SP HP强阳离子交换预装柱5mL

SP HP强阳离子交换预装柱5mL

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

SP强阳离子交换层析填料HP以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-SO3

本品SP强阳离子交换预装柱是SP强阳离子交换层析填料HP的中压预装柱,规格为5 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

24-45 µm

离子交换类型

强阳离子

载量

~0.15-0.20 mmol H+/mL 基质

耐压

0.3 MPa

推荐使用流速

60~150cm/h

pH范围

4-13(长期)/ 3-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇,0.2M NaAc

柱子尺寸

1.6×2.5 cm(5 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点1个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阳离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或 Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或 Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或 Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或 Li+

5.76

5.6-6.6

MES

50

Na+或 Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPES

50

Na+或 Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Cl

8.33

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

HB220708

 

SP HP强阳离子交换预装柱5mL

暂无内容

SP HP强阳离子交换预装柱5mL

暂无内容

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

SP强阳离子交换层析填料HP以高度交联的6%琼脂糖为基架,可耐受较高的流速及更高的化学稳定性,适合实验室及工业大规模纯化。本品带电基团-SO3

本品SP强阳离子交换预装柱是SP强阳离子交换层析填料HP的中压预装柱,规格为5 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

粒径

24-45 µm

离子交换类型

强阳离子

载量

~0.15-0.20 mmol H+/mL 基质

耐压

0.3 MPa

推荐使用流速

60~150cm/h

pH范围

4-13(长期)/ 3-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇,0.2M NaAc

柱子尺寸

1.6×2.5 cm(5 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点1个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阳离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或 Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或 Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或 Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或 Li+

5.76

5.6-6.6

MES

50

Na+或 Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPES

50

Na+或 Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Cl

8.33

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

HB220708

 

SP HP强阳离子交换预装柱5mL

暂无内容

SP HP强阳离子交换预装柱5mL

暂无内容

Magnify Q HP高流速高分辨率Q强阴离子交换层析填料

Magnify Q HP高流速高分辨率Q强阴离子交换层析填料

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

本品Magnify Q HP是一种强阴离子交换层析介质,以表面接枝了葡聚糖的高刚性琼脂糖为基架,具有高流速状态下仍具有高的动态结合能力的优点,可以很好的提高工业下游工艺的生产效率。且本品平均粒径在40 μm左右,具有更高的比表面积,更高的载量和分辨率。本品离子交换基团-N+(CH3)3

 

产品性质

基质

高刚性琼脂糖微球

平均粒径

40 µm

离子交换类型

强阴离子

载量

0.20-0.24 mmol Cl/mL 介质

推荐流速

300 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存,有效期5年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,下表为常用的阴离子交换缓冲液。

表1:阴离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl或HCOO

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl或CH3COO

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl或CH3COO

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl

11.12

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的Magnify Q HP中(保证目的蛋白与填料充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

4 填料清洗

离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

树脂重复多次使用

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。

HB220629

Magnify Q HP高流速高分辨率Q强阴离子交换层析填料

暂无内容

Magnify Q HP高流速高分辨率Q强阴离子交换层析填料

暂无内容

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

本品Magnify Q HP是一种强阴离子交换层析介质,以表面接枝了葡聚糖的高刚性琼脂糖为基架,具有高流速状态下仍具有高的动态结合能力的优点,可以很好的提高工业下游工艺的生产效率。且本品平均粒径在40 μm左右,具有更高的比表面积,更高的载量和分辨率。本品离子交换基团-N+(CH3)3

 

产品性质

基质

高刚性琼脂糖微球

平均粒径

40 µm

离子交换类型

强阴离子

载量

0.20-0.24 mmol Cl/mL 介质

推荐流速

300 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存,有效期5年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,下表为常用的阴离子交换缓冲液。

表1:阴离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl或HCOO

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl或CH3COO

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl或CH3COO

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl

11.12

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的Magnify Q HP中(保证目的蛋白与填料充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

