细胞培养的忠实伴侣-支原体抗生素Plasmocin™

是否在养细胞?是否遇到支原体污染?如果是细胞系,只好丢掉,重新再来。如果是您珍贵的细胞,怎么办?

不用担心!invivogen公司推出了专门针对支原体的抗生素:Plasmocin™。该抗生素包含了两个针对支原体的有效成分,能在2周之内杀死支原体。抗生素一方面作用于蛋白质合成;另一方面作用于DNA复制阶段。这两个作用机制只针对支原体,对许多细菌和真核细胞则没有影响。

和其他抗支原体的试剂相比,Plasmocin™不仅对游离的支原体有效,同样能杀死胞内的支原体。确保培养细胞不会被细胞中释放出来的支原体再次污染。

Plasmocin™浓度范围很广。实验证明,即使使用5倍的工作浓度,Plasmocin™也不影响细胞正常代谢。同时,低浓度的Plasmocin™也能抑制细胞培养中有青霉素链霉素抗性的革兰染色阳性和阴性细菌。

Plasmocin™对很多感染支原体的细胞都有作用,包括胚胎干细胞,杂交瘤细胞和慢病毒感染的细胞系。

Plasmocin™有两种浓度包装,一种是25mg/ml的治疗性Plasmocin™,可以用来杀灭支原体,每支报价1960元;2.5mg/ml的预防性Plasmocin™,可以预防正常培养细胞中支原体污染,每支报价1260元。每支包装1ml,这两种包装都有现货。如果您的细胞正在忍受支原体污染,请。

Quick Cell 支原体快速检测试剂盒(细胞培养)


Quick Cell 支原体快速检测试剂盒(细胞培养)

简要描述:Quick Cell支原体快速检测试剂盒,不用仪器,不需样品处理,1小时观测结果,消除假阴性,超高灵敏度,准确率99.9%以上。

详细介绍

产品咨询

产品名称:Quick Cell 支原体快速检测试剂盒(细胞培养)

         货号:C4056L1060

         规格:48 T

         保存: -20

         价格: 1250

         产品简介:

Quick Cell支原体快速检测试剂盒,不用仪器,不需样品处理,1小时观测结果,消除假阴性,超高灵敏度,准确率99.9%以上。

         产品说明

Quick Cell支原体快速检测试剂盒,不用仪器,不需样品处理,1小时观测结果,消除假阴性,超高灵敏度,准确率99.9%         “Quick Cell快速支原体检测试剂盒》主要用于检测细胞培养上清或别的液体样品(如血清)中是否含有支原体污染,该试剂盒仅用于基础科研。

哺乳动物细胞的培养,支原体(Mycoplasma)污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数,导致实验结果的不准确、甚至*错误。从2013年开始,《Nature》期刊已要求投稿的文章,如涉及细胞培养都要进行支原体检测。

本试剂盒可以检测:(1M.Hyorhinis、(2M.Fermentans、(3M.Arginini、(4M. hominis、(5M. orale、(6M. salivarium、(7M.pirum、(8Acholeplasma Laidlawii、(9M. agalactiae、(10M.bovis、(11M. buccale、(12M. arthritidis、(13M. pulmonis等几乎所有常见的污染细胞的支原体(注:M.Mycoplasma的缩写)。以上13种支原体约占细胞支原体污染的99%以上,本试剂盒产品全部可以检测。绝大多数支原体污染集中于前8种。注意:本试剂盒无法检测Ureaplasma Urealyticum支原体!Ureaplasma Urealyticum在支原体污染种极其罕见。

PCR法比较产品优点:

1.Quick Cell支原体检测法不需样品处理,没有假阴性。常规PCR法需要样品处理,而且细胞培养液中的扩增抑制物可能会造成假阴性。

2.因为反应原理不一样,Quick Cell法检测灵敏度较PCR法高80-100倍。

3.快速简单,不需仪器,一步反应,1小时目测结果。

产品链接:http://www.life-ilab.com/a/chanpinzhongxin/xibaoshengwuxue/xibaopeiyang/2016/0121/32.html

