nanohelix Bst DNA 聚合酶说明书
具有强链置换活性的嗜热 DNA 聚合酶
缺乏 5' → 3' 核酸外切酶活性
一种重组蛋白，在大肠杆菌中表达
| 货号 | 产品 | 尺寸 |
|---|---|---|
| BST-1600 | HelixAmp™ Bst DNA 聚合酶，大片段 | 1,600 台 |
| BST-4K | HelixAmp™ Bst DNA 聚合酶，大片段 | 4,000 台 |
HelixAmp™ Bst DNA 聚合酶，大片段 是 嗜热脂肪芽孢杆菌DNA 聚合酶蛋白的一部分，含有 5' → 3' 聚合酶活性，但缺乏 5' → 3' 核酸外切酶活性。 Bst DNA 聚合酶，大片段由含有 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶基因的大肠杆菌菌株制备 ，缺乏 5' → 3' 外切核酸酶结构域。
应用
等温扩增 (LAMP)
通过高 GC 分辨率进行 DNA 测序
纳克量 DNA 模板的快速测序
内容
Bst DNA 聚合酶，大片段（8 单位/μl）
Bst Plus DNA聚合酶冻干粉(60 U/μL 无甘油) Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase
Bst Plus DNA Polymerase来源于Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I，经基因工程改造去除了其5’-3’核酸外切酶活性，但保留了5’-3’ DNA聚合酶活性和强链置换活性。与野生型Bst DNA Polymerase相比，该酶在扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高，同时增加了dUTP耐受性，非常适合于等温扩增反应，如LAMP反应。本产品将无甘油Bst Plus DNA Polymerase冻干，解决了无甘油酶不稳定问题，可以用于制作冻干产品。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|||
|
14405ES60 （12 KU） |
14405ES97 （120 KU） |
14405ES98 （1200 KU） |
|||
|
14405-A |
Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase (60 U/μL，Glycerol-Free) |
1 瓶（200 μL） |
5 瓶（400 μL） |
10 瓶（2mL） |
|
|
14405-B |
冻干单酶复溶液 |
200 μL |
2mL |
20 mL |
|
使用方法：
若用于后续冻干，请用沿壁缓慢滴入200 μL(以14405ES60为例)冻干单酶复溶液复溶，得到总体积为200 μL的无甘油Bst 酶，也可以分多次加入冻干单酶复溶液复溶，得到总体积为200 μL的无甘油Bst 酶。复溶后的无甘油Bst 酶可短暂保存于4℃。
产品应用
等温扩增反应。
单位定义
1 U指65℃条件下反应30 min，能使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
热失活
85℃，5 min。
运输与保存方法
避光室温运输。避光-20℃保存，有效期1年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
以LAMP(pH指示剂法)为例
1、反应体系配制
|
组分 |
单次反应体积（μL） |
终浓度 |
|
2.5×pH Sensitive Reaction Buffer |
10 |
1× |
|
1M MgSO4 |
0.2 |
|
|
25 mM d（AUGC)TPa |
1.4 |
|
|
UDGase |
0.005 |
|
|
无甘油逆转录酶 |
0.075 |
|
|
冻干Bst单酶 |
2 |
|
|
无甘油RNase 抑制剂 |
0.2 |
– |
|
10×Primersb |
2.5 |
1× |
|
模板 |
10 ng~1 μg |
|
|
ddH2O |
Up to 25 |
|
【注】a. 25mmol/L d(A/U/G/C)TP mix推荐使用浓度为1.2-1.4 mmol/L。
b. 10× Primers：16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each；引物组的比例也可以进行适当的调整。
2、反应条件
65°C孵育30~60 min，85℃，5 min失活。
若使用UDG体系，可添加UDG消化反应程序，如25℃，10min。
HB230109
Bst Plus DNA Polymerase来源于Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I，经基因工程改造去除了其5’-3’核酸外切酶活性，但保留了5’-3’ DNA聚合酶活性和强链置换活性。与野生型Bst DNA Polymerase相比，该酶在扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高，同时增加了dUTP耐受性，非常适合于等温扩增反应，如LAMP反应。本产品将无甘油Bst Plus DNA Polymerase冻干，解决了无甘油酶不稳定问题，可以用于制作冻干产品。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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|
14405ES60 （12 KU） |
14405ES97 （120 KU） |
14405ES98 （1200 KU） |
|||
|
14405-A |
Lyophilized Bst Plus DNA Polymerase (60 U/μL，Glycerol-Free) |
