第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hifair® III Reverse Transcriptase在Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达65℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kb的cDNA。Hifair® III Reverse Transcriptase, 600 U/μL, Glycerol-free第三代耐热逆转录酶(无甘油版)可用于制备冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂等。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11297ES09 (6 KU)

11297ES12 (12 KU)

11297ES75 (300 KU)

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/μL)

10 μL

20 μL

500 μL

 

产品应用

冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂盒。

 

活性定义

以Poly(A).Oligo(dT)为模板-引物,在37℃,10 min内,将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,效期6个月。

 

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解。

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

参考操作步骤

1. 体系配置:

组分

组分

使用量

13840-A

10×Bst Buffer

2.5 µL

13840-C

100 mmol/L MgSO4

2 µL

dNTP Mix (100 mmol/L)

dNTP Mix (100 mmol/L)

3.5 µL

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

0.35 µL

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/µL, Glycerol-free)

0.1 µL

10703

Murine RNase inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

0.2 µL

13839(可选)

Heat Labile UDG (200 U/µL)(可选)

0.005 µL

10×Primersa

10×Primers

2 µL

13840-Bb

Bst Ⅱ Plus DNA polymerase (120 U/µL, Glycerol-free)

0.5 µL

RNase free ddH2O

RNase free ddH2O

To 25 µL

a. 10×Primers:16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each;引物组的比例也可以进行适当的调整。

b. 可根据实验具体情况来调整用量。

2. 反应程序设置

温度

时间

作用

37℃

2 min

消化

65℃

30-60 mina

逆转录和恒温扩增

85℃

10 min

灭活

a. 探针法的引物可以直接选择目的通道收集荧光,1 min采集一次荧光。染料法可以额外添加货号为13841的染料,通道选择SYBR,1 min采集一次荧光。   

 

相关产品

 

产品名称

货号

规格

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

14402ES92

8,000 U

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL)

14403ES20

20,000 U

10× Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase Buffer

15441ES03

1 mL

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

13762ES60

100 T

RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit

13906ES65

100 T

新冠RT-LAMP检测预混液 RT-LAMP COVID-19 Primer Master Mix (N)

13995ES60

100 T

Uracil DNA Glycosylase (UDG),   Heat-Labile (Glycerol-Free)

10707ES60

100 U

Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μL,Glycerol-free

11302ES12

10,000 U

Murine RNase Inhibitor(200   U/µL,Glycerol-free)

10703ES05

2 KU

Murine RNase Inhibitor(40   U/µL,Glycerol-free)

10701ES05

2 KU

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶

11300ES92

10,000 U

HB220720

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

暂无内容

[1] Huang R, Xu L, Wang Y, et al. Efficient fabrication of stretching hydrogels with programmable strain gradients as cell sheet delivery vehicles. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;129:112415. doi:10.1016/j.msec.2021.112415(IF:7.328)
[2] Zhang ZP, Bai X, Cui WB, et al. Diterpenoid Caesalmin C Delays Aβ-Induced Paralysis Symptoms via the DAF-16 Pathway in Caenorhabditis elegans. Int J Mol Sci. 2022;23(12):6871. Published 2022 Jun 20. doi:10.3390/ijms23126871(IF:5.924)
[3] Li N, Lin SM, Li Y, Sun J, Zhang L, Chen M. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi004-A) derived from a fetus with heterozygous G380R mutation in FGFR3 gene causing achondroplasia. Stem Cell Res. 2021;53:102322. doi:10.1016/j.scr.2021.102322(IF:2.020)
[4] Jia N, Gong X, Chen J, et al. Generation of an induced pluripotent stem cell line (OGHFUi001-A) from a type 1 early infantile epileptic encephalopathy with ARX mutation. Stem Cell Res. 2021;53:102367. doi:10.1016/j.scr.2021.102367(IF:2.020)
[5] Chen M, Lin SM, Li N, Li Y, Li Y, Zhang L. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi003-A) derived from a fetus with exon 3 heterozygous deletion in RUNX2 gene causing cleidocranial dysplasia. Stem Cell Res. 2021;51:102166. doi:10.1016/j.scr.2021.102166(IF:2.020)

Hifair® III Reverse Transcriptase在Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达65℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kb的cDNA。Hifair® III Reverse Transcriptase, 600 U/μL, Glycerol-free第三代耐热逆转录酶(无甘油版)可用于制备冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂等。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11297ES09 (6 KU)