4 填料清洗

离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

树脂重复多次使用

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。

HB220629

Magnify Q HP高流速高分辨率Q强阴离子交换层析填料

暂无内容

Magnify Q HP高流速高分辨率Q强阴离子交换层析填料

暂无内容

Magnify Q HP强阴离子交换预装柱5mL

Magnify Q HP强阴离子交换预装柱5mL

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

Magnify Q是一种强阴离子交换层析介质,以表面接枝了葡聚糖的高刚性琼脂糖为基架,具有高流速状态下仍具有高的动态结合能力的优点,可以很好的提高工业下游工艺的生产效率。本品离子交换基团-N+(CH3)3

本品Magnify Q强阴离子交换预装柱是Magnify Q强阴离子交换层析填料的中压预装柱,规格为5 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高刚性琼脂糖微球

平均粒径

40 µm

离子交换类型

强阴离子

载量

0.20-0.24 mmol Cl/mL 介质

耐压

0.3 MPa

推荐使用流速

300 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm(5 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-30℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点 1 个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阴离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl或HCOO

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl或CH3COO

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl或CH3COO

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl

11.12

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

 

Magnify Q HP强阴离子交换预装柱5mL

暂无内容

Magnify Q HP强阴离子交换预装柱5mL

暂无内容

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

Magnify Q是一种强阴离子交换层析介质,以表面接枝了葡聚糖的高刚性琼脂糖为基架,具有高流速状态下仍具有高的动态结合能力的优点,可以很好的提高工业下游工艺的生产效率。本品离子交换基团-N+(CH3)3

本品Magnify Q强阴离子交换预装柱是Magnify Q强阴离子交换层析填料的中压预装柱,规格为5 mL,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。

 

产品性质

基质

高刚性琼脂糖微球

平均粒径

40 µm

离子交换类型

强阴离子

载量

0.20-0.24 mmol Cl/mL 介质

耐压

0.3 MPa

推荐使用流速

300 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm(5 mL)

 

运输和保存方法

冰袋运输。2-30℃保存,有效期2年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

应选择缓冲基团不与介质作用的缓冲盐,平衡缓冲液宜采用低盐和低 pH(通常低于目的物等电点 1 个 pH 单位)缓冲液以有利于目的物的结合,同时需要考虑目的物在缓冲液中的稳定性。洗脱缓冲液通常为在平衡缓冲液中加入高浓度盐(如 1M NaCl)的缓冲液或高 pH 洗脱。所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

表1:阴离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

4.3-5.3

N-Methylpiperazine

20

Cl

4.75

4.8-5.8

Piperazine

20

Cl或HCOO

5.33

5.5-6.5

L-Histidine

20

Cl

6.04

6.0-7.0

bis-Tris

20

Cl

6.48

6.2-7.2

bis-Tris propane

20

Cl

6.65

7.3-8.3

Triethanolamine

20

Cl或CH3COO

7.76

7.6-8.6

Tris

20

Cl

8.07

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

20

SO42-

8.52

8.0-9.0

N-Methyl-diethanolamine

50

Cl或CH3COO

8.52

8.4-9.4

Diethanolamine

50

Cl

8.88

8.4-9.4

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

8.88

8.6-9.6

bis-Tris propane

20

Cl

9.10

9.0-10.0

Ethanolamine

20

Cl

9.50

9.2-10.2

Piperazine

20

Cl

9.73

10.0-11.0

Propane 1,3-Diamino

20

Cl

10.55

10.6-11.6

Piperidine

20

Cl

11.12

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)用3-5倍柱体积的去离子水冲洗出存储缓冲液。

3)使用至少5倍柱床体积的结合Buffer平衡色谱柱。

4)利用泵或注射器上样。

【注】样品的粘度增加使得即使上样体积很少也会导致层析柱很大的反压。上样量不要超过柱子的结合能力。大量的样品体积也可能造成很大的反压,使得进样器更难使用。

5)用洗杂Buffer冲洗柱子,直到紫外吸收达到一个稳定的基线(一般至少10-15个柱体积)。

6)用洗脱Buffer采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中,通常5倍柱体积洗脱液就足够了。可以用一个小的梯度,例如20倍柱体积或更多,来分离不同结合强度的蛋白质。

5 填料清洗

离子交换填料每次使用后可以用1M NaCl甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换填料可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对填料进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1 M NaOH溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2 M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)为了得到良好的分离效果,避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

