Nanobody-Tn5纳米抗体 anti-mouse Tn5 anti-rabbit Tn5
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COA
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Nanobody-Tn5主要是将纳米抗体与Tn5转座酶进行融合，制备出可结合两种不同物种（小鼠和兔）一抗的anti-mouse Tn5和anti-rabbit Tn5。这两种nanobody-Tn5中包埋含不同index的接头序列时，Tn5切割染色质即可将接头插入到染色质中，通过不同的index来区分来源于mouse的一抗靶向区域还是来源于rabbit一抗靶向的区域。该产品为裸酶，需要自己组装接头序列。
组分信息
|
组分编号 |
组分名称 |
12595ES01 |
12595ES02 |
12595ES03 |
|
12595-A |
Anti-mouse Tn5 |
10 μL |
80 μL |
100 μL |
|
12595-B |
Anti-rabbit Tn5 |
10 μL |
80 μL |
100 μL |
|
12595-C |
Assemble buffer |
10 μL |
80 μL |
100 μL |
储存条件
–85~–65℃保存，有效期1年。
使用说明
以高通量测序建库为例，在使用前，请务必仔细阅读使用说明。
- 接头制备
1）Illumina平台参考引物名称及序列：
Primer A-1：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATAAGGCTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3' Primer A-2：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Primer A-3：5′-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer B：5′-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer C：5'-phos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2）将Primer A、Primer B、Primer C溶解至200 μM。
3） 分别配制如下反应体系：
|
组分 |
反应1 |
|
Primer B（200 μM） |
10 μL |
|
Primer C（200 μM） |
10 μL |
|
total |
20 μL |
|
组分 |
反应2 |
|
Primer A-1 or A-2 or A-3（200 μM） |
10 μL |
|
Primer C（200 μM） |
10 μL |
|
total |
20 μL |
4）分别将反应1和反应2涡旋振荡充分混匀，并短暂离心使溶液回到管底。置于PCR仪内，进行如下反应程序：热盖105℃ On，94℃加热2 min。时间到后，停止反应程序，不要打开热盖，让PCR管在PCR仪器中自然冷却2 h，然后再于4℃中放置5 min。
5）反应结束后，将反应1和反应2等体积混合，混匀。命名为Adapter Mix，-25~-15℃保存。
2．转座子生成
1） 配置以下反应体系：
|
组分 |
体积（μL） |
|
Anti-mouse Tn5 or Anti-rabbit Tn5 |
10 |
|
Adapter mix (50 μM) |
0.5 |
|
Assemble Buffer |
0.5 |
2）反应条件：使用移液器轻轻吹打充分混匀。置于25℃反应1 h（热盖关闭）。反应产物可直接应用于建库实验，或-25~-15℃保存。
注意事项
1. 转座酶对温度敏感，建议尽快完成接头包埋，生成的转座子可于-25~-15℃保存，有效期1年。
2. 本产品仅作科研用途。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20231008
Nanobody-Tn5主要是将纳米抗体与Tn5转座酶进行融合，制备出可结合两种不同物种（小鼠和兔）一抗的anti-mouse Tn5和anti-rabbit Tn5。这两种nanobody-Tn5中包埋含不同index的接头序列时，Tn5切割染色质即可将接头插入到染色质中，通过不同的index来区分来源于mouse的一抗靶向区域还是来源于rabbit一抗靶向的区域。该产品为裸酶，需要自己组装接头序列。
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
12595ES01 |
12595ES02 |
12595ES03 |
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12595-A |
Anti-mouse Tn5 |
10 μL |
80 μL |
100 μL |
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12595-B |
Anti-rabbit Tn5 |
10 μL |
80 μL |
100 μL |
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12595-C |
Assemble buffer |
10 μL |
80 μL |
100 μL |
储存条件
–85~–65℃保存，有效期1年。
使用说明
以高通量测序建库为例，在使用前，请务必仔细阅读使用说明。
- 接头制备
1）Illumina平台参考引物名称及序列：
Primer A-1：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATAAGGCTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3' Primer A-2：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Primer A-3：5′-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer B：5′-GTCTCGTGGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Primer C：5'-phos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2）将Primer A、Primer B、Primer C溶解至200 μM。
3） 分别配制如下反应体系：
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组分 |
反应1 |
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Primer B（200 μM） |
10 μL |
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Primer C（200 μM） |
10 μL |
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total |
20 μL |
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组分 |
反应2 |
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Primer A-1 or A-2 or A-3（200 μM） |
10 μL |
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Primer C（200 μM） |
10 μL |
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total |
20 μL |
4）分别将反应1和反应2涡旋振荡充分混匀，并短暂离心使溶液回到管底。置于PCR仪内，进行如下反应程序：热盖105℃ On，94℃加热2 min。时间到后，停止反应程序，不要打开热盖，让PCR管在PCR仪器中自然冷却2 h，然后再于4℃中放置5 min。
5）反应结束后，将反应1和反应2等体积混合，混匀。命名为Adapter Mix，-25~-15℃保存。
2．转座子生成
1） 配置以下反应体系：
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组分 |
体积（μL） |
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Anti-mouse Tn5 or Anti-rabbit Tn5 |
10 |
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Adapter mix (50 μM) |
0.5 |
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Assemble Buffer |
0.5 |
2）反应条件：使用移液器轻轻吹打充分混匀。置于25℃反应1 h（热盖关闭）。反应产物可直接应用于建库实验，或-25~-15℃保存。
注意事项
1. 转座酶对温度敏感，建议尽快完成接头包埋，生成的转座子可于-25~-15℃保存，有效期1年。
2. 本产品仅作科研用途。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20231008
暂无内容
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