angioproteomie cAP-0010说明书

发表于2024年4月10日由上海金畔生物科技有限公司

angioproteomie cAP-0010说明书

人视网膜微血管内皮细胞

Human Retinal Microvascular Endothelial Cells

Item#:

cAP-0010

Size	Price
1.0 Frozen Vial	$600.00

订单信息
产品名称	人视网膜微血管内皮细胞（HRMVEC）
目录号	cAP-0010
产品格式	冷冻瓶
细胞数量	> 5×10 [5]个细胞/小瓶
一般信息HRMVEC（cAP-0010）细胞是从正常人视网膜组织中分离出来的。将细胞装在冷冻小瓶中（第3代提供细胞）。推荐使用内皮细胞生长培养基（EGM，包含10％的血清和生长补充剂，cAP-02）进行细胞培养，按照以下详细方案进行培养时，这些细胞的小平均群体倍增水平> 20。
细胞的表征
1.	细胞质VWF /因子VIII免疫荧光阳性> 95％
2.	免疫荧光检测Di-I-Ac-LDL细胞质摄取> 95％阳性
3.	细胞质PECAM1免疫荧光阳性> 95％
4.	HRMVEC对HIV-1，HBV，HCV和支原体呈阴性
产品使用情况单元仅供研究使用。
用干冰包装运输冷冻瓶。
到达细胞的处理当您收到装有冷冻小瓶中的细胞的干冰包装时，请将冷冻小瓶中的细胞转移到-80C冷冻室中进行短期保存，或者将其移入液氮罐中进行长期保存。
解冻细胞和亚培养的协议
a）	T25烧瓶的预涂-将2ml快速涂层溶液（cAP-01）加入T25烧瓶中，以覆盖烧瓶的整个表面，5分钟后，通过抽吸处理过量的涂层溶液，准备使用烧瓶（尽管可以使用包含其他细胞外基质（即明胶，胶原蛋白和纤连蛋白）的溶液，但请确保事先优化条件）。
B）	首先在37°C水浴中解冻冷冻的细胞瓶，然后将细胞转移到装有10ml cAP-02培养基的预涂T25烧瓶中，细胞通常会汇合过夜，并准备进行传代。
C）	要传代细胞，请在T25烧瓶中用5ml HBSS（RT）冲洗两次。然后将2ml胰蛋白酶/ EDTA（RT）（cAP-23）加入一个T25烧瓶中；吸出后在20秒内轻轻处置过量的胰蛋白酶/ EDTA溶液。
D）	将T25烧瓶中的细胞在室温或37°C下放置1分钟（大多数细胞通常会在1-2分钟内从表面分离；或在显微镜下监控细胞，直到大多数细胞被聚集起来，然后轻轻敲击烧瓶）靠在工作台表面上，在显微镜下监控时，细胞会在烧瓶表面上移动。
E）	加入5ml胰蛋白酶中和缓冲液，并通过800g离心5分钟使细胞旋转。
G）	用10或15ml cAP-2培养基重悬细胞沉淀，然后将5 ml分别转移到2或3个预涂的T25烧瓶中（对于1/2至1/3的继代培养比例）。
H）	每2或3天更换培养基，通常在7天内（当以1/3的比例分裂时）融合细胞。
I）	要准备静态细胞，当细胞几乎汇合时，请在实验前约8-12小时用含有0.5％FBS的内皮基础培养基（EBM，cAP-03）代替cAP-02。

mRNA Cap2氧甲基转移酶重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

发表于2024年3月24日由上海金畔生物科技有限公司

mRNA Cap2氧甲基转移酶重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

mRNA Cap 2氧甲基转移酶（mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase）是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA，从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率，因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。

产品性质

英文名（English Name）	mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase
来源（Source）	重组E.coli
浓度（Concertation）	50000 Units/mL
纯度（Purity）	≥99%（SDS-PAGE）
比活（Specific Activity）	≥1.6×105 U/mg
储存缓冲液（Storage Buffer）	20 mM Tris-HCl pH8.0，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，100 mM NaCl，50%（v/v）甘油，0.1%（v/v）Trion X-100
活性单位定义（Unit Definition）	一单位（U）定义为：在37℃条件下1 h内甲基化10 pmol的80 nt带帽RNA转录物所需的酶量。

