快速末端修复/A尾添加模块|Hieff NGS®Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module
产品说明书
FAQ
COA
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产品描述
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module是针对Illumina®高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块，具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容1 ng-1 μg片段化Input DNA，可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5'端磷酸化和3'端加A尾反应，得到5'末端含磷酸基团且3'末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化，即可使用Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）进行文库构建接头连接反应。
本产品已与Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文库构建，通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
24 T |
96 T |
|
12608-A |
End Repair/dA-Tailing Buffer |
144 μL |
576 μL |
|
12608-B |
End Repair/dA-Tailing Enzyme |
96 μL |
384 μL |
测序验证
本品与Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace® High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文库构建，已通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅用作科研用途！
使用方法
1. 将表1中各试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1 末端修复/dA尾添加PCR反应体系
|
名称 |
体积（μL） |
|
Fragmented DNA |
x |
|
End Repair/dA-Tailing Buffer |
6 |
|
End Repair/dA-Tailing Enzyme |
4 |
|
ddH2O |
Up to 60 μL |
3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。
4. 将上述PCR管置于PCR仪，设置表2所示反应程序，进行末端修复/dA尾添加反应。
表2 末端修复/dA尾添加PCR反应程序
|
温度 |
时间 |
|
热盖105°C |
On |
|
30°C |
20 min |
|
72°C |
20 min |
|
4°C |
Hold |
5. 产物如需纯化，可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效产品。
HB220728
产品描述
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module是针对Illumina®高通量测序平台文库构建而专业设计的DNA末端修复/A尾添加模块，具有高效、快速、易实现自动化的优势。本产品兼容1 ng-1 μg片段化Input DNA，可在单管内实现片段化DNA的末端补平、5'端磷酸化和3'端加A尾反应，得到5'末端含磷酸基团且3'末端带有dA突出的DNA产物。该产物无需纯化，即可使用Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）进行文库构建接头连接反应。
本产品已与Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文库构建，通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
24 T |
96 T |
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12608-A |
End Repair/dA-Tailing Buffer |
144 μL |
576 μL |
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12608-B |
End Repair/dA-Tailing Enzyme |
96 μL |
384 μL |
测序验证
本品与Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace® High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文库构建，已通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 本产品仅用作科研用途！
使用方法
1. 将表1中各试剂解冻后，颠倒混匀，置于冰上备用。
2. 于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1 末端修复/dA尾添加PCR反应体系
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名称 |
体积（μL） |
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Fragmented DNA |
x |
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End Repair/dA-Tailing Buffer |
6 |
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End Repair/dA-Tailing Enzyme |
4 |
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ddH2O |
Up to 60 μL |
3. 使用移液器轻轻吹打或振荡混匀，并短暂离心将反应液离心至管底。
4. 将上述PCR管置于PCR仪，设置表2所示反应程序，进行末端修复/dA尾添加反应。
表2 末端修复/dA尾添加PCR反应程序
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温度 |
时间 |
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热盖105°C |
On |
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30°C |
20 min |
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72°C |
20 min |
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4°C |
Hold |
5. 产物如需纯化，可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效产品。
HB220728
暂无内容
[1]Ma CJ, Li L, Shao WX, et al. An enzyme-mediated bioorthogonal labeling method for genome-wide mapping of 5-hydroxymethyluracil. Chem Sci. 2021;12(42):14126-14132. Published 2021 Oct 4. doi:10.1039/d1sc03812e(IF:9.969)
[2]Zhou W, Yang B, Zou Y, et al. Screening of Compounds for Anti-tuberculosis Activity, and in vitro and in vivo Evaluation of Potential Candidates. Front Microbiol. 2021;12:658637. Published 2021 Jun 30. doi:10.3389/fmicb.2021.658637(IF:6.064)