1 瓶（200 μL） |
5 瓶（400 μL） |
10 瓶（2mL） |
|
|
14405-B |
冻干单酶复溶液 |
200 μL |
2mL |
20 mL |
|
使用方法：
若用于后续冻干，请用沿壁缓慢滴入200 μL(以14405ES60为例)冻干单酶复溶液复溶，得到总体积为200 μL的无甘油Bst 酶，也可以分多次加入冻干单酶复溶液复溶，得到总体积为200 μL的无甘油Bst 酶。复溶后的无甘油Bst 酶可短暂保存于4℃。
产品应用
等温扩增反应。
单位定义
1 U指65℃条件下反应30 min，能使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
热失活
85℃，5 min。
运输与保存方法
避光室温运输。避光-20℃保存，有效期1年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
以LAMP(pH指示剂法)为例
1、反应体系配制
|
组分 |
单次反应体积（μL） |
终浓度 |
|
2.5×pH Sensitive Reaction Buffer |
10 |
1× |
|
1M MgSO4 |
0.2 |
|
|
25 mM d（AUGC)TPa |
1.4 |
|
|
UDGase |
0.005 |
|
|
无甘油逆转录酶 |
0.075 |
|
|
冻干Bst单酶 |
2 |
|
|
无甘油RNase 抑制剂 |
0.2 |
– |
|
10×Primersb |
2.5 |
1× |
|
模板 |
10 ng~1 μg |
|
|
ddH2O |
Up to 25 |
|
【注】a. 25mmol/L d(A/U/G/C)TP mix推荐使用浓度为1.2-1.4 mmol/L。
b. 10× Primers：16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each；引物组的比例也可以进行适当的调整。
2、反应条件
65°C孵育30~60 min，85℃，5 min失活。
若使用UDG体系，可添加UDG消化反应程序，如25℃，10min。
HB230109
暂无内容
暂无内容
Bst Plus DNA聚合酶(40 U/μL)|Bst Plus DNA Polymerase
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase来源于Thermophilic Geobacillus sp DNA Polymerase I，经基因工程改造去除了其5’-3’核酸外切酶活性。本产品具有强5’-3’ DNA聚合酶活性、链置换活性及dUTP耐受性，更适合于防污染的等温扩增反应，如LAMP、CPA等。
产品组分
|
编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
14402ES92 (8,000 U) |
14402ES97 (40,000 U) |
||
|
14402-A |
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) |
200 μL |
1 mL |
|
14402-B |
10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer |
1 mL |
3 × 1 mL |
|
14402-C |
100 mM MgSO4 |
1 mL |
3 × 1 mL |
产品应用
本产品适用于LAMP、CPA、RCA等多种等温扩增反应。
单位定义
1 U指65℃条件下反应30 min，能使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
酶保存液成分
10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50%甘油，pH 7.5 @ 25℃。
热失活
85℃，5 min。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
注意事项
1. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；
2. 本产品仅做科研用途；
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
LAMP实验案例
1、反应体系配制
|
组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
|
10×Reaction Buffer |
2.5 |
1× |
|
100 mM MgSO4 |
0.75 |
3 mM+2 mM in buffer=5 mM |
|
dNTP Mix (25 mM each) |
1.4 |
1.4 mM each |
|
dUTP (25 mM) 选加 |
1.4 |
1.4 mM |
|
UDGase (1 U/μL) 选加 |
1 |
0.04 U |
|
模板DNA |
10 ng~1 μg |
– |
|
10×Primers |
2.5 |
– |
|
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) |
1* |
1.6 U/μL |
|
ddH2O |
to 25 |
– |
【注】：1. *：根据不同实验，Hieff® Bst Plus DNA Polymerase添加量可进行调整优化；
2. 10×Reaction Buffer：200 mM Tris-HCl，500 mM KCl，100 mM (NH4)2S04，20 mM MgS04，1% Tween-20，pH 8.8 @ 25℃。
3. 根据不同的实验，Mg2+浓度可在4–10 mM之间调整。
4. 10× Primers：16 µM FIP/BIP，2 µM F3/B3，4 µM Loop F/B each。
