萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)(RG009S)
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
RG009S | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) | 100次 | 478.00元 |
碧云天生产的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (Enhanced Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit),是一种以萤光素(luciferin)为底物高灵敏度检测萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)活性的试剂盒。
本产品是萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010)的不同包装版本,两者的检测效果完全一致。本产品,即RG009为即用型液体,其优点是无需配制即可直接使用,但需要-80℃保存,如果在-20℃保存时间较长后检测效果会逐渐下降。萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型),即RG010,为RG009的冻干粉版本,优点是在-20℃保存非常稳定,缺点是使用前需要使用提供的缓冲液充分溶解底物冻干粉后才能使用。
本产品的性能达到国外主要同类产品同等水平。本产品的性能和用途与Promega公司的Luciferase Assay System基本相同。本产品(RG009)与国外同类产品(Competitor P)的检测效果比较参见图1,本产品的发光强度与国外同类产品(Competitor P)相近或略优(图1A),发光信号稳定性与国外同类产品(Competitor P)基本一致(图1B)。
图1. 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) (RG009)的检测效果对比图。图中所示为本产品和国外同类产品(Competitor P)对转染阳性萤火虫萤光素酶报告基因质粒的HeLa细胞裂解样品的检测效果。图A为化学发光强度的检测效果对比图,图B为化学发光稳定性的检测效果对比图。实际读数会因细胞种类、转染效率、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本产品发光强度高。对于相同的细胞样品,本产品的发光强度可以达到甚至略优于国外同类产品(图1A),特别适用于Firefly luciferase表达水平低的样品检测。如果样品中萤火虫萤光素酶的表达水平较高,或者样品数量较多、对发光信号的稳定性要求较高,也可以使用发光强度和灵敏度稍低,但发光信号更稳定的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG005/RG006/RG007)。
本产品操作简单,检测速度快,从样品制备到完成检测仅需约20分钟。本试剂盒中提供的萤火虫萤光素酶检测试剂为即用型试剂,只需将100微升萤火虫萤光素酶检测试剂与20-100微升裂解制备的细胞样品混合后即可立即进行化学发光检测。并且发光信号比较稳定,信号半衰期约10分钟。
本产品稳定性好。本试剂盒中的萤火虫萤光素酶检测试剂的稳定性非常好,反复冻融5次对检测效果无明显影响,反复冻融10次检测效果下降不超过10%。在4℃条件下,保存3天检测效果下降不超过20%,保存5天检测效果下降不超过30%,保存7天仍可保留60%以上的检测效果。在室温保存1天可保留70%以上的检测效果,室温保存3天可保留60%以上的检测效果,37℃保存1天可保留50%以上的检测效果。萤火虫萤光素酶检测试剂即使仅保留约50%的检测效果,仍可以满足各种常规检测的要求。
萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin氧化成oxyluciferin。在luciferin氧化的过程中,会发出生物萤光(bioluminescence)。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定[1]。本试剂盒的检测原理参考图2。
图2. 萤火虫萤光素酶的检测原理图。
通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系,可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游,或把3′-UTR区克隆在luciferase的下游等,构建成报告基因(reporter gene)质粒。然后转染细胞,用适当药物等处理细胞后裂解细胞,测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用[2]。
关于碧云天萤光素酶报告基因检测试剂盒相关产品的比较和选择,请参考碧云天的相关网页:
http://www.beyotime.com/support/luciferase-reporter-gene-assay.htm
萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
萤火虫萤光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm (centered around 560nm)。