一步法恒温支原体检测试剂盒现货

一步法恒温支原体检测试剂盒-上海金畔生物现货

品牌:yisemed

货号:MD001

规格:48Reaction

 

细胞《一步法恒温支原体检测试剂盒》详细介绍​

 一、《一步法恒温支原体检测试剂盒》主要用途​​

 

《一步法恒温支原体检​测试剂盒》主要用于检测细胞培养上清或别的液体样品中是否含有支原体污染,该试剂盒仅用于基础科研。

 
 二、《一步法恒温支原体检测试剂盒》扩增原理​​

 

《一步法恒温支原体检测试剂盒》采用*的恒温基因扩增技术和显色技术,对样品的支原体基因组DNA进行恒温扩增,反应完后,通过反应管的颜色即可对结果进行判断。

​​

 三、《一步法恒温支原体检测试剂盒》八大优点​​

《一步法恒温支原体检测试剂盒》八大优点

 

​(1) 方便,整个检测过程只需一步即可完成。

(2) 省时,整个检测过程只需1小时,而PCR法通常需要2-3小时。

(3)灵敏度良好,一般比30个循环普通PCR灵敏度高。

(4)无需样品的前处理。由于细胞培养数天后,培养液中经常含有严重抑制PCR扩增的代谢物,所以样品的前处理一般是PCR法*的环节。而RD-RCA扩增不受抑制,无需样品的前处理。

(5)无需样品的离心浓缩,检测只需1微升培养液即可。

(6)无需用到PCR仪、电泳槽、凝胶成像仪、离心机等仪器,整个检测只需一个水浴锅即可完成。

(7)无需电泳,无需接触EB等诱癌物质。根据反应管的指示剂,肉眼即可判断反应结果。

(8)产品稳定性,冻干型产品可以在室温至少放置2个月,-20 ℃至少可以放置2年。

 

 四、 《一步法恒温支原体检测试剂盒》法与PCR法的灵敏度和抗干扰性比较​​

将有支原体污染的细胞培养液上清用水做系列稀释(RD-RCA做10倍系列稀释、PCR做5倍系列稀释),而后分别用《一步法恒温支原体检测试剂盒》和普通PCR进行支原体检测。

    ​如右图所示,采用RD-RCA法的《一步法恒温支原体检测试剂盒》在稀释10000倍后仍呈明显的阳性而普通PCR(30 cycles)在稀释125倍后呈勉强的弱阳性,二者灵敏度至少相差80倍。

    另外一个值得高度注意的是:用细胞培养上清原液进行PCR检测居然呈明显的阴性!而原液用水稀释5倍后,PCR却呈阳性。说明:细胞培养上清原液含有强烈抑制PCR的代谢物!

    与此形成鲜明对比的是:采用RD-RCA法的《一步法恒温支原体检测试剂盒》却能在细胞培养上清原液中检测出支原体污染!说明:同样的代谢产物虽然强烈抑制PCR却不会抑制RD-RCA的正常扩增。

    这是RD-RCA法的巨大优势!如此,RD-RCA就不需要进行样品的稀释或者进行支原体DNA的抽提等的前处理。

 

 

特别提醒:

         该实验也说明:如果使用的PCR法支原体检测试剂盒没有内参对照,而直接使用细胞培​​养上清原液进行PCR检测,检测结果即使为阴性,也不能说明其没有支原体污染,极有可能是PCR的扩增被细胞的代谢产物抑制了!这个问题绝大部分进行支原体检测的人员都不会注意,这是利用无内参对照的PCR法进行支原体检测的致命弱点!

【注:由于本公司现在生产的《PCR法支原体检测试剂盒》(货号:PM008),含内参对照,已经可以区分真阴性样品(样品无支原体污染。电泳结果:有内参条带,无支原体特异条带)和假阴性样品(PCR被代谢产物抑制。电泳结果:内参条带和支原体特异条带都没有)。详情请参考本公司生产的《PCR法支原体检测试剂盒》说明书】

 
        有关PCR的扩增会被细胞的代谢产物抑制的问题,Sigma公司的LookOut Mycoplasma PCR Detection Kit(货号MP0035-1 kit)的PCR法支原体检测试剂盒说明书中也特别提到了这点,其强烈建议用试剂盒进行DNA提取后再进行检测。可见这是利用PCR法进行支原体检测过程中普遍遇到的问题,应该引起科研工作者的高度重视!否则,由此引起的假阴性(培养时间越久,概率越高),将使无内参对照的PCR法进行的支原体检测变得毫无意义!
 