11297ES12 (12 KU)

11297ES75 (300 KU)

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/μL)

10 μL

20 μL

500 μL

 

产品应用

冻干制剂、可冻干RT-LAMP试剂盒。

 

活性定义

以Poly(A).Oligo(dT)为模板-引物,在37℃,10 min内,将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,效期6个月。

 

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解。

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

参考操作步骤

1. 体系配置:

组分

组分

使用量

13840-A

10×Bst Buffer

2.5 µL

13840-C

100 mmol/L MgSO4

2 µL

dNTP Mix (100 mmol/L)

dNTP Mix (100 mmol/L)

3.5 µL

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

dUTP Mix (100 mmol/L)(可选)

0.35 µL

11297

Hifair® III Reverse Transcriptase (600 U/µL, Glycerol-free)

0.1 µL

10703

Murine RNase inhibitor (200 U/µL, Glycerol-free)

0.2 µL

13839(可选)

Heat Labile UDG (200 U/µL)(可选)

0.005 µL

10×Primersa

10×Primers

2 µL

13840-Bb

Bst Ⅱ Plus DNA polymerase (120 U/µL, Glycerol-free)

0.5 µL

RNase free ddH2O

RNase free ddH2O

To 25 µL

a. 10×Primers:16 µmol/L FIP/BIP, 2 µmol/L F3/B3, 4 µmol/L Loop F/B each;引物组的比例也可以进行适当的调整。

b. 可根据实验具体情况来调整用量。

2. 反应程序设置

温度

时间

作用

37℃

2 min

消化

65℃

30-60 mina

逆转录和恒温扩增

85℃

10 min

灭活

a. 探针法的引物可以直接选择目的通道收集荧光,1 min采集一次荧光。染料法可以额外添加货号为13841的染料,通道选择SYBR,1 min采集一次荧光。   

 

相关产品

 

产品名称

货号

规格

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (40 U/μL)

14402ES92

8,000 U

Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase (2,000 U/μL)

14403ES20

20,000 U

10× Bst Ⅱ Plus DNA Polymerase Buffer

15441ES03

1 mL

RT-LAMP Dye Assay Kit(UDG plus)

13762ES60

100 T

RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit

13906ES65

100 T

新冠RT-LAMP检测预混液 RT-LAMP COVID-19 Primer Master Mix (N)

13995ES60

100 T

Uracil DNA Glycosylase (UDG),   Heat-Labile (Glycerol-Free)

10707ES60

100 U

Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μL,Glycerol-free

11302ES12

10,000 U

Murine RNase Inhibitor(200   U/µL,Glycerol-free)

10703ES05

2 KU

Murine RNase Inhibitor(40   U/µL,Glycerol-free)

10701ES05

2 KU

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶

11300ES92

10,000 U

HB220720

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase Glycerol-free

暂无内容

[1] Huang R, Xu L, Wang Y, et al. Efficient fabrication of stretching hydrogels with programmable strain gradients as cell sheet delivery vehicles. Mater Sci Eng C Mater Biol Appl. 2021;129:112415. doi:10.1016/j.msec.2021.112415(IF:7.328)
[2] Zhang ZP, Bai X, Cui WB, et al. Diterpenoid Caesalmin C Delays Aβ-Induced Paralysis Symptoms via the DAF-16 Pathway in Caenorhabditis elegans. Int J Mol Sci. 2022;23(12):6871. Published 2022 Jun 20. doi:10.3390/ijms23126871(IF:5.924)
[3] Li N, Lin SM, Li Y, Sun J, Zhang L, Chen M. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi004-A) derived from a fetus with heterozygous G380R mutation in FGFR3 gene causing achondroplasia. Stem Cell Res. 2021;53:102322. doi:10.1016/j.scr.2021.102322(IF:2.020)
[4] Jia N, Gong X, Chen J, et al. Generation of an induced pluripotent stem cell line (OGHFUi001-A) from a type 1 early infantile epileptic encephalopathy with ARX mutation. Stem Cell Res. 2021;53:102367. doi:10.1016/j.scr.2021.102367(IF:2.020)
[5] Chen M, Lin SM, Li N, Li Y, Li Y, Zhang L. An induced pluripotent stem cell line (GZHMCi003-A) derived from a fetus with exon 3 heterozygous deletion in RUNX2 gene causing cleidocranial dysplasia. Stem Cell Res. 2021;51:102166. doi:10.1016/j.scr.2021.102166(IF:2.020)

