免疫球蛋白G降解酶 半胱氨酸水解酶|IdeS Protease

免疫球蛋白G降解酶 半胱氨酸水解酶|IdeS Protease

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

IdeS Protease全称免疫球蛋白G降解酶(Immunoglubulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes, IdeS),是由人类致病菌酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。该蛋白酶具有极高的底物特异性,仅能识别 IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使 IgG 水解为完整的 F(ab’)2 片段和 Fc 片段。IdeS 可识别人源和其他多种动物来源的 IgG,比如、兔、猴、绵羊以及人动物嵌合 IgG 等。IdeS 具有独特的底物选择性,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。

本产品利用大肠杆菌重组表达,纯度高,具有良好的酶切活性,是用于表征治疗性抗体、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具。  

 

产品信息

货号

20412JP84 / 20412JP90

规格

2000 U / 5000 U

 

产品性质

中文别名Chinese synonym)

免疫球蛋白G降解酶

英文别名(English synonym)

IdeS Protease

来源(Source)

大肠杆菌表达

标签(label)

N-terminal His Tag

纯度(Purity)

SDS-PAGE及HPLC分析,纯度> 95%

分子量(Molecular weight)

35.3kDa

缓冲液组分(Buffer)

50 mM 磷酸钠,150 mM NaCl(pH6.6),50% glycerol

酶活(Enzyme activity)

40 U/μL

酶活定义(Unit Definition)

37℃条件下,反应 30 min,剪切>95%的1 μg重组单克隆 IgG

所需要的酶量定义为一个活性单位。

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期1年。

 

使用方法

1.在消化液中加入适量IgG(加至5 mg)

2.在IgG 样本中加入 IdeS 蛋白酶(每1 μg IgG 加入1个单位的 IdeS)

3.将样品置于 37℃孵育 30-60 min。IdeS 蛋白酶在中性 pH 或接近中性 pH 的缓冲中活性最强。推荐反应缓冲是 50 mM 磷酸钠,150 mM NaCl(pH6.6),多数常见的生物缓冲也适用,比如 Tris 或 PBS 

注意:不在此 pH 范围(例如乙酸盐缓冲液)的缓冲也可能适用,但是孵育时间或酶量需要根据实际情况进行优化。

 

注意事项

1. IdeS不能识别切割小鼠IgG1/IgG2b,大鼠、猪、牛和山羊IgG, 对小鼠IgG2a和IgG3具有中等酶切活性, 酶切小鼠IgG2a 和IgG3建议增加IdeS的用量(推荐用量为正常用量的5-10倍)。

2. IdeS 不能切割非IgG亚型的单抗分子,包括IgA、IgM、IgD和IgE。

3. 本产品仅作科研用途

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20230908

Q:本产品常用于哪些实验?

AIdeS 可识别人源和其他多种动物来源的IgG,可作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。

Q:该产品能置于 4°保存吗?

A:不能,20℃保存。

Q:该产品的使用量是多少?

A:一般要根据具体实验做预实验,自己摸索。

Q:该产品的缓冲液是什么?

A:推荐反应缓冲是 50 mM 磷酸钠150 mM NaClpH6.6,多数常见的生物缓冲也适用,比如 Tris  PBS。但推荐反应缓冲是 50 mM 磷酸钠,150 mM NaCl多数常见的生物缓冲也适用,比如 Tris PBS。pH6.6

 

[1] Cheng Y, Shi D, Xu Z, et al. 124I-Labeled Monoclonal Antibody and Fragment for the Noninvasive Evaluation of Tumor PD-L1 Expression In Vivo [published online ahead of print, 2022 Mar 4]. Mol Pharm. 2022;10.1021/acs.molpharmaceut.2c00084. doi:10.1021/acs.molpharmaceut.2c00084(IF:4.939)

IdeS Protease全称免疫球蛋白G降解酶(Immunoglubulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes, IdeS),是由人类致病菌酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。该蛋白酶具有极高的底物特异性,仅能识别 IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使 IgG 水解为完整的 F(ab’)2 片段和 Fc 片段。IdeS 可识别人源和其他多种动物来源的 IgG,比如、兔、猴、绵羊以及人动物嵌合 IgG 等。IdeS 具有独特的底物选择性,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。

本产品利用大肠杆菌重组表达,纯度高,具有良好的酶切活性,是用于表征治疗性抗体、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具。  

 

产品信息

货号

20412JP84 / 20412JP90

规格

2000 U / 5000 U

 

产品性质

中文别名Chinese synonym)

免疫球蛋白G降解酶

英文别名(English synonym)

IdeS Protease

来源(Source)

大肠杆菌表达

标签(label)

N-terminal His Tag

纯度(Purity)

SDS-PAGE及HPLC分析,纯度> 95%

分子量(Molecular weight)

35.3kDa

缓冲液组分(Buffer)

50 mM 磷酸钠,150 mM NaCl(pH6.6),50% glycerol

酶活(Enzyme activity)

40 U/μL

酶活定义(Unit Definition)

37℃条件下,反应 30 min,剪切>95%的1 μg重组单克隆 IgG

所需要的酶量定义为一个活性单位。

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期1年。

 

使用方法

1.在消化液中加入适量IgG(加至5 mg)

2.在IgG 样本中加入 IdeS 蛋白酶(每1 μg IgG 加入1个单位的 IdeS)

3.将样品置于 37℃孵育 30-60 min。IdeS 蛋白酶在中性 pH 或接近中性 pH 的缓冲中活性最强。推荐反应缓冲是 50 mM 磷酸钠,150 mM NaCl(pH6.6),多数常见的生物缓冲也适用,比如 Tris 或 PBS 

注意:不在此 pH 范围(例如乙酸盐缓冲液)的缓冲也可能适用,但是孵育时间或酶量需要根据实际情况进行优化。

 

注意事项

1. IdeS不能识别切割小鼠IgG1/IgG2b,大鼠、猪、牛和山羊IgG, 对小鼠IgG2a和IgG3具有中等酶切活性, 酶切小鼠IgG2a 和IgG3建议增加IdeS的用量(推荐用量为正常用量的5-10倍)。

2. IdeS 不能切割非IgG亚型的单抗分子,包括IgA、IgM、IgD和IgE。

3. 本产品仅作科研用途

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20230908

Q:本产品常用于哪些实验?

AIdeS 可识别人源和其他多种动物来源的IgG,可作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。

Q:该产品能置于 4°保存吗?

A:不能,20℃保存。

Q:该产品的使用量是多少?

A:一般要根据具体实验做预实验,自己摸索。

Q:该产品的缓冲液是什么?

A:推荐反应缓冲是 50 mM 磷酸钠150 mM NaClpH6.6,多数常见的生物缓冲也适用,比如 Tris  PBS。但推荐反应缓冲是 50 mM 磷酸钠,150 mM NaCl多数常见的生物缓冲也适用,比如 Tris PBS。pH6.6

 

[1] Cheng Y, Shi D, Xu Z, et al. 124I-Labeled Monoclonal Antibody and Fragment for the Noninvasive Evaluation of Tumor PD-L1 Expression In Vivo [published online ahead of print, 2022 Mar 4]. Mol Pharm. 2022;10.1021/acs.molpharmaceut.2c00084. doi:10.1021/acs.molpharmaceut.2c00084(IF:4.939)