 五、 《一步法恒温支原体检测试剂盒》产品形式

 

 

本公司所有恒温基因检测产品主要以冻干品的形式提供(如右图所示)。《一步法恒温支原体检测试剂盒》同样以冻干品的形式提供。

 

采用先进的冻干技术,将所有扩增成分都冻干在一个0.2 mL的PCR管中,使用时只需加入水化液和待测样品,整个检测过程一步即可完成,非常简单。

 

此外,由于冻干品的稳定性非常好,可以在室温保存至少2个月,这样非常方便运输和储存,也非常适合在野外或者污染点进行即时检测。该工艺的创新极大的扩展了相关产品的市场应用前景。

 

 

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cells-safe-支原体全面解决方案

cells-safe成立于2009年,致力于提供支原体全面解决方案,可以有效检测、消除和预防影响细胞培养的支原体。cells-safe已发展成为一家全球性公司,cells-safe克服了许多技术难题。开发了支原体qPCR检测试剂盒和支原体消除试剂盒,这是亚洲同类试剂盒中的第一个,产品出口到包括美国和日本在内的世界各地。cells-safe建立了GMP级生产工厂,按照yi流的质量体系生产各种类型的产品。此外,cell-safe生产各种诊断材料,包括GMP级的Taq DNA聚合酶,并供应给大学、医院和诊断公司。

发展历程

2009年,在亚洲大学成立。

2010年,被选入京畿道G-startup项目中;培养无支原体污染的细胞和去除细胞支原体污染的方法获得韩国zhuan利。

2011年,在美国发布支原体相关产品;二羟基苯甲酸衍生物的骨移植或骨填充组合物申请欧洲zhuan利。

2012年,发布支原体qPCR诊断试剂盒。

2013年,发布DNA taq酶;消除细胞支原体污染的方法韩国zhuan利注册。

2014年,发布qPCR相关产品;无霉原生质体细胞培养和去除细胞霉原生质体污染方法(在美国注册的两项zhuan利);骨移植或含有二羟基苯甲酸衍生物的骨填充组合物(在美国注册zhuan利)。

2015年,骨移植或包含二羟基苯甲酸衍生物的骨填充组合物(日本zhuan利注册)

无霉原生质体污染的细胞培养方法和去除细胞霉原生质体污染的方法(日本zhuan利注册)。

2016年,骨移植或含有二羟基苯甲酸衍生物的骨填充组合物(中国zhuan利注册);无霉原细胞培养方法和去除细胞霉原污染方法(韩国zhuan利注册)。

2017年,建立了一个符合GMP标准的制造工厂;在日本推出(Primetech)。

2018年,扩大GMP级工厂;在新加坡设立分公司。

主要产品线

一、ResidualQSearch™ CHO DNA Quantitation KitCHO-100

cells-safe ResidualQSearch™ CHO DNA定量试剂盒使用实时PCR检测中国仓鼠卵巢(CHO)细胞DNA。引物和探针混合物包含在试剂盒中。FAM标记的探针和引物对CHO基因组DNA具有特异性,仅用于检测多拷贝遗传元件中的靶特异性区域。此外,CHO细胞DNA可以使用该产品中包含的CHO DNA标准品产生的标准曲线进行定量。

二、支原体系列产品

1)支原体检测试剂盒:BioMycoX® Mycoplasma PCR Detection KitBioMycoX® Mycoplasma qPCR Detection KitMycoQSearch™ Mycoplasma qPCR Detection KitMycoQSearch™ Plus Mycoplasma qPCR Detection Kit用于检测研究细胞株中的支原体污染。