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hifair®  III Reverse Transcriptase是在Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的新一代逆转录酶,与Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比,其cDNA合成速度快,且热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair®  III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kbcDNA

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11302ES12

(10000 U)

11302ES75

(5*10000 U)

11302

Hifair®  III Reverse Transcriptase, 200 U/μl, Glycerol-free

50 μL

250 μL

产品应用

全长cDNA文库构建;终点法PCR;实时定量PCR等。

活性定义

Poly(A) .Oligo(dT)为模板引物,在37℃10 min内,将1 nmoldTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,有效期6个月。

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染;

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解;

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

第一链cDNA合成操作步骤

1. RNA变性(此步为可选步骤,RNA变性有助于打开二级结构,可在很大程度上提高第一链cDNA的产量。)

组分

使用量

RNase free ddH2O

to 13 μL

Oligo (dT)18 (50 μM)

or Random Primers (50 ng/μL)  

or Gene Specific Primers (2 μM)

1 μL

or 1 μL

or 1 μL

模板RNA

Total RNA: 10 pg -5 μgmRNA:10 pg-500 ng

65℃加热5 min,迅速置于冰上冷却2 min。简短离心收集反应液后加入下表中的逆转录反应液,并用移液器轻轻吹打混匀。

2. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

13 μL

5×Buffer

4 μL

dNTP Mix (10 mM)

1 μL

Hifair® III Reverse Transcriptase, 200 U/μl, Glycerol-free

1 μL

RNase inhibitor (40 U/µL)

1 μL

3. 逆转录程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15-30 min

85℃

5 min

【注】

1)当使用Random Primers时,需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18Gene Specific Primers,此步可省略;

2)逆转录温度:推荐使用55℃;对于GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃

3) 可将逆转录时间延长到45-60min,有助于提高产量

485℃加热5 min,目的是使逆转录酶失活。

逆转录产物可立即用于后续PCRqPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

 

相关产品

产品名称

货号

规格

dNTP Mix (10 mM each)

10124ES76

500 μL

10124ES80

1 mL

Bst II DNA polymerase

12908ES60

1600 U

12908ES97

8000 U

12908ES98

40000 U

Murine RNase inhibitor (40 U/μL) 鼠源RNase抑制剂

10603ES05

2 KU

10603ES10

10 KU

10603ES20

100 KU

10603ES60

200 KU

 

HB210923

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

暂无内容

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

暂无内容

Hifair®  III Reverse Transcriptase是在Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的新一代逆转录酶,与Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase相比,其cDNA合成速度快,且热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair®  III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达19.8 kbcDNA

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11302ES12

(10000 U)

11302ES75

(5*10000 U)

11302

Hifair®  III Reverse Transcriptase, 200 U/μl, Glycerol-free

50 μL

250 μL

产品应用

全长cDNA文库构建;终点法PCR;实时定量PCR等。

活性定义

Poly(A) .Oligo(dT)为模板引物,在37℃10 min内,将1 nmoldTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

运输与保存方法

冰袋运输。4℃保存,有效期6个月。

注意事项

1. 请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染;

2. 所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解;

3. 为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

第一链cDNA合成操作步骤

1. RNA变性(此步为可选步骤,RNA变性有助于打开二级结构,可在很大程度上提高第一链cDNA的产量。)

组分

使用量

RNase free ddH2O

to 13 μL

Oligo (dT)18 (50 μM)

or Random Primers (50 ng/μL)  

or Gene Specific Primers (2 μM)

1 μL

or 1 μL

or 1 μL

模板RNA

Total RNA: 10 pg -5 μgmRNA:10 pg-500 ng

65℃加热5 min,迅速置于冰上冷却2 min。简短离心收集反应液后加入下表中的逆转录反应液,并用移液器轻轻吹打混匀。

2. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

13 μL

5×Buffer

4 μL

dNTP Mix (10 mM)

1 μL

Hifair® III Reverse Transcriptase, 200 U/μl, Glycerol-free

1 μL

RNase inhibitor (40 U/µL)

1 μL

3. 逆转录程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15-30 min

85℃

5 min

【注】

1)当使用Random Primers时,需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18Gene Specific Primers,此步可省略;