本试剂盒RG009S和RG009M分别可以测定100个和1000个样品。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG009S-1 | 报告基因细胞裂解液 | 60ml |
RG009S-2 | 萤火虫萤光素酶检测试剂 | 10ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG009M-1 | 报告基因细胞裂解液 | RG009S-1×10 |
RG009M-2 | 萤火虫萤光素酶检测试剂 | RG009S-2×10 |
— | 说明书 | 1份 |
报告基因细胞裂解液4℃保存3个月有效,-20℃保存一年有效,-80℃可以长期保存;萤火虫萤光素酶检测试剂-80℃避光保存,至少一年有效;-20℃避光保存,推荐3-6个月内使用。
萤火虫萤光素酶检测试剂在-20℃保存其检测效果会逐渐下降,保存半年后其发光效果会降低约50%。因此,本产品如果保存于-20℃,推荐在3-6个月内使用。如果订购后可能放置较长时间后再使用,推荐订购在-20℃保存非常稳定的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) (RG010)。
为取得最佳测定效果,在用单管的化学发光仪测定时,样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内,例如30秒内;使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时,宜先把样品全部加好,然后统一加入萤火虫萤光素酶检测试剂。
由于萤光素酶的活性对温度比较敏感,所以反应前样品和检测试剂均需达到室温后再进行测定。可将萤火虫萤光素酶检测试剂在室温或不超过25℃的水浴中融解并混匀后使用。
尽管经测试萤火虫萤光素酶检测试剂反复冻融5次对其检测效果无明显影响,为保证萤光素酶检测试剂的稳定性、取得良好的使用效果,第一次解冻后可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于室温。
检测时需使用白色或黑色的96孔板。如果使用普通透明的96孔板,相邻孔之间会产生相互干扰。推荐使用碧云天的BeyoGold™全黑96孔细胞培养板(FCP966)或BeyoGold™全白96孔细胞培养板(FCP968)。
样品和测定试剂混合后,必须等待1-2秒,再进行测定。测定时间通常为10秒,根据情况也可以测定更长或更短时间,但是同一批样品宜使用相同的测定时间。
为避免由于质粒转细胞时效率的差异而带来的误差,可以同时转入海肾萤光素酶(Renilla luciferase)的报告基因质粒作为内参,采用碧云天的双萤光素酶报告基因检测试剂盒(RG027/RG028)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒II (RG029)进行检测;也可以同时转入β-半乳糖苷酶(β-galactosidase, β-gal)报告基因质粒作为内参,然后采用碧云天生产的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)进行检测。采用本试剂盒中的报告基因细胞裂解液裂解获得的样品可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(RG0036)的检测。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 裂解细胞:将报告基因细胞裂解液充分混匀后,按如下方式加入报告基因细胞裂解液,充分裂解细胞。
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量报告基因细胞裂解液。
器皿类型 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
报告基因细胞裂解液(μl/孔) | 100 | 150 | 200 | 300 | 500 |
注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100微升。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于测定。
注:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
2. 融解萤火虫萤光素酶检测试剂,并达到室温。
3. 按仪器操作说明书开启化学发光仪或具有检测化学发光功能的多功能酶标仪,可以将测定间隔设为2秒,测定时间设为10秒,或者根据仪器设备的要求并根据实验需要设置适当的间隔时间和测定时间。
4. 每个样品测定时,取样品20-100微升(如果样品量足够,请加入100微升;如果样品量不足可以适当减少用量,但同批样品的使用量宜保持一致),取等体积的报告基因细胞裂解液作为空白对照。
5. 各孔加入100微升萤火虫萤光素酶检测试剂,用枪打匀或用其它适当方式混匀后测定RLU (relative light unit)。本试剂盒的检测效果以及与同类竞争产品的检测效果比较可以参考图1。
常见问题:
1. Luminometer和荧光分光光度计有何不同?
荧光分光光度计检测的样品本身不能发光,样品需要由特定波长的激发光激发,然后才能产生荧光并被荧光分光光度计检测。Luminometer检测的样品本身可以发光,不需要激发光进行激发。也就是说luminometer是检测化学发光(萤光)的仪器。有些型号的荧光分光光度计也具有luminometer的功能,即也可以检测化学发光。您所使用的荧光分光光度计能否用于化学发光的测定请仔细阅读该仪器的说明书。
2. 可以进行ATP化学发光检测的仪器是否就可以用于本试剂盒的检测?