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。推荐分装冻存，避免反复冻融。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	10616ES84	10616ES92	10616ES97
10616-A	mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)	40 μL	200 μL	1 mL
10616-B	10×Capping Reaction Buffer	80 μL	400 μL	2 mL

使用方法

1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16 μL；

2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5 min，反应后冰上放置 5 min；

3、按下表（1）配置反应体系（适用于10 μg以内Capped RNA的甲基化反应）；

4、37℃条件下孵育1 h（对与目的片段长度小于200 nt RNA，可将孵育时间增加到2 h）；

表1：20μL反应体系配置

组分名称	体积
Denatured Capped RNA	16 μL
10×Capping Reaction Buffer	2 μL
SAM (4 mM)	1 μL
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)	1 μL

注意事项

1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子；

3、反应之前推荐65℃加热5 min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5´端结构复杂，可将时间延长至10 min；

4、本产品仅作科研用途！

HB220224

产品性质

英文名（English Name）	mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase
来源（Source）	重组E.coli
浓度（Concertation）	50000 Units/mL
纯度（Purity）	≥99%（SDS-PAGE）
比活（Specific Activity）	≥1.6×105 U/mg
储存缓冲液（Storage Buffer）	20 mM Tris-HCl pH8.0，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，100 mM NaCl，50%（v/v）甘油，0.1%（v/v）Trion X-100
活性单位定义（Unit Definition）	一单位（U）定义为：在37℃条件下1 h内甲基化10 pmol的80 nt带帽RNA转录物所需的酶量。

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。推荐分装冻存，避免反复冻融。

产品组分

组分编号	组分名称	产品编号/规格
组分编号	组分名称	10616ES84	10616ES92	10616ES97
10616-A	mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)	40 μL	200 μL	1 mL
10616-B	10×Capping Reaction Buffer	80 μL	400 μL	2 mL

使用方法

1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16 μL；

2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5 min，反应后冰上放置 5 min；

3、按下表（1）配置反应体系（适用于10 μg以内Capped RNA的甲基化反应）；

4、37℃条件下孵育1 h（对与目的片段长度小于200 nt RNA，可将孵育时间增加到2 h）；

表1：20μL反应体系配置

组分名称	体积
Denatured Capped RNA	16 μL
10×Capping Reaction Buffer	2 μL
SAM (4 mM)	1 μL
mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)	1 μL

注意事项

1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子；

3、反应之前推荐65℃加热5 min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5´端结构复杂，可将时间延长至10 min；

4、本产品仅作科研用途！

HB220224

mRNA Cap2氧甲基转移酶重组蛋白|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase

暂无内容

Cap AU-GAU(m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU) Cap类似物

发表于2024年3月18日由上海金畔生物科技有限公司

Cap AU-GAU(m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU) Cap类似物

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Cap AU is a cap analogue with the structure of m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU, the molecular formula of it is C₃₁H₄₂N₁₂O₂₅P₄and the molecular weight is 1106.6. The product is specifically designed for self-replicating RNAs based on the genomes of positive sense strand RNA viruses such as Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV), Semliki forest virus (SFV), and Sindbis virus (SIN).

The (+) strand genomes of these viruses start with a 5’-AU… Cap 1 mRNAs have superior in vivo activity compared to Cap 0 mRNA produced by legacy co-transcriptional capping methods anti-reverse cap analog (ARCA).

This product is produced in accordance with GMP process requirements and provided in liquid form.

Product Nature

Molecular Formula	C₃₁H₄₂N₁₂O₂₅P₄ (free acid)
Molecular weight	1106.6 (free acid)
Concentration	100 ± 3mM
Purity	≥ 98%
Structure

Shipping and Storage

This product is shipped with dry ice and can be stored at -25℃ ~ -15℃ for two years.

Notes

1. For your safety and health, please wear personal protective equipment (PPE), such as laboratory coats and disposable gloves, when operating with this product.

HB230226

This product is produced in accordance with GMP process requirements and provided in liquid form.