2)逆转录温度:推荐使用55℃;对于GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃

3) 可将逆转录时间延长到45-60min,有助于提高产量

485℃加热5 min,目的是使逆转录酶失活。

逆转录产物可立即用于后续PCRqPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

 

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产品名称

货号

规格

dNTP Mix (10 mM each)

10124ES76

500 μL

10124ES80

1 mL

Bst II DNA polymerase

12908ES60

1600 U

12908ES97

8000 U

12908ES98

40000 U

Murine RNase inhibitor (40 U/μL) 鼠源RNase抑制剂

10603ES05

2 KU

10603ES10

10 KU

10603ES20

100 KU

10603ES60

200 KU

 

HB210923

第三代耐热逆转录酶(无甘油版)|Hifair® III Reverse Transcriptase,200 U/μl,Glycerol-free

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暂无内容

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

品牌 其他品牌

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA,是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。本机器采用微芯片控制和热风对流技术,提供了精确的温度控制和恒定的温度环境。炉内空气循环装置设计*,升温速度快、均匀。这使其成为Northern 和Southern 杂交实验理想杂交系统。它的底部还有一个摇动基座,同时还可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

产品简述:

分子杂交炉是现代实验室采用杂交技术的理想设备,可替代塑料杂交袋和水浴摇床,并避免杂交袋破损带来污染危险。本机器采用微芯片控制和热风对流技术,提供了精确的温度控制和恒定的温度环境。炉内空气循环装置设计*,升温速度快、均匀。这使其成为Northern 和Southern 杂交实验理想杂交系统。它的底部还有一个摇动基座,同时还可适用于如放置杂交袋等其他严格要求的孵育实验。

产品特点

1、微电脑控制器提供精确的温度控制。

2、升温速度快

3、管式旋转

4、杂交管易装卸

5、内部使用防腐蚀、镜面不锈钢材料制造

6、双层玻璃门设计,有效防止辐射

7、底部可带摇动基座,一机多用

8、比振荡水浴污染机会少

9、密封性高

技术参数:

型号 LF-I LF-III LF-IIIA
恒温范围 室温 +5℃-100℃ 室温 +5℃-100℃ 室温 +5℃-100℃
控温精度 ±0.5℃ ±0.5℃ ±0.5℃
温度均匀性误差 ±0.03℃ ±0.03℃ ±0.03℃
温度显示分辨率 01℃ 01℃ 01℃
温度平衡时间 <20 min <20 min <20 min
旋转速度 6.5±0.5r/min 固定 5-20r/min 转速可调 6-25r/min 转速可调
连续工作时间 24小时 24小时 24小时
杂交管容纳数 6个 6个 6个
底部摇动基座
频   率 0-33 Hz 0-33 Hz
振   幅 0-1 mm 0-1 mm
外部尺寸 450*390*370 mm 450*390*400 mm 440*480*430 mm
内部尺寸 340*220*210 mm 340*220*220 mm 340*220*220 mm
随机杂交管 35*240 mm 35*240 mm 35*240 mm
可选配杂交管 35*150 mm,35*300 mm 35*150 mm,35*300 mm 35*150 mm,35*300 mm
显示方式 数显 液晶显示

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

分子杂交炉LF-I/LF-III/LF-IIIA

 

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

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COA

已发表文献

产品描述 

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为4种类型:胶原酶I型、II型、III型和IV型,在应用上有所偏向:1)胶原酶I(Type I Collagenase:含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶,胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;2)胶原酶II(Type II Collagenase:含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源细胞的制备;3)胶原酶III(Type III Collagenase:含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;4)胶原酶IV(Type IV Collagenase:含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

 

产品性质

 

分子量(Molecular Weight)

68-130 kDa

激活剂(Activators)

Ca2+、Zn2+

抑制剂(Inhibitors)

EDTA, EGTA,Cysteine, histidine,   2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+,   Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力单位(Unit definition)

在37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

 

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

 

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

 

产品应用场景和主要特点  

应用场景

名称

货号

主要特点

原生质体制备

Snailase 蜗牛酶

10404ES

来源于蜗牛的混合酶,可降解植物细胞壁。

生长调节剂

(生长促进剂

生长延缓剂

新型植物激素)