5. 本公司dNTP（Cat#10124），dUTP（Cat#10128）和UDGase（Cat#10303）可以与本品配套使用。
2、反应条件
|
温度 |
时间 |
作用 |
|
25~37°C |
5~10 min |
降解含U模板（选做） |
|
65°C |
30~60 min |
反应 |
|
85℃ |
5 min |
失活 |
HB220923
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase来源于Thermophilic Geobacillus sp DNA Polymerase I，经基因工程改造去除了其5’-3’核酸外切酶活性。本产品具有强5’-3’ DNA聚合酶活性、链置换活性及dUTP耐受性，更适合于防污染的等温扩增反应，如LAMP、CPA等。
产品组分
|
编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
14402ES92 (8,000 U) |
14402ES97 (40,000 U) |
||
|
14402-A |
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) |
200 μL |
1 mL |
|
14402-B |
10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer |
1 mL |
3 × 1 mL |
|
14402-C |
100 mM MgSO4 |
1 mL |
3 × 1 mL |
产品应用
本产品适用于LAMP、CPA、RCA等多种等温扩增反应。
单位定义
1 U指65℃条件下反应30 min，能使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
酶保存液成分
10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50%甘油，pH 7.5 @ 25℃。
热失活
85℃，5 min。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
注意事项
1. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；
2. 本产品仅做科研用途；
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
LAMP实验案例
1、反应体系配制
|
组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
|
10×Reaction Buffer |
2.5 |
1× |
|
100 mM MgSO4 |
0.75 |
3 mM+2 mM in buffer=5 mM |
|
dNTP Mix (25 mM each) |
1.4 |
1.4 mM each |
|
dUTP (25 mM) 选加 |
1.4 |
1.4 mM |
|
UDGase (1 U/μL) 选加 |
1 |
0.04 U |
|
模板DNA |
10 ng~1 μg |
– |
|
10×Primers |
2.5 |
– |
|
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) |
1* |
1.6 U/μL |
|
ddH2O |
to 25 |
– |
【注】：1. *：根据不同实验，Hieff® Bst Plus DNA Polymerase添加量可进行调整优化；
2. 10×Reaction Buffer：200 mM Tris-HCl，500 mM KCl，100 mM (NH4)2S04，20 mM MgS04，1% Tween-20，pH 8.8 @ 25℃。
3. 根据不同的实验，Mg2+浓度可在4–10 mM之间调整。
4. 10× Primers：16 µM FIP/BIP，2 µM F3/B3，4 µM Loop F/B each。
5. 本公司dNTP（Cat#10124），dUTP（Cat#10128）和UDGase（Cat#10303）可以与本品配套使用。
2、反应条件
|
温度 |
时间 |
作用 |
|
25~37°C |
5~10 min |
降解含U模板（选做） |
|
65°C |
30~60 min |
反应 |
|
85℃ |
5 min |
失活 |
HB220923
暂无内容
暂无内容
10×BstⅡPlus DNA聚合酶缓冲液(10× Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase Buffer)
10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer可与Hieff® Bst Plus DNA Polymerase配套使用，为等温扩增反应创造最佳条件。本产品中KCl及 (NH4)2S04组分可有效提高引物退火的特异性，适用于LAMP、CPA、RCA等多种等温扩增反应。
产品组分
|
编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
15441ES03 (1 mL) |
15441ES08 (5×1 mL) |
||
|
15441-A |
10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer |
1 mL |
5× 1 mL |
|
15441-B |
100 mM MgSO4 |
1 mL |
5× 1 mL |
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
使用方法
本品在等温扩增反应体系中终浓度为1× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer即可。
