Protein A Sepharose 4FF 产品使用说明书

发表于2024年4月22日由上海金畔生物科技有限公司

Protein A Sepharose 4FF 产品使用说明书

——高IgG结合特异性高流速低蛋白A脱落

产品特点

特点	结合特异性强，基团脱落少	颗粒大小	50-160 μm
基质	4%的交联琼脂糖凝胶	推荐流速	50-300cm/h
配基	重组protein A	使用温度	常温
配基密度	6mg重组蛋白A/ml	pH范围	3-10
动态吸附载量	60mg人IgG/ml	保存温度	+4~8℃
蛋白A残留	小于3ng蛋白A/mg IgG	保存液体	20%乙醇

Protein A Sepharose 4FF ，上海金畔生物专业代理，：

产品介绍

Protein A sepharose介质是经过我们公司长期开发，在公司生产的native protein A 的基础上精致而成。通过Protein A Sepharose 4FF，可分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。本产品相对同类产品具有如下优势：

1、偶联条件温和，更好的保持了protein A的构象，所以抗体载量高，同体积的介质，相同规模的纯化设备，相同体积介质，抗体的产量明显高于用同类产品，大大的降低了抗体药物生产成本。

2、非常稳定，不易脱落，用其生产的抗体中protein A的残留比同类产品的更少。

3、公司的Protein A 以及Protein A sepharose的生产都是在清洁车间生产，符合制药企业生产需求。

4、公司生产的Protein A sepharose使用寿命长，常规条件下能够重复使用100次以上。

使用说明

（1）缓冲液的准备：

平衡缓冲液：纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的，部分参照如下：抗体种类	平衡缓冲液成分
人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b	10mM 磷酸盐缓冲液，150mM NaCl，pH 7.21
人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3	50mM Tris-Cl，3M NaCl，pH7.8-8.5

（2）样品的准备

样品上柱前先用平衡缓冲液稀释5至10倍，从而确保样品液的成分和pH与平衡缓冲液相近。如果上样体积过大，可以采取调节上样液pH和盐浓度的方式，使样品的pH和电导与平衡液接近，使样品中的缓冲体系与平衡缓冲液相同。

细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰，去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。

样品在上柱前也需0.45μm微孔滤膜过滤。

（3）操作步骤

a）填料装柱后，用纯水流洗至少3个柱管体积，以冲掉乙醇，再用平衡缓冲液流洗至少5个柱管体积来平衡柱子。

b）将样品上柱，上样流速控制在60cm/h。

c）平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积，把UV洗至基线。

d）洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰，立即用中和缓冲液中和到中性。

e）再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于+4-8℃保存。

操作中如果没有在线的蛋白监测系统，洗脱峰时可以分阶段

收集，zui后根据测定结果合并活性部分。

Protein A Sepharose 4FF 说明书

发表于2024年4月16日由上海金畔生物科技有限公司

Protein A Sepharose 4FF，Protein A Sepharose 4FF说明书

产品介绍

Protein A sepharose介质是经过我们公司长期开发，在公司生产的native protein A 的基础上精致而成。通过Protein A Sepharose 4FF，可分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。

本产品相对同类产品具有如下优势：

2、非常稳定，不易脱落，用其生产的抗体中protein A的残留比同类产品的更少。

3、公司的Protein A 以及Protein A sepharose的生产都是在清洁车间生产，符合制药企业生产需求。

4、公司生产的Protein A sepharose使用寿命长，常规条件下能够重复使用100次以上。

FormuMax F70101F-N 说明书

发表于2024年4月12日由上海金畔生物科技有限公司

世界*实验材料供应商 FormuMax上海金畔生物为其中国代理， FormuMax在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品，的服务，FormuMax就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

FormuMax中国代理, FormuMax上海代理， FormuMax北京代理，FormuMax广东代理， FormuMax江苏代理FormuMax湖北代理,FormuMax天津,FormuMax黑龙江代理,FormuMax内蒙古代理,FormuMax吉林代理,FormuMax福建代理,FormuMax江苏代理, FormuMax浙江代理, FormuMax四川代理,

FormuMax Scientific是一家位于加州北部硅谷中心提供脂质体给药的专业公司，以满足制药、生物技术、化妆品及营养企业日益增长的研发需求。FormuMax Scientific力求成为脂质体给药领域的，特别是在配制用脂质体及其他特定纳米包埋传输的复杂药物领域。在药物传输企业，FormuMax Scientific拥有由世界*专家的技术团队，并致力于脂质体及其它以磷脂为基础的先进药物传输技术。FormuMax 是目前*一家在线提供大量预制脂质体试剂的公司，可为大学、研究所、研究中心及各种研发企业提供的药物传输试剂。同时该公司还可为基础研究、配方可行性、定制配方制备、配方鉴定及分析提供技术服务。

