QT-G510智能轨道式摇床

QT-G510智能轨道式摇床

QT-G510智能轨道式摇床,直流无刷电机驱动,性能稳定,无噪音,寿命长,免保养。功能多样化。缓和震荡适用于不同领域的多种试验振荡混匀工作。
一机多用,可更换不同容器的锥形烧瓶夹、锥形烧瓶架,取下烧瓶架可作为脱色摇床使用。

QT-G510智能轨道式摇床

 

产品简述:

  1. 直流无刷电机驱动,性能稳定,无噪音,寿命长,免保养。
  2. QT-G510智能轨道式摇床,液晶显示转速、定时时间,操作更加直观简便。
  3. 转速30转-300转,可自由设定。定时时间长达99小时59分59秒,定时时间运行结束后有自动报警功能,连续可调,
  4. 功能多样化。缓和震荡适用于不同领域的多种试验振荡混匀工作。
  5. 一机多用,可更换不同容器的锥形烧瓶夹、锥形烧瓶架,取下烧瓶架可作为脱色摇床使用。

 

技术指标: 

  1. 型号名称:
  2. 旋转方式:轨道式
  3. 304不锈钢工作台:320×300 (mm)
  4. 304不锈钢锥形烧瓶架,工作台分别可放置1000ml锥形烧瓶4个,
  5.       250ml锥形烧瓶6个,100ml锥形烧瓶12个,根据实验要求更换。
  6. 转速:30-300转,连续可调,可任意设定
  7. 轨道直径:24mm
  8. 定时时间:1秒-99小时59分59秒
  9. 可载重量:4kg
  10. 显示方式:液晶显示工作界面,具有运行参数记忆功能
  11. 重量:12kg
  12. 环境温度:-5℃-40℃
  13. 功率:40W
  14. 电源:AC220V±10%,50HZ
  15. 外形尺寸:370x320x150 (mm)

 

QT-G510智能轨道式摇床

 

兰格-G600-1J-1工业蠕动泵

兰格G600-1J-1工业蠕动泵

品牌 其他品牌 性能 其他
驱动方式 其他 泵轴位置 其他
材质 其他

G600-1J-1工业蠕动泵,外置电源模块具有IP67防护等级
更强抗浪涌能力和更高的可靠性
流量范围:0ml/min-3000ml/min
通道数:2

G600-1J-1工业蠕动泵

产品简述:

结构紧凑,外形小巧,流量可达3L/min
强驱动力,可匹配多种高化学抗性的软管
元器件的采用,进一步提高了产品的电磁兼容性能,保证其在电磁干扰严重的工业环境中能够可靠、稳定的运行
铝合金外壳,防腐喷漆处理,提高整机的防腐蚀性能,延长泵在恶劣环境的使用寿命
高防护等级IP65,适用于潮湿多尘的环境
段码液晶显示屏,专业设计界面,直观显示泵的设置参数和工作状态

主要特点

转速范围: 0rpm-600rpm,正反转可逆
转速调节分辨率: 1rpm
显示方式: 液晶屏
控制方式: 按键控制,外部信号控制和通信控制
外控功能: 启停控制/方向控制:无源触点信号
速度控制:0-5V、0-10V、4-20mA、0-10kHz可选,接口统一,大转速可设(设置范围60rpm-600rpm)

通信功能: RS485通信接口,支持兰格公司协议和Modbus协议,可通过按键设置通信参数(地址、波特率、校验位,停止位)
参数记忆: 运行参数和系统参数自动保存
上电运行状态: 上电停止或恢复掉电前状态可设
全速功能: 一键控制全速工作,用于快速填充、排空等
电磁兼容性: 关键指标达到或超过III级水平
键盘锁功能: 键盘可锁定,防止误操作
外形尺寸(长*宽*高): 240 mm×211 mm×155 mm(含外置电源及支架)
适用电源:AC100V~240V/100W,50~60Hz
工作环境温度:0℃~40℃
工作环境相对湿度:10%~90%
防护等级:IP65
重量:5.56kg(含外置电源及支架)

G600-1J-1工业蠕动泵

技术参数

兰格-G600-1J-1工业蠕动泵

适应环境

潮湿,多尘,一定的酸碱腐蚀,强电磁干扰等工业生产环境.

兰格-G300-3F工业灌装蠕动泵

兰格G300-3F工业灌装蠕动泵

品牌 其他品牌 性能 其他
驱动方式 其他 泵轴位置 其他
材质 其他

兰格G300-3F工业灌装蠕动泵,流量范围:0ml/min-5500ml/min。
铝合金外壳,防腐喷漆处理,延长泵在恶劣环境的使用寿命。
适用场所:潮湿,多尘,一定的酸碱腐蚀,强电磁干扰等工业生产环境。

G300-3F工业灌装蠕动泵

产品简述:

流量范围:0ml/min-5500ml/min

铝合金外壳,防腐喷漆处理,延长泵在恶劣环境的使用寿命。

良好的电磁兼容性能,既不会被电磁环境干扰,也不会干扰周围的其它电子设备

高防护等级,适用于潮湿多尘的环境

高质量的电子元器件,优化的软件设计和硬件设计,保证了可靠、稳定的运行

通过高精度的转速控制(分辨率高达0.1rpm),可实现高精度的流量控制

适用于潮湿,多尘,一定的酸碱腐蚀,强电磁干扰等工业生产环境。

技术指标

型号名称:G300-3F工业灌装蠕动泵

转速范围:0rpm-300rpm,正反转可逆
转速调节分辨率:”转速0-100(rpm),调节分辨率为0.1rpm
转速100-300(rpm),调节分辨率为1rpm”
显示方式:液晶屏
控制方式:按键控制,外部信号控制和通信控制
工作模式:流量模式和分配模式
流量模式:显示流量,泵按照设定的流量连续运行
流量校正:将实际流量值输入,自动进行流量校正,校正时间可设
流量设置范围:1.000mL/min-9999mL/min
分配模式:按照设定的分配液量、分配次数、间隔时间、回吸角度,进行连续自动定量分配。
分配校正:将实际分配液量输入,自动进行分配液量校正,校正时间可设
分配液量范围:0.1mL-9999L
分配次数:0-9999
分配间隔时间:1sec-99.9min
回吸角度:0-9.9圈,调整分辨率为0.1圈
外控功能:”启停控制/方向控制:电平信号控制方式,兼容电平5V及12V电平 
速度控制:0-5V、0-10V、0-10kHz可选,接口统一”
状态输出功能:提供状态输出接口,可输出泵的启停状态(OC门信号)、方向状态(OC门信号)及转动速度(125-7500Hz线性对应0.1-300rpm)
通信接口:RS485
掉电记忆:重新上电后可按照掉电前的状态继续进行工作。
脚踏开关控制:可选配脚踏开关附件,通过脚踏开关控制泵的启停
外形尺寸(长*宽*高):360mm×215mm×243mm
适用电源:AC220V±10%/120W,50~60Hz
工作环境温度:0℃—40℃
防护等级:IP65
重量:12kg

兰格-G300-3F工业灌装蠕动泵
业蠕动泵定制:

兰格公司根据客户的具体需求,提供定制化的工业蠕动泵解决方案。G300-3F-1和G300-3F-2都是以G300-3F为基础的定制化产品,可以配合使用市场上常用的工业蠕动泵泵头,并根据需要更改工作模式、外控功能、增加泵头漏液检测功能等。

兰格-G300-3F工业灌装蠕动泵

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)(RG010S)

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)

产品编号: RG010S

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478.00 10

价格: ¥ 478.00

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RG010S 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) 100次 478.00元

