NeuGc的比较水平),单糖的定量分析,利用HPLC和MS方法对N -和O –多糖进行1级和2级分析以及提供详细的外糖苷酶测序服务.具体服务内容请直接与我们.

Ludger产品线:
一、Glycan Release Kits 聚糖释放kit
二、Glycan Labeling Kits 聚糖标记kit
三、Glycan Purification Kits 聚糖纯化Kit
四、Glycan HPLC columns 聚糖HPLC柱
五、N-Glycans N连接聚糖
六、2-AA Labeled Glycans  2-AA标记聚糖
七、2-AB Labeled Glycans  2-AB标记聚糖

上海金畔生物科技有限公司为Ludger公司中国区一级代理。只有从上海金畔生物科技有限公司购买的产品,才能享受本公司完善高效的和售后服务!

 

 

Ludger

LudgerTag Glycan Labeling Kits(聚糖标记KIT)

 

 

产品名称

 

 

规格

 

 

货号

2-AB Glycan Labeling Kit

2 Reaction Sets

LT-KAB-A2

2-AA Glycan Labeling Kit

2 Reaction Sets

LT-KAA-A2

AA-Ac Glycan Labeling Kit

2 Reaction Sets

LT-KAAAC-A2

2-AP Glycan Labeling Kit

2 Reaction Sets

LT-KAP-A2

DMB Sialic Acid Labeling Kit

1 Reaction Set

LT-KDMB-A1

Monosaccharide Release & Labeling Kit

2 Reaction Sets

LT-Mono-96

 

LudgerSep Glycan HPLC Columns基于电荷的分析和纯化的LudgerTag™高效液相色谱法和紫外荧光发色基团标记聚糖

 

 

产品名称

 

 

规格

 

 

货号

LudgerSep N1 HPLC Column

4.6 x 250 mm, 5 μm

LS-N1-4.6×250

LudgerSep N1 Guard Column

4.6 x 10 mm

LS-N1-4.6×10

LudgerSep N2 HPLC Column

4.6 x 150mm, 3 μm

LS-N2-4.6×150

LudgerSep N2 HPLC Column

2.0 x 150 mm, 3 μm

LS-N2-2.0×150

LudgerSep C2 HPLC Column

4.6 x 50 mm

LS-C2-4.6×50

LudgerSep C2 HPLC Column

4.6 x 150 mm

LS-C2-4.6×150

LudgerSep C3 HPLC Column

7.5 x 75 mm

LS-C3-7.5×75

LudgerSep R1 HPLC Column

4.6 x 150 mm

LS-R1-4.6×150

 

Glycoprotein Standards and Glycan Libraries

 

 

产品名称

 

 

规格

 

 

货号

Fetuin glycoprotein standard

0.5 mg

GCP-FET-05

Fetuin N glycan library

25 μg

CLIBN-FETUIN-01

Fetuin N +O glycan library

25 μg

CLIBNO-FETUIN-01

Fetuin O glycan library

from 30 μg fetuin

CLIBO-FETUIN-01

IgG N glycan library

25 μg

CLIBN-IGG-01

IgG N glycan library, 2AB-labelled

200 pmol

CAB-IGG-01

 

 

2-AB Labeled Glycans 2-AB标记聚糖

 

 

产品名称

 

 

规格

 

 

货号

NA4 Glycan, 2-AB Labeled

100 pmol

CAB-NA4-01

NGA4 Glycan, 2-AB Labeled

100 pmol

CAB-NGA4-01

A3 Glycan, 2-AB Labeled

100 pmol

CAB-A3-01

NA3 Glycan, 2-AB Labeled

100 pmol

CAB-NA3-01

NGA3 Glycan, 2-AB Labeled

100 pmol

CAB-NGA3-01

NA2F Glycan, 2-AB Labeled

100 pmol

CAB-NA2F-01

A2F Glycan, 2-AB Labeled

100 pmol

CAB-A2F-01

A1F Glycan, 2-AB Labeled

100 pmol

CAB-A1F-01