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重组猪源RNase抑制剂说明书

发表于由

重组猪源RNase抑制剂说明书

产品详情

货号

规格

价格

78BAB10003-100uL

100uL(4KU)

￥200.00

78BAB10003-1ml

1ml (40KU)

￥1600.00

78BAB10003-50ml

50ml (2MU)

￥50000.00

产品描述

本产品是以大肠杆菌中进行表达，并通过亲和层析纯化的重组猪源RNase抑制剂，该蛋白特征与猪肝和人胎盘来源此类酶相似，可替代天然提取 RNase Inhibitor的应用。本产品与RNase A形成1： 1复合体，抑制RNase活性。该反应是可逆的，通过尿素及巯基类试剂能够解离复合体，使RNase复性而抑制剂不可逆失活。本产品与其它竞争性抑制剂（核酸类，无机磷酸类）不同，可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去，但不能抑制逆转录酶的RNase H的活性。使用时可直接加入含有RNA的反应液中用于cDNA第一链合成、体外转录和体外翻译等实验。

产品特点

·     cDNA合成

·      体外转录

·      体外翻译

·      1-Step RT-qPCR

产品组分

缓冲液成分：20 mM HEPES-KOH(pH 7.6)，50mM KCl，8mM DTT，50% (v/v) glycerol。

使用方法

使用方法

温馨提示：需要用无RNA酶的PCR管中配制RNA/引物预混液

1 cDNA合成

（1）在无RNA酶的PCR管中配制RNA/引物预混液

组分

反应体积（10ul）

Oligo(dT)20

（或Random primer）

（或基因特异引物）

25pmoles

(25pmoles)

(5pmoles)

10mM dNTPs

2µL

模板RNA

2pg-5µg

DNase/Rnase Free Water

10ul

（2）65℃加热5min，立即置于冰上

组分

反应体积（10ul）

RNA引物预混液

10ul

5x RT Buffer

4µL

Jinpan Reverse Transcritase

1ul

RNase inhibitor(40U/µL)

1ul

100mM DTT

2ul

DNase/Rnase Free Water

补足20ul

（3）轻轻混匀，按如下反应条件设置

逆转录反应条件

1

42℃

20-60min

2

99℃

5min

备注：逆转录温度可在42-60℃之间调整，反应时间建议在20-60min内调整

 

（4）得到的cDNA溶液可以直接用于第二链cDNA合成及后续PCR反应。

优化参考方法

优化参数

参考范围

逆转录

50-60℃ 5-15min

预变性温度时间

95-98℃ 10sec-5min

变性温度

95-98℃ 3sec-10sec

延伸/退火温度

60-65℃ 5sec-30sec

注意事项

1. 本产品在PH7〜8时表现最佳抑制RNase活性。

2. 本产品发挥活性作用至少添加1 mM的DTT。

3. 本产品不抑制RNase H活性及逆转录酶活性。

运输及保存方法

-20℃可保存12个月。

重组猪源高亲和力RNase抑制剂 UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

发表于由

重组猪源高亲和力RNase抑制剂 UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)是在大肠杆菌中表达纯化的重组猪源RNase抑制剂，通过与RNase以非共价键结合形成复合体，造成RNase失活，能够广泛抑制各种类型RNase (RNase A, B, C)。经RT-PCR、RT-qPCR检验，本产品能与Hifair® Ultra Reverse Transcriptase (200 U/μL) (Cat#14604ES)及各种DNA Polymerase兼容。UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)经过金畔生物UCF.ME®超低残留工艺处理，宿主残留更低，适合对背景菌要求更为严格的应用场景，如病原微生物检测等。

 

产品信息

货号

14675ES05 / 14675ES20 / 14675ES60

规格

2 KU / 20 KU / 100 KU

活性定义

抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1 U。RNase A活性通过水解Cyclic 2', 3'-CMP生成3'-CMP定量求得。

 

组分信息

产品名称

14675ES05

14675ES20

14675ES60

UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

50 μL

500 μL

2.5 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

  1. 在RNase free离心管中配制如下混合液：

组分

体积 (μL)

RNase-free ddH2O

to 20

5×Hifair® Ultra Reverse Transcriptase Reaction Buffer*

4

Oligo(dT)18 (50 μM)

1

dNTP Mix (10 mM each)

1

UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

0.5-1

Hifair® Ultra Reverse Transcriptase (200 U/μL)*

1

模板RNA

Total RNA:1 ng-5 μg

*根据具体的实验应用，可购买14604ES搭配使用。

  1. 逆转录程序设置：

温度

时间

50℃*

15 min

85℃**

5 min

*逆转录温度：当搭配14604ES使用时，推荐使用50℃；对于高GC含量模板或者复杂模板，可将逆转录温度提高到55℃-60℃；

**85℃加热5 min，目的是使逆转录酶失活。

3. 逆转录产物可立即用于后续PCR或qPCR反应，可于-25~-15℃保存短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融产物。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

重组猪源高亲和力RNase抑制剂 UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

暂无内容

重组猪源高亲和力RNase抑制剂 UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

暂无内容

 

UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)是在大肠杆菌中表达纯化的重组猪源RNase抑制剂，通过与RNase以非共价键结合形成复合体，造成RNase失活，能够广泛抑制各种类型RNase (RNase A, B, C)。经RT-PCR、RT-qPCR检验，本产品能与Hifair® Ultra Reverse Transcriptase (200 U/μL) (Cat#14604ES)及各种DNA Polymerase兼容。UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)经过金畔生物UCF.ME®超低残留工艺处理，宿主残留更低，适合对背景菌要求更为严格的应用场景，如病原微生物检测等。

 

产品信息

货号

14675ES05 / 14675ES20 / 14675ES60

规格

2 KU / 20 KU / 100 KU

活性定义

抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1 U。RNase A活性通过水解Cyclic 2', 3'-CMP生成3'-CMP定量求得。

 

组分信息

产品名称

14675ES05

14675ES20

14675ES60

UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

50 μL

500 μL

2.5 mL

 

储存条件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用说明

  1. 在RNase free离心管中配制如下混合液：

组分

体积 (μL)

RNase-free ddH2O

to 20

5×Hifair® Ultra Reverse Transcriptase Reaction Buffer*

4

Oligo(dT)18 (50 μM)

1

dNTP Mix (10 mM each)

1

UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

0.5-1

Hifair® Ultra Reverse Transcriptase (200 U/μL)*

1

模板RNA

Total RNA:1 ng-5 μg

*根据具体的实验应用，可购买14604ES搭配使用。

  1. 逆转录程序设置：

温度

时间

50℃*

15 min

85℃**

5 min

*逆转录温度：当搭配14604ES使用时，推荐使用50℃；对于高GC含量模板或者复杂模板，可将逆转录温度提高到55℃-60℃；

**85℃加热5 min，目的是使逆转录酶失活。

3. 逆转录产物可立即用于后续PCR或qPCR反应，可于-25~-15℃保存短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融产物。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

重组猪源高亲和力RNase抑制剂 UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

暂无内容

重组猪源高亲和力RNase抑制剂 UCF.ME® High Affinity RNase Inhibitor (40 U/μL)

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