Product Nature

Molecular Formula	C₃₁H₄₂N₁₂O₂₅P₄ (free acid)
Molecular weight	1106.6 (free acid)
Concentration	100 ± 3mM
Purity	≥ 98%
Structure

Shipping and Storage

This product is shipped with dry ice and can be stored at -25℃ ~ -15℃ for two years.

Notes

1. For your safety and health, please wear personal protective equipment (PPE), such as laboratory coats and disposable gloves, when operating with this product.

HB230226

Cap AU-GAU(m7G(5')ppp(5')(2'OMeA)pU) Cap类似物

暂无内容

Innovagen CAP-18说明书

发表于2024年3月15日由上海金畔生物科技有限公司

Innovagen成立于1992年，并于1995年成立为Innovagen AB，我们一直为科学界提供分子生物学领域的研究产品和服务。重点是抗体，重组蛋白和合成肽的生产和开发。

我们的设施位于IDEON科技园内，靠近大学，位于通常被称为Medicon Valley的密集生物技术集群内。

我们的客户遍布所有主要实验室。一些例子包括; Amgen，AstraZeneca，Commissariat a l'Energie Atomique，EMBL，Ferring Pharmaceuticals，Fisher Scientific，Harvard Medical School，Institut Pasteur，Karolinska Institute，Life Technologies，Max-Planck-Instiut，Mayo foundation，Merck，NIH，Novartis Pharma，Novo Nordisk ，Novartis，Pfizer，Promega，Roche Diagnostics，Sanofi-Aventis，斯克里普斯研究所，斯坦福医学院，VWR。

在我们在该领域运营的二十多年中，我们从数千个肽和抗体项目中获得了经验。有价值的一课就是质量始终得到回报，我们始终致力于为您提供高品质的材料和的客户服务。

CAP-18 antibody

Name	CAP-18
Synonyms	CAP18
Host	Chicken 鸡
Type	Polyclonal IgY 多克隆IgY
Purity	Antigen specific affinity purified 抗原特异性亲和纯化
Immunogen	Synthetic CAP-18 peptide. 合成CAP-18肽
Description	Polyclonal antibody raised against the synthetic peptide CAP-18, which is the rabbit homologue of LL-37. 针对合成肽CAP-18产生的多克隆抗体，其是LL-37的兔同源物。
References	Raqib, R., P. Sarker, P. Bergman, G. Ara, M. Lindh, D. A. Sack, K. M. Nasirul Islam, G. H. Gudmundsson, J. Andersson, and B. Agerberth. 2006. Improved outcome in shigellosis associated with butyrate induction of an endogenous peptide antibiotic. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 103:9178-9183.

Name		Type
APEX2 (126-146)		Polyclonal Chicken IgY
beta Amyloid 1-40		Polyclonal Rabbit IgG
beta Amyloid 1-42		Polyclonal Rabbit IgG
beta Amyloid N-term Pyr11		Polyclonal Rabbit IgG
beta Amyloid N-term Pyr3		Polyclonal Rabbit IgG
beta Amyloid N-terminus		Polyclonal Rabbit IgG
CAP-18		Polyclonal Chicken IgY
CAP-18 AP		Polyclonal Chicken IgY
CAP-18 biotin		Polyclonal Chicken IgY
CAP-18 FITC		Polyclonal Chicken IgY
CAP-18 HRP		Polyclonal Chicken IgY
CRAMP		Polyclonal Rabbit IgG
CRAMP biotin		Polyclonal Rabbit IgG
CRAMP FITC		Polyclonal Rabbit IgG
CRAMP HRP		Polyclonal Rabbit IgG
CysLT1R		Polyclonal Rabbit IgG
CysLT1R biotin		Polyclonal Rabbit IgG
CysLT2R		Polyclonal Rabbit IgG
Dicer (human)		Polyclonal Rabbit IgG
Dicer (human) AP		Polyclonal Rabbit IgG
Dicer (human) biotin		Polyclonal Rabbit IgG
Dicer (human) FITC		Polyclonal Rabbit IgG
Dicer (human) HRP		Polyclonal Rabbit IgG
Ghrelin (rat)		Polyclonal Rabbit IgG
Ghrelin (rat) biotin		Polyclonal Rabbit IgG
GPR40 (human)		Polyclonal Rabbit IgG
GPR40 (mouse, rat)		Polyclonal Rabbit IgG
HIV Tat		Polyclonal Rabbit IgG
HIV Tat biotin		Polyclonal Rabbit IgG
LL-37		Polyclonal Rabbit IgG
LL-37 AP		Polyclonal Rabbit IgG
LL-37 biotin		Polyclonal Rabbit IgG
LL-37 FITC		Polyclonal Rabbit IgG
LL-37 HRP		Polyclonal Rabbit IgG
Menin		Polyclonal Rabbit IgG
Menin biotin		Polyclonal Rabbit IgG
Normal chicken IgY		Polyclonal Chicken IgY
Normal chicken IgY FITC		Polyclonal Chicken IgY
Normal goat IgG		Polyclonal Goat IgG
Normal goat IgG FITC		Polyclonal Goat IgG
Normal rabbit IgG		Polyclonal Rabbit IgG
Normal rabbit IgG FITC		Polyclonal Rabbit IgG
Octreotide		Polyclonal Rabbit IgG
OVA 323-339		Polyclonal Rabbit IgG