碧云天生产的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (Enhanced Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit II),是一种以萤光素(luciferin)为底物高灵敏度检测萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)活性的试剂盒。

本产品是萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG009)的不同包装版本,两者的检测效果完全一致。萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒,即RG009为即用型液体,其优点是无需配制即可直接使用,但需要-80℃保存,如果在-20℃保存时间较长后检测效果会逐渐下降。本产品,即RG010,为RG009的冻干粉版本,优点是在-20℃保存非常稳定,缺点是使用前需要使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后才能使用。

本产品的性能达到国外主要同类产品同等水平。本产品的性能和用途与Promega公司的Luciferase Assay System基本相同。本产品与国外同类产品(Competitor P)的检测效果比较参见图1,本产品的发光强度与国外同类产品(Competitor P)相近或略优(图1A),发光信号稳定性与国外同类产品(Competitor P)基本一致(图1B)。

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)(RG010S)

图1. 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010)的检测效果对比图。萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)与碧云天生产的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)的检测效果完全一致。图中所示为本产品和国外同类产品(Competitor P)对转染阳性萤火虫萤光素酶报告基因质粒的HeLa细胞裂解样品的检测效果。图A为化学发光强度的检测效果对比图,图B为化学发光稳定性的检测效果对比图。实际读数会因细胞种类、转染效率、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

本产品发光强度高。对于相同的细胞样品,本产品的发光强度可以达到甚至略优于国外同类产品(图1A),特别适用于Firefly luciferase表达水平低的样品检测。如果样品中萤火虫萤光素酶的表达水平较高,或者样品数量较多、对发光信号的稳定性要求较高,也可以使用发光强度和灵敏度稍低,但发光信号更稳定的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006/RG007)。

本产品操作简单,检测速度快,从样品制备到完成检测仅需约20分钟。只需用试剂盒提供的萤火虫萤光素酶检测缓冲液把检测底物(冻干粉)充分溶解后配制成萤火虫萤光素酶检测试剂II,再取100微升萤火虫萤光素酶检测试剂II与20-100微升裂解制备的细胞样品混合后即可立即进行化学发光检测。并且发光信号比较稳定,信号半衰期约10分钟。

本产品稳定性好。本试剂盒在-20℃可以长期保存,配制成萤火虫萤光素酶检测试剂II后的稳定性非常好,反复冻融5次对检测效果无明显影响,反复冻融10次检测效果下降不超过10%。萤火虫萤光素酶检测试剂II在4℃条件下,保存3天检测效果下降不超过20%,保存5天检测效果下降不超过30%,保存7天仍可保留60%以上的检测效果。在室温保存1天可保留70%以上的检测效果,室温保存3天可保留60%以上的检测效果,37 ℃保存1天可保留50%以上的检测效果。萤火虫萤光素酶检测试剂II即使仅保留约50%的检测效果,仍可以满足各种常规检测的要求。

萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。在luciferin氧化的过程中,会发出生物萤光(bioluminescence)。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定[1]。本试剂盒的检测原理参考图2。

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)(RG010S)

图2. 萤火虫萤光素酶的检测原理图。

通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游,或把3′-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用[2]。

关于碧云天萤光素酶报告基因检测试剂盒相关产品的比较和选择,请参考碧云天的相关网页:
http://www.beyotime.com/support/luciferase-reporter-gene-assay.htm

萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。

萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm (centered around 560nm)。

本试剂盒RG010S和RG010M分别可以测定100个和1000个样品。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
RG010S-1 报告基因细胞裂解液 60ml
RG010S-2 萤火虫萤光素酶检测缓冲液 10ml
RG010S-3 萤火虫萤光素酶底物 1瓶
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
RG010M-1 报告基因细胞裂解液 RG010S-1×10
RG010M-2 萤火虫萤光素酶检测缓冲液 RG010S-2×10
RG010M-3 萤火虫萤光素酶底物 RG010S-3×10
说明书 1份
保存条件:

-20℃避光保存,至少一年有效。萤火虫萤光素酶检测缓冲液和检测底物混合配制成的萤火虫萤光素酶检测试剂II -80℃避光保存,至少一年有效;-20℃避光保存,推荐3-6个月内使用。

注意事项:

对于订购后可能放置较长时间后再使用的,或者对于检测结果的精度要求特别高的,推荐订购萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010);对于订购后短期内使用完毕的,推荐订购使用更加便捷的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)。

为取得最佳测定效果,在用单管的化学发光仪测定时,样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内,例如30秒内;使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,宜先把样品全部加好,然后统一加入萤火虫萤光素酶检测试剂II。

由于萤光素酶的活性对温度比较敏感,所以反应前样品和检测试剂均需达到室温后再进行测定。可将萤火虫萤光素酶检测缓冲液在室温或不超过25℃的水浴中融解并混匀后再与检测底物混合成萤火虫萤光素酶检测试剂II使用。

尽管经测试萤火虫萤光素酶检测缓冲液和检测底物混合后配制成的萤火虫萤光素酶检测试剂II反复冻融5次对其检测效果无明显影响,为保证萤光素酶检测试剂的稳定性、取得良好的使用效果,建议现用现配。没有用完的检测试剂可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于室温。

检测时需使用白色或黑色的96孔板。如果使用普通透明的96孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。推荐使用碧云天的BeyoGold™全黑96孔细胞培养板(FCP966)或BeyoGold™全白96孔细胞培养板(FCP968)。。

样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品宜使用相同的测定时间。

为避免由于质粒转细胞时效率的差异而带来的误差,可以同时转入海肾萤光素酶(Renilla luciferase)的报告基因质粒作为内参,采用碧云天的双萤光素酶报告基因检测试剂盒 (RG027/RG028)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG029)进行检测;也可以同时转入β-半乳糖苷酶(β-galactosidase, β-gal)报告基因质粒作为内参,然后采用碧云天生产的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)进行检测。采用本试剂盒中的报告基因细胞裂解液裂解获得的样品可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)的检测。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 裂解细胞:将报告基因细胞裂解液充分混匀后,按如下方式加入报告基因细胞裂解液,充分裂解细胞。
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量报告基因细胞裂解液。

器皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板
报告基因细胞裂解液(μl/孔) 100 150 200 300 500

注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100微升。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于测定。
注:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
2. 准备检测试剂:融解冻存的萤火虫萤光素酶检测缓冲液,将检测缓冲液全部转移至检测底物瓶中,旋紧瓶盖后适当颠倒混匀,当检测底物全部溶解并混匀后即为萤火虫萤光素酶检测试剂II,并平衡至室温。注:冻干粉状的萤火虫萤光素酶检测底物可能会有少量粘附在瓶盖和瓶口,旋开瓶盖前可以拿起瓶子用瓶底并轻轻敲击桌面,使粉末尽量掉落至瓶底,然后再轻轻旋开瓶盖,并注意不要损失冻干粉。
3. 按仪器操作说明书开启化学发光仪或具有检测化学发光功能的多功能酶标仪,可以将测定间隔设为2秒,测定时间设为10秒,或者根据仪器设备的要求并根据实验需要设置适当的间隔时间和测定时间。
4. 每个样品测定时,取样品20-100微升(如果样品量足够,请加入100微升;如果样品量不足可以适当减少用量,但同批样品的使用量宜保持一致),取等体积的报告基因细胞裂解液作为空白对照。
5. 各孔加入100微升萤火虫萤光素酶检测试剂II,用枪打匀或用其它适当方式混匀后测定RLU (relative light unit)。本试剂盒的检测效果以及与同类竞争产品的检测效果比较可以参考图1。

常见问题:
1. Luminometer和荧光分光光度计有何不同?
荧光分光光度计检测的样品本身不能发光,样品需要由特定波长的激发光激发,然后才能产生荧光并被荧光分光光度计检测。Luminometer检测的样品本身可以发光,不需要激发光进行激发。也就是说luminometer是检测化学发光(萤光)的仪器。有些型号的荧光分光光度计也具有luminometer的功能,即也可以检测化学发光。您所使用的荧光分光光度计能否用于化学发光的测定请仔细阅读该仪器的说明书。
2. 可以进行ATP化学发光检测的仪器是否就可以用于本试剂盒的检测?
是。ATP化学发光的检测原理和本试剂盒的原理相同,可以用相同的仪器测定。

参考文献:
1. J R de Wet, K V Wood, M DeLuca, D R Helinski, and S Subramani. Mol Cell Biol. 1987. 7:725-37.
2. E Schenborn, D Groskreutz. Mol Biotechnol. 1999. 13:29-44.