注意事项
1. 本产品仅做科研用途；
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
LAMP实验案例
1、反应体系配制
|
组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
|
10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer |
2.5 |
1× |
|
100 mM MgSO4 |
0.75 |
3 mM+2 mM in buffer=5 mM |
|
dNTP Mix (25 mM each) |
1.4 |
1.4 mM each |
|
dUTP (25 mM) 选加 |
1.4 |
1.4 mM |
|
UDGase (1 U/μL) 选加 |
1 |
0.04 U |
|
模板DNA |
10 ng~1 μg |
– |
|
10×Primers |
2.5 |
– |
|
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL) |
0.02* |
1.6 U/μL |
|
ddH2O |
to 25 |
– |
【注】：1. *：根据不同实验，Hieff® Bst Plus DNA Polymerase添加量可进行调整优化；
2. 根据不同的实验，Mg2+浓度可在4–10 mM之间调整。
3. 10× Primers：16 µM FIP/BIP，2 µM F3/B3，4 µM Loop F/B each。
4. 本公司Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (Cat#14403ES), dNTP (Cat#10124), dUTP (Cat#10128) 和UDGase (Cat#10303) 可以与本品配套使用。
2、反应条件
|
温度 |
时间 |
作用 |
|
25~37°C |
5~10 min |
降解含U模板（选做） |
|
65°C |
30~60 min |
反应 |
|
85℃ |
5 min |
失活 |
HB220924
10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer可与Hieff® Bst Plus DNA Polymerase配套使用，为等温扩增反应创造最佳条件。本产品中KCl及 (NH4)2S04组分可有效提高引物退火的特异性，适用于LAMP、CPA、RCA等多种等温扩增反应。
产品组分
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编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
15441ES03 (1 mL) |
15441ES08 (5×1 mL) |
||
|
15441-A |
10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer |
1 mL |
5× 1 mL |
|
15441-B |
100 mM MgSO4 |
1 mL |
5× 1 mL |
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
使用方法
本品在等温扩增反应体系中终浓度为1× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer即可。
注意事项
1. 本产品仅做科研用途；
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
LAMP实验案例
1、反应体系配制
|
组分 |
体积 (μL) |
终浓度 |
|
10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer |
2.5 |
1× |
|
100 mM MgSO4 |
0.75 |
3 mM+2 mM in buffer=5 mM |
|
dNTP Mix (25 mM each) |
1.4 |
1.4 mM each |
|
dUTP (25 mM) 选加 |
1.4 |
1.4 mM |
|
UDGase (1 U/μL) 选加 |
1 |
0.04 U |
|
模板DNA |
10 ng~1 μg |
– |
|
10×Primers |
2.5 |
– |
|
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL) |
0.02* |
1.6 U/μL |
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ddH2O |
to 25 |
– |
【注】：1. *：根据不同实验，Hieff® Bst Plus DNA Polymerase添加量可进行调整优化；
2. 根据不同的实验，Mg2+浓度可在4–10 mM之间调整。
3. 10× Primers：16 µM FIP/BIP，2 µM F3/B3，4 µM Loop F/B each。
4. 本公司Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (Cat#14403ES), dNTP (Cat#10124), dUTP (Cat#10128) 和UDGase (Cat#10303) 可以与本品配套使用。
2、反应条件
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温度 |
时间 |
作用 |
|
25~37°C |
5~10 min |
降解含U模板（选做） |
|
65°C |
30~60 min |
反应 |
|
85℃ |
5 min |
失活 |
HB220924
暂无内容
暂无内容