3)层析柱可以放在层析冷柜中使用,但是需要适当降低流速。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45   µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

填料重复多次使用

按照【填料清洗】部分对填料进行清洗或更换新填料。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保填料充分平衡/洗杂。

 

 

Magnify Q HP强阴离子交换预装柱5mL

暂无内容

Magnify Q HP强阴离子交换预装柱5mL

暂无内容

Magnify SP HP高流速高分辨率SP强阳离子交换层析填料

Magnify SP HP高流速高分辨率SP强阳离子交换层析填料

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

本品Magnify SP HP是一种强阳离子交换层析介质,以表面接枝了葡聚糖的高刚性琼脂糖为基架,具有高流速状态下仍具有高的动态结合能力的优点,可以很好的提高工业下游工艺的生产效率。且本品平均粒径在40 μm左右,具有更高的比表面积,更高的载量和分辨率。本品离子交换基团-SO3

 

产品性质

基质

高刚性琼脂糖微球

平均粒径

40 µm

离子交换类型

强阳离子

载量

0.20-0.24 mmol H+/mL 介质

流速

300 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇,0.2M醋酸钠

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存,有效期5年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。下表为常用的阳离子交换缓冲液。

表1:阳离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或 Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或 Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或 Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或 Li+

5.76

5.6-6.6

MES

50

Na+或 Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPES

50

Na+或 Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Cl

8.33

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的Magnify SP HP中(保证目的蛋白与填料充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

4 填料清洗

离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22µm或0.45µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

树脂重复多次使用

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。

HB220629

Magnify SP HP高流速高分辨率SP强阳离子交换层析填料

暂无内容

Magnify SP HP高流速高分辨率SP强阳离子交换层析填料

暂无内容

 

离子交换主要包括强阳离子交换、弱阳离子交换、强阴离子交换和弱阴离子交换4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

本品Magnify SP HP是一种强阳离子交换层析介质,以表面接枝了葡聚糖的高刚性琼脂糖为基架,具有高流速状态下仍具有高的动态结合能力的优点,可以很好的提高工业下游工艺的生产效率。且本品平均粒径在40 μm左右,具有更高的比表面积,更高的载量和分辨率。本品离子交换基团-SO3

 

产品性质

基质

高刚性琼脂糖微球

平均粒径

40 µm

离子交换类型

强阳离子

载量

0.20-0.24 mmol H+/mL 介质

流速

300 cm/h

pH范围

2-12(长期)/ 2-14(短期)

储存缓冲液

20%乙醇,0.2M醋酸钠

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30℃保存,有效期5年。

 

使用方法

1 缓冲液的准备

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。下表为常用的阳离子交换缓冲液。

表1:阳离子交换缓冲液

pH 范围

缓冲盐

浓度(mM)

平衡离子

pKa(25℃)

1.4-2.4

Maleic acid

20

Na+

1.92

2.6-3.6

Methyl malonic acid

20

Na+或 Li+

3.07

2.6-3.6

Citric acid

20

Na+

3.13

3.3-4.3

Lactic acid

50

Na+

3.86

3.3-4.3

Formic acid

50

Na+或 Li+

3.75

3.7-4.7

Succinic acid

50

Na+

4.21

4.3-5.3

Acetic acid

50

Na+或 Li+

4.75

5.1-6.1

Succinic acid

50

Na+

5.64

5.2-6.2

Methyl malonic acid

50

Na+或 Li+

5.76

5.6-6.6

MES

50

Na+或 Li+

6.27

6.7-7.7

Phosphate

50

Na+

7.20

7.0-8.0

HEPES

50

Na+或 Li+

7.56

7.8-8.8

BICINE

50

Cl

8.33

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的Magnify SP HP中(保证目的蛋白与填料充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

4 填料清洗

离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton™ X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22µm或0.45µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