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2：产品种类齐全，经营超过700多个品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。

4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。

5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等药企。

6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等*批发，欢迎合作。

eurodiagnostica CAP MPOIU说明书

发表于2024年2月20日由上海金畔生物科技有限公司

eurodiagnostica CAP MPOIU说明书

Capture MPO-ANCA WIESLAB®

捕获MPO-ANCAWIESLAB®

MPO特异性ANCA的测量是评估系统性血管炎光谱内临床亚型的临床发现的重要辅助手段。该Wieslab ^®拍摄MPO-ANCA校准针对AF-CDC标准（参考人血清15，代码IS2720）。

产品代码

CAP MPOIU

格式

ELISA法

测验

96孔

计算方式

定量的

抗原

纯化的MPO抗原（IgG）

单位

单位/毫升

校准品

范围

0-200 IU / mL

孵化时间

60 + 30 + 30分钟

检测系统

405纳米

可用性

Cap MPO IU：CE标记。

有可能的使用

所述Wieslab ^®捕获MPO-ANCA测试试剂盒是用于IgG抗体的检测和定量，以在人血清中的髓过氧化物酶（MPO）的酶联免疫吸附测定（ELISA）。该测定的结果将被用于诊断显微多血管炎（MP）。该测定法适用于症状和体征与MP一致的患者。它不适用于筛查健康人群。分析应由训练有素的实验室专业人员进行。

供体外诊断使用。

背景

ANCA（抗中性粒细胞胞浆抗体）是与血管炎和炎性疾病相关的自身抗体家族。当显示c-ANCA与肉芽肿伴多血管炎（Wegener肉芽肿（WG））有关时，人们对ANCA的兴趣稳步增长，今天，这些抗体被认为是研究系统性血管炎的主要诊断工具。

检测ANCA的一种方法是对乙醇固定的粒细胞进行间接免疫荧光（IIF）。该方法产生两种模式，即表示存在c-ANCA的粒细胞的细胞质染色，和表示存在p-ANCA的核周染色。IIF之后是使用纯化蛋白的ELISA。

粒细胞充满了各自含有许多不同蛋白质的颗粒。重要的蛋白质是蛋白酶3（PR3）和髓过氧化物酶（MPO）。因此，针对蛋白酶3的抗体称为PR3-ANCA，而针对髓过氧化物酶的抗体称为MPO-ANCA。

大约80-90％的WG患者表现出PR3-ANCA和5-15％的MPO-ANCA。一类血管炎是显微多发性血管炎（MP）。大多数活动性MP患者的特征是ANCA测试结果阳性，MPO-ANCA比PR3-ANCA更为频繁。