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RG005/RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) 100/1000次
RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) 100/1000次
RG016/RG017 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG029S/M 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG066S/M Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG126S/M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml
RG127S/M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) 10/100ml
RG129S/M 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml
RG132S/M 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)(RG010S)
萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)(RG010S)

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双萤光素酶报告基因细胞裂解液(RG132M)

双萤光素酶报告基因细胞裂解液

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碧云天生产的双萤光素酶报告基因细胞裂解液(Dual Luciferase Reporter Gene Assay Cell Lysis Buffer),是一种用于裂解细胞后用于双萤光素酶报告基因检测的裂解液。本产品裂解后的细胞样品主要用于RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG029S/M双萤光素酶报告基因检测试剂盒II的检测,也可以用于RG005/RG006 萤火虫萤光素酶检测试剂盒、RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II、RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒等萤火虫萤光素酶的检测,还可以用于RG016/RG017海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒等海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒及RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒和RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒的检测。

本裂解液兼容的产品列表如下:

产品编号 产品名称 包装
RG005 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100次
RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 1000次
RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) 100/1000次
RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) 100/1000次
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RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
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如果细胞量比较大,例如培养在培养皿或6孔板中时,适合使用本产品先裂解细胞,然后再使用RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG066S/M Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒进行检测。

使用RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG029S/M 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II时,如果试剂盒中的裂解液用量不足,可以使用本产品。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
RG132S 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 10ml
RG132M 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 100ml
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存,至少一年有效。4℃保存至少1个月有效。

注意事项:

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 融解本产品并适当混匀,置于冰浴备用。
2. 细胞的裂解和样品的收集:
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的双萤光素酶报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量双萤光素酶报告基因细胞裂解液。

器皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板
报告基因细胞裂解液(μl/孔) 100 150 200 300 500

注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100μl。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因检测、海肾萤光素酶报告基因检测或双萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
3. 组织的裂解和样品的收集:
a. 对于双萤光素酶转基因动物等组织样品的裂解,优先推荐先把组织样品液氮冷冻研磨成粉末后,按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行裂解(例如20mg组织粉末加入200μl双萤光素酶报告基因细胞裂解液进行裂解);也可以按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行匀浆(例如20mg组织加入200μl双萤光素酶报告基因细胞裂解液用玻璃匀浆器或者电动匀浆器进行匀浆)。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因、海肾萤光素酶报告基因检测或双萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
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G418硫酸盐(遗传霉素) 氨基糖苷类抗生素|G418 Sulfate(Geneticin)|CAS 108321-42-2

G418硫酸盐(遗传霉素) 氨基糖苷类抗生素|G418 Sulfate(Geneticin)|CAS 108321-42-2

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

G418 SulfateG418硫酸盐),也称作Geneticin(遗传霉素),是一种结构类似于庆大霉素B1Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素,通过影响80S核糖体功能和阻断延伸步骤来干扰蛋白合成,对原核和真核等细胞都有毒性,包括细菌、酵母、高等植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。其抗性基因(主要为neo基因)位于转座子Tn601903)或Tn5(来源于细菌),但是可以在真核细胞中表达。通过基因重组技术将这些抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选和维持培养携带抗性基因的原核或者真核细胞。

哺乳动物细胞中,当抗性基因neo被整合进真核细胞基因组后 ,使其编码表达氨基糖苷磷酸转移酶amino-glycoside 3’-phosphotransferaseAPH(3')II)。此酶通过共价修饰G418的氨基或羟基功能,抑制抗生素核糖体间的相互作用,从而使得抗生素失活。这一特性赋予细胞产生抗性。稳转细胞株筛选实验,需要建立杀灭曲线(剂量反应曲线)确定杀死无抗性细胞的最低有效浓度。

植物细胞中,通过转染携带nptII基因的抗性质粒孵育其抗性。nptII基因也能编码表达氨基糖苷磷酸转移酶,这个酶使得多种抗生素丧失活性,包括G418卡那霉素和巴龙霉素。

 

产品性质

英文同义名(English synonym

Antibiotic G418; G418 Sulfate

中文同义名(Chinese synonym G418硫酸盐;遗传霉素

CAS号(CAS No.

108321-42-2

分子式(Molecular formula

C20H40N4O10·2 H2SO4

分子量(Molecular weight

692.7 g/mol

外观(Appearance

白色粉末

纯度(Purity

~98%

活力(Potency)(anhydrous

>700 U/mg

溶解性(Solubility

溶于水

结构式(Structure

G418硫酸盐(遗传霉素) 氨基糖苷类抗生素|G418 Sulfate(Geneticin)|CAS 108321-42-2 

 

运输与保存方法

常温运输。粉末-20 避光保存,有效期3年。储存液-20 避光保存,有效期1年。避免受潮,否则会降低抗生素活力。

 

使用方法

1. G418储存液的配制(50 mg/mL,活性浓度)

1)活力单位的换算

根据此公式进行换算:1000/A0×A1=A2,其中A0G418的活力值(Potency),因批次而异。可见批次对应的质检报告,或者瓶子上的标签。A1是想配制的活性G418浓度。A2是实际称重的粉末与体积比浓度。
比如若所用批次的G418 活力值为:750 U/mg,要配制50 mg/mLG418活性浓度,则实际要配制的粉末浓度为1000/750×50 mg/mL=66.67 mg/mL

如果配制10 mLG418储存液(活性浓度,50 mg/mL),则需要称取666.7 mg粉末。

2)除菌和保存

根据上述换算得到的实际粉末称重量,加入10 mL无菌去离子水内使其完全溶解。

先用5 mL无菌去离子水预湿润0.22 μm针头式过滤器,除尽水。之后使用此滤器过滤,除菌后分装成单次使用的小量(如1mL)放到-20 冻存,1年稳定。
不要对混浊的溶液进行过滤,因为混浊的溶液意味着未完全溶解,过滤过程中会造成药物损失,降低终液的活性。

不建议使用液体培养基,NaCl磷酸盐溶液或者有机溶剂来制备储存液。

 

2. 常用筛选浓度

一般来说,刚开始筛选转化子需要高浓度的G418,并用一个较低浓度的G418用于维持培养。生长条件,细胞类型和其他的环境因素都可能影响G418的用量,因此第一次使用的实验体系建议通过杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。

通常情况,哺乳动物细胞筛选范围200-2000 μg/mL;植物细胞:10-100 μg/mL;酵母细胞:500-1000 μg/mL

以下是一些细胞类型使用G418筛选使用的浓度,可做参考。

细胞类型

激活浓度

应用

引用文献

网柄菌属

a) 10 μg/mL

b) 30 μg/mL

a)培养在培养液中

b)培养在冻干细菌上

Hirth,et. al., Proc. Natl. Acad. Sci., v. 79, 7356-7360 (1982).