2)支原体清除试剂盒:BioMycoX® Mycoplasma Elimination Kit

这是一种非抗生素型产品,可以yong久消除支原体污染的细胞系中的支原体。通过生物制剂的组合产生的非抗生素型产品、弥补了现有抗生素类产品的缺点(细胞毒性和抗生素耐药性),适用于所有类型的细胞系对大多数细胞系无毒。

3)支原体预防喷雾:BioMycoX® Mycoplasma Prevention Spray

这是一种喷雾型产品,可以有效防止支原体污染。易于使用,可在几秒钟内wan全消除支原体,喷洒和擦拭时可防止支原体污染,对实验室设备和用具的定期消毒和清洁有效安全。

三、细胞冻存液:CryoBanker™ – Cell Freezing Medium

这是一种成分不含血清成分的产品。它可以安全地冷冻和储存动物细胞,同时防止支原体污染。通过冷冻细胞保持细胞的高活力、防止动物血清来源微生物的可能污染、在批次之间保持一致的性能和稳定性。

cells-safe热卖产品

货号

产品名称

规格

品牌

CHO-100

ResidualQSearch™ CHO DNA Quantitation Kit

100 Tests

cells-safe

D-100

BioMycoX®   Mycoplasma PCR Detection Kit

100 Tests

cells-safe

LD-48

SafeDry™   Mycoplasma PCR Detection Kit*

48 Tests

cells-safe

QDR-100

BioMycoX®   Mycoplasma qPCR Detection Kit

100 Tests

cells-safe

HD-100

HiSense™   Mycoplasma PCR Detection Kit

100 Tests

cells-safe

QD-100

MycoQSearch™   Mycoplasma qPCR Detection Kit

100 Tests

cells-safe

QDP-100

MycoQSearch™   Plus Mycoplasma qPCR Detection Kit

100 Tests

cells-safe

CB-100

CryoBanker™ –   Cell Freezing Medium

100 ml

cells-safe

P-10000R

BioMycoX®   Mycoplasma Prevention Spray

1L X 10 ea

cells-safe

P-1000

BioMycoX®   Mycoplasma Prevention Spray

1L

cells-safe

作为cells-safe在中国区域的代理,上海金畔生物科技有限公司将为中国客户提供zui全面的cells-safe的产品。欢迎大家随时联系我们!!!

InvivoGen 支原体清除试剂 说明书

世界*实验材料供应商Invivogen 上海金畔生物为其中国代理,Invivogen 在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔生物一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, Invivogen 就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

Invivogen 中国代理,Invivogen 上海代理,Invivogen 北京代理,Invivogen 广东代理,Invivogen 江苏代理 Invivogen 湖北代理, Invivogen 天津, Invivogen 黑龙江代理, Invivogen 内蒙古代理, Invivogen 吉林代理, Invivogen 福建代理, Invivogen 江苏代理, Invivogen 浙江代理, Invivogen四川代理,

 

Invivogen专注于基因治疗相关的分子生物学试剂研究开发。公司1997年在美国加州生物公司聚集地圣地亚哥成立,初期即以其拳头产品支原体抗生素与同城Invitrogen公司合作进行市场推广,其主打产品有:多基因表达质粒载体、DNA疫苗质粒载体、鼠类转基因质粒载体、合成基因质粒载体pMOD、基因转染试剂等,此外该公司还拥有庞大的基因和启动子库,可以接受定制服务。其产品线为pFUSE-Fc 重组抗体载体系列,面市不久已经形成了新的市场热点。

Plasmocin™-支原体清除试剂

细胞培养中支原体污染的清除和预防

Plasmocin™可以用来消除那些被支原体和某些无细胞壁的细菌感染的细胞系。
在小型或大型细胞培养中,Plasmocin™也可以直接添加到液体培养基中来预防支原体及常见的细菌污染。

Plasmocin™是一种优化的抗支原体试剂。它包含两种抗生素强效作用于支原体,并在两周内迅速杀灭支原体。
其中一种有效成分可以阻断蛋白质合成,另一种则可以作用于DNA复制过程。这两种抗生素作用的特异的靶标仅存在于支原体和很多其它的细菌中,在真核细胞中*不存在。