一个工作组已经制定了MPO-ANCA血清学的标准。该Wieslab ^®拍摄MPO-ANCA校准针对AF-CDC标准（参考人血清15，代码IS2720）。

技术信息

微量滴定板的孔用纯化的抗MPO单克隆抗体和髓过氧化物酶包被。在一次孵育过程中，稀释的血清中的特异性抗体将与抗原涂层结合。

然后洗涤孔以去除未结合的抗体和其他成分。

在第二次孵育中，碱性磷酸酶标记的抗体与人IgG的缀合物与孔中的抗体结合。

在进一步的洗涤步骤之后，通过与底物溶液一起孵育来检测特异性抗体。结合的抗体的量与颜色强度相关，并根据吸光度（光密度（OD））进行测量。然后根据校准曲线计算吸光度，结果以IU / mL给出。

mRNA Cap 2氧甲基转移酶GMP级|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade

发表于2024年2月20日由上海金畔生物科技有限公司

mRNA Cap 2氧甲基转移酶GMP级|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Product Description

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase is a recombinant protein derived from vaccinia virus. The enzyme can add a methyl group at the 2´-O position of the first nucleotide of the cap structure at the 5´ end of the RNA. The enzyme uses SAM as a methyl donor to methylate capped RNA to form a Cap1 structure. The Cap1 structure can enhance the translation efficiency of mRNA, so it can improve the expression of mRNA in transfection and microinjection experiments. This enzyme requires RNA with m7GpppN, a 7-methylguanosine cap structure, as a substrate.

This product is produced in accordance with GMP process requirements. The product is provided in liquid form and can be used for Cap1 capping reaction of pre-mRNA in vivo/in vitro.

Product Properties

Source	Recombinant E.coli with Cap 2´-O-Methyltransferase gene
Optimum Temperature		37℃
Storage Buffer	20 mM Tris-HCl pH8.0，0.1mM EDTA，1mM DTT，100mM NaCl，50%（v/v）glycerin，0.1%（v/v）Trion X-100
Unit Definition	One unit is defined as the amount of enzyme required to methylate 10 pmol of 80nt capped RNA transcript in 1 h at 37°C.

Contents

Contents No.

Name

Catalog No./Specification

10612ES92

(10 KU)

10612ES97

(50 KU)

10612ES98

(250 KU)

10612ES99

(20 MU)

10612

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade (50 U/μL)

200 μL

1 mL

5 mL

400 mL

Shipping and Storage

The mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade products are shipped with dry ice and can be stored at -15℃ ~ -25℃ for one year.

Experimental methods

Cap1 capping reaction (20 μL reaction system)

This step is suitable for capping reaction of 10 μg RNA (≥ 100 nt), and can be amplified according to experimental needs.

1. Take 10 μg RNA to a 1.5 mL centrifuge tube and dilute to 12.9 μL with nuclease-free water;

2. Heat at 65°C for 5 min;

3. Take out the centrifuge tube and place it on ice for 5 min;

4. Add the following components in sequence:

Components	Volume
Denatured RNA	12.9 μL
10×Capping Buffer	2.0 μL
Murine RNase inhibitor(40 U/μL)	0.5 μL
GTP (10 mM)	1.0 μL
SAM (10 mM, fresh)	1.6 μL
Vaccinia Capping Enzyme (10 U/μL)	1.0 μL
Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)	1.0 μL

【Note】10×Capping Buffer(Cat# 10666)：0.5 M Tris-HCl, 50 mM KCl, 10 mM MgCl₂, 10 mM DTT pH 8.0@25°C.

5. Incubate at 37°C for 2 h;

6. RNA capping is completed, next experiments can be performed.

Notes

1. For your safety and health, please wear personal protective equipment (PPE), such as laboratory coats and disposable gloves, when operating with this product.

2. The extracted RNA needs to be purified and resuspended in nuclease-free water;

3. The RNA solution needs to be heated before adding the enzyme to remove the secondary structure at the 5'end;

4. For RNA with a known 5'end structure, the reaction time can be extended to 4 h to improve the capping efficiency;

5. In the 5'end labeling reaction system, the GTP stock solution should be diluted to 1-3 times of the mRNA molar concentration in the reaction system.

HB230818

Product Description

This product is produced in accordance with GMP process requirements. The product is provided in liquid form and can be used for Cap1 capping reaction of pre-mRNA in vivo/in vitro.