哺乳动物

a) 400 -1000 μg/mL

b) 200 μg/mL

a)用于筛选

b)用于维持生长

Canaani and Berg, Proc. Natl. Acad. Sci., v. 79, 5166-5170 (1982).

植物

a) 25-50 μg/mL

b) 10 μg/mL

a)用于筛选

b)用于维持生长

Ursic, et. al., Biochem. Biophys. Res. Comm., v. 101:3, 1031-1037 (1981).

酵母

a) 500 μg/mL 

b) 125-200 μg/mL

a)用于筛选

b)用于维持生长

Jimenez and Davies, Nature, v. 287, 869-871 (1980).

细菌

16 μg/mL

用于筛选

Waitz, et. al., Antimicrob. Agents Chemother., v. 6:5, 579-581 (1974).

 

3. 杀灭曲线的建立
注意事项

为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线来实现,至少选择6个浓度。处理分裂期的细胞时G418的活性最强,因此在添加G418之前需要让细胞培养一段时间。

1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37 CO2培养过夜。

对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。

2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定0501002004008001000 μg/mL

3) 第二天:去除旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

 

4. 稳定转染细胞的筛选

1) 转染48 h后,用含有适当浓度的G418筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染以及筛选效果。

4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35 mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5) 之后更换正常培养基培养即可。

 

注意事项

1) 本品不可高压灭菌;
2) G418不要和其他的抗生素/抗真菌剂(如青霉素/链霉素)共同使用,因为它们是G418的竞争性抑制剂。其他的抗生素也会产生交叉活性。

3) 配制G418溶液时,一定要根据G418批次不同的活力值(potency)来进行换算,从而得到需要活性浓度的储存液及工作液。
4) G418加入培养体系中未转染的细胞有可能不会被杀死,原因在于药物浓度过低,或者细胞密度过高。另外,快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞,更容易被杀死。对照细胞(未转染)可能抗生素添加5-7天后才能杀死,转染细胞(抗性克隆子)的克隆需要10-14天形成。

5) 即使加入杀死剂量的G418,细胞可能会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。

6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7) 本产品仅作科研用途!

 

产品应用场景和主要特点

应用场景

名称

货号

主要特点

原生质体制备

Snailase 蜗牛酶

10404JP

来源于蜗牛的混合酶,可降解植物细胞壁。

生长调节剂

(生长促进剂

生长延缓剂

新型植物激素)

Zeatin 玉米素

41001JP

从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的,促进侧芽生长,刺激细胞分化,促进愈伤组织和种子发芽,还能防止叶片衰老。

Trans-Zeatin 反玉米素

41002JP

高纯的反式玉米素,适用于植物组织培养。

Trans-Zeatin-Riboside 反玉米素核苷

41003JP

是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素,功能上不仅促进细胞分裂,刺激茎芽增殖,抑制根的生成,阻止叶片衰老,还能激活基因表达和代谢活性。

Indole-3-acetic acid(IAA)3-吲哚乙酸

40509JP

适用于植物细胞或组织培养。

(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸

41004JP

抑制幼苗生长。

rac-GR24(strigolactone analog) 独脚金内酯

41012JP

近年来发现的一种植物激素或其前体,能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。

抗生素

(抗细菌

抗真菌

抗性筛选)

 

 

Timentin 特美汀

60230JP

特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。

Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素

60214JP

实验室中应用非常普遍:微生物学研究,细胞培养内抑制细菌污染,分子生物学研究

Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐

60208JP

主要对革兰氏阳性菌有效,作用于细菌的细胞壁,对人类的毒性较小。

Penicillin-Streptomycin,青霉素-链霉素

60162JP

有效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,从而有效控制细胞被细菌污染。

Rifampicin 利福平

60234JP

有效的广谱抗菌抗生素。

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206JP

对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。

Aureobasidin A(AbA)金担子素A

60231JP

一种环状肽、抗真菌的抗生素,具有很强的抗真菌能力,主要抗酵母菌。

Hygromycin B 潮霉素B

60225JP

用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。

G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素

60220JP

将抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选携带抗性基因的细胞。

除草剂

Glyphosate 草甘膦(甘草磷),95%

41011JP

对多年生的恶习性杂草如茅草、香附子、狗牙根有很好的防除效果。

Glufosinate-ammonium草铵膦

60221JP

毒性低,活性高,广谱的非选择性除草剂,其有效成分是草丁膦。

Bialaphos 双丙氨膦

60235JP

用于筛选含有抗性基因的基因工程细胞系,且在玉米培养中比草铵膦的活性强。

 

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60212JP25/60

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Vancomycin Hydrochloride 盐酸万古霉素

60213JP60/80/90

100mg/1g/5g

Gentamycin Sulfate Salt    硫酸庆大霉素

60214JP03/08/25

1/5/25g

Spectinomycin Hydrochloride 盐酸壮观霉素

60215JP08

5g

盐酸博莱霉素

60216JP60/80

100/10×100mg

Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素

60217JP20/60

20/5×20mg

Blasticidin S  杀稻瘟菌素S (灭瘟素)

60218JP10/60

10/10×10mg

Nystatin 制真菌素

60219JP08

5g

G418 Sulfate (Geneticin) 遗传霉素

60220JP03/08

1/5g

Hygromycin B 潮霉素B

60225JP03/10

1/10g

Erythromycin 红霉素

60228JP08/25

5/25g

Timentin 特美汀

60230JP07/32

3.2/10×3.2g

Aureobasidin A (AbA)金担子素A

60231JP03/08/10

1/5×1/10×1mg

Polymyxin B Sulfate 多粘菌素B硫酸盐

60242JP03/10

1/10MU

HB220914

 

Q过滤抗生素是用油系膜还是水洗膜过滤?

A都可以。

[1] Zhu G, Xie J, Kong W, et al. Phase Separation of Disease-Associated SHP2 Mutants Underlies MAPK Hyperactivation. Cell. 2020;183(2):490-502.e18. doi:10.1016/j.cell.2020.09.002(IF:38.637)
[2] Zhang D, Liu Y, Zhu Y, et al. A non-canonical cGAS-STING-PERK pathway facilitates the translational program critical for senescence and organ fibrosis. Nat Cell Biol. 2022;24(5):766-782. doi:10.1038/s41556-022-00894-z(IF:28.824)
[3] Zhou C, Yi C, Yi Y, et al. LncRNA PVT1 promotes gemcitabine resistance of pancreatic cancer via activating Wnt/β-catenin and autophagy pathway through modulating the miR-619-5p/Pygo2 and miR-619-5p/ATG14 axes. Mol Cancer. 2020;19(1):118. Published 2020 Jul 29. doi:10.1186/s12943-020-01237-y(IF:27.401)
[4] Meng F, Yu Z, Zhang D, et al. Induced phase separation of mutant NF2 imprisons the cGAS-STING machinery to abrogate antitumor immunity. Mol Cell. 2021;81(20):4147-4164.e7. doi:10.1016/j.molcel.2021.07.040(IF:17.970)
[5] Zhou C, Liang Y, Zhou L, et al. TSPAN1 promotes autophagy flux and mediates cooperation between WNT-CTNNB1 signaling and autophagy via the MIR454-FAM83A-TSPAN1 axis in pancreatic cancer. Autophagy. 2021;17(10):3175-3195. doi:10.1080/15548627.2020.1826689(IF:16.016)
[6] Chen S, Liu S, Wang J, et al. TBK1-Mediated DRP1 Targeting Confers Nucleic Acid Sensing to Reprogram Mitochondrial Dynamics and Physiology. Mol Cell. 2020;80(5):810-827.e7. doi:10.1016/j.molcel.2020.10.018(IF:15.584)
[7] Zhao Q, Zheng K, Ma C, et al. PTPS Facilitates Compartmentalized LTBP1 S-Nitrosylation and Promotes Tumor Growth under Hypoxia. Mol Cell. 2020;77(1):95-107.e5. doi:10.1016/j.molcel.2019.09.018(IF:14.548)
[8] Yu P, Zhu X, Zhu JL, et al. The Chk2-PKM2 axis promotes metabolic control of vasculogenic mimicry formation in p53-mutated triple-negative breast cancer. Oncogene. 2021;40(34):5262-5274. doi:10.1038/s41388-021-01933-z(IF:9.867)
[9] Wu Y, Gu W, Han X, Jin Z. LncRNA PVT1 promotes the progression of ovarian cancer by activating TGF-β pathway via miR-148a-3p/AGO1 axis. J Cell Mol Med. 2021;25(17):8229-8243. doi:10.1111/jcmm.16700(IF:5.310)
[10] Zeng WJ, Lu C, Shi Y, et al. Initiation of stress granule assembly by rapid clustering of IGF2BP proteins upon osmotic shock. Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 2020;1867(10):118795. doi:10.1016/j.bbamcr.2020.118795(IF:4.105)
[11] Li B, Zhang J, Su Y, et al. Overexpression of PTEN may increase the effect of pemetrexed on A549 cells via inhibition of the PI3K/AKT/mTOR pathway and carbohydrate metabolism. Mol Med Rep. 2019;20(4):3793-3801. doi:10.3892/mmr.2019.10617(IF:1.851)