是。ATP化学发光的检测原理和本试剂盒的原理相同,可以用相同的仪器测定。
参考文献:
1. J R de Wet, K V Wood, M DeLuca, D R Helinski, and S Subramani. Mol Cell Biol. 1987. 7:725-37.
2. E Schenborn, D Groskreutz. Mol Biotechnol. 1999. 13:29-44.
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产品编号 | 产品名称 | 包装 |
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RG009S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) | 100/1000次 |
RG010S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) | 100/1000次 |
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RG027/RG028 | 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
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RG052S/M | Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG055S/M | One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG056S/M | One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG058S/M | Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG059S/M | Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG062S/M | Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG066S/M | Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG088S/M | Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG089S/M | Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG126S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
RG127S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) | 10/100ml |
RG129S/M | 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
RG132S/M | 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
RG-185T台式高速离心机
RG-185T台式高速离心机
品牌 | 其他品牌 | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
结构类型 | 台式 | 布局形式 | 其他 |
RG-185T台式高速离心机,微机控制,直流无刷电机驱动,运行稳定、噪音低、转速精度高。广泛应用于临床医学、生物化学、基因工程、免疫学等领域。是各级医院、科研单位、高等院校用于离心分离的*仪器。
RG-185T台式高速离心机
产品特点
台式高速离心机广泛应用于临床医学、生物化学、基因工程、免疫学等领域。是各级医院、科研单位、高等院校用于离心分离的*仪器。
主要技术性能
1、数字屏(液晶屏)显示,人性化界面,操作简单便捷。
2、微机控制,直流无刷电机驱动,运行稳定、噪音低、转速精度高。
3、触摸面板,可编程操作,主机运行参数可根据需求设置且自动存储。
4、配备电子门锁,设有门盖自锁、超速等多种保护功能;故障自动报警功能,安全可靠。
5、具有9个程序的升/降速率曲线,可根据需要设置升/降速时间。
6、实时rpm/RCF之间读数换算与设定,方便快捷。
主要技术参数
型号 |
RG-185T |
转速可达 |
18500r/min |
相对离心力可达 |
23797xg |
容量可达 |
100mlx4 |
转速精度 |
± 30r/min |
时间设置范围 |
1min~99min |
整机噪音 |
<65dB(A) |
电源 |
AC220V 50Hz 10A |
外形尺寸(Lx宽xH) |
330mmx420mmx280mm |
外包装尺寸(Lx宽xH) |
430mmx520mmx390mm |
净重 |
20kg |
RG-185T台式高速离心机
型号 |
产品名称 |
转速 |
相对离心力 |
容量 |
备注 |
RG-185T型 |
台式高速离心机 |
18500 |
23797 |
LCD液晶显示 |
主机带1号转子 |
1号转子 |
角转子 |
18500 |
23797 |
1.5ml/2.2ml×12 |
二选一 |
NO.2 |
角转子 |
13000 |
11400 |
5ml×10/12 |
二选一 |
NO.3 |
角转子 |
12000 |
14800 |
10ml×12 |
|
角转子 |
12000 |
14800 |
15ml×8 |
|
|
NO.4 |
角转子 |
12000 |
13000 |
50ml×6 |
适用圆底管 |
角转子 |
12000 |
13000 |
50ml×6 |
适用尖底管 |
|
角转子 |
12000 |
13000 |
100ml×4 |
|
|
NO.5 |
水平转子 |
6000 |
3200 |
10ml×4 |
|
NO.6 |
水平酶标转子 |
3000 |
1400 |
2×48 孔 |
|
NO.7 |
角转子 |
13200 |
16110 |
1.5ml/2.2ml×24 |
二选一 |
NO.8 |
角转子 |
16000 |
23669 |
0.5ml×36/48 |
二选一 |
萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型)(RG127S)
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
RG127S | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) | 10ml | 45.00元 |
RG127M | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) | 100ml | 239.00元 |
碧云天生产的萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) (Enhanced Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Cell Lysis Buffer),是一种用于裂解细胞后用于萤火虫萤光素酶报告基因检测的裂解液。本产品裂解后的细胞样品,主要用于RG009S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)、RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)的检测,也可以用于RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒的检测。本产品裂解后的样品,不建议用于RG005/RG006 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒和RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II的检测,也不适合直接用于海肾萤光素酶报告基因的检测。
本裂解液兼容的产品列表如下:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG009S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) | 100/1000次 |
RG010S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) | 100/1000次 |