Product Properties

Source	Recombinant E.coli with Cap 2´-O-Methyltransferase gene
Optimum Temperature		37℃
Storage Buffer	20 mM Tris-HCl pH8.0，0.1mM EDTA，1mM DTT，100mM NaCl，50%（v/v）glycerin，0.1%（v/v）Trion X-100
Unit Definition	One unit is defined as the amount of enzyme required to methylate 10 pmol of 80nt capped RNA transcript in 1 h at 37°C.

Contents

Contents No.

Name

Catalog No./Specification

10612ES92

(10 KU)

10612ES97

(50 KU)

10612ES98

(250 KU)

10612ES99

(20 MU)

10612

mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade (50 U/μL)

200 μL

1 mL

5 mL

400 mL

Shipping and Storage

The mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade products are shipped with dry ice and can be stored at -15℃ ~ -25℃ for one year.

Experimental methods

Cap1 capping reaction (20 μL reaction system)

This step is suitable for capping reaction of 10 μg RNA (≥ 100 nt), and can be amplified according to experimental needs.

1. Take 10 μg RNA to a 1.5 mL centrifuge tube and dilute to 12.9 μL with nuclease-free water;

2. Heat at 65°C for 5 min;

3. Take out the centrifuge tube and place it on ice for 5 min;

4. Add the following components in sequence:

Components	Volume
Denatured RNA	12.9 μL
10×Capping Buffer	2.0 μL
Murine RNase inhibitor(40 U/μL)	0.5 μL
GTP (10 mM)	1.0 μL
SAM (10 mM, fresh)	1.6 μL
Vaccinia Capping Enzyme (10 U/μL)	1.0 μL
Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)	1.0 μL

【Note】10×Capping Buffer(Cat# 10666)：0.5 M Tris-HCl, 50 mM KCl, 10 mM MgCl₂, 10 mM DTT pH 8.0@25°C.

5. Incubate at 37°C for 2 h;

6. RNA capping is completed, next experiments can be performed.

Notes

1. For your safety and health, please wear personal protective equipment (PPE), such as laboratory coats and disposable gloves, when operating with this product.

2. The extracted RNA needs to be purified and resuspended in nuclease-free water;

3. The RNA solution needs to be heated before adding the enzyme to remove the secondary structure at the 5'end;

4. For RNA with a known 5'end structure, the reaction time can be extended to 4 h to improve the capping efficiency;

5. In the 5'end labeling reaction system, the GTP stock solution should be diluted to 1-3 times of the mRNA molar concentration in the reaction system.

HB230818

mRNA Cap 2氧甲基转移酶GMP级|mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade

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Cap1-GAG钠盐帽类似物结构m7G(5’)ppp(5’)(2’OMeA)pG

发表于2024年2月20日由上海金畔生物科技有限公司

Cap1-GAG钠盐帽类似物结构m7G(5’)ppp(5’)(2’OMeA)pG

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Cap1-GAG is a cap analogue with the structure of m7G (5') ppp (5') (2'OMeA) pG, the molecular formula of it is C₃₂H₄₃N₁₅O₂₄P₄ and the molecular weight is 1145.66. The product is used for transcription with the initial sequence of 5'AG3', and the natural cap1 structure is produced by Cap1 transcription capping. Compared with cap0 produced by traditional capping method, the cap1 structure produced by cap1 GAG enables the mRNA to have higher in vivo activity and translation efficiency.

This product is produced in accordance with GMP process requirements and provided in liquid form.

Product Nature

Molecular Formula	C₃₂H₄₃N₁₅O₂₄P₄ (free acid)
Molecular weight	1145.66(free acid)
Concentration	100 ± 3mM
Purity	≥ 98%
Structure

Shipping and Storage

This product is shipped with dry ice and can be stored at -15℃ ~ -25℃ for two years.

Notes

1. For your safety and health, please wear personal protective equipment (PPE), such as laboratory coats and disposable gloves, when operating with this product.

