产品描述

本试剂盒利用独特的磁珠与缓冲液系统，可以特异性地吸附RNA，有效去除蛋白、盐离子和其它杂质。常用于纯化去除rRNA后的总RNA样本，体外转录的RNA产物，RNA标记产物以及合成的RNA等。纯化后的RNA适用于RNA文库构建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等实验。

运输与保存方法

冰袋运输。2-8℃保存，有效期一年。避免冷冻！

使用方法

所需额外试剂：

100% 乙醇，Nuclease-free水，磁力架，Nuclease-free离心管。

实验前准备：

（1）将RNA clean beads 从4 ℃取出，平衡至室温（约30 min）。

（2）在一个Nuclease free PCR管中，用Nuclease-free水将0.5-5 μg总RNA稀释至50 μL。

RNA纯化：
（1）颠倒或涡旋振荡使磁珠充分混匀，吸取2×磁珠（100 μL）加入总RNA样品中（50 μL），用移液器吹打6次充分混匀。

（2）室温孵育5 min，使RNA结合到磁珠上。

（3）将样品置于磁力架上5 min，待溶液澄清后，小心移除上清。

（4）保持样品置于磁力架上，加入200 μL新鲜配制的80%乙醇,漂洗磁珠，室温孵育30 s，小心移除上清。

【注】漂洗时使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鲜配制，以防止引入RNase酶导致RNA降解。

（5）重复步骤4，共漂洗2次。

（6）保持样品始终处于磁力架上，开盖空气干燥磁珠5 min。

【注】磁珠开盖晾干时要避免过分干燥，如果磁珠出现龟裂，则提示磁珠过分干燥，此时RNA的洗脱效率会降低。

（7）将样品从磁力架上取出，加入12 μL Nuclease-free 水，用移液器吹打6次以充分混匀，室温静置5 min。

（8）将样品置于磁力架5 min，待溶液澄清后，小心转移上清10 μL至一个新的Nuclease-free PCR管中。

【注】建议转移上清时留2-3 μL液体，以免吸到磁珠影响后续实验。得到的RNA极不稳定，建议尽快进入下一步。若

要保存，请置于-80℃保存。

注意事项

1）磁珠使用前一定要平衡到室温后混匀，否则可能影响样品的回收效率。

2）操作过程要严格保证无RNase酶和核酸污染。

3）80%乙醇需现用现配，否则将影响回收效率。

4）本试剂盒和其他试剂配套使用时，请按照具体实验说明来进行操作。

5）本产品仅作科研用途！

结果展示：

使用总RNA纯化试剂盒纯化前后，RNA样品qRT-PCR Ct值变化

【注】使用Hieff NGS^® RNA Cleaner可以有效去除影响RT-PCR的抑制剂，让检测结果更加真实。

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HB190103

Q：这款磁珠的载量是多少，1μL可以结合多少RNA?

A：无具体参考，可以先根据使用说明书中的体系，单次反应50μl体积的样本，使用1.8~2倍磁珠（100μl磁珠）可以纯化0.5-5µg RNA。

Q：这款磁珠可以回收小RNA吗？

A：可以回收到小RNA，回收率没有专门测试过，我们一般是用于Total RNA的纯化。

Q：如何从磁珠的外观区分磁珠是否正常？

A：正常磁珠静置时，微珠与buffer 分层，聚集在瓶身底部，使用前震荡混匀，微珠均匀分布在buffer 中。非正常磁珠由于 β-巯基乙醇、DTT、pH 差值大等因素，影响磁珠的均一性，使得磁珠粘稠，聚集成块或出现挂壁的现象。

Q：磁珠未开封的时候 4℃保存，开封后一直室温保存使用，是否会影响磁珠的回收性能？

A：室温放置对磁珠的回收性能会有一定影响，不建议室温放置太久，使用完后建议 4℃保存。PEG 分离效果易受pH、温度等影响。

Q：RNA 磁珠的用途？

A：12602：RNA 纯化磁珠；12603：真核生物完整 mRNA 抓取磁珠

Q：磁珠沉淀可能是什么原因？

A：1）样本：样本中含高糖或者高蛋白；样本buffer 和磁珠 buffer 冲突；

2）磁珠：磁珠 buffer 被污染

3）操作：干燥时间太长（一般不宜超过 5 min）

Q：磁珠可以重复使用吗？

A：产品不可以重复使用，乙醇洗脱步骤将影响磁珠表面活性基团性能。

Q：可以用DNA纯化磁珠代替RNA纯化磁珠吗？

A：不建议，DNA磁珠纯化RNA可能造成RNA降解。RNA磁珠中的体系更有利于维持RNA结构的稳定，防止其降解。