树脂重复多次使用

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。

HB220629

Magnify SP HP高流速高分辨率SP强阳离子交换层析填料

暂无内容

Magnify SP HP高流速高分辨率SP强阳离子交换层析填料

暂无内容

高分辨率丁基琼脂糖HP|Butyl Agarose HP弱疏水层析介质

高分辨率丁基琼脂糖HP|Butyl Agarose HP弱疏水层析介质

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Butyl Agarose HP疏水介质的基架为高度交联的琼脂糖,保留了天然多糖化合物极好的亲水性及孔结构,对生物大分子具有很好的相容性,Butyl Agarose HP的平均粒径为34μm,与Butyl Agarose FF相比具有较高的分辨效率,其表面含有疏水性配基,配基是丁基,特别适用于疏水性较强的生物分子的精细分离纯化。

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

2545 µm

功能基团

丁基

载量

8 mg lgG25 mg BSA/mL

建议流速

150 cm/h

pH工作范围

3-13

PH稳定性

2-14(短时间,在位清洗);4-13(长时间)

化学稳定性

常用的水相缓冲液;1 mol/L 氢氧化钠;8 mol/L 尿素;6 mol/L 盐酸胍 70% 乙醇

储存缓冲液

20%乙醇

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期4年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的Butyl Agarose HP中,收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

 

高分辨率丁基琼脂糖HP|Butyl Agarose HP弱疏水层析介质

暂无内容

高分辨率丁基琼脂糖HP|Butyl Agarose HP弱疏水层析介质

暂无内容

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Butyl Agarose HP疏水介质的基架为高度交联的琼脂糖,保留了天然多糖化合物极好的亲水性及孔结构,对生物大分子具有很好的相容性,Butyl Agarose HP的平均粒径为34μm,与Butyl Agarose FF相比具有较高的分辨效率,其表面含有疏水性配基,配基是丁基,特别适用于疏水性较强的生物分子的精细分离纯化。

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

2545 µm

功能基团

丁基

载量

8 mg lgG25 mg BSA/mL

建议流速

150 cm/h

pH工作范围

3-13

PH稳定性

2-14(短时间,在位清洗);4-13(长时间)

化学稳定性

常用的水相缓冲液;1 mol/L 氢氧化钠;8 mol/L 尿素;6 mol/L 盐酸胍 70% 乙醇

储存缓冲液

20%乙醇

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期4年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的Butyl Agarose HP中,收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

 

高分辨率丁基琼脂糖HP|Butyl Agarose HP弱疏水层析介质

暂无内容

高分辨率丁基琼脂糖HP|Butyl Agarose HP弱疏水层析介质

暂无内容

丁基琼脂糖HP|Butyl HP弱疏水层析预装柱5ml

丁基琼脂糖HP|Butyl HP弱疏水层析预装柱5ml

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Butyl Agarose HP疏水介质的基架为高度交联的琼脂糖,保留了天然多糖化合物极好的亲水性及孔结构,对生物大分子具有很好的相容性,Butyl Agarose HP的平均粒径为34μm,与Butyl Agarose FF相比具有较高的分辨效率,其表面含有疏水性配基,配基是丁基,特别适用于疏水性较强的生物分子的精细分离纯化。
本品Butyl HP Chromatography Column是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mLButyl Agarose HP填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

2545 µm

功能基团

丁基

载量

8 mg lgG25 mg BSA/mL

建议流速

150 cm/h

pH工作范围

3-13

PH稳定性

2-14(短时间,在位清洗);4-13(长时间)

化学稳定性

常用的水相缓冲液;1 mol/L 氢氧化钠;8 mol/L 尿素;6 mol/L 盐酸胍 70% 乙醇

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm5 mL

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期2年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

3)将样品加到平衡好的预装柱中,收集流出液。

4)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

5)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

6)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

 

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

丁基琼脂糖HP|Butyl HP弱疏水层析预装柱5ml

暂无内容

丁基琼脂糖HP|Butyl HP弱疏水层析预装柱5ml

暂无内容

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Butyl Agarose HP疏水介质的基架为高度交联的琼脂糖,保留了天然多糖化合物极好的亲水性及孔结构,对生物大分子具有很好的相容性,Butyl Agarose HP的平均粒径为34μm,与Butyl Agarose FF相比具有较高的分辨效率,其表面含有疏水性配基,配基是丁基,特别适用于疏水性较强的生物分子的精细分离纯化。
本品Butyl HP Chromatography Column是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mLButyl Agarose HP填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