Plasmocin™对低浓度的革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌有很好的抗菌性,即便这些菌对于链霉素和青霉素具有抗药性。与市面上的同类产品相比,Plasmocin™对真核细胞的毒性zui低。

Plasmocin™已经成功的在不改变细胞状态的情况下,清除支原体污染。包括原代癌细胞[2],培养病毒的细胞[3]和诱导性多能干细胞[4]。

Plasmocin™ prophylactic

内容摘要 预防支原体污染
货号 ant-mpp
单位规格 25 mg (10 x 1 ml)

 

Plasmocin™ treatment

内容摘要 清除支原体污染
货号 ant-mpt
单位规格 50 mg (2 x 1 ml)

支原体活菌种:口腔支原体说明书

支原体活菌种:口腔支原体说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EH10013-0.1ml

0.1ml

7200.00

 

产品描述

本口腔支原体(Mycoplasma orale活菌种是从 ATCC 引进(ATCC 23714 珠)的菌种。口腔支原体(Mycoplasma orale)是体外细胞培养中最常见的污染细胞的支原体种类之一。

使用方法

使用方法

口腔支原体(Mycoplasma orale)活菌种 5 μL ,接种到 10 mL  20%小牛血清(已灭活的精氨酸支原体液体培养基必须含精氨酸,pH 值为 7.1)中,放入厌氧罐内,37 ℃ 厌氧培养。

培养 2-7 天后,可以看到接种有 Mycoplasma orale 的精氨酸支原体液体培养基与不接菌的对照管相比,其颜色会由初始的橙色变成鲜红色pH 值升高,如图 1 所示),说明Mycoplasma orale 培养成功。

注意:接种后,精氨酸支原体液体培养基的颜色一旦由初始的橙色变成鲜红色后,不能继续培养,否则支原体很容易因 pH 值太高而死亡。

 

 1. 将口腔支原体Mycoplasma orale)接种到精氨酸支原体液体培养基(必须含精氨酸, pH 值为 7.1,厌氧培养 3 天后的结果。(A)为未接种的对照管;(B)为接种口腔支原体的实验管。可见:接种有口腔支原体的实验管,厌氧培养 3 天后其颜色会由初始的橙色变成鲜红色,而对照管颜色不变。

 

 

 

 

运输及保存方法

该产品通过冰袋运输,收到产品后请放于-80 ℃保存。

 

 

支原体活菌种:猪鼻支原体说明书

支原体活菌种:猪鼻支原体说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EH10012-0.1ml

0.1ml

7200.00

 

产品描述

本猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)活菌种是从ATCC引进(ATCC 17981珠)的菌种。

        猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)是体外细胞培养中最常见的污染细胞的支原体种类之一,大约占细胞培养中支原体污染的20-50%

使用方法

使用方法

取猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)活菌种 5 μL ,接种到 10 mL 的含 20%小牛血清(已灭活)的 支原体液体培养基(含葡萄糖,不含精氨酸,pH 值为 7.6)中,在 37 ℃普通的细菌培养箱,有氧培养。 培养 2-5 天后,可以看到接种有 Mycoplasma hyorhinis 的支原体液体培养基(含葡萄糖,不含精氨酸) 与不接菌的对照管相比,其颜色会由初始的鲜红色变成黄色(pH 值降低,,如图 1 所示),说明 Mycoplasma hyorhinis 培养成功。 注意:接种后,支原体液体培养基(含葡萄糖,不含精氨酸)的颜色一旦由初始的鲜红色变成黄色后, 不能继续培养,否则支原体很容易因 pH 值太低而死亡。 变色后的菌液即可用作《发光法支原体检测试剂盒》、《PCR 法支原体检测试剂盒》、《一步法恒温 支原体检测试剂盒》或《探针法支原体检测试剂盒》的阳性对照。 也可以将猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)活菌种直接接种到含 10%血清的哺乳动物细胞培养液中, 与细胞共同培养,培养 3 天后,即可使用该细胞培养上清作为《发光法支原体检测试剂盒》、《PCR 法支 原体检测试剂盒》、《一步法恒温支原体检测试剂盒》或《探针法支原体检测试剂盒》的阳性对照。注意: 如果将支原体接种到哺乳动物细胞培养液中进行扩增培养,必须与细胞共同培养,不能单独培养! 