DiI Fluorescent Control Liposomes (Neutral)

DiI荧光控制脂质体（中性）

货号：F70101F-N

规格：2 mL、10 mL

描述

DiI-Labeled Fluorescent Control Liposomes for Clophosome^®(Neutral)

The fluorescent control liposomes contain the lipophilic dye Dil incorporated in the bilayers. It has comparable physical and chemical attributes as for the Clophosome^®except no active is encapsulated inside. It is used for tracking the cellular uptake of the liposomes by common methods like confocal, FACS, etc.

Specifications

Lipid composition: phosphatidylcholine and cholesterol

Dye: 0.15 mM (0.14mg/mL) (note: the amount of dye has increased from 0.07mg/mL to 0.14mg/mL)

Stability: 6 months for unopened vials

'DiI'; DiIC18(3) (Invitrogen V22889) is a lipophilic membrane dye. It is weakly fluorescent until incorporated into liposome membranes. This orange—red-fluorescent dye, which is spectrally similar to tetramethylrhodamine, is often used as a long-term tracer for neuronal and other cells.

Ex/Em: 550nm/570nm

CAS Name/Number: 3H-Indolium, 2-[3-(1,3-dihydro-3,3-dimethyl-1-octadecyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl]-3,3-dimethyl 1-octadecyl-, perchlorate/ 41085-99-8

二甲苯青FF 核酸电泳示踪染料|Xylene cyanol FF|CAS 2650-17-1

发表于2024年3月17日由上海金畔生物科技有限公司

二甲苯青FF 核酸电泳示踪染料|Xylene cyanol FF|CAS 2650-17-1

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

二甲苯青FF，一种核酸电泳的示踪染料，可与溴酚蓝按照一定比例配制成loading buffer用于琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳。

产品性质

英文别名（English Synonym）	Acid blue 147, Cyanol FF, XC
CAS号（CAS NO.）	2650-17-1
分子式（Formula）	C₂₅H₂₇N₂NaO₆S₂
分子量（Molecular Weight）	538.6 g/mol
外观（Appearance）	粉末
熔点（Melting Point）	295℃
纯度（Purity）	≥75%
溶解性（Solubility）	水
结构式（Structure）

运输和保存方法

室温运输和保存即可，有效期3年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

相关产品

产品名称	货号	规格
Bromothymol blue 溴百里酚蓝	60501JP08/25	5g/25g
Bromophenol blue 溴酚蓝	60503JP08/25	5g/25g
Alizarin red S 茜素红	60504JP25	25g
Crystal Violet 结晶紫	60505JP25	25g
Phenol Red, ACS Grade 酚红	60526JP08/25	5g/25g

HB181121

二甲苯青FF，一种核酸电泳的示踪染料，可与溴酚蓝按照一定比例配制成loading buffer用于琼脂糖和聚丙烯酰胺电泳。

产品性质

英文别名（English Synonym）	Acid blue 147, Cyanol FF, XC
CAS号（CAS NO.）	2650-17-1
分子式（Formula）	C₂₅H₂₇N₂NaO₆S₂
分子量（Molecular Weight）	538.6 g/mol
外观（Appearance）	粉末
熔点（Melting Point）	295℃
纯度（Purity）	≥75%
溶解性（Solubility）	水
结构式（Structure）

运输和保存方法

室温运输和保存即可，有效期3年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

相关产品

产品名称	货号	规格
Bromothymol blue 溴百里酚蓝	60501JP08/25	5g/25g
Bromophenol blue 溴酚蓝	60503JP08/25	5g/25g
Alizarin red S 茜素红	60504JP25	25g
Crystal Violet 结晶紫	60505JP25	25g
Phenol Red, ACS Grade 酚红	60526JP08/25	5g/25g

HB181121

Q:与溴酚蓝按照一定比例配制成loading buffer，比例是多少？

A：比例是 1:1.