2545 µm

功能基团

丁基

载量

8 mg lgG25 mg BSA/mL

建议流速

150 cm/h

pH工作范围

3-13

PH稳定性

2-14(短时间,在位清洗);4-13(长时间)

化学稳定性

常用的水相缓冲液;1 mol/L 氢氧化钠;8 mol/L 尿素;6 mol/L 盐酸胍 70% 乙醇

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm5 mL

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期2年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。

2)3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

3)将样品加到平衡好的预装柱中,收集流出液。

4)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

5)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

6)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

 

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

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丁基琼脂糖HP|Butyl HP弱疏水层析预装柱5ml

暂无内容

丁基琼脂糖HP|Butyl HP弱疏水层析预装柱5ml

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高分辨率苯基琼脂糖HP|phenyl强疏水层析介质

高分辨率苯基琼脂糖HP|phenyl强疏水层析介质

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Phenyl Agarose HP疏水介质的基架为高度交联的琼脂糖,保留了天然多糖化合物极好的亲水性及孔结构,对生物大分子具有很好的相容性,Phenyl Agarose HP 的平均粒径为 34μm,与Phenyl Agarose FF相比具有较高的分辨效率,其表面含有疏水性配基,配基是苯基,特别适用于重组蛋白、抗体、疫苗、VLP 颗粒等疏水性强弱一般的生物分子的精细分离纯化。

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

2545 µm

功能基团

载量

25 mg lgG20 mg BSA/mL

建议流速

150 cm/h

pH工作范围

3-13

PH稳定性

2-14(短时间,在位清洗);4-13(长时间)

化学稳定性

常用的水相缓冲液;1 mol/L 氢氧化钠;8 mol/L 尿素;6 mol/L 盐酸胍 70% 乙醇

储存缓冲液

20%乙醇

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期4年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的Butyl Agarose HP中,收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

 

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

 

高分辨率苯基琼脂糖HP|phenyl强疏水层析介质

暂无内容

高分辨率苯基琼脂糖HP|phenyl强疏水层析介质

暂无内容

 

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。

Phenyl Agarose HP疏水介质的基架为高度交联的琼脂糖,保留了天然多糖化合物极好的亲水性及孔结构,对生物大分子具有很好的相容性,Phenyl Agarose HP 的平均粒径为 34μm,与Phenyl Agarose FF相比具有较高的分辨效率,其表面含有疏水性配基,配基是苯基,特别适用于重组蛋白、抗体、疫苗、VLP 颗粒等疏水性强弱一般的生物分子的精细分离纯化。

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

2545 µm

功能基团

载量

25 mg lgG20 mg BSA/mL

建议流速

150 cm/h

pH工作范围

3-13

PH稳定性

2-14(短时间,在位清洗);4-13(长时间)

化学稳定性

常用的水相缓冲液;1 mol/L 氢氧化钠;8 mol/L 尿素;6 mol/L 盐酸胍 70% 乙醇

储存缓冲液

20%乙醇

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期4年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的Butyl Agarose HP中,收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

 

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

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高分辨率苯基琼脂糖HP|phenyl强疏水层析介质

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苯基琼脂糖HP|Phenyl HP强疏水层析预装柱5ml

苯基琼脂糖HP|Phenyl HP强疏水层析预装柱5ml

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。
Phenyl Agarose HP疏水介质的基架为高度交联的琼脂糖,保留了天然多糖化合物极好的亲水性及孔结构,对生物大分子具有很好的相容性,Phenyl Agarose HP 的平均粒径为 34μm,与Phenyl Agarose FF相比具有较高的分辨效率,其表面含有疏水性配基,配基是苯基,特别适用于重组蛋白、抗体、疫苗、VLP 颗粒等疏水性强弱一般的生物分子的精细分离纯化。
本品Phenyl HP Chromatography Column是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mLPhenyl Agarose HP填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

2545 µm

功能基团

载量

25 mg lgG20 mg BSA/mL

建议流速

150 cm/h

pH工作范围

3-13

PH稳定性

2-14(短时间,在位清洗);4-13(长时间)