实验案例分析

 

 

 

 1. 将猪鼻支原体Mycoplasma hyorhinis)接种到支原体液体培养基(含葡萄糖,不含精氨酸,pH 值为 7.6,有氧培养 3 天后的结果。(A)为未接种的对照管;(B)为接种猪鼻支原体的实验管。可见: 接种有猪鼻支原体的实验管,培养 3 天后其颜色会由初始的鲜红色变成黄色,而对照管颜色不变。

 

 

 

 

 

 

运输及保存方法

   该产品通过冰袋运输,收到产品后请放于-80 ℃保存

支原体清除试剂2(1000x)说明书

支原体清除试剂2(1000x)说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EH10009-1ml

1ml

1160.00

产品描述

本公司开发的支原体清除试剂1含有抑制支原体蛋白质合成的药物,而支原体清除试剂2含有抑制支原体DNA合成的药物。由于两种试剂的作用机理不同,支原体清除试剂1需要处理不少于15天,而支原体清除试剂2只需处理7天。两者都可以达到杀灭和清除支原体的目的。

使用方法

使用方法

1. 使用之前,先将支原体清除试剂2(注意:支原体清除试剂220 ℃保存后,解冻时可能会有细小的结晶析出)PBS 或者无血清培养液稀释10倍后(此时,支原体清除试剂2应该溶解),放 4℃冰箱保存。

2.  50-100万个细胞铺到60mm的细胞培养皿内,加入4mL含支原体清除试剂2的正常细胞培养液(使用稀释 10倍后的支原体清除试剂 2,按 1:100 比例加入)。

3. 1-2天更换细胞培养液。换液时,用PBS冲洗2-3遍细胞,以将死亡的支原体清洗干净。而后加入新鲜的含支原体清除试剂2的正常细胞培养液。期间如果细胞密度过大,请保持细胞密度适当(贴壁细胞可能需要胰酶消化),并更换新的培养皿。

4. 处理7天后,可以用支原体检测试剂盒进行检测,检测支原体是否杀灭。如果仍有支原体残留,可以考虑再处理 3天。

5. 以后每隔1个月进行支原体的常规检测,以保证没有新的支原体污染。

实验案例分析

 

如上图所示,左侧为未经支原体清除试剂处理的人 Hela 细胞, DAPI 染色后,除了细胞核为蓝色外,细胞质也有大量的絮状核酸物质被染成蓝色,这些处于细胞质的核酸物质就是支原体 DNA。而右侧为经过本公司的支原体清除试剂 2 处理 7 天的 Hela 细胞,经 DAPI 染色后,除了细胞核为蓝色外,细胞质没有任何絮状核酸物质被染成蓝色,说明支原体已经被清除。

注意事项

建议将细胞分成三份:第一份添加清除试剂1,第二份添加清除试剂2,第三份同时添加清除试剂1和清除试剂2进行杀灭(注:同时添加两种药物可能对细胞的毒性较大,但是杀灭的概率会非常高), 这样支原体对两种药物同时产生抗性和处理过程中细胞同时死亡的概率会非常低。如果同时添加清除试剂 1 和清除试剂 2,细胞可以每 2 天更换一次培养液。

处理过程中,注意每天观察细胞的状况,如果发现支原体清除试剂对细胞的毒性较大,可以加大培养液中的血清浓度或者提高细胞的密度。

清除试剂1和清除试剂2在降低浓度后使用稀释10倍后的支原体清除试剂1或者 2,再按 1:500 比例加入,即药物的最终稀释比例为 1:5000)也可以加入到培养液中作为短期(1-2个月)的支原体污染预防药物,但是不建议在细胞培养液中长期(超过2个月)加入,因为有可能导致对该两种药物有抗性的支原体出现。