RG051S/M | Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG052S/M | Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG055S/M | One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG056S/M | One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG058S/M | Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG059S/M | Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
如果细胞量比较大,例如培养在培养皿或6孔板中时,适合使用本产品先裂解细胞,然后再使用RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒进行检测。
使用RG009S/M萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型)或RG010S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型)时,如果试剂盒中的裂解液用量不足,可以直接使用本产品。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG127S | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) | 10ml |
RG127M | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) | 100ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,至少一年有效。4℃保存至少1个月有效。
本产品裂解后的样品不适合直接用于海肾萤光素酶报告基因的检测。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 融解本产品并适当混匀,置于冰浴备用。
2. 细胞的裂解和样品的收集:
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液。
器皿类型 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
报告基因细胞裂解液(μl/孔) | 100 | 150 | 200 | 300 | 500 |
注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100μl。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
3. 组织的裂解和样品的收集:
a. 对于萤火虫萤光素酶转基因动物等组织样品的裂解,优先推荐先把组织样品液氮冷冻研磨成粉末后,按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行裂解(例如20mg组织粉末加入200μl萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液进行裂解);也可以按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行匀浆(例如20mg组织加入200μl萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液用玻璃匀浆器或者电动匀浆器进行匀浆)。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG005/RG006 | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG007S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II | 100/1000次 |
RG009S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) | 100/1000次 |
RG010S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) | 100/1000次 |
RG016/RG017 | 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG027/RG028 | 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG029S/M | 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II | 100/1000次 |
RG051S/M | Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG052S/M | Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG055S/M | One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG056S/M | One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG058S/M | Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG059S/M | Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG062S/M | Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG066S/M | Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG088S/M | Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG089S/M | Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG126S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
RG127S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) | 10/100ml |
RG129S/M | 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
RG132S/M | 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
双萤光素酶报告基因细胞裂解液(RG132S)
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
RG132S | 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10ml | 48.00元 |
RG132M | 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 100ml | 263.00元 |
碧云天生产的双萤光素酶报告基因细胞裂解液(Dual Luciferase Reporter Gene Assay Cell Lysis Buffer),是一种用于裂解细胞后用于双萤光素酶报告基因检测的裂解液。本产品裂解后的细胞样品主要用于RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG029S/M双萤光素酶报告基因检测试剂盒II的检测,也可以用于RG005/RG006 萤火虫萤光素酶检测试剂盒、RG007S/M 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II、RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒等萤火虫萤光素酶的检测,还可以用于RG016/RG017海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒等海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒及RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒和RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒的检测。