G418 SulfateG418硫酸盐),也称作Geneticin(遗传霉素),是一种结构类似于庆大霉素B1Gentamycin B1)的氨基糖苷类抗生素,通过影响80S核糖体功能和阻断延伸步骤来干扰蛋白合成,对原核和真核等细胞都有毒性,包括细菌、酵母、高等植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。其抗性基因(主要为neo基因)位于转座子Tn601903)或Tn5(来源于细菌),但是可以在真核细胞中表达。通过基因重组技术将这些抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选和维持培养携带抗性基因的原核或者真核细胞。

哺乳动物细胞中,当抗性基因neo被整合进真核细胞基因组后 ,使其编码表达氨基糖苷磷酸转移酶amino-glycoside 3’-phosphotransferaseAPH(3')II)。此酶通过共价修饰G418的氨基或羟基功能,抑制抗生素核糖体间的相互作用,从而使得抗生素失活。这一特性赋予细胞产生抗性。稳转细胞株筛选实验,需要建立杀灭曲线(剂量反应曲线)确定杀死无抗性细胞的最低有效浓度。

植物细胞中,通过转染携带nptII基因的抗性质粒孵育其抗性。nptII基因也能编码表达氨基糖苷磷酸转移酶,这个酶使得多种抗生素丧失活性,包括G418卡那霉素和巴龙霉素。

 

产品性质

英文同义名(English synonym

Antibiotic G418; G418 Sulfate

中文同义名(Chinese synonym G418硫酸盐;遗传霉素

CAS号(CAS No.

108321-42-2

分子式(Molecular formula

C20H40N4O10·2 H2SO4

分子量(Molecular weight

692.7 g/mol

外观(Appearance

白色粉末

纯度(Purity

~98%

活力(Potency)(anhydrous

>700 U/mg

溶解性(Solubility

溶于水

结构式(Structure

G418硫酸盐(遗传霉素) 氨基糖苷类抗生素|G418 Sulfate(Geneticin)|CAS 108321-42-2 

 

运输与保存方法

常温运输。粉末-20 避光保存,有效期3年。储存液-20 避光保存,有效期1年。避免受潮,否则会降低抗生素活力。

 

使用方法

1. G418储存液的配制(50 mg/mL,活性浓度)

1)活力单位的换算

根据此公式进行换算:1000/A0×A1=A2,其中A0G418的活力值(Potency),因批次而异。可见批次对应的质检报告,或者瓶子上的标签。A1是想配制的活性G418浓度。A2是实际称重的粉末与体积比浓度。
比如若所用批次的G418 活力值为:750 U/mg,要配制50 mg/mLG418活性浓度,则实际要配制的粉末浓度为1000/750×50 mg/mL=66.67 mg/mL

如果配制10 mLG418储存液(活性浓度,50 mg/mL),则需要称取666.7 mg粉末。

2)除菌和保存

根据上述换算得到的实际粉末称重量,加入10 mL无菌去离子水内使其完全溶解。

先用5 mL无菌去离子水预湿润0.22 μm针头式过滤器,除尽水。之后使用此滤器过滤,除菌后分装成单次使用的小量(如1mL)放到-20 冻存,1年稳定。
不要对混浊的溶液进行过滤,因为混浊的溶液意味着未完全溶解,过滤过程中会造成药物损失,降低终液的活性。

不建议使用液体培养基,NaCl磷酸盐溶液或者有机溶剂来制备储存液。

 

2. 常用筛选浓度

一般来说,刚开始筛选转化子需要高浓度的G418,并用一个较低浓度的G418用于维持培养。生长条件,细胞类型和其他的环境因素都可能影响G418的用量,因此第一次使用的实验体系建议通过杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。

通常情况,哺乳动物细胞筛选范围200-2000 μg/mL;植物细胞:10-100 μg/mL;酵母细胞:500-1000 μg/mL

以下是一些细胞类型使用G418筛选使用的浓度,可做参考。

细胞类型

激活浓度

应用

引用文献

网柄菌属

a) 10 μg/mL

b) 30 μg/mL

a)培养在培养液中

b)培养在冻干细菌上

Hirth,et. al., Proc. Natl. Acad. Sci., v. 79, 7356-7360 (1982).

哺乳动物

a) 400 -1000 μg/mL

b) 200 μg/mL

a)用于筛选

b)用于维持生长

Canaani and Berg, Proc. Natl. Acad. Sci., v. 79, 5166-5170 (1982).

植物

a) 25-50 μg/mL

b) 10 μg/mL

a)用于筛选

b)用于维持生长

Ursic, et. al., Biochem. Biophys. Res. Comm., v. 101:3, 1031-1037 (1981).

酵母

a) 500 μg/mL 

b) 125-200 μg/mL

a)用于筛选

b)用于维持生长

Jimenez and Davies, Nature, v. 287, 869-871 (1980).

细菌

16 μg/mL

用于筛选

Waitz, et. al., Antimicrob. Agents Chemother., v. 6:5, 579-581 (1974).

 

3. 杀灭曲线的建立
注意事项

为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线来实现,至少选择6个浓度。处理分裂期的细胞时G418的活性最强,因此在添加G418之前需要让细胞培养一段时间。

1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37 CO2培养过夜。

对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。

2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定0501002004008001000 μg/mL

3) 第二天:去除旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

 

4. 稳定转染细胞的筛选

1) 转染48 h后,用含有适当浓度的G418筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染以及筛选效果。

4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35 mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5) 之后更换正常培养基培养即可。

 

注意事项

1) 本品不可高压灭菌;
2) G418不要和其他的抗生素/抗真菌剂(如青霉素/链霉素)共同使用,因为它们是G418的竞争性抑制剂。其他的抗生素也会产生交叉活性。

3) 配制G418溶液时,一定要根据G418批次不同的活力值(potency)来进行换算,从而得到需要活性浓度的储存液及工作液。
4) G418加入培养体系中未转染的细胞有可能不会被杀死,原因在于药物浓度过低,或者细胞密度过高。另外,快速分裂的细胞相对于缓慢增殖细胞,更容易被杀死。对照细胞(未转染)可能抗生素添加5-7天后才能杀死,转染细胞(抗性克隆子)的克隆需要10-14天形成。

5) 即使加入杀死剂量的G418,细胞可能会继续分裂2-3次。G418的药效通常在2天后才变得明显。

6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7) 本产品仅作科研用途!