运输及保存方法

该产品在常温下运输,收到产品后请放于-20 ℃保存,该条件下,至少可以保存 2 年。

支原体清除试剂1(1000x)说明书

支原体清除试剂1(1000x)说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EH10008-1ml

1ml

1160.00

产品描述

本公司开发的支原体清除试剂1含有抑制支原体蛋白质合成的药物,而支原体清除试剂2含有抑制支原体DNA合成的药物。由于两种试剂的作用机理不同,支原体清除试剂1需要处理不少于15天,而支原体清除试剂2只需处理7天。两者都可以达到杀灭和清除支原体的目的。

 

使用方法

使用方法

(一)支原体清除试剂 1

1. 使用之前,先将支原体清除试剂1 PBS或者无血清培养液稀释10倍后,放 4℃冰箱保存。

2.  50-100万个细胞铺到 60mm的细胞培养皿内,加入4mL含支原体清除试剂1的正常细胞培养液(使用稀释 10倍后的支原体清除试剂 1,按 1:100 比例加入)。

3.  2-3天更换细胞培养液。换液时,用 PBS冲洗 2-3 遍细胞,以将死亡的支原体清洗干净。而后加入新鲜的含支原体清除试剂 1 的正常细胞培养液。期间如果细胞密度过大,请保持细胞密度适当(贴壁细胞可能需要胰酶消化),并更换新的培养皿。

4. 处理15天后,可以用支原体检测试剂盒进行检测,检测支原体是否杀灭。如果仍有支原体残留,可以考虑再处理6天。

5. 以后每隔1个月进行支原体的常规检测,以保证没有新的支原体污染。

实验案例分析

 

如上图所示,左侧为未经支原体清除试剂处理的人Hela细胞,经DAPI染色后,除了细胞核为蓝色外,细胞质也有大量的絮状核酸物质被染成蓝色,这些处于细胞质的核酸物质就是支原体 DNA。而右侧为经过本公司的支原体清除试剂2处理7天的 Hela细胞,经DAPI染色后,除了细胞核为蓝色外,细胞质没有任何絮状核酸物质被染成蓝色,说明支原体已经被清除。

注意事项

建议将细胞分成三份:第一份添加清除试剂1,第二份添加清除试剂2,第三份同时添加清除试剂1和清除试剂2进行杀灭(注:同时添加两种药物可能对细胞的毒性较大,但是杀灭的概率会非常高), 这样支原体对两种药物同时产生抗性和处理过程中细胞同时死亡的概率会非常低。如果同时添加清除试剂 1 和清除试剂 2,细胞可以每 2 天更换一次培养液。

处理过程中,注意每天观察细胞的状况,如果发现支原体清除试剂对细胞的毒性较大,可以加大培养液中的血清浓度或者提高细胞的密度。

清除试剂1和清除试剂2在降低浓度后使用稀释10倍后的支原体清除试剂1或者 2,再按 1:500 比例加入,即药物的最终稀释比例为 1:5000)也可以加入到培养液中作为短期(1-2个月)的支原体污染预防药物,但是不建议在细胞培养液中长期(超过2个月)加入,因为有可能导致对该两种药物有抗性的支原体出现。

运输及保存方法

该产品在常温下运输,收到产品后请放于-20 ℃保存,该条件下,至少可以保存 2 年。

 

抗菌肽支原体预防剂说明书

Jinpan抗菌肽支原体预防剂说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EH10002-500μL

500μL

415.00

78EH10002-500μL × 4

500μL × 4

1115.00

使用方法

使用方法

请在收到货后,将试剂管瞬时离心(3000 rpm35 s)保存。

1.建议现配现用。

2.使用Jinpan抗菌肽支原体预防剂(78EH10002)处理时,建议保持细胞密度在 5060%

3.推荐Jinpan抗菌肽支原体预防剂(78EH10002)的稀释比例为 1:2000,例如:20 mL 的培养基加入10 μL Jinpan抗菌肽支原体预防剂。

4.建议根据细胞的周期不一样,每 2天处理 次,或长期处理,以预防支原体污染。

※注意产品出现沉淀属正常现象,在分装或使用前须在室温下震荡溶解至澄清透明状,不影响产品的使用效果。

运输及保存方法

4个月;-2012 个月;避免反复冻融,建议-20分装保存。