本裂解液兼容的产品列表如下:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG005 | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100次 |
RG006 | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 1000次 |
RG007S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II | 100/1000次 |
RG009S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) | 100/1000次 |
RG010S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) | 100/1000次 |
RG016 | 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100次 |
RG017 | 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 1000次 |
RG027 | 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100次 |
RG028 | 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 1000次 |
RG029S/M | 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II | 100/1000次 |
RG051S/M | Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG052S/M | Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG055S/M | One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG056S/M | One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG058S/M | Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG059S/M | Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG062S/M | Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG066S/M | Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG088S/M | Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG089S/M | Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
如果细胞量比较大,例如培养在培养皿或6孔板中时,适合使用本产品先裂解细胞,然后再使用RG051S/M Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG052S/M Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG055S/M One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG056S/M One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG058S/M Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG059S/M Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG062S/M Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG066S/M Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒、RG088S/M Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG089S/M Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒进行检测。
使用RG027/RG028 双萤光素酶报告基因检测试剂盒或RG029S/M 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II时,如果试剂盒中的裂解液用量不足,可以使用本产品。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG132S | 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10ml |
RG132M | 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 100ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存,至少一年有效。4℃保存至少1个月有效。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 融解本产品并适当混匀,置于冰浴备用。
2. 细胞的裂解和样品的收集:
a. 对于贴壁细胞:吸尽细胞培养液后,参考下表加入适量的双萤光素酶报告基因细胞裂解液;对于悬浮细胞:离心去上清后,参考下表加入适量双萤光素酶报告基因细胞裂解液。
器皿类型 | 96孔板 | 48孔板 | 24孔板 | 12孔板 | 6孔板 |
报告基因细胞裂解液(μl/孔) | 100 | 150 | 200 | 300 | 500 |
注:如果萤光素酶的表达水平比较低,可以尝试使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可以最小为100μl。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因检测、海肾萤光素酶报告基因检测或双萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
3. 组织的裂解和样品的收集:
a. 对于双萤光素酶转基因动物等组织样品的裂解,优先推荐先把组织样品液氮冷冻研磨成粉末后,按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行裂解(例如20mg组织粉末加入200μl双萤光素酶报告基因细胞裂解液进行裂解);也可以按照组织重量和裂解液体积1:10的比例进行匀浆(例如20mg组织加入200μl双萤光素酶报告基因细胞裂解液用玻璃匀浆器或者电动匀浆器进行匀浆)。
b. 充分裂解后,10,000-15,000×g离心3-5分钟,取上清用于萤火虫萤光素酶报告基因、海肾萤光素酶报告基因检测或双萤光素酶报告基因检测。
注1:细胞裂解后可立即测定萤光素酶,也可以先冻存,待以后再测定。冻存样品需融解,并达到室温后再进行测定。
注2:制备的样品也可以用BCA法测定蛋白浓度,然后用于SDS-PAGE和Western blot检测。
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
RG005/RG006 | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG007S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II | 100/1000次 |
RG009S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(增强型) | 100/1000次 |
RG010S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒II (增强型) | 100/1000次 |