Zeatin 玉米素

41001ES

从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的,促进侧芽生长,刺激细胞分化,促进愈伤组织和种子发芽,还能防止叶片衰老。

Trans-Zeatin 反玉米素

41002ES

高纯的反式玉米素,适用于植物组织培养。

Trans-Zeatin-Riboside 反玉米素核苷

41003ES

是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素,功能上不仅促进细胞分裂,刺激茎芽增殖,抑制根的生成,阻止叶片衰老,还能激活基因表达和代谢活性。

Indole-3-acetic acid(IAA)3-吲哚乙酸

40509ES

适用于植物细胞或组织培养。

(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸

41004ES

抑制幼苗生长。

rac-GR24(strigolactone analog) 独脚金内酯

41012ES

近年来发现的一种植物激素或其前体,能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。

抗生素

(抗细菌

抗真菌

抗性筛选)

 

 

Timentin 特美汀

60230ES

特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。

Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素

60214ES

实验室中应用非常普遍:微生物学研究,细胞培养内抑制细菌污染,分子生物学研究

Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐

60208ES

主要对革兰氏阳性菌有效,作用于细菌的细胞壁,对人类的毒性较小。

Penicillin-Streptomycin,青霉素-链霉素

60162ES

有效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,从而有效控制细胞被细菌污染。

Rifampicin 利福平

60234ES

有效的广谱抗菌抗生素。

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206ES

对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。

Aureobasidin A(AbA)金担子素A

60231ES

一种环状肽、抗真菌的抗生素,具有很强的抗真菌能力,主要抗酵母菌。

Hygromycin B 潮霉素B

60225ES

用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。

G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素

60220ES

将抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选携带抗性基因的细胞。

除草剂

Glyphosate 草甘膦(甘草磷),95%

41011ES

对多年生的恶习性杂草如茅草、香附子、狗牙根有很好的防除效果。

Glufosinate-ammonium草铵膦

60221ES

毒性低,活性高,广谱的非选择性除草剂,其有效成分是草丁膦。

Bialaphos 双丙氨膦

60235ES

用于筛选含有抗性基因的基因工程细胞系,且在玉米培养中比草铵膦的活性强。

 

 

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入1 mL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成100 mg/mL(即100×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1)使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2)利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3)加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4)于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5) 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1)向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2)按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3)将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

 

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100 mg

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Collagenase IV胶原酶IV型

100 mg

40511ES60

Collagenase V胶原酶V型

100 mg

 

HB220705

 

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

暂无内容

[1] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)

产品描述 

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为4种类型:胶原酶I型、II型、III型和IV型,在应用上有所偏向:1)胶原酶I(Type I Collagenase:含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶,胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;2)胶原酶II(Type II Collagenase:含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、肝、甲状腺和软骨等组织来源细胞的制备;3)胶原酶III(Type III Collagenase:含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;4)胶原酶IV(Type IV Collagenase:含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

 

产品性质

 

分子量(Molecular Weight)

68-130 kDa

激活剂(Activators)

Ca2+、Zn2+

抑制剂(Inhibitors)

EDTA, EGTA,Cysteine, histidine,   2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+,   Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力单位(Unit definition)

在37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

 

运输和保存方法

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

 

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2)本产品仅作科研用途!

 

产品应用场景和主要特点  

应用场景

名称

货号

主要特点

原生质体制备

Snailase 蜗牛酶

10404ES

来源于蜗牛的混合酶,可降解植物细胞壁。

生长调节剂

(生长促进剂

生长延缓剂

新型植物激素)

Zeatin 玉米素

41001ES

从幼嫩的玉米芯中发现分离出来的,促进侧芽生长,刺激细胞分化,促进愈伤组织和种子发芽,还能防止叶片衰老。

Trans-Zeatin 反玉米素

41002ES

高纯的反式玉米素,适用于植物组织培养。

Trans-Zeatin-Riboside 反玉米素核苷

41003ES

是一种活性高且应用广泛的天然合成细胞分裂素,功能上不仅促进细胞分裂,刺激茎芽增殖,抑制根的生成,阻止叶片衰老,还能激活基因表达和代谢活性。

Indole-3-acetic acid(IAA)3-吲哚乙酸

40509ES

适用于植物细胞或组织培养。

(+)-Abscisic acid(ABA) (+)-脱落酸

41004ES

抑制幼苗生长。

rac-GR24(