一步法多重反转PCR试剂盒(Hifair® V Multiplex One Step RT-PCR Kit)
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
Hifair® V Multiplex One Step RT-PCR Kit是以RNA为模板进行多重PCR反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer、Enzymes Mix等，缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等，并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重PCR反应扩增效率的因子，能够保证引物扩增效率的同时，进行多达八重的反应。
产品组分
|
组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
|
|
13089ES50 （50T） |
13089ES60 （100T） |
||
|
13089-A |
2×Hifair® V MP Buffer |
500 μL |
1 mL |
|
13089-B |
Hifair® V Enzyme Mix |
75 μL |
150 μL |
|
13089-C |
RNase Free H2O |
500 μL |
1 mL |
【注】1) 2×Hifair® V MP Buffer为Multiplex One Step RT-PCR Kit的简写。本组分含有dNTP和Mg2+和扩增所需的离子。
- Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作
反应体系（以20 μL为例）
|
组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
|
2×Hifair® V MP Buffer |
10 |
1× |
|
Hifair® V Enzyme Mix |
1.5 |
– |
|
Primer Mix |
x |
0.1 μM -0.5 μM |
|
模板 RNA |
1 ng-100 ng |
– |
|
RNase Free H2O |
to 20 |
– |
【注】：使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
- 引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.2 μM，也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。
b) 反应体系：推荐使用20 μL以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
c) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
|
|
反应阶段 |
温度 |
时间 |
循环数 |
|
1 |
逆转录 |
50℃a |
15 min |
1 |
|
2 |
预变性 |
95℃ |
5 min |
1 |
|
3 |
扩增反应 |
95℃ |
15 sec |
35 |
|
60℃b |
5 min |
【注】1）退火/延伸温度可根据实验要求适当调整
- 退火/延伸的时间可根据扩增长度进行调整，扩增速度1 kb/min
HB200913
Hifair® V Multiplex One Step RT-PCR Kit是以RNA为模板进行多重PCR反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和PCR在同一反应管中进行，简化了实验操作。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA，并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer、Enzymes Mix等，缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等，并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重PCR反应扩增效率的因子，能够保证引物扩增效率的同时，进行多达八重的反应。
产品组分
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组分编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
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13089ES50 （50T） |
13089ES60 （100T） |
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13089-A |
2×Hifair® V MP Buffer |
500 μL |
1 mL |
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13089-B |
Hifair® V Enzyme Mix |
75 μL |
150 μL |
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13089-C |
RNase Free H2O |
500 μL |
1 mL |
【注】1) 2×Hifair® V MP Buffer为Multiplex One Step RT-PCR Kit的简写。本组分含有dNTP和Mg2+和扩增所需的离子。
- Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作
反应体系（以20 μL为例）
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
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2×Hifair® V MP Buffer |
10 |
1× |
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Hifair® V Enzyme Mix |
1.5 |
– |
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Primer Mix |
x |
0.1 μM -0.5 μM |
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模板 RNA |
1 ng-100 ng |
– |
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RNase Free H2O |
to 20 |
– |
【注】：使用前务必充分混匀，避免剧烈震荡产生过多气泡。
- 引物浓度：Primer Mix中包含多对引物，通常每条引物终浓度为0.2 μM，也可以根据情况在0.1-0.5 μM间进行调整。
b) 反应体系：推荐使用20 μL以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
c) 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
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反应阶段 |
温度 |
时间 |
循环数 |
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1 |
逆转录 |
50℃a |
15 min |
1 |
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2 |
预变性 |
95℃ |
5 min |
1 |
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3 |
扩增反应 |
95℃ |
15 sec |
35 |
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60℃b |
5 min |
【注】1）退火/延伸温度可根据实验要求适当调整
- 退火/延伸的时间可根据扩增长度进行调整，扩增速度1 kb/min
HB200913
暂无内容
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