RG016/RG017 | 海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG027/RG028 | 双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG029S/M | 双萤光素酶报告基因检测试剂盒II | 100/1000次 |
RG051S/M | Bright-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG052S/M | Bright-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG055S/M | One-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG056S/M | One-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG058S/M | Steady-Lumi™萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG059S/M | Steady-Lumi™ II萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG062S/M | Renilla-Lumi™海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG066S/M | Renilla-Lumi™ Plus海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG088S/M | Dual-Lumi™双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG089S/M | Dual-Lumi™ II双萤光素酶报告基因检测试剂盒 | 100/1000次 |
RG126S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
RG127S/M | 萤火虫萤光素酶报告基因细胞裂解液(增强型) | 10/100ml |
RG129S/M | 海肾萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
RG132S/M | 双萤光素酶报告基因细胞裂解液 | 10/100ml |
GDC-0068 RG7440 PAN-AKT抑制剂|GDC-0068(Ipatasertib/ RG7440/ GDC0068)|CAS 1001264-89-6
GDC-0068 RG7440 PAN-AKT抑制剂|GDC-0068(Ipatasertib/ RG7440/ GDC0068)|CAS 1001264-89-6
产品说明书
FAQ
COA
已发表文献
GDC-0068是一种ATP竞争型的高效选择性的PAN-AKT抑制剂,其抑制Akt 1/2/3的IC50值分别是5 nM、18 nM、8 nM。
产品性质
英文别名(English Synonym) |
Ipatasertib; RG7440; GDC0068; CS0975 |
中文名称 (Chinese Name) |
帕他色替 |
靶点(Target) |
Akt 1;Akt 2;Akt 3 |
CAS号(CAS NO.) |
1001264-89-6 |
分子式(Formula) |
C24H32ClN5O2 |
分子量(Molecular Weight) |
458 |
外观(Appearance) |
粉末 |
纯度(Purity) |
≥98% |
溶解性(Solubility) |
溶于DMSO |
结构式(Structure) |
|
运输和保存方法
冰袋运输。粉末直接保存于–20℃,有效期3年。建议分装后–20℃避光保存,避免反复冻融。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)粉末溶解前请先短暂离心,以保证产品全在管底。
3)本产品仅用于科研用途,禁止用于人身上。
使用浓度
【具体使用浓度请参考相关文献,并根据自身实验条件(如实验目的,细胞种类,培养特性等)进行摸索和优化。】
使用方法(数据来自于公开发表的文献,仅供参考)
(一)细胞实验(体外实验)
GDC-0068(1,5,10 μmol/L)处理细胞24 h、48 h、72 h后检测细胞增殖情况,GDC-0068阻断Akt信号通路,在人癌细胞系中具有抗增殖和诱导凋亡作用。[1]
(二)动物实验(体内实验)
GDC-0068(0,12.5,50,100 mg/kg)处理移植瘤模型,24 h后检测MCF7-neo/HER2肿瘤组织中Akt、PRAS40和S6的磷酸化水平,GDC-0068在PTEN缺失、PIK3CA突变或HER2过表达等基因改变的的异种移植模型中,可以有效激活Akt信号通路。在这些模型中,在不大于100 mg/kg的每日口服剂量下,肿瘤出现生长延迟、停滞或消退等现象。[1]
参考文献
[1]. Lin J, et al. Targeting activated Akt with GDC-0068, a novel selective Akt inhibitor that is efficacious in multiple tumor models. Clin Cancer Res. 2013 Apr 1;19(7):1760-72.
[2]. Blake JF, et al. Discovery and preclinical pharmacology of a selective ATP-competitive Akt inhibitor (GDC-0068) for the treatment of human tumors. J Med Chem. 2012 Sep 27;55(18):8110-27.
HB211207
GDC-0068是一种ATP竞争型的高效选择性的PAN-AKT抑制剂,其抑制Akt 1/2/3的IC50值分别是5 nM、18 nM、8 nM。
产品性质
英文别名(English Synonym) |
Ipatasertib; RG7440; GDC0068; CS0975 |
中文名称 (Chinese Name) |
帕他色替 |
靶点(Target) |
Akt 1;Akt 2;Akt 3 |
CAS号(CAS NO.) |
1001264-89-6 |
分子式(Formula) |
C24H32ClN5O2 |
分子量(Molecular Weight) |
458 |
外观(Appearance) |
粉末 |
纯度(Purity) |
≥98% |
溶解性(Solubility) |
溶于DMSO |
结构式(Structure) |
|
运输和保存方法
冰袋运输。粉末直接保存于–20℃,有效期3年。建议分装后–20℃避光保存,避免反复冻融。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)粉末溶解前请先短暂离心,以保证产品全在管底。
3)本产品仅用于科研用途,禁止用于人身上。
使用浓度
【具体使用浓度请参考相关文献,并根据自身实验条件(如实验目的,细胞种类,培养特性等)进行摸索和优化。】
使用方法(数据来自于公开发表的文献,仅供参考)
(一)细胞实验(体外实验)
GDC-0068(1,5,10 μmol/L)处理细胞24 h、48 h、72 h后检测细胞增殖情况,GDC-0068阻断Akt信号通路,在人癌细胞系中具有抗增殖和诱导凋亡作用。[1]
(二)动物实验(体内实验)
GDC-0068(0,12.5,50,100 mg/kg)处理移植瘤模型,24 h后检测MCF7-neo/HER2肿瘤组织中Akt、PRAS40和S6的磷酸化水平,GDC-0068在PTEN缺失、PIK3CA突变或HER2过表达等基因改变的的异种移植模型中,可以有效激活Akt信号通路。在这些模型中,在不大于100 mg/kg的每日口服剂量下,肿瘤出现生长延迟、停滞或消退等现象。[1]
参考文献
[1]. Lin J, et al. Targeting activated Akt with GDC-0068, a novel selective Akt inhibitor that is efficacious in multiple tumor models. Clin Cancer Res. 2013 Apr 1;19(7):1760-72.
[2]. Blake JF, et al. Discovery and preclinical pharmacology of a selective ATP-competitive Akt inhibitor (GDC-0068) for the treatment of human tumors. J Med Chem. 2012 Sep 27;55(18):8110-27.
HB211207
暂无内容
暂无内容