PAGE凝胶电泳PCR预混液|PCR Master Mix for PAGE

PAGE凝胶电泳PCR预混液|PCR Master Mix for PAGE

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2× Hieff® PCR Master Mix for PAGE含有经过配体修饰的热稳定Taq DNA Polymerase融合3-5校正活性因子以及优化的缓冲体系,具有卓越的耐抑制性和扩增效率。试剂包含扩增所需的dNTPMg2+,使用时只需加入引物和模板即可进行PCR反应避免了加样过程产生的各种损耗,同时Mix还包含了示踪染料,可在PCR反应后直接进行琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。此外,体系中加入的保护剂使得本产品经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。可搭配翌圣高分辨率PAGE预制胶(Yeasen No. 36245ES10-36256ES10)使用,操作更加方便!

 

PCR反应体系和扩增条件

组分

体积

循环步骤

温度

时间

循环数

ddH2O

to 50 μL

预变性

95

3 min

1

2× Hieff® PCR Master Mix for PAGE a

25 μL

变性

95

15 sec

30-35

DNA模板b

适量

退火

60

15 sec

Primer正向 (10 μM)

2 μL

延伸

72

10 sec/kb

Primer反向 (10 μM)

2 μL

终延伸

72℃

5 min

1

a 反应缓冲液:缓冲液中含有2 mM Mg2+和优化的dNTPs成分。

b 不同模板的推荐使用量

模板种类

使用量范围(50 μL反应体系)

gDNAcDNA (RNA相当)

1  1000 ng

质粒或病毒DNA

10 pg – 100 ng

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。

 

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

HB220727

Q:为什么普通的PCR Mix不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳?

A:常规的PCR Mix的buffer组分容易导致PAGE电泳时候条带形变扭曲,同时 PAGE通常会用到银染,银离子和buffer反应会导致背景很强。

PAGE凝胶电泳PCR预混液|PCR Master Mix for PAGE

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2× Hieff® PCR Master Mix for PAGE含有经过配体修饰的热稳定Taq DNA Polymerase融合3-5校正活性因子以及优化的缓冲体系,具有卓越的耐抑制性和扩增效率。试剂包含扩增所需的dNTPMg2+,使用时只需加入引物和模板即可进行PCR反应避免了加样过程产生的各种损耗,同时Mix还包含了示踪染料,可在PCR反应后直接进行琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。此外,体系中加入的保护剂使得本产品经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。可搭配翌圣高分辨率PAGE预制胶(Yeasen No. 36245ES10-36256ES10)使用,操作更加方便!

 

PCR反应体系和扩增条件

组分

体积

循环步骤

温度

时间

循环数

ddH2O

to 50 μL

预变性

95

3 min

1

2× Hieff® PCR Master Mix for PAGE a

25 μL

变性

95

15 sec

30-35

DNA模板b

适量

退火

60

15 sec

Primer正向 (10 μM)

2 μL

延伸

72

10 sec/kb

Primer反向 (10 μM)

2 μL

终延伸

72℃

5 min

1

a 反应缓冲液:缓冲液中含有2 mM Mg2+和优化的dNTPs成分。

b 不同模板的推荐使用量

模板种类

使用量范围(50 μL反应体系)

gDNAcDNA (RNA相当)

1  1000 ng

质粒或病毒DNA

10 pg – 100 ng

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。

 

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

HB220727

Q:为什么普通的PCR Mix不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳?

A:常规的PCR Mix的buffer组分容易导致PAGE电泳时候条带形变扭曲,同时 PAGE通常会用到银染,银离子和buffer反应会导致背景很强。

PAGE凝胶电泳PCR预混液|PCR Master Mix for PAGE

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