Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。
haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。
Haematologic HCBT-0022说明书
凝血酶(β,γ)
蛋白水解形式的α-凝血酶
上文说明了人α-凝血酶向较低活性形式的降解模式。通过在Arg106-Tyr107键处切割完整的B链产生β-凝血酶,产生B1和B2片段。通过在Lys190-Gly191键处进一步切割β-凝血酶B2链产生γ-凝血酶,产生B4和B5片段。尽管未示出,但B3片段是通过在Lys190-Gly191键处切割完整B链而衍生的潜在中间体,产生通常称为β'-凝血酶的产物。(此处使用的氨基酸编号始于A链的NH2末端并继续通过B链)。
HCBT-0022 人体β凝血酶
尺寸
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100微克
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公式
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的10mM磷酸钠4,0.3M NaCl,pH为6.5
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存储
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-80℃下
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纯度
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通过SDS-PAGE> 95%
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活动决定
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纤维蛋白原凝血试验
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保质期(妥善保存)
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12个月
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HCGT-0021 人类γ凝血酶
尺寸
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100微克
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公式
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的100mM磷酸钠4,0.1%PEG,pH 6.5的
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存储
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-80℃下
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纯度
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通过SDS-PAGE> 95%
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活动决定
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纤维蛋白原凝血试验
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保质期(妥善保存)
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12个月
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α-凝血酶是通过酶原凝血酶原的蛋白水解活化产生的高度特异性丝氨酸蛋白酶(1)。已经显示纯化形式的α-凝血酶(2-4)在长期储存时经历自溶作用至较低活性形式。在用胰蛋白酶(5)有限消化α-凝血酶时观察到类似的失活。这些蛋白水解形式的α-凝血酶被称为β-凝血酶和γ-凝血酶。通过在Arg106-Tyr107键处切割B链产生人β-凝血酶。通过在Lys190-Gly191键处进一步切割β-凝血酶B2链产生γ-凝血酶。通过在Arg-154处单个裂解凝血酶形成另一种形式的蛋白水解凝血酶,称为β'-凝血酶。γ-凝血酶通过B链中这两个位点(Arg70 / 73和Arg-154)的蛋白水解切割产生。这些切割导致不再共价连接到凝血酶分子上的肽的释放,但通过离子交换和凝胶过滤色谱保持相关。这些蛋白水解形式的凝血酶保留了切割小合成底物(6,7)和一些蛋白质底物如因子XIII(8),抗凝血酶III(9)和凝血酶原(10)的能力。它们凝固纤维蛋白原(11),裂解血小板反应蛋白(12)或激活蛋白C(9)的能力已显着降低。
通过TPCK处理的胰蛋白酶的有限蛋白水解,基本上通过Braun等人的方法,由纯化的α-凝血酶制备人β-凝血酶和γ-凝血酶。(5)。蛋白水解形式的α-凝血酶在100mM NaH 2 PO 4,pH 6.5缓冲液中提供,应储存在-20℃。通过SDS-PAGE评估纯度,并使用纤维蛋白原凝固测定评估活性。
凝胶
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Novex 4-12%Bis-Tris
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加载
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人β和γ凝血酶,每通道1μg
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缓冲
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MES
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标准
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SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(188 kDa),磷酸化酶B(98 kDa),BSA(62 kDa),谷氨酸脱氢酶(49 kDa),酒精脱氢酶(38 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(17 kDa),溶菌酶(14 kDa),抑肽酶(6kDa),胰岛素,B链(3kDa)。
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注意
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其他污染物来自凝血酶,并且可以占额外带质量的~5%。
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行动方式
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蛋白水解形式的 – 凝血酶,其保留对小底物,因子XIII和凝血酶原的活性,但对纤维蛋白原,蛋白C活化和抗凝血酶III结合的活性降低。
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分子量
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36700(B-凝血酶) 36700(G-凝血酶) 4000(A链)* 34300(B链)* 6000(B1链)* 10400(B5链)* 11800(B4链)* *通过SDS测定的表观分子量-PAGE分析
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消光系数
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结构体
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b-凝血酶:三条链(A,B1,B2),A链和B2链之间的二硫键。g-凝血酶:四条链(A,B1,B5,B4),在A肽和B5肽之间具有二硫键。
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