化学稳定性

常用的水相缓冲液;1 mol/L 氢氧化钠;8 mol/L 尿素;6 mol/L 盐酸胍 70% 乙醇

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm5 mL

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期2年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化
1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。
2)3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
3)将样品加到平衡好的预装柱中,收集流出液。
4)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
5)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
6)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

 

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

 

苯基琼脂糖HP|Phenyl HP强疏水层析预装柱5ml

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苯基琼脂糖HP|Phenyl HP强疏水层析预装柱5ml

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疏水作用层析(hydrophobic interaction chromatographyHIC)是利用生物分子所带有的疏水基团和固定相上的疏水配基之间的相互作用来分离物质的一种层析方法,盐离子可以破坏生物分子表面的水化膜,促进疏水基团和配基之间的结合。
Phenyl Agarose HP疏水介质的基架为高度交联的琼脂糖,保留了天然多糖化合物极好的亲水性及孔结构,对生物大分子具有很好的相容性,Phenyl Agarose HP 的平均粒径为 34μm,与Phenyl Agarose FF相比具有较高的分辨效率,其表面含有疏水性配基,配基是苯基,特别适用于重组蛋白、抗体、疫苗、VLP 颗粒等疏水性强弱一般的生物分子的精细分离纯化。
本品Phenyl HP Chromatography Column是专门为快速、简便和高效分离纯化生物大分子的疏水层析预装柱。本品为装填了5 mLPhenyl Agarose HP填料的中压预装柱,该预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作

 

产品性质

基质

6%的高度交联的琼脂糖

粒径

2545 µm

功能基团

载量

25 mg lgG20 mg BSA/mL

建议流速

150 cm/h

pH工作范围

3-13

PH稳定性

2-14(短时间,在位清洗);4-13(长时间)

化学稳定性

常用的水相缓冲液;1 mol/L 氢氧化钠;8 mol/L 尿素;6 mol/L 盐酸胍 70% 乙醇

储存缓冲液

20%乙醇

柱子尺寸

1.6×2.5 cm5 mL

 

运输和保存方法

冰袋运输。4-30保存,有效期2年。

 

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2填料使用前一定要充分颠倒若干次,使琼脂糖珠混合均匀。

3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

4本产品仅作科研用途!

 

使用方法

1 缓冲液的准备

1所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤

2结合缓冲液通常选用含有高浓度盐的磷酸盐缓冲液,如20 mM PB1.5 M (NH4)2SO4pH7.0

3洗脱缓冲液通常选用不含其他盐类的磷酸盐缓冲液,如50 mM PBpH7.0对于较难洗脱的物质可以采用纯水,或者在纯水中加入低浓度乙醇作为洗脱液。

注:需要根据后续的实验结果(目的物是否有沉淀、目的物的结合强弱、回收率、分离度等) 对结合缓冲液中的盐的浓度和类型进行调整。

 

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。需要将样品的 pH 和电导率调整到与结合缓冲液一致

 

3 样品纯化
1)将泵管道中注满去离子水。去掉上塞子,将层析柱连接至色谱系统中。再折断下口,将预装柱接到色谱系统中,并旋紧。
2)3-5倍柱体积的去离子水冲洗出储存缓冲液,然后5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
3)将样品加到平衡好的预装柱中,收集流出液。
4)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
5)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
6)依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4度保存,防止填料被细菌污染。

 

4 填料清洗

疏水层析填料每次使用后可以分别2-3倍柱体积的30%异丙醇(70%乙醇)3倍柱体积的纯化水冲洗层析柱,然后用至少3倍柱体积的平衡液进行平衡。

 

CIPCleaning In Place)清洗

疏水层析填料可以重复使用,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)先用2个柱体积的纯化水冲洗掉结合比较紧的蛋白。

2对于强疏水性蛋白、沉淀蛋白的去除:先用2~3个柱体积1M NaOH清洗,然后立即用5~10个柱体积纯水冲洗。

3脂蛋白和脂类物质的去除:先用5~10个柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,后用5~10个柱体积纯水冲洗。

4也可将上述两种清洗条件结合进行清洗,即用含有1M NaOH30%异丙醇溶液清洗

HB220815

 

苯基琼脂糖HP|Phenyl HP强疏水层析预装柱5ml

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