怎样选购α2-抗纤溶酶 α2-Antiplasmin

中文名:抗纤溶酶

英文名:α2-Antiplasmin

英文简称:α2-AP

产生器官:肝脏

简介:α2-抗纤溶酶(α2-Antiplasmin, α2-AP)是由肝脏合成分泌的,含有452个氨基酸的单链糖蛋白,分子量为70 000,属于丝氨酸酶抑制物家族成员之一,在人血浆中α2-AP是主要的纤溶酶抑制物,在控制纤溶中起关键作用。

实验:

为此制备α2-AP单克隆抗体,建立ELISA方法用于纤溶系统的监测,为进一步提高抗原的免疫原性,减少抗原用量,延长抗原释放时间,用大分子惰性物质如硝酸纤维素膜(NC膜)作为抗原载体进行脾内包埋免疫。我们将抗原吸附于NC膜上,沿小鼠左肩正中线下胸背部纵形切口1 cm长,逐层入腹,轻轻牵出脾脏,以刀尖沿脾纵轴轻划一小口,置入1个三角形载有α2-AP抗原的NC膜,使之*包埋于脾脏内,观察无出血后回纳脾脏,依次缝合伤口。

间隔3 w后,用同样方法再进行1次,于加强免疫后第3天取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(5∶1),用PEG-4000常规方法进行融合[2,3],HAT培养基选择培养,当克隆长至1/10孔大小时,采用间接ELISA法筛选分泌抗体阳性杂交瘤细胞株,并采用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行亚克隆,建立了2株稳定分泌抗-α2-AP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H4和2E3,并用α2-AP采用常规方法免疫家兔,制备抗-α2-AP多克隆抗体血清。

对其中的1株3H4进行研究,其杂交瘤染色体众数为96.37±1.90,分泌的抗体为IgG1亚类,kappa型。ELISA检测腹水效价1∶106,采用饱和硫酸铵盐析法从腹水纯化McAb 3H4,SDS-PAGE检测有较高纯度。3H4抗体对α2-AP标准品为阳性反应,而对ATIII及纤维蛋白原均为阴性,说明对其无交叉反应。此杂交瘤细胞株3 d传1代,体外传代培养6个月以上,ELISA检测抗体滴度无明显降低。采用ELISA法检测正常人血浆α2-AP含量,以纯化的McAb 3H4包板,兔抗α2-AP为多抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG作为三抗,以ABTS为底物,ELISA法检测了30名正常人枸缘酸钠抗凝血浆(1∶9)α2-AP含量,其结果为(98±1.99) mg/L。

应用范围:由此可见,制备α2-抗纤溶酶单克隆抗体用以检测α2-AP,对于了解肝病、血栓性疾病、DIC等许多疾病纤溶改变有着广泛的应用前景,并可用于溶栓治疗监测[1]

选购指南:

蛋白购买:

货号 品名 规格 价格 品牌
HA2AP-0230 Human alpha-2 Antiplasmin 1×100 µg 2432.85588 Haematologic Technologies
HA2AP-0230 Human alpha-2 Antiplasmin 5×100 µg 10983.2814 Haematologic Technologies
HA2AP-0230 Human alpha-2 Antiplasmin 5×1 mg 96133.2372 Haematologic Technologies
HA2AP-0230 Human alpha-2 Antiplasmin 10×1 mg 189668.2788 Haematologic Technologies
HA2AP-0230 Human alpha-2 Antiplasmin 50×1 mg 853861.554 Haematologic Technologies
HA2AP-0230 Human alpha-2 Antiplasmin 100×1 mg 1665207.18 Haematologic Technologies
HA2AP-0230 Human alpha-2 Antiplasmin 500×1 mg 7499337.3 Haematologic Technologies
a2AP a2-Antiplasmin 0.1 mg 2635 Enzyme Research2016
a2AP a2-Antiplasmin >5 x 0.1 mg 2600 Enzyme Research2016

抗体购买:

货号 品名 规格 价格 品牌
SA2AP-IG Sheep anti  human a2-Antiplasmin  purified IgG 10 mg 2822 affinitybiologicals
GA2AP-IG Goat anti  human a2-Antiplasmin  purified IgG 5 mg 2635 affinitybiologicals
GA2AP-HRP Goat anti  human a2-Antiplasmin  peroxidase conjugated IgG 0.2 mg 4029 affinitybiologicals
GA2AP-AP Goat anti  human a2-Antiplasmin  affinity purified IgG 0.5 mg 5066 affinitybiologicals
SA2AP-IG Anti-human a2Antiplasmin (a2AP)sheep, purified IgG, 10 mg 2822 Enzyme Research2016
GA2AP-IG Anti-human a2Antiplasmin (a2AP)goat, purified IgG, 5 mg 2635 Enzyme Research2016
GA2AP-HRP Anti-human a2Antiplasmin (a2AP)goat, perox-conj. IgG, 0.2 mg 4029 Enzyme Research2016
GA2AP-AP Anti-human a2Antiplasmin (a2AP)goat, affinity purified IgG, 0.5 mg 5066 Enzyme Research2016
13081-05021 Alpha-2 Antiplasmin, anti-human 150 ug 2800 AssayPro
13081-05011 Alpha-2 Antiplasmin, anti-human 150 ug 2320 AssayPro

 

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