[1] Li L, Peng W, Tian X. Protective Effects and Mechanisms of MicroRNA-182 on Oxidative Stress in RHiN. Open Life Sci. 2019;14:400-409. Published 2019 Aug 28. doi:10.1515/biol-2019-0045(IF:0.504)

丁基琼脂糖4FF|Butyl Agarose 4FF弱疏水层析介质HIC

发表于2024年3月13日由上海金畔生物科技有限公司

丁基琼脂糖4FF|Butyl Agarose 4FF弱疏水层析介质HIC

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

疏水作用层析（hydrophobic interaction chromatography，HIC）是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法，盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜，促进疏水基团和配基之间的结合。

本品Butyl Agarose 4FF是在 4%的琼脂糖基架上偶联丁基脂肪链而成的，配基疏水性弱，优化后的配基密度适合疏水性较强的生物分子的分离纯化。

产品性质

基质	4%的高度交联的琼脂糖
粒径	45–165 µm
功能基团	-CH2-CH2-CH2-CH3（丁基）
载量	7 mg lgG 或 26 mg HSA/mL
建议流速	300 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

1）将介质装入合适的层析柱，用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液，然后用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。

2）将样品加到平衡好的Butyl Agarose 4FF中，收集流出液。

3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

5）依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被细菌污染。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

疏水层析填料可以重复使用，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

HB220815

本品Butyl Agarose 4FF是在 4%的琼脂糖基架上偶联丁基脂肪链而成的，配基疏水性弱，优化后的配基密度适合疏水性较强的生物分子的分离纯化。

产品性质

基质	4%的高度交联的琼脂糖
粒径	45–165 µm
功能基团	-CH2-CH2-CH2-CH3（丁基）
载量	7 mg lgG 或 26 mg HSA/mL
建议流速	300 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

2）将样品加到平衡好的Butyl Agarose 4FF中，收集流出液。

3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

HB220815

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丁基琼脂糖4FF弱疏水层析预装柱5mL Butyl 4FF

发表于2024年3月13日由上海金畔生物科技有限公司

丁基琼脂糖4FF弱疏水层析预装柱5mL Butyl 4FF

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Butyl Agarose 4FF是在 4%的琼脂糖基架上偶联丁基脂肪链而成的，配基疏水性弱，优化后的配基密度适合疏水性较强的生物分子的分离纯化。

本品Butyl 4FF Chromatography Column是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mL的Butyl Agarose 4FF填料的中压预装柱，该预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA等，方便客户操作。

产品性质

基质	4%的高度交联的琼脂糖
粒径	45–165 µm
功能基团	-CH2-CH2-CH2-CH3（丁基）
载量	7 mg lgG 或 26 mg HSA/mL
建议流速	300 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇
柱子尺寸	1.6×2.5 cm（5 mL）

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

1）将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。

2）用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液，然后用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。

3）将样品加到平衡好的预装柱中，收集流出液。

4）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

5）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

6）依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4度保存，防止填料被细菌污染。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

HB220815

Butyl Agarose 4FF是在 4%的琼脂糖基架上偶联丁基脂肪链而成的，配基疏水性弱，优化后的配基密度适合疏水性较强的生物分子的分离纯化。

产品性质

基质	4%的高度交联的琼脂糖
粒径	45–165 µm
功能基团	-CH2-CH2-CH2-CH3（丁基）
载量	7 mg lgG 或 26 mg HSA/mL
建议流速	300 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇
柱子尺寸	1.6×2.5 cm（5 mL）

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

1）将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。

3）将样品加到平衡好的预装柱中，收集流出液。

4）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

5）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

HB220815

暂无内容

苯基琼脂糖FF(HS)|Phenyl(HS)强疏水层析介质

发表于2024年3月13日由上海金畔生物科技有限公司

苯基琼脂糖FF(HS)|Phenyl(HS)强疏水层析介质

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

本品Phenyl Agarose FF(HS)是一种高取代的芳香族疏水层析介质，它是在 6%的琼脂糖基架上偶联苯基而成的，结合载量较高，配基疏水性强，适合疏水性较弱的生物分子的分离纯化。

产品性质

基质	6%的高度交联的琼脂糖
粒径	45-165 µm
功能基团	苯基
载量	30 mg lgG 或 36 mg HSA/mL
建议流速	300-600 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

2）将样品加到平衡好的Phenyl Agarose FF(HS)中，收集流出液。

3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

HB220815

产品性质

基质	6%的高度交联的琼脂糖
粒径	45-165 µm
功能基团	苯基
载量	30 mg lgG 或 36 mg HSA/mL
建议流速	300-600 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

2）将样品加到平衡好的Phenyl Agarose FF(HS)中，收集流出液。

3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

HB220815

暂无内容

苯基琼脂糖FF(HS)强疏水层析预装柱5mL Phenyl FF(HS)

发表于2024年3月12日由上海金畔生物科技有限公司

苯基琼脂糖FF(HS)强疏水层析预装柱5mL Phenyl FF(HS)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Phenyl Agarose FF(HS)是一种高取代的芳香族疏水层析介质，它是在 6%的琼脂糖基架上偶联苯基而成的，结合载量较高，配基疏水性强，适合疏水性较弱的生物分子的分离纯化。