HB220514

Q: 你们帽类似物10677ES和10678ES这两款有没有做过验证，哪个加帽效果会好些？

A: 10678ES是形成天然Cap1结构的mRNA；10677ES是形成含有3′OMe修饰Cap1结构的mRNA，已上市的新冠疫苗BNT162b2使用的帽类似物是此结构。他们的作用都是一样的，使用上没有区别，使用10677ES的产量可能会比10678ES的产量会低一些。

Q: 检测时出现帽子类似物挑酶的情况，翌圣的酶搭配客户的其他厂家帽类似物没有产量是什么原因呢？

A: 各家的酶比活差不多但酶活差异较大，例如某公司50U的相当于200-250U的酶，所以在体系不匹配的情况，酶量加少了，帽子就加不上去。

要根据应用场景选择帽子类型，类似于做细胞治疗，基因治疗，只是为了利用mRNA快速表达筛选有用的肿瘤靶点，可以直接选择直接加帽Cap0、Cap1的形式的帽子都可以。针对于Trilink的体系介绍： CleanCap：NTP=4：5，产量较低，原因就是NTP加少了，在酶法加帽的IVT体系中，NTP的量10mM，所以在共转录加帽体系中建议按照等比例（1：1或5：4）10mM or 8mM。其实在大规模生产体系中，co-capping的成本会略小于post-capping，因为在要保证加帽率的前提下，酶用量会提升且工艺操作更加复杂。我们是Claencap的帽子，目前我们只有AG帽子，它的加帽率会受到影响主要是因为T7 RNA酶的碱基偏好GG序列。

Q: 帽类似物加帽和酶法加帽如何选择？

A: 工业上酶法加帽最常使用的是牛痘病毒加帽酶处理IVT产物可以将其修饰成Cap 0 mRNA，Cap 0结构可以在二氧甲基转移酶（2'O-methyltransferase）的作用下进一步修饰成Cap 1（m7GpppmN）。利用酶法加帽，加帽效率可以达到95%以上。共转录加帽法操作简便，但由于GTP会竞争帽状二聚体，因此该方法加帽率低一些；两种方式各有优缺点。

Q: 对于一些没有加上帽子的mRNA，会对后续实验比如说做生物制剂等有什么影响？

A: 目前行业对这一块的没有做针对性的去除，行业里面主要是看加帽效率的多少，目前做的比较好的加帽率在80%以上，当然肯定是越高越好了。这个还没有一个绝对的标准。

对于合成之后的mRNA，可以用纯化的方式处理，比如康*的一步膜包，极大的减少了纯化工艺，传统用Oligo d（T）的柱子做纯化，效果好可以回收率70-80%；效果差40-50%，也可以多加一步疏水柱在oligo dT后。

Q: 共转录加帽和两步法加帽对于模板的起始位点的要求？

A: 共转录要求对于模板的起始位点要求必须是 AGG* 开头

两步法对于位点无要求，但我司目前产品对于AGGG起始位点的产量最高，主要是T7酶的偏好性导致。

Q: 对于共转录体系中Clean-cap涉及到的专利问题

A: 目前我们可以提供帽子类似物，据我们了解，现在Trilink在国内专利还没有授权，在国内可以放心使用；据消息，更倾向和CDMO和药企进行授权；目前我们是希望能以代工的形式进行生产合作，但是目前还没有回复。

This product is produced in accordance with GMP process requirements and provided in liquid form.

Product Nature

Molecular Formula	C₃₂H₄₃N₁₅O₂₄P₄ (free acid)
Molecular weight	1145.66(free acid)
Concentration	100 ± 3mM
Purity	≥ 98%
Structure

Shipping and Storage

This product is shipped with dry ice and can be stored at -15℃ ~ -25℃ for two years.

Notes

1. For your safety and health, please wear personal protective equipment (PPE), such as laboratory coats and disposable gloves, when operating with this product.

HB220514

Q: 你们帽类似物10677ES和10678ES这两款有没有做过验证，哪个加帽效果会好些？

Q: 检测时出现帽子类似物挑酶的情况，翌圣的酶搭配客户的其他厂家帽类似物没有产量是什么原因呢？

A: 各家的酶比活差不多但酶活差异较大，例如某公司50U的相当于200-250U的酶，所以在体系不匹配的情况，酶量加少了，帽子就加不上去。

Q: 帽类似物加帽和酶法加帽如何选择？

Q: 对于一些没有加上帽子的mRNA，会对后续实验比如说做生物制剂等有什么影响？

Q: 共转录加帽和两步法加帽对于模板的起始位点的要求？

A: 共转录要求对于模板的起始位点要求必须是 AGG* 开头

两步法对于位点无要求，但我司目前产品对于AGGG起始位点的产量最高，主要是T7酶的偏好性导致。

Q: 对于共转录体系中Clean-cap涉及到的专利问题

Cap1-GAG钠盐帽类似物结构m7G(5’)ppp(5’)(2’OMeA)pG

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Cap1-GAG(3’OMe)钠盐帽类似物结构m7(3’OMeG)(5’)ppp(5’)(2’OMeA)pG