 

产品应用场景和主要特点

应用场景

名称

货号

主要特点

原生质体制备

Snailase 蜗牛酶

10404JP

来源于蜗牛的混合酶,可降解植物细胞壁。

生长调节剂

(生长促进剂

生长延缓剂

新型植物激素)

Zeatin 玉米素

41001JP

从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的,促进侧芽生长,刺激细胞分化,促进愈伤组织和种子发芽,还能防止叶片衰老。

Trans-Zeatin 反玉米素

41002JP

高纯的反式玉米素,适用于植物组织培养。

Trans-Zeatin-Riboside 反玉米素核苷

41003JP

是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素,功能上不仅促进细胞分裂,刺激茎芽增殖,抑制根的生成,阻止叶片衰老,还能激活基因表达和代谢活性。

Indole-3-acetic acid(IAA)3-吲哚乙酸

40509JP

适用于植物细胞或组织培养。

(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸

41004JP

抑制幼苗生长。

rac-GR24(strigolactone analog) 独脚金内酯

41012JP

近年来发现的一种植物激素或其前体,能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。

抗生素

(抗细菌

抗真菌

抗性筛选)

 

 

Timentin 特美汀

60230JP

特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。

Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素

60214JP

实验室中应用非常普遍:微生物学研究,细胞培养内抑制细菌污染,分子生物学研究

Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐

60208JP

主要对革兰氏阳性菌有效,作用于细菌的细胞壁,对人类的毒性较小。

Penicillin-Streptomycin,青霉素-链霉素

60162JP

有效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,从而有效控制细胞被细菌污染。

Rifampicin 利福平

60234JP

有效的广谱抗菌抗生素。

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206JP

对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。

Aureobasidin A(AbA)金担子素A

60231JP

一种环状肽、抗真菌的抗生素,具有很强的抗真菌能力,主要抗酵母菌。

Hygromycin B 潮霉素B

60225JP

用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。

G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素

60220JP

将抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选携带抗性基因的细胞。

除草剂

Glyphosate 草甘膦(甘草磷),95%

41011JP

对多年生的恶习性杂草如茅草、香附子、狗牙根有很好的防除效果。

Glufosinate-ammonium草铵膦

60221JP

毒性低,活性高,广谱的非选择性除草剂,其有效成分是草丁膦。

Bialaphos 双丙氨膦

60235JP

用于筛选含有抗性基因的基因工程细胞系,且在玉米培养中比草铵膦的活性强。

 

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产品名称

产品编号

规格

Ciprofloxacin hydrochloride 环丙沙星盐酸盐

60201JP05/25/60

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Ampicillin, Sodium Salt 氨苄青霉素钠

60203JP10/60

10/100g

Doxycycline hyclate 盐酸强力霉素

60204JP03/08/25

1/5/25g

Chloramphenicol, USP Grade 氯霉素,USP级

60205JP08/25/60

5/25/100g

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206JP10/60

10/100g

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素盐酸盐

60210JP25/76

25/500 mg

Tetracyclin HCl 四环素盐酸盐(USP)

60212JP25/60

25/100g

Vancomycin Hydrochloride 盐酸万古霉素

60213JP60/80/90

100mg/1g/5g

Gentamycin Sulfate Salt    硫酸庆大霉素

60214JP03/08/25

1/5/25g

Spectinomycin Hydrochloride 盐酸壮观霉素

60215JP08

5g

盐酸博莱霉素

60216JP60/80

100/10×100mg

Phleomycin (20mg/ml in solution) 腐草霉素

60217JP20/60

20/5×20mg

Blasticidin S  杀稻瘟菌素S (灭瘟素)

60218JP10/60

10/10×10mg

Nystatin 制真菌素

60219JP08

5g

G418 Sulfate (Geneticin) 遗传霉素

60220JP03/08

1/5g

Hygromycin B 潮霉素B

60225JP03/10

1/10g

Erythromycin 红霉素

60228JP08/25

5/25g

Timentin 特美汀

60230JP07/32

3.2/10×3.2g

Aureobasidin A (AbA)金担子素A

60231JP03/08/10

1/5×1/10×1mg

Polymyxin B Sulfate 多粘菌素B硫酸盐

60242JP03/10

1/10MU

HB220914

 

Q过滤抗生素是用油系膜还是水洗膜过滤?

A都可以。

[1] Zhu G, Xie J, Kong W, et al. Phase Separation of Disease-Associated SHP2 Mutants Underlies MAPK Hyperactivation. Cell. 2020;183(2):490-502.e18. doi:10.1016/j.cell.2020.09.002(IF:38.637)
[2] Zhang D, Liu Y, Zhu Y, et al. A non-canonical cGAS-STING-PERK pathway facilitates the translational program critical for senescence and organ fibrosis. Nat Cell Biol. 2022;24(5):766-782. doi:10.1038/s41556-022-00894-z(IF:28.824)
[3] Zhou C, Yi C, Yi Y, et al. LncRNA PVT1 promotes gemcitabine resistance of pancreatic cancer via activating Wnt/β-catenin and autophagy pathway through modulating the miR-619-5p/Pygo2 and miR-619-5p/ATG14 axes. Mol Cancer. 2020;19(1):118. Published 2020 Jul 29. doi:10.1186/s12943-020-01237-y(IF:27.401)
[4] Meng F, Yu Z, Zhang D, et al. Induced phase separation of mutant NF2 imprisons the cGAS-STING machinery to abrogate antitumor immunity. Mol Cell. 2021;81(20):4147-4164.e7. doi:10.1016/j.molcel.2021.07.040(IF:17.970)
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萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)(RG009S)

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)

产品编号: RG009S

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RG009S 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) 100次 478.00元

碧云天生产的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (Enhanced Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit),是一种以萤光素(luciferin)为底物高灵敏度检测萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)活性的试剂盒。

本产品是萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010)的不同包装版本,两者的检测效果完全一致。本产品,即RG009为即用型液体,其优点是无需配制即可直接使用,但需要-80℃保存,如果在-20℃保存时间较长后检测效果会逐渐下降。萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型),即RG010,为RG009的冻干粉版本,优点是在-20℃保存非常稳定,缺点是使用前需要使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后才能使用。

本产品的性能达到国外主要同类产品同等水平。本产品的性能和用途与Promega公司的Luciferase Assay System基本相同。本产品(RG009)与国外同类产品(Competitor P)的检测效果比较参见图1,本产品的发光强度与国外同类产品(Competitor P)相近或略优(图1A),发光信号稳定性与国外同类产品(Competitor P)基本一致(图1B)。

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)(RG009S)

图1. 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)的检测效果对比图。图中所示为本产品和国外同类产品(Competitor P)对转染阳性萤火虫萤光素酶报告基因质粒的HeLa细胞裂解样品的检测效果。图A为化学发光强度的检测效果对比图,图B为化学发光稳定性的检测效果对比图。实际读数会因细胞种类、转染效率、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

本产品发光强度高。对于相同的细胞样品,本产品的发光强度可以达到甚至略优于国外同类产品(图1A),特别适用于Firefly luciferase表达水平低的样品检测。如果样品中萤火虫萤光素酶的表达水平较高,或者样品数量较多、对发光信号的稳定性要求较高,也可以使用发光强度和灵敏度稍低,但发光信号更稳定的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006/RG007)。