本品Phenyl FF(HS) Chromatography Column, 5 mL是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mL的Phenyl Agarose FF(HS)填料的中压预装柱，该预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA等，方便客户操作。

产品性质

基质	6%的高度交联的琼脂糖
粒径	45–165 µm
功能基团	苯基
载量	30 mg lgG 或 36 mg HSA/mL
建议流速	300-600 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇
柱子尺寸	1.6×2.5 cm（5 mL）

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

1）将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。

3）将样品加到平衡好的预装柱中，收集流出液。

4）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

5）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

HB220815

产品性质

基质	6%的高度交联的琼脂糖
粒径	45–165 µm
功能基团	苯基
载量	30 mg lgG 或 36 mg HSA/mL
建议流速	300-600 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇
柱子尺寸	1.6×2.5 cm（5 mL）

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

1）将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。

3）将样品加到平衡好的预装柱中，收集流出液。

4）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

5）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

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苯基琼脂糖FF(LS)|Phenyl(LS)强疏水层析介质

发表于2024年3月12日由上海金畔生物科技有限公司

苯基琼脂糖FF(LS)|Phenyl(LS)强疏水层析介质

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

本品Phenyl Agarose FF(LS)是一种高取代的芳香族疏水层析介质，它是在 6%的琼脂糖基架上偶联苯基而成的，结合载量相对Phenyl Agarose FF(HS)较低，配基疏水性强，适合疏水性较弱的生物分子的分离纯化。

产品性质

基质	6%的高度交联的琼脂糖
粒径	45–165 µm
功能基团	苯基
载量	10 mg lgG 或 24 mg HSA/mL
建议流速	300-600 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

2）将样品加到平衡好的Phenyl Agarose FF(LS)中，收集流出液。

3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

HB220815

产品性质

基质	6%的高度交联的琼脂糖
粒径	45–165 µm
功能基团	苯基
载量	10 mg lgG 或 24 mg HSA/mL
建议流速	300-600 cm/h
pH范围	3-13
储存缓冲液	20%乙醇

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存，有效期4年。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）填料使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

使用方法

1 缓冲液的准备

1）所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2）结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液，如20 mM PB，1.5 M (NH₄)₂SO₄，pH7.0。

3）洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液，如50 mM PB，pH7.0，对于较难洗脱的物质可以采用纯水，或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注：需要根据后续的实验结果（目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等）对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致。

3 样品纯化

2）将样品加到平衡好的Phenyl Agarose FF(LS)中，收集流出液。

3）用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

4）使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer，收集洗脱液，即目的蛋白组分。

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别用2-3倍柱体积的30%异丙醇（70%乙醇）、3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱，然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2）对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除：先用2~3个柱体积1M NaOH清洗，然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3）脂蛋白和脂类物质的去除：先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4）也可将上述两种清洗条件结合进行清洗，即用含有1M NaOH的30%异丙醇溶液清洗。

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暂无内容

Q 6FF强阴离子交换预装柱1mL

发表于2024年3月12日由上海金畔生物科技有限公司

Q 6FF强阴离子交换预装柱1mL

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

Q强阴离子交换层析填料FF以高度交联的6%琼脂糖为基架，可耐受较高的流速及更高的化学稳定性，适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-N⁺(CH₃)₃。

本品Q强阴离子交换预装柱是Q强阴离子交换层析填料FF的中压预装柱，规格为1 mL，该预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA等，方便客户操作。

产品性质

基质	高度交联的6%琼脂糖微球
粒径	45-165 µm
离子交换类型	强阴离子
载量	～0.18-0.25 mmol Cl^–/mL 基质
耐压	0.3 MPa
建议流速	400-700 cm/h
pH范围	2-12（长期）/ 2-14（短期）
储存缓冲液	20%乙醇
柱子尺寸	0.7×2.5 cm（1 mL）