发表于2024年2月20日由上海金畔生物科技有限公司

Cap1-GAG(3’OMe)钠盐帽类似物结构m7(3’OMeG)(5’)ppp(5’)(2’OMeA)pG

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Cap1-GAG(3’OMe) is a cap analogue with the structure of m7(3’OMeG)(5’)ppp(5’)(2’OMeA)pG, the molecular formula of it is C₃₃H₄₅N₁₅O₂₄P₄ and the molecular weight is 1159.60. The product is used for transcription with the initial sequence of 5'AG3', and the natural cap1 structure is produced by Cap1 transcription capping. Compared with cap0 produced by traditional capping method, the cap1 structure produced by cap1-GAG (3’OMe) enables the mRNA to have higher activity and translation efficiency in vivo.

This product is produced in accordance with GMP process requirements and provided in liquid form.

Product Nature

Molecular Formula	C₃₃H₄₅N₁₅O₂₄P₄ (free acid)
Molecular weight	1159.60(free acid)
Concentration	100 ± 3mM
Purity	≥ 98%
Structure

Shipping and Storage

This product is shipped with dry ice and can be stored at -15℃ ~ -25℃ for two years.

Notes

1. For your safety and health, please wear personal protective equipment (PPE), such as laboratory coats and disposable gloves, when operating with this product.

HB220514

Q: 你们帽类似物10677ES和10678ES这两款有没有做过验证，哪个加帽效果会好些？

Q: 检测时出现帽子类似物挑酶的情况，翌圣的酶搭配客户的其他厂家帽类似物没有产量是什么原因呢？

A: 各家的酶比活差不多但酶活差异较大，例如某公司50U的相当于200-250U的酶，所以在体系不匹配的情况，酶量加少了，帽子就加不上去。

Q: 帽类似物加帽和酶法加帽如何选择？

Q: 对于一些没有加上帽子的mRNA，会对后续实验比如说做生物制剂等有什么影响？

Q: 共转录加帽和两步法加帽对于模板的起始位点的要求？

A: 共转录要求对于模板的起始位点要求必须是 AGG* 开头

两步法对于位点无要求，但我司目前产品对于AGGG起始位点的产量最高，主要是T7酶的偏好性导致。

Q: 对于共转录体系中Clean-cap涉及到的专利问题

This product is produced in accordance with GMP process requirements and provided in liquid form.

Product Nature

Molecular Formula	C₃₃H₄₅N₁₅O₂₄P₄ (free acid)
Molecular weight	1159.60(free acid)
Concentration	100 ± 3mM
Purity	≥ 98%
Structure

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Notes

1. For your safety and health, please wear personal protective equipment (PPE), such as laboratory coats and disposable gloves, when operating with this product.

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Q: 你们帽类似物10677ES和10678ES这两款有没有做过验证，哪个加帽效果会好些？

Q: 检测时出现帽子类似物挑酶的情况，翌圣的酶搭配客户的其他厂家帽类似物没有产量是什么原因呢？

A: 各家的酶比活差不多但酶活差异较大，例如某公司50U的相当于200-250U的酶，所以在体系不匹配的情况，酶量加少了，帽子就加不上去。

Q: 帽类似物加帽和酶法加帽如何选择？

Q: 对于一些没有加上帽子的mRNA，会对后续实验比如说做生物制剂等有什么影响？

Q: 共转录加帽和两步法加帽对于模板的起始位点的要求？

A: 共转录要求对于模板的起始位点要求必须是 AGG* 开头

两步法对于位点无要求，但我司目前产品对于AGGG起始位点的产量最高，主要是T7酶的偏好性导致。

Q: 对于共转录体系中Clean-cap涉及到的专利问题

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