angioproteomie cAP-0010说明书


angioproteomie cAP-0010说明书

人视网膜微血管内皮细胞

Human Retinal Microvascular Endothelial Cells

Item#:

cAP-0010

Size Price
1.0 Frozen Vial $600.00

 

订单信息
产品名称 人视网膜微血管内皮细胞(HRMVEC)
目录号 cAP-0010
产品格式 冷冻瓶
细胞数量 > 5×10 [5]个细胞/小瓶
一般信息HRMVEC(cAP-0010)细胞是从正常人视网膜组织中分离出来的。将细胞装在冷冻小瓶中(第3代提供细胞)。推荐使用内皮细胞生长培养基(EGM,包含10%的血清和生长补充剂,cAP-02)进行细胞培养,按照以下详细方案进行培养时,这些细胞的小平均群体倍增水平> 20。
细胞的表征
1. 细胞质VWF /因子VIII免疫荧光阳性> 95%
2. 免疫荧光检测Di-I-Ac-LDL细胞质摄取> 95%阳性
3. 细胞质PECAM1免疫荧光阳性> 95%
4. HRMVEC对HIV-1,HBV,HCV和支原体呈阴性
产品使用情况单元仅供研究使用。
用干冰包装运输冷冻瓶。
到达细胞的处理当您收到装有冷冻小瓶中的细胞的干冰包装时,请将冷冻小瓶中的细胞转移到-80C冷冻室中进行短期保存,或者将其移入液氮罐中进行长期保存。
解冻细胞和亚培养的协议
a) T25烧瓶的预涂-将2ml快速涂层溶液(cAP-01)加入T25烧瓶中,以覆盖烧瓶的整个表面,5分钟后,通过抽吸处理过量的涂层溶液,准备使用烧瓶(尽管可以使用包含其他细胞外基质(即明胶,胶原蛋白和纤连蛋白)的溶液,但请确保事先优化条件)。
B) 首先在37°C水浴中解冻冷冻的细胞瓶,然后将细胞转移到装有10ml cAP-02培养基的预涂T25烧瓶中,细胞通常会汇合过夜,并准备进行传代。
C) 要传代细胞,请在T25烧瓶中用5ml HBSS(RT)冲洗两次。然后将2ml胰蛋白酶/ EDTA(RT)(cAP-23)加入一个T25烧瓶中;吸出后在20秒内轻轻处置过量的胰蛋白酶/ EDTA溶液。
D) 将T25烧瓶中的细胞在室温或37°C下放置1分钟(大多数细胞通常会在1-2分钟内从表面分离;或在显微镜下监控细胞,直到大多数细胞被聚集起来,然后轻轻敲击烧瓶)靠在工作台表面上,在显微镜下监控时,细胞会在烧瓶表面上移动。
E) 加入5ml胰蛋白酶中和缓冲液,并通过800g离心5分钟使细胞旋转。
G) 用10或15ml cAP-2培养基重悬细胞沉淀,然后将5 ml分别转移到2或3个预涂的T25烧瓶中(对于1/2至1/3的继代培养比例)。
H) 每2或3天更换培养基,通常在7天内(当以1/3的比例分裂时)融合细胞。
I) 要准备静态细胞,当细胞几乎汇合时,请在实验前约8-12小时用含有0.5%FBS的内皮基础培养基(EBM,cAP-03)代替cAP-02。

 

​angioproteomie pV1006R-r说明书

angioproteomie pV1006R-r说明书

大鼠兔多克隆阻断抗体

订购信息

目录号:pV1006R-r

尺寸:100µg

储存:<-20°C

免疫原:大鼠VEGF-C全长蛋白

Ig类型:兔IgG

应用:中和VEGF-C诱导的VEGFR3

制备:该抗体是用纯化的大鼠免疫家兔产生的

VEGF-C重组蛋白。通过亲和层析纯化IgG。

配制和储存:将抗体从0.2µm过滤的磷酸盐缓冲盐水(PBS)溶液中冻干。抗体稳定至少12个月

当储存在-70°C时。

特异性:该抗体识别大鼠VEGF-C,与小鼠和人VEGF-C具有强烈的交叉反应性。

用或不用大鼠VEGFC处理小鼠皮肤内皮细胞(SEND)

(50ng/ml)在不存在或存在5或20µg/ml pV1006R-r的情况下持续30分钟,并用IP Western检测pTyrosine的磷酸-VEGFR3