repligen 9333-1蛋白A ELISA试剂盒说明书

MabSelect SuRe™ ELISA Kit Performance Summary

引言

蛋白A ELISA试剂盒（目录号9333-1）用于检测和定量残留的MabSelect SuRe™ 配体。我们的蛋白A检测ELISA试剂盒是为那些需要高灵敏度检测以测量少量污染MabSelect SuRe的客户开发的™ 抗体产物中的配体。污染测试发生在开发和商业制造的几个不同阶段，可能包括：

特定条件下树脂浸出特性的工艺开发

制造，通常从纯化过程中的几个点采集的洗脱样品

完成产品发布，以记录过程控制水平和批次间一致性

以下总结报告包含在存在人免疫球蛋白G（hIgG）的情况下，从蛋白A ELISA试剂盒的评估中收集的性能数据。此处提供的数据证明了蛋白A ELISA试剂盒：

检测MabSelect SuRe的能力™ 在PBS-T缓冲液中存在高达0.5mg/ml hIgG的配体

回收率（准确度）、批间和批内精密度、定量限和检测限

结果摘要

MabSelect SuRe公司™ 在hIgG存在下

当检测MabSelect SuRe时，评估蛋白A ELISA试剂盒的性能™ 与不含hIgG的标准相比，在hIgG存在下。所有加标样品的最终hIgG浓度为0.125mg/ml（在最终稀释到测定板中之后）。每个样品以8个重复制备，并根据试剂盒的标准方案进行三次单独的ELISA。

数据处理

将标准曲线数据点拟合到4参数拟合分析中。该方程允许反向计算样品rPA浓度和LoQ值。回收率计算如下：

定量限值（LoQ）

根据标准曲线测定的LoQ计算为0.025ng/ml。MabSelect SuRe的LOQ™ 在存在hIgG的情况下，配体加标样品为0.115ng/ml或0.920ng/mg（0.92ppm）。根据该数据设置检测MabSelect SuRe时试剂盒的灵敏度™ 在存在免疫球蛋白的情况下，配体的浓度小于百万分之一（ppm）。

稀释线性度

计算说明

精度（%CV）

通过确定rPA加标样品数据点之间的标准偏差并除以平均值来计算精度。根据“工业指南：生物分析方法验证”文本，精度应在15%以内。

分析内精密度

通过平均所有测定的%CV值，计算每个rPA加标样品浓度的测定内精密度。

分析间精密度

通过测定三次测定的计算结果之间的标准差，然后除以平均值，计算每个浓度点的测定间精密度。

定量限（LoQ）

定量限（LoQ）定义为0 ng/ml样品标准偏差的10倍。将0 ng/ml OD值的标准偏差乘以10，然后加到基础0 ng/ml OD值上。然后通过将求和值输入标准曲线4参数拟合方程来生成LoQ。对于每个试剂盒，在存在hIgG的情况下，rPA加标样品的LoQ报告为每毫升缓冲液中的ng蛋白A（ng/ml）和每毫克hIgG中的ng蛋白质A（ppm）。

检测限（LoD）

检测限（LoD）定义为0 ng/ml蛋白A标准偏差的3倍

样品将0 ng/ml OD值的标准偏差乘以3，然后加到基础0 ng/ml OD值上。然后通过将求和值输入标准曲线4参数拟合方程来生成LoD。对于每个试剂盒，LoD报告为每毫升（ng/ml）缓冲液中的ng蛋白a和百万分之一（ppm）。

精确

准确度描述为与理论加标浓度相比，通过测定确定的回收率%。

MabSelect ™, MabSelect SuRe公司™ 和SuRe™ 是GE Healthcare的注册商标。