本产品操作简单,检测速度快,从样品制备到完成检测仅需约20分钟。本试剂盒中提供的萤火虫萤光素酶检测试剂为即用型试剂,只需将100微升萤火虫萤光素酶检测试剂与20-100微升裂解制备的细胞样品混合后即可立即进行化学发光检测。并且发光信号比较稳定,信号半衰期约10分钟。

本产品稳定性好。本试剂盒中的萤火虫萤光素酶检测试剂的稳定性非常好,反复冻融5次对检测效果无明显影响,反复冻融10次检测效果下降不超过10%。在4℃条件下,保存3天检测效果下降不超过20%,保存5天检测效果下降不超过30%,保存7天仍可保留60%以上的检测效果。在室温保存1天可保留70%以上的检测效果,室温保存3天可保留60%以上的检测效果,37℃保存1天可保留50%以上的检测效果。萤火虫萤光素酶检测试剂即使仅保留约50%的检测效果,仍可以满足各种常规检测的要求。

萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。在luciferin氧化的过程中,会发出生物萤光(bioluminescence)。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定[1]。本试剂盒的检测原理参考图2。

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)(RG009S)

图2. 萤火虫萤光素酶的检测原理图。

通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游,或把3′-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用[2]。

关于碧云天萤光素酶报告基因检测试剂盒相关产品的比较和选择,请参考碧云天的相关网页:
http://www.beyotime.com/support/luciferase-reporter-gene-assay.htm

萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。

萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm (centered around 560nm)。

本试剂盒RG009S和RG009M分别可以测定100个和1000个样品。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
RG009S-1 报告基因细胞裂解液 60ml
RG009S-2 萤火虫萤光素酶检测试剂 10ml
说明书 1份

产品编号 产品名称 包装
RG009M-1 报告基因细胞裂解液 RG009S-1×10
RG009M-2 萤火虫萤光素酶检测试剂 RG009S-2×10
说明书 1份
保存条件:

报告基因细胞裂解液4℃保存3个月有效,-20℃保存一年有效,-80℃可以长期保存;萤火虫萤光素酶检测试剂-80℃避光保存,至少一年有效;-20℃避光保存,推荐3-6个月内使用。

注意事项:

萤火虫萤光素酶检测试剂在-20℃保存其检测效果会逐渐下降,保存半年后其发光效果会降低约50%。因此,本产品如果保存于-20℃,推荐在3-6个月内使用。如果订购后可能放置较长时间后再使用,推荐订购在-20℃保存非常稳定的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010)。

为取得最佳测定效果,在用单管的化学发光仪测定时,样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内,例如30秒内;使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,宜先把样品全部加好,然后统一加入萤火虫萤光素酶检测试剂。

由于萤光素酶的活性对温度比较敏感,所以反应前样品和检测试剂均需达到室温后再进行测定。可将萤火虫萤光素酶检测试剂在室温或不超过25℃的水浴中融解并混匀后使用。

尽管经测试萤火虫萤光素酶检测试剂反复冻融5次对其检测效果无明显影响,为保证萤光素酶检测试剂的稳定性、取得良好的使用效果,第一次解冻后可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于室温。

检测时需使用白色或黑色的96孔板。如果使用普通透明的96孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。推荐使用碧云天的BeyoGold™全黑96孔细胞培养板(FCP966)或BeyoGold™全白96孔细胞培养板(FCP968)。

样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品宜使用相同的测定时间。

为避免由于质粒转细胞时效率的差异而带来的误差,可以同时转入海肾萤光素酶(Renilla luciferase)的报告基因质粒作为内参,采用碧云天的双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG029)进行检测;也可以同时转入β-半乳糖苷酶(β-galactosidase, β-gal)报告基因质粒作为内参,然后采用碧云天生产的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)进行检测。采用本试剂盒中的报告基因细胞裂解液裂解获得的样品可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)的检测。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 裂解细胞:将报告基因细胞裂解液充分混匀后,按如下方式加入报告基因细胞裂解液,充分裂解细胞。
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量报告基因细胞裂解液。

器皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板
报告基因细胞裂解液(μl/孔) 100 150 200 300 500

注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100微升。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于测定。
注:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
2. 融解萤火虫萤光素酶检测试剂,并达到室温。
3. 按仪器操作说明书开启化学发光仪或具有检测化学发光功能的多功能酶标仪,可以将测定间隔设为2秒,测定时间设为10秒,或者根据仪器设备的要求并根据实验需要设置适当的间隔时间和测定时间。
4. 每个样品测定时,取样品20-100微升(如果样品量足够,请加入100微升;如果样品量不足可以适当减少用量,但同批样品的使用量宜保持一致),取等体积的报告基因细胞裂解液作为空白对照。
5. 各孔加入100微升萤火虫萤光素酶检测试剂,用枪打匀或用其它适当方式混匀后测定RLU (relative light unit)。本试剂盒的检测效果以及与同类竞争产品的检测效果比较可以参考图1。

常见问题:
1. Luminometer和荧光分光光度计有何不同?
荧光分光光度计检测的样品本身不能发光,样品需要由特定波长的激发光激发,然后才能产生荧光并被荧光分光光度计检测。Luminometer检测的样品本身可以发光,不需要激发光进行激发。也就是说luminometer是检测化学发光(萤光)的仪器。有些型号的荧光分光光度计也具有luminometer的功能,即也可以检测化学发光。您所使用的荧光分光光度计能否用于化学发光的测定请仔细阅读该仪器的说明书。
2. 可以进行ATP化学发光检测的仪器是否就可以用于本试剂盒的检测?
是。ATP化学发光的检测原理和本试剂盒的原理相同,可以用相同的仪器测定。

参考文献:
1. J R de Wet, K V Wood, M DeLuca, D R Helinski, and S Subramani. Mol Cell Biol. 1987. 7:725-37.
2. E Schenborn, D Groskreutz. Mol Biotechnol. 1999. 13:29-44.

相关产品:

产品编号 产品名称 包装
RG005/RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) 100/1000次
RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) 100/1000次
RG016/RG017 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG029S/M 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG066S/M Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG126S/M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml
RG127S/M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) 10/100ml
RG129S/M 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml
RG132S/M 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml

萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)(RG009S)
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萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型)(RG127S)

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
RG127S 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) 10ml 45.00元
RG127M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) 100ml 239.00元

碧云天生产的萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) (Enhanced Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Cell Lysis Buffer),是一种用于裂解细胞后用于萤火虫萤光素酶报告基因检测的裂解液。本产品裂解后的细胞样品,主要用于RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)、RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)的检测,也可以用于RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒的检测。本产品裂解后的样品,不建议用于RG005/RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒和RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II的检测,也不适合直接用于海肾萤光素酶报告基因的检测。

本裂解液兼容的产品列表如下:

产品编号 产品名称 包装
RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) 100/1000次
RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) 100/1000次
RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次

如果细胞量比较大,例如培养在培养皿或6孔板中时,适合使用本产品先裂解细胞,然后再使用RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒进行检测。

使用RG009S/M萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)或RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)时,如果试剂盒中的裂解液用量不足,可以直接使用本产品。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
RG127S 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) 10ml
RG127M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) 100ml
说明书 1份

保存条件:

-20℃保存,至少一年有效。4℃保存至少1个月有效。

注意事项:

本产品裂解后的样品不适合直接用于海肾萤光素酶报告基因的检测。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 融解本产品并适当混匀,置于冰浴备用。
2. 细胞的裂解和样品的收集:
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液。

器皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板
报告基因细胞裂解液(μl/孔) 100 150 200 300 500

