Hieff Trans<sup>®</sup>通用型转染试剂

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Hieff Trans®通用型转染试剂是基于最新的纳米技术研发的一款多用途、便捷高效的脂质体转染试剂,适用于DNARNA和寡核苷酸的转染,对难转染细胞具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

产品组分

组分编号

组分名称

规格/货号

40808ES02

40808ES03

40808ES03

40808-A

Universal-A溶液

0.5 mL

1 mL

5×1 mL

40808-B

Universal-B溶液

0.5 mL

1 mL

5×1 mL

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!

注意事项

1) 转染操作时,以细胞融合度达70%-90%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2) 制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂。

3) 转染的时候培养基中不能添加抗生素。

4) 使用高纯度的DNARNA有助于获得较高的转染效率,质粒中的内毒素是转染的大敌。

5) 2-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。

6) 初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最的转染效率。

7) 本产品仅作科研用途!

操作流程

1. DNA转染

注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1) 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-90%为佳。

2) 按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液,轻轻混匀。

3) 使用Opti-MEM培养基稀释DNA,得到DNA预混液,然后添加Universal-A溶液,轻轻混匀,得到稀释的DNA

4) 将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液(1:1比例)

5) 室温孵育5分钟。

6) DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

7) 37℃5% CO2培养箱培养48-96 h,直至进行基因表达分析。

2. siRNA转染

转染siRNA操作与DNA的转染操作流程一样,但在稀释siRNA时则不需要加入Universal-A溶液(3)

不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

培养皿

96-well

24-well

6-well

贴壁细胞

1-4×104

0.5-2×105

0.25-1×106

使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液,轻轻混匀。

Opti-MEM培养基

5 μL

25 μL

125 μL

Universal-B溶液

0.2 μL

1 μL

5 μL

使用Opti-MEM培养基稀释DNA,得到DNA预混液,然后添加Universal-A溶液,轻轻混匀,得到稀释的DNA

Opti-MEM培养基

5 μL

25 μL

125 μL

DNA (0.5–5 μg/μL)

0.1 μg

0.5 μg

2.5 μg

Universal-A溶液(2 μL/μg DNA)

0.2 μL

1 μL

5 μL

将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)

稀释的DNA

5 μL

25 μL

125 μL

稀释的Universal-B溶液

5 μL

25 μL

125 μL

室温孵育5分钟

DNA-脂质体复合物形成

复合物成分(每孔)

96-well

24-well

6-well

Opti-MEM培养基

10 μL

50 μL

250 μL

DNA(0.5–5 μg/μL)

0.1 μg

0.5 μg

2.5 μg

Universal-B溶液

0.2 μL

1 μL

5 μL

Universal-A溶液

0.2 μL

1 μL

5 μL

DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀

DNA-脂质体复合物

10 μL

50 μL

250 μL

【注】该表使用量仅供参考,DNAUniversal-B溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

相关产品

名称

货号

规格

Hieff Trans® Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

40802ES02

0.5 mL

40802ES03

1.0 mL

40802ES08

5×1mL

Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂

40803ES70

200 T

Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/ml

40804ES76

500 μL

40804ES86

5×500 μL

Hieff Trans® Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂

40805ES02

0.5 mL

40805ES03

1.0 mL

40805ES08

5×1 mL

Hieff Trans® in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA体外转染试剂

40806ES02

0.5 mL

40806ES03

1.0 mL

Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 线性PEI转染试剂MW25000

40815ES03

1 g

40815ES08

5×1 g

Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000rapid lysis)线性PEI转染试剂(速溶型)MW40000

40816ES02

100 mg

40816ES03

1 g

HB220930

 

Hieff Trans&lt;sup&gt;®&lt;/sup&gt;通用型转染试剂

暂无内容

[1] Xie F, Su P, Pan T, et al. Engineering Extracellular Vesicles Enriched with Palmitoylated ACE2 as COVID-19 Therapy. Adv Mater. 2021;33(49):e2103471. doi:10.1002/adma.202103471(IF:30.849)
[2] Su WQ, Yu XJ, Zhou CM. SARS-CoV-2 ORF3a Induces Incomplete Autophagy via the Unfolded Protein Response. Viruses. 2021;13(12):2467. Published 2021 Dec 9. doi:10.3390/v13122467(IF:5.048)
[3] Zu S, Xue Q, He Z, et al. Duck PIAS2 Promotes H5N1 Avian Influenza Virus Replication Through Its SUMO E3 Ligase Activity. Front Microbiol. 2020;11:1246. Published 2020 Jun 11. doi:10.3389/fmicb.2020.01246(IF:4.236)

Hieff Trans®通用型转染试剂是基于最新的纳米技术研发的一款多用途、便捷高效的脂质体转染试剂,适用于DNARNA和寡核苷酸的转染,对难转染细胞具有较高的转染效率。其独特的配方使其可直接加入培养基中,血清的存在不会影响转染效率,这样可以减少去除血清对细胞的损伤。转染后不需要除去核酸转染试剂复合物或更换新鲜培养基,也可根据细胞营养状态在4-6小时后更换新鲜培养基。

产品组分

组分编号

组分名称

规格/货号

40808ES02

40808ES03

40808ES03

40808-A

Universal-A溶液

0.5 mL

1 mL

5×1 mL

40808-B

Universal-B溶液

0.5 mL

1 mL

5×1 mL

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品2-8ºC保存,一年有效。不可冷冻!

