BIOLAMININ MX521产品说明书

BioLamina是一家瑞典生物技术公司,业务遍及。我们提供广泛的化学成分和无动物成分的层粘连蛋白组合,用于多种应用,包括多能细胞的可靠扩增和特化细胞类型的分化和维持,如肝细胞,骨骼肌细胞和不同的神经细胞。

我们以的产品,能力,奉献精神和服务而闻名和认可,并将自己定位于细胞培养的前沿。我们的高科技产品有助于提高客户的效率和科学突破,使他们开启医学研究的新纪元。BioLamina的Biolaminins™是市场上仅有的原始全长,人类,重组层粘连蛋白细胞培养基质,我们的Biolaminin基质对细胞培养质量的影响已经在许多具有高影响力的期刊中得到科学验证。

BioLamina建立在科学基础之上,具有基质生物学的遗产和基于细胞培养的研究的丰富经验。该公司成立于2009年,由Karl Tryggvason博士及其儿子Kristian Tryggvason博士共同创立。如今,该公司在生产,研发,物流,销售和营销方面拥有约20名员工。我们的质量体系符合ISO 9001:2015标准,管理层和员工均遵循明确的标准流程和协议。

 

BIOLAMININ 521 MX(MX521)

人重组层粘连蛋白521

重建天然细胞生态位是成功培育的关键。BM中不同层粘连蛋白同种型的物理,拓扑和生物化学表达是异质的和组织特异性的。 

Biolaminin 521 MX(MX521)是多能干细胞的天然层粘连蛋白,因此可以在化学成分确定的无饲养细胞和无动物成分的干细胞培养系统中可靠地促进人ES和iPS细胞的自我更新。MX521能够对遗传稳定和多能干细胞进行有效的单细胞传代,无需任何细胞凋亡抑制剂,从而提高细胞质量和研究质量。 

出生后,α5-层粘连蛋白代表体内常见的层粘连蛋白,MX521支持许多不同的组织细胞类型,如来自胰腺,血管,神经和肌肉系统的细胞。
 

BIOLAMININ MX521产品说明书

 

 

 

功能和规格:

  • 研究级基材

  • 动物成分免费到中学水平

  • 生物学相关的文化环境

  • 同源和遗传稳定的hPSC培养物

  • 简单灵活的文化系统

  • 一致可靠的性能

  • 快速扩大规模

  • 轻松适应自动化平台

  • 支持周末免费喂养制度

  • 有效的分化和增强的细胞成熟,极化和组织

  • 科学证明

生物相关的文化环境

Biolaminin 521 MX是一种全长的人类重组层粘连蛋白521底物,是市场上仅有的此类底物,为hPSCs的无饲养细胞培养提供了宜环境。层粘连蛋白521是天然干细胞生态位的关键细胞粘附蛋白,由胚胎内细胞团中的hPSC表达和分泌。Biolaminin 521底物在体外重建了生物学相关的hPSC环境  ,促进依恋,高生存率和强大的hPSCs长期自我更新。此外,更真实的培养环境使多能干细胞更有效地分化,增强细胞成熟,极化和特化细胞类型的组织。层粘连蛋白521细胞培养基质对hES细胞系之间的多能基因表达谱的稳定和均质化具有积极作用,与饲养细胞和许多其它无饲养细胞培养系统相比,提供了更可控和更稳健的培养系统。通过与相关细胞表面受体的相互作用,层粘连蛋白激活细胞信号级联(例如PI3K / Akt途径),提供一致的细胞反应和改善的细胞功能,终节省研究人员的时间和成本。
 

MX521干细胞基质可实现高膨胀率,单层均匀生长,并保持多能性。细胞在遗传上是稳定的,没有核型异常。与饲养细胞或其他无饲养细胞培养的细胞相比,hESC和iPSC在MX521上生长更快,促进了自动化。人多能干细胞可以常规培养为单细胞而不添加ROCKi。MX521还支持hES和iPS细胞的有效克隆存活和扩增,极大地促进了多能细胞中基因组改变和操作的研究。此外,使特定组织细胞更有效地重编程为iPSC。

与基于饲养细胞的培养系统相比,Biolaminin 521底物更灵活,更易于使用且更省力,并且符合任何市售的无血清培养基。细胞以均匀的单层生长,易于监测,具有保持多能性和遗传完整性。强大而灵活的文化环境允许独立于操作员的文化维护和可靠的标准化协议,可轻松适应自动化平台。