注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100μl。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
3. 组织的裂解和样品的收集:
a. 对于萤火虫萤光素酶转基因动物等组织样品的裂解,优先推荐先把组织样品液氮冷冻研磨成粉末后,按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行裂解(例如20mg组织粉末加入200μl萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液进行裂解);也可以按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行匀浆(例如20mg组织加入200μl萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液用玻璃匀浆器或者电动匀浆器进行匀浆)。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
相关产品:

产品编号 产品名称 包装
RG005/RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) 100/1000次
RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) 100/1000次
RG016/RG017 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG029S/M 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG066S/M Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG126S/M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml
RG127S/M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) 10/100ml
RG129S/M 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml
RG132S/M 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml

萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型)(RG127S)
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双萤光素酶报告基因细胞裂解液(RG132S)

双萤光素酶报告基因细胞裂解液

产品编号: RG132S

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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
RG132S 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 10ml 48.00元
RG132M 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 100ml 263.00元

碧云天生产的双萤光素酶报告基因细胞裂解液(Dual Luciferase Reporter Gene Assay Cell Lysis Buffer),是一种用于裂解细胞后用于双萤光素酶报告基因检测的裂解液。本产品裂解后的细胞样品主要用于RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG029S/M双萤光素酶报告基因检测试剂盒II的检测,也可以用于RG005/RG006 萤火虫萤光素酶检测试剂盒、RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II、RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒等萤火虫萤光素酶的检测,还可以用于RG016/RG017海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒等海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒及RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒和RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒的检测。

本裂解液兼容的产品列表如下:

产品编号 产品名称 包装
RG005 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100次
RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 1000次
RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) 100/1000次
RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) 100/1000次
RG016 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100次
RG017 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 1000次
RG027 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100次
RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 1000次
RG029S/M 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG066S/M Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次

如果细胞量比较大,例如培养在培养皿或6孔板中时,适合使用本产品先裂解细胞,然后再使用RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG066S/M Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒进行检测。

使用RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG029S/M 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II时,如果试剂盒中的裂解液用量不足,可以使用本产品。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
RG132S 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 10ml
RG132M 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 100ml
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存,至少一年有效。4℃保存至少1个月有效。

注意事项:

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 融解本产品并适当混匀,置于冰浴备用。
2. 细胞的裂解和样品的收集:
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的双萤光素酶报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量双萤光素酶报告基因细胞裂解液。

器皿类型 96孔板 48孔板 24孔板 12孔板 6孔板
报告基因细胞裂解液(μl/孔) 100 150 200 300 500

注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100μl。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因检测、海肾萤光素酶报告基因检测或双萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
3. 组织的裂解和样品的收集:
a. 对于双萤光素酶转基因动物等组织样品的裂解,优先推荐先把组织样品液氮冷冻研磨成粉末后,按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行裂解(例如20mg组织粉末加入200μl双萤光素酶报告基因细胞裂解液进行裂解);也可以按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行匀浆(例如20mg组织加入200μl双萤光素酶报告基因细胞裂解液用玻璃匀浆器或者电动匀浆器进行匀浆)。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因、海肾萤光素酶报告基因检测或双萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
相关产品:

产品编号 产品名称 包装
RG005/RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) 100/1000次
RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) 100/1000次
RG016/RG017 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG029S/M 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II 100/1000次
RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG066S/M Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 100/1000次
RG126S/M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml
RG127S/M 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) 10/100ml
RG129S/M 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml
RG132S/M 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 10/100ml

双萤光素酶报告基因细胞裂解液(RG132S)
双萤光素酶报告基因细胞裂解液(RG132S)

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LABGIC-ELVE-32G迷你梯度基因扩增仪

LABGICELVE-32G迷你梯度基因扩增仪

品牌 其他品牌 加工定制

ELVE-32G迷你梯度基因扩增仪,采用温度循环器长寿命Peltier模块;可伸缩式热盖,能适应不同高度试管;程序采用文件夹管理,可自建目录;内置11个标准程序文件模板,能快速编辑所需文件;一键快速孵育功能,满足变性、酶切/酶连、ELISA等实验需要;热盖温度和热盖工作模式可设,满足不同实验需求。
样本容量:32×0.2ml(4×8排列)。

ELVE-32G迷你梯度基因扩增仪

产品简述:

  采用美国Marlow半导体制冷片,大变温速率大于5度每秒,循环次数大于20万次。该产品融合多种技术于一体:安卓操作系统,彩色全触控屏幕,可做梯度实验,内置WIFI模块,发送邮件提醒功能,大数据存储量及扩展功能等。

技术特点

彩色电容式触摸屏控制,高清晰TFT显示(5英寸,800×480像素),图形化菜单式导航界面,操作极其简单;

采用温度循环器长寿命Peltier模块;

阳极氧化技术处理的工程加固型铝质模块,既保留快速导热性能,又具有足够的耐腐蚀性;

实时显示程序进展及剩余时间,支持PCR仪运行中间编程;

快速的升降温速率,快升降温速率5℃/s,节约宝贵的实验时间;

可伸缩式热盖,能适应不同高度试管;

内置11个标准程序文件模板,能快速编辑所需文件;

一键快速孵育功能,满足变性、酶切/酶连、ELISA等实验需要

程序采用文件夹管理,可自建目录;

热盖温度和热盖工作模式可设,满足不同实验需求;

支持U盘和局域网更新软件;

自动断电保护,恢复供电后自动执行未完成循环,保证扩增全过程安全运行;

USB接口,支持U盘存/取PCR数据,也可使用USB鼠标控制PCR仪;

内置WIFI模块,通过网络连接可实现一机同时控制多台PCR仪;

支持实验程序结束发送邮件提醒功能。 

性能指标

产品型号

ELVE-16

ELVE-32G

样本容量 Capacity

16×0.2ml(4×4排列)

32×0.2ml(4×8排列)

试管 Tube

0.2ml单管

0.2ml单管,8连管

温度范围 Temperature Range

4~100℃

大升温速率MAX. Heating Rate

5℃/s

大降温速率 MAX. Cooling Rate

4℃/s

温度均匀性 Uniformity

≤±0.2℃

温度准确性 Accuracy

≤±0.2℃

温度显示分辨率

Display Resolution

0.1℃

温度控制方式 Temperature Control

BlockTube

变温速率可调

Ramping Rate Adjustable

0.1~5℃

梯度温度范围

Gradient Temp. Range

30~100℃

梯度设置范围 Gradient Spread

1~30℃

热盖温度范围 Hot Lid Temperature

30~110℃

程序存储数量 Number of Programs

10000 +(USB FLASH)

程序大步骤 Max. No. of Step

30

程序大循环数 Max. No. of Cycle

100

时间递增/递减

Time Increment/Decrement

1 Sec ~ 600 Sec

温度递增/递减

Temp. Increment/Decrement

0.1~10.0℃

程序暂停功能 Pause Function

有 Yes

掉电数据保护 Auto Data Protection

有 Yes

4℃保温 Hold at 4℃

无限长 Forever

语言设置功能 Language

中文/English

电脑软件 Computer Software

有 Yes

软件 phone APP

有 Yes

液晶显示屏 LCD

5 inch,800×480 pels, 65K色

通讯接口 Communication

USB2.0 , WIFI

产品尺寸 Dimensions

267mm×190mm×115mm (L×W×H)

净重 Weight

3kg

3.2kg

输入电源 Power Supply

85~264VAC ,

47~63Hz , 120 W

85~264VAC ,

47~63Hz , 200W

ELVE-32G迷你梯度基因扩增仪

LABGIC-ELVE-32G迷你梯度基因扩增仪