pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照(pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid)

pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照(pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

产品描述

 

pGM-CMV-Luc是以CMV作为启动子,启动Luciferase在细胞内的表达,主要用于萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)报告基因的阳性对照和动物的活体成像实验等。通过对质粒上可以被预测出的转录因子结合位点全部进行适当的突变处理,在不改变质粒功能的情况下,使质粒对转录因子的非特异结合降到了最低。

 

质粒图谱

 

pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照(pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid)

 

质粒元件信息

 

CMV promoter

32-634

Minimal TA promoter (pTA)

663-685

Luciferase reporter gene

717-2379

SV40 late poly(A) signal

2414-2635

SV40 early promoter

2683-3101

Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region

3126-3920

Synthetic poly(A) signal

3945-3993

Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region

5108-5968

Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site

6073-6226

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。-20 ºC保存。

 

使用说明

 

pGM-CMV-Luc可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

 

注意事项

 

1)本质粒未经翊圣生物允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位;

2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和戴一次性手套。

 

 

HB190107

 

 

Q:报告基因质粒的全序列能否提供?结合位点序列两端的酶切位点是什么?

A:全序列和酶切位点序列均是保密的,在已购买的说明书版本上会提供转录因子的结合位点序列和质粒测序引物序列。

Q:LUC 系列的报告基因质粒骨架是什么?报告质粒的启动子是什么?

A:骨架是 PGL-6-TALUC 的启动子是PTA,抗性基因的启动子是SV40。

Q:怎么保证报告基因系列质粒的有效性的?有没有做功能性的实验验证?

A:保证全序列正确。未进行功能性试验验证,可以参考相关文献。

Q:报告基因质粒导入细胞后能稳定遗传吗?

A:不建议做稳转,常用于瞬转。

Q:1μg 报告基因质粒是固体还是液体形式?浓度是多少?报告基因质粒 1μg 包装可以用多少次?

A:液体,浓度在 100ng/μl 左右。不建议直接用,可以转化到感受态细胞如 DH5α中摇菌抽提质粒进行扩大量。

Q:报告基因质粒是针对什么物种的?

A:仅用于哺乳动物,如人,小鼠等。

Q:报告基因质粒转染有什么特别要注意的?

A:没有,和普通质粒转染一样。转染方法参考所用转染试剂。

Q:阴性对照和阳性对照是什么?

A:阴性对照是 Luciferase Reporter Plasmid negative control (荧光素酶报告基因质粒阴性对照11555ES03。阳性对照需客户自己参考相关文献。

[1] Shen AW, Fu LL, Lin L, et al. SNX9 Inhibits Cell Proliferation and Cyst Development in Autosomal Dominant Polycystic Kidney Disease via Activation of the Hippo-YAP Signaling Pathway. Front Cell Dev Biol. 2020;8:811. Published 2020 Aug 21. doi:10.3389/fcell.2020.00811(IF:5.186)
[2] Liu C, He X, Liu X, et al. RPS15A promotes gastric cancer progression via activation of the Akt/IKK-β/NF-κB signalling pathway. J Cell Mol Med. 2019;23(3):2207-2218. doi:10.1111/jcmm.14141(IF:4.658)
[3] Zhu Y, Zhang X, Qi M, Zhang Y, Ding F. miR-873-5p inhibits the progression of colon cancer via repression of tumor suppressor candidate 3/AKT signaling. J Gastroenterol Hepatol. 2019;34(12):2126-2134. doi:10.1111/jgh.14697(IF:3.632)

产品描述

 

pGM-CMV-Luc是以CMV作为启动子,启动Luciferase在细胞内的表达,主要用于萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)报告基因的阳性对照和动物的活体成像实验等。通过对质粒上可以被预测出的转录因子结合位点全部进行适当的突变处理,在不改变质粒功能的情况下,使质粒对转录因子的非特异结合降到了最低。

 

质粒图谱

 

pGM-CMV-Luc荧光素酶报告基因质粒阳性对照(pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid)

 

质粒元件信息

 

CMV promoter

32-634

Minimal TA promoter (pTA)

663-685

Luciferase reporter gene

717-2379

SV40 late poly(A) signal

2414-2635

SV40 early promoter

2683-3101

Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region

3126-3920

Synthetic poly(A) signal

3945-3993

Synthetic Beta-lactamase(Ampr) coding region

5108-5968

Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site

6073-6226

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。-20 ºC保存。

 

使用说明

 

pGM-CMV-Luc可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

 

注意事项

 

1)本质粒未经翊圣生物允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位;

2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和戴一次性手套。

 

 

HB190107

 

 

Q:报告基因质粒的全序列能否提供?结合位点序列两端的酶切位点是什么?

A:全序列和酶切位点序列均是保密的,在已购买的说明书版本上会提供转录因子的结合位点序列和质粒测序引物序列。

Q:LUC 系列的报告基因质粒骨架是什么?报告质粒的启动子是什么?

A:骨架是 PGL-6-TALUC 的启动子是PTA,抗性基因的启动子是SV40。

Q:怎么保证报告基因系列质粒的有效性的?有没有做功能性的实验验证?

A:保证全序列正确。未进行功能性试验验证,可以参考相关文献。

Q:报告基因质粒导入细胞后能稳定遗传吗?

A:不建议做稳转,常用于瞬转。

Q:1μg 报告基因质粒是固体还是液体形式?浓度是多少?报告基因质粒 1μg 包装可以用多少次?

A:液体,浓度在 100ng/μl 左右。不建议直接用,可以转化到感受态细胞如 DH5α中摇菌抽提质粒进行扩大量。

Q:报告基因质粒是针对什么物种的?

A:仅用于哺乳动物,如人,小鼠等。

Q:报告基因质粒转染有什么特别要注意的?

A:没有,和普通质粒转染一样。转染方法参考所用转染试剂。

Q:阴性对照和阳性对照是什么?

A:阴性对照是 Luciferase Reporter Plasmid negative control (荧光素酶报告基因质粒阴性对照11555ES03。阳性对照需客户自己参考相关文献。

[1] Shen AW, Fu LL, Lin L, et al. SNX9 Inhibits Cell Proliferation and Cyst Development in Autosomal Dominant Polycystic Kidney Disease via Activation of the Hippo-YAP Signaling Pathway. Front Cell Dev Biol. 2020;8:811. Published 2020 Aug 21. doi:10.3389/fcell.2020.00811(IF:5.186)
[2] Liu C, He X, Liu X, et al. RPS15A promotes gastric cancer progression via activation of the Akt/IKK-β/NF-κB signalling pathway. J Cell Mol Med. 2019;23(3):2207-2218. doi:10.1111/jcmm.14141(IF:4.658)
[3] Zhu Y, Zhang X, Qi M, Zhang Y, Ding F. miR-873-5p inhibits the progression of colon cancer via repression of tumor suppressor candidate 3/AKT signaling. J Gastroenterol Hepatol. 2019;34(12):2126-2134. doi:10.1111/jgh.14697(IF:3.632)