出生后,层粘连蛋白521代表体内常见的层粘连蛋白之一,并与其他层粘连蛋白同种型一起,它支持许多不同组织细胞类型的有效扩增和分化。

详细了解不同的层粘连蛋白细胞培养应用

下载细胞培养应用海报

人类干细胞培养


生物相关和无动物成分的环境中  容易地培养人ES和iPS细胞

克隆细胞培养

有效的克隆培养和
人多能干细胞的  衍生

 

涂层板

请参阅涂层方案说明,推荐的涂层体积和浓度。

MX521上的HPSC文化

参见 Biolaminin 521上干细胞培养的说明,包括:- 转移- 传代- 解冻  – 在MX521上冷冻保存hPSC。  

 

胚胎体形成

在Biolaminin 521底物上培养的hPSC形成胚状体的方案

重要笔记

  • “仅供研究使用”

  • 避免蛋白质长时间暴露在环境温度下

  • 根据ISCT指导文件“ISCT无动物源调查结果 – 摘要”,CT521是动物来源免于中学水平。

  • 当在-20°C至-80°C下储存时,层粘连蛋白原液可稳定3年。当在无菌条件下在+ 2°C至+ 8°C下储存时,解冻的未稀释的层粘连蛋白原液可稳定至少3个月。

  • 应避免反复冻融。如果需要,可以将层粘连蛋白原液分配到工作等分试样中并储存在-20℃至-80℃。
  • 为方便起见,无菌保存在+ 2°C至+ 8°C时,涂层板可保存长达4周

  • 通过选择培养基和解离试剂,可以轻松*定义和无异种方案

  • 转移到MX521基质的细胞具有高质量是很重要的

  • 转移到MX521基质的一些hPSC细胞系可能需要适应期才能根据单细胞传代方案进行培养

  • 一旦适应MX521基质,hPSC可以常规培养为不含ROCKi的单细胞

故障排除

Biolaminin板涂层

不均匀的细胞扩散,通常是涂层问题,可能由以下原因引起:

  • 使用的涂料浓度低。增加涂层浓度足以支持均匀的细胞生长。
  • 涂层覆盖率差/板已干燥。在制备新鲜板时,确保层粘连蛋白涂层溶液覆盖整个表面。此外,不要让板干燥,因为这会使层粘连蛋白涂层失活。在没有密封的情况下,在培养箱中长时间存放或长时间存放会导致过多的蒸发,从而使部分板干燥(通常在中心)。

 
从其他基材转移

  • 我们建议将细胞转移为单个细胞(或小团块),并且在初的几(3-5)次传代中始终加入ROCKi。一旦细胞适应MX521基质,细胞可以作为没有ROCKi的单细胞培养。这可能需要多达5个段落。
  • 如果细胞难以适应,尝试将包衣浓度增加至10ug / ml并以更高的细胞密度接种50,000-100,1000个细胞/ cm 2。一旦细胞适应,通常可以使用较低的包衣和接种浓度。
  • 转移到MX521基质的细胞具有高质量是很重要的。MX521通常也会支持分化细胞,因此请仔细选择未分化的细胞区域进行转移。
  • MX521与大多数商业媒体品牌结合使用效果很好。然而,可以预期细胞形态将根据用于培养的培养基而看起来不同。

hPSC分裂和播种

  • 我们建议将单细胞传代或传代作为小团块。
  • 干细胞是敏感的,当使用酶时,不要对细胞进行太长时间处理,因为这样会破坏细胞。与其他基质相比,细胞在层粘连蛋白上更紧密地附着,并且在没有首先松散细胞的情况下刮擦或移液可以影响细胞完整性和活力,这可能导致第二天较少的附着。较少融合的细胞需要较短的治疗时间,而更融合的细胞可能需要更长的治疗时间。细胞应易于分离,无需过多移液。不要使用过多的机械力(大量移液或刮擦),否则会损坏细胞。增加解离试剂的孵育时间而不是增加力。如果细胞非常坚硬地粘附在MX521表面上,请尝试降低涂层浓度。
  • 播种后:大多数细胞应在1小时后附着,细胞应均匀分布在整个平板上。如果接种后细胞死亡很多,那么在分裂过程中细胞很可能被治疗过于严厉。
  • 接种后第二天:细胞已经迁移并且应该形成小的集落并且将继续作为同质单层扩增。当细胞培养物为60-99%汇合时,在MX521基质上培养的细胞准备好传代。取决于细胞系,接种密度和使用的培养基,培养物通常在接种后3-6天传代。