注意事项

1) 转染操作时,以细胞融合度达70%-90%为佳,具体铺板密度根据细胞情况酌情而定。

2) 制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂。

3) 转染的时候培养基中不能添加抗生素。

4) 使用高纯度的DNARNA有助于获得较高的转染效率,质粒中的内毒素是转染的大敌。

5) 2-8ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖。

6) 初次使用应优化核酸浓度和试剂量以得到最的转染效率。

7) 本产品仅作科研用途!

操作流程

1. DNA转染

注:转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。

1) 细胞铺板,至转染操作时,以细胞融合度达70%-90%为佳。

2) 按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液,轻轻混匀。

3) 使用Opti-MEM培养基稀释DNA,得到DNA预混液,然后添加Universal-A溶液,轻轻混匀,得到稀释的DNA

4) 将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液(1:1比例)

5) 室温孵育5分钟。

6) DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀。

7) 37℃5% CO2培养箱培养48-96 h,直至进行基因表达分析。

2. siRNA转染

转染siRNA操作与DNA的转染操作流程一样,但在稀释siRNA时则不需要加入Universal-A溶液(3)

不同细胞培养容器转染用量(仅供参考):

培养皿

96-well

24-well

6-well

贴壁细胞

1-4×104

0.5-2×105

0.25-1×106

使用Opti-MEM培养基稀释Universal-B溶液,轻轻混匀。

Opti-MEM培养基

5 μL

25 μL

125 μL

Universal-B溶液

0.2 μL

1 μL

5 μL

使用Opti-MEM培养基稀释DNA,得到DNA预混液,然后添加Universal-A溶液,轻轻混匀,得到稀释的DNA

Opti-MEM培养基

5 μL

25 μL

125 μL

DNA (0.5–5 μg/μL)

0.1 μg

0.5 μg

2.5 μg

Universal-A溶液(2 μL/μg DNA)

0.2 μL

1 μL

5 μL

将稀释的DNA加入已稀释的Universal-B溶液中(1:1比例)

稀释的DNA

5 μL

25 μL

125 μL

稀释的Universal-B溶液

5 μL

25 μL

125 μL

室温孵育5分钟

DNA-脂质体复合物形成

复合物成分(每孔)

96-well

24-well

6-well

Opti-MEM培养基

10 μL

50 μL

250 μL

DNA(0.5–5 μg/μL)

0.1 μg

0.5 μg

2.5 μg

Universal-B溶液

0.2 μL

1 μL

5 μL

Universal-A溶液

0.2 μL

1 μL

5 μL

DNA-脂质体复合物逐滴加到细胞中,轻轻混匀

DNA-脂质体复合物

10 μL

50 μL

250 μL

【注】该表使用量仅供参考,DNAUniversal-B溶液具体使用量还需根据细胞类型及其他实验条件进行优化。建议使用时比值保持在1:0.5-1:5之间。

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货号

规格

Hieff Trans® Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂

40802ES02

0.5 mL

40802ES03

1.0 mL

40802ES08

5×1mL

Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂

40803ES70

200 T

Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/ml

40804ES76

500 μL

40804ES86

5×500 μL

Hieff Trans® Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂

40805ES02

0.5 mL

40805ES03

1.0 mL

40805ES08

5×1 mL

Hieff Trans® in vitro siRNA/miRNA Transfection Reagent siRNA/miRNA体外转染试剂

40806ES02

0.5 mL

40806ES03

1.0 mL

Polyethylenimine Linear(PEI) MW25000 线性PEI转染试剂MW25000

40815ES03

1 g

40815ES08

5×1 g

Polyethylenimine Linear(PEI) MW40000rapid lysis)线性PEI转染试剂(速溶型)MW40000

40816ES02

100 mg

40816ES03

1 g

HB220930

 

Hieff Trans&lt;sup&gt;®&lt;/sup&gt;通用型转染试剂

暂无内容

[1] Xie F, Su P, Pan T, et al. Engineering Extracellular Vesicles Enriched with Palmitoylated ACE2 as COVID-19 Therapy. Adv Mater. 2021;33(49):e2103471. doi:10.1002/adma.202103471(IF:30.849)
[2] Su WQ, Yu XJ, Zhou CM. SARS-CoV-2 ORF3a Induces Incomplete Autophagy via the Unfolded Protein Response. Viruses. 2021;13(12):2467. Published 2021 Dec 9. doi:10.3390/v13122467(IF:5.048)
[3] Zu S, Xue Q, He Z, et al. Duck PIAS2 Promotes H5N1 Avian Influenza Virus Replication Through Its SUMO E3 Ligase Activity. Front Microbiol. 2020;11:1246. Published 2020 Jun 11. doi:10.3389/fmicb.2020.01246(IF:4.236)