invivogen提供了广泛的试剂,工程细胞系和测定试剂盒,可满足您对先天免疫和哺乳动物细胞表达的研究需求。
对于细胞培养,我们提供微生物污染的解决方案,以及选择性抗生素和内毒素检测试剂盒。
我们还提供了一个扩展的报告细胞系集合,以监测由细胞因子或模式识别受体(PRR)配体诱导的细胞内信号传导途径。
对于主要的PRR信号通路,我们提供相关配体,抑制剂和抗体的家族。
此外,我们提供了多种人类和鼠类基因,细胞启动子以及用于不同应用的克隆和表达载体的选择。
细胞转染
用表达GFP的质粒转染THP-1细胞
细胞转染包括将“外源”核酸(例如质粒或siRNA)引入细胞中,以分别过表达或沉默目的基因。转染可以在各种细胞环境中对特定基因的表达进行功能评估。根据核酸的类型以及细胞的类型,可以使用许多不同的转染方案。转染的三种主要方法是化学的(例如阳离子脂质),物理的(例如电穿孔)和生物的(例如病毒转导)。新引入的核酸可以是瞬时存在的,从而该基因仅在有限的时间段内表达而不能复制,也可以稳定地存在,由此该基因整合到受体细胞的基因组中。细胞转染后
仍难以转染的细胞(例如免疫细胞)通常会表达能检测外源核酸的强效胞质传感器。因此,需要转染增强剂或加强剂来禁用这些防御,从而有助于促进核酸表达并大大提高转染成功率。
InvivoGen提供:
- LyoVec™:一种专有的基于阳离子脂质的转染试剂,属于磷脂家族。它很容易用于许多细胞系的转染,例如人类胚胎肾-293(HEK-293)细胞系。
- NATE™:一种核酸转染增强剂,可提高瞬时和稳定转染效率。它被设计与转染试剂和推荐用于难以转染的细胞(例如人单核细胞和鼠巨噬细胞(分别为THP-1和RAW 264.7))一起使用的技术结合使用。
- 选择性抗生素:范围广泛的高纯度和无内毒素的选择性抗生素,包括弹性蛋白,Zeocin™,嘌呤霉素,G418,潮霉素B金和菌霉素。它们可用于在哺乳动物和细菌细胞中进行选择 。
invivogen LyoVec说明书
LyoVec™ | 单位大小 | 货号 |
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用于转染哺乳动物细胞的阳离子脂质+ 1小瓶的对照LyoVec™-GFP / SEAP复合物
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8ml,160次反应
10毫升,200次反应
18毫升,360次反应
20 ml,400次反应
16毫升,320反应
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LYEC-12
lyec-1
LYEC-22
lyec-2
lyec-3
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冻干脂质基转染试剂
LyoVec™是一种专有的基于阳离子脂质的转染试剂,属于磷脂家族。该家族最初被Floch等人描述为在体外和体内使用的有效转染试剂[1-2]。
LyoVec™的主要成分是磷脂DTCPTA,它与DiPPE偶联,DiPPE是一种中性脂质,有助于使膜双层稳定并提高LyoVec™的体外转染效率。
如何使用LyoVec™
LyoVec ™的应用:
- 阳离子脂质基转染试剂
- 核酸络合剂
磷脂的正电荷可使LyoVec™与质粒DNA结合,并且该结构可促进与细胞膜的融合,从而实现有效的DNA传递。
另外,LyoVec™可用作核酸络合剂,以促进细胞进入RNA或基于DNA的寡核苷酸,例如RIG-1配体(例如poly(dA:dT)[3]和poly(I:C) [4])和内体TLR7 / 8配体(例如ssPolyU [5])。该复合步骤对于通过病原体识别受体诱导对核酸的有效应答是至关重要的。
参考
1. Floch等人, 1997。阳离子磷脂作为非病毒载体,可在造血细胞系和CD34 +细胞中进行DNA转染。血细胞分子与疾病23:69-87。
2. Guillaume-Gable等, 1998。阳离子磷脂作为小鼠肺中非病毒基因转移剂。嗡嗡声基因The 9:2309-2319。
3. Xie M.等人, 2016。依赖PKM2的糖酵解促进NLRP3和AIM2炎性体激活。Nat Commun。7:13280。
4.JärverP.等人, 2018。单链核酸通过干扰网格蛋白介导的胞吞作用来调节TLR3 / 4/7活化。科学8:15841。
5.片芝等人, 2011年。人髓样树突状细胞中的双链DNA和单链RNA分别诱导了干扰素-α和白介素12。免疫学。132(2):165-73。
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规格
动手时间:不超过15分钟,转染前一天无需任何准备
转染:瞬时稳定转染
条件:在有血清的情况下工作,转染后无需洗涤细胞
保质期:质粒DNA(pDNA)/ LyoVec™复合物的保质期长
质量控制:
- LyoVec™的转染效率已在HEK293衍生的细胞中得到证实。
- 已经评估了HEK293衍生细胞的细胞毒性。
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内容
LyoVec™以冻干粉的形式提供,无菌并包装在密封的玻璃小瓶中。
该产品有不同的格式:
- lyec-1:5个小瓶(足以在12孔板中进行200个反应)
- lyec-2:10个小瓶(足以在12孔板中进行400个反应)
- lyec-3 :2个大瓶(足以在12孔板中进行320个反应)
- lyec-12:4个小瓶(足以在12孔板中进行160个反应)和1个对照LyoVec™-GFP / SEAP复合物。
- lyec-22:9个小瓶(足以在12孔板中进行360个反应)和1个对照LyoVec™-GFP / SEAP复合物。