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存，有效期2年。

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐，平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH（通常低于目的物等电点 1 个 pH 单位）缓冲液以有利于目的物的结合，同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐（如 1M NaCl）的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1：阴离子交换缓冲液

pH 范围	缓冲盐	浓度（mM）	平衡离子	pKa(25℃)
4.3-5.3	N-Methylpiperazine	20	Cl^–	4.75
4.8-5.8	Piperazine	20	Cl^–或HCOO^–	5.33
5.5-6.5	L-Histidine	20	Cl^–	6.04
6.0-7.0	bis-Tris	20	Cl^–	6.48
6.2-7.2	bis-Tris propane	20	Cl^–	6.65
7.3-8.3	Triethanolamine	20	Cl^–或CH₃COO^–	7.76
7.6-8.6	Tris	20	Cl^–	8.07
8.0-9.0	N-Methyl-diethanolamine	20	SO₄^2-	8.52
8.0-9.0	N-Methyl-diethanolamine	50	Cl^–或CH₃COO^–	8.52
8.4-9.4	Diethanolamine	50	Cl^–	8.88
8.4-9.4	Propane 1,3-Diamino	20	Cl^–	8.88
8.6-9.6	bis-Tris propane	20	Cl^–	9.10
9.0-10.0	Ethanolamine	20	Cl^–	9.50
9.2-10.2	Piperazine	20	Cl^–	9.73
10.0-11.0	Propane 1,3-Diamino	20	Cl^–	10.55
10.6-11.6	Piperidine	20	Cl^–	11.12

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1）将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。

2）用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3）使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4）利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压，使得进样器更难使用。

5）用洗杂Buffer冲洗柱子，直到紫外吸收达到一个稳定的基线（一般至少10-15个柱体积）。

6）用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中，通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度，例如20倍柱体积或更多，来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗，然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP（Cleaning In Place）清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生，但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集，往往造成流速和结合载量都下降，这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1）去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3）去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）为了得到良好的分离效果，避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3）层析柱可以放在层析冷柜中使用，但是需要适当降低流速。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5）本产品仅作科研用途！

附表问题及解决方案

问题	可能原因	推荐解决方案
柱子反压过高	填料被堵塞	按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。
柱子反压过高	填料被堵塞	样品中含有微小的固体颗粒，建议使用前用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。
洗脱样品较杂	填料重复多次使用	按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。
洗脱样品较杂	平衡不充分	增加平衡液体积，确保填料充分平衡/洗杂。

产品性质

基质	高度交联的6%琼脂糖微球
粒径	45-165 µm
离子交换类型	强阴离子
载量	～0.18-0.25 mmol Cl^–/mL 基质
耐压	0.3 MPa
建议流速	400-700 cm/h
pH范围	2-12（长期）/ 2-14（短期）
储存缓冲液	20%乙醇
柱子尺寸	0.7×2.5 cm（1 mL）

运输和保存方法

冰袋运输。2-8℃保存，有效期2年。

使用方法

1 缓冲液的准备

表1：阴离子交换缓冲液

pH 范围	缓冲盐	浓度（mM）	平衡离子	pKa(25℃)
4.3-5.3	N-Methylpiperazine	20	Cl^–	4.75
4.8-5.8	Piperazine	20	Cl^–或HCOO^–	5.33
5.5-6.5	L-Histidine	20	Cl^–	6.04
6.0-7.0	bis-Tris	20	Cl^–	6.48
6.2-7.2	bis-Tris propane	20	Cl^–	6.65
7.3-8.3	Triethanolamine	20	Cl^–或CH₃COO^–	7.76
7.6-8.6	Tris	20	Cl^–	8.07
8.0-9.0	N-Methyl-diethanolamine	20	SO₄^2-	8.52
8.0-9.0	N-Methyl-diethanolamine	50	Cl^–或CH₃COO^–	8.52
8.4-9.4	Diethanolamine	50	Cl^–	8.88
8.4-9.4	Propane 1,3-Diamino	20	Cl^–	8.88
8.6-9.6	bis-Tris propane	20	Cl^–	9.10
9.0-10.0	Ethanolamine	20	Cl^–	9.50
9.2-10.2	Piperazine	20	Cl^–	9.73
10.0-11.0	Propane 1,3-Diamino	20	Cl^–	10.55
10.6-11.6	Piperidine	20	Cl^–	11.12

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1）将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子，将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口，将预装柱接到色谱系统中，并旋紧。

2）用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3）使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4）利用泵或注射器上样。

5）用洗杂Buffer冲洗柱子，直到紫外吸收达到一个稳定的基线（一般至少10-15个柱体积）。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗，然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP（Cleaning In Place）清洗

1）去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3）去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

注意事项

1）请勿冷冻保存本产品。

2）为了得到良好的分离效果，避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3）层析柱可以放在层析冷柜中使用，但是需要适当降低流速。

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5）本产品仅作科研用途！

附表问题及解决方案

问题	可能原因	推荐解决方案
柱子反压过高	填料被堵塞	按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。
柱子反压过高	填料被堵塞	样品中含有微小的固体颗粒，建议使用前用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。
洗脱样品较杂	填料重复多次使用	按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。
洗脱样品较杂	平衡不充分	增加平衡液体积，确保填料充分平衡/洗杂。

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