Hieff Canace®II 高保真DNA聚合酶(High-Fidelity DNA Polymerase)
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FAQ
COA
已发表文献
Hieff Canace®II High-Fidelity DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase，经基因工程改造而成，其蛋白结构包含5’→3’聚合酶结构域和3’→5’外切酶结构域。这种组合大幅度提升了酶的耐热性，保真性。耐热温度达到98°C，保真性是Taq DNA聚合酶的52倍，普通Pfu DNA聚合酶的6倍。该酶主要为NGS文库扩增所设计，克服了扩增不同GC含量模板带来的GC-bias，同时扩增效率比第一代的Canace高1.5倍，文库扩增产量大幅增加。本产品配备了单独的buffer，并增加了特殊的扩增促进剂，具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
||
|
14381ES03 |
14381ES10 |
14381ES60 |
||
|
14381 |
Hieff Canace®II High-Fidelity DNA Polymerase (10 U/μL) |
1 mL |
10 mL |
100 mL |
产品应用
基因克隆；复杂DNA模板扩增；高通量建库。
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74°C，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
运输与保存方法
冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。
注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2. 本产品仅作科研用途！
使用方法
在使用前，请务必仔细阅读使用说明。
1. PCR反应体系（推荐冰上配制）
表1 PCR扩增反应体系
|
组分 |
体积 (μL) |
|
ddH2O |
to 50 |
|
2×Canace®Ⅱ PCR buffer (含Mg2+, dNTPs)(Cat#15421) |
25 |
|
模板或接头连接产物 |
X |
|
NGS Primer 1 (10-25 μM) |
1 |
|
NGS Primer 2 (10-25 μM) |
1 |
|
Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity DNA Polymerase (10 U/μL) |
0.1 |
【注】： 1) 试剂使用：使用前要充分解冻混匀；
2) 聚合酶浓度：50 μL体系推荐使用1 U，可以在0.5-2 U之间进行优化；
3) Mg2+终浓度：体系终浓度为1.5 mM。如有特殊需要，可用50 mM MgCl2，以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索；
4) 高GC模板：在体系中加入终浓度为3%的DMSO可能有利于扩增。
2. PCR扩增程序
表2 PCR扩增反应程序
|
温度 |
时间 |
循环数 |
|
98℃ |
1 min |
1 |
|
98℃ |
|
1~15（根据实验要求） |
|
60℃ |
30 sec |
|
|
72℃ |
30 sec |
|
|
72℃ |
5 min |
1 |
|
4℃ |
Hold |
– |
HB221220
Hieff Canace®II High-Fidelity DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase，经基因工程改造而成，其蛋白结构包含5’→3’聚合酶结构域和3’→5’外切酶结构域。这种组合大幅度提升了酶的耐热性，保真性。耐热温度达到98°C，保真性是Taq DNA聚合酶的52倍，普通Pfu DNA聚合酶的6倍。该酶主要为NGS文库扩增所设计，克服了扩增不同GC含量模板带来的GC-bias，同时扩增效率比第一代的Canace高1.5倍，文库扩增产量大幅增加。本产品配备了单独的buffer，并增加了特殊的扩增促进剂，具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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14381ES03 |
14381ES10 |
14381ES60 |
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Hieff Canace®II High-Fidelity DNA Polymerase (10 U/μL) |
1 mL |
10 mL |
100 mL |
产品应用
基因克隆；复杂DNA模板扩增；高通量建库。
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74°C，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
运输与保存方法
冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。
注意事项
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2. 本产品仅作科研用途！
使用方法
在使用前，请务必仔细阅读使用说明。
1. PCR反应体系（推荐冰上配制）
表1 PCR扩增反应体系
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组分 |
体积 (μL) |
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ddH2O |
to 50 |
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2×Canace®Ⅱ PCR buffer (含Mg2+, dNTPs)(Cat#15421) |
25 |
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模板或接头连接产物 |
X |
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NGS Primer 1 (10-25 μM) |
1 |
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NGS Primer 2 (10-25 μM) |
1 |
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Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity DNA Polymerase (10 U/μL) |
0.1 |
【注】： 1) 试剂使用：使用前要充分解冻混匀；
2) 聚合酶浓度：50 μL体系推荐使用1 U，可以在0.5-2 U之间进行优化；
3) Mg2+终浓度：体系终浓度为1.5 mM。如有特殊需要，可用50 mM MgCl2，以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索；
4) 高GC模板：在体系中加入终浓度为3%的DMSO可能有利于扩增。
2. PCR扩增程序
表2 PCR扩增反应程序
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温度 |
时间 |
循环数 |
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98℃ |
1 min |
1 |
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98℃ |
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1~15（根据实验要求） |
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60℃ |
30 sec |
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72℃ |
30 sec |
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72℃ |
5 min |
1 |
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4℃ |
Hold |
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HB221220
暂无内容
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