Recombinant Ten-Eleven Translocase 2.0(eTET2.0, with buffer)是上海金畔生物科技有限公司开发的一款高效用于甲基化位点转化的单酶。可以将甲基化的胞嘧啶（5mC）特异性地转化成尿嘧啶（U）。最终通过PCR可以高效特异性地将甲基化的胞嘧啶（5mC）转变成胸腺嘧啶（T），通过C>T突变来实现单碱基分辨率和高准确性的DNA甲基化正向筛选和鉴定，适用于10-100 ng起始量的DNA样本。

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

注意事项

关于操作

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。

3. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。

4. PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染，进而影响实验结果准确性。推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离；配备文库构建专用移液器等设备；定时对各实验区域进行清洁（推荐使用Thermol Fisher公司的DNAZapTM高效核酸去除喷雾），以保证实验环境的洁净度。

5. 本产品仅用作科研用途！

应用范围

本试剂盒适用于DNA甲基化（DNA 5mC）研究，针对的DNA投入量为10-100 ng，也提供了应用于RNA甲基化（RNA 5mC）的可能性。

Ver. CN20231219

Recombinant Ten-Eleven Translocase (TET)是基于TET酶改造和重组表达的高效 Fe²⁺和α-酮戊二酸（α-KG）依赖的双加氧酶，通过一系列氧化反应，可将5-甲基胞嘧啶（5mC）转化为5-羟甲基胞嘧啶（5hmC），再转化为5-甲酰胞嘧啶（5fC）和5-羧基胞嘧啶（5caC）。再通过转化剂或酶法的作用，5caC进一步被转化成尿嘧啶(U)，通过PCR将尿嘧啶（U）转化成胸腺嘧啶（T），从而达到单碱基分辨率和高准确性的DNA甲基化位点鉴定。

组分信息

储存条件

-25~-15℃保存，有效期1年。

使用说明

EM-seq投入量~40ug/T*，该酶的反应温度为37℃，充分反应一般需60 min，需进行终止反应。

*：酶投入量可根据实验需求进行适当调整。

注意事项

1. 该酶解冻后应置于冰上操作。

2. 该酶适用于酶法甲基化测序（EM-seq），DNA模板投入量为1-200 ng。

3. 本产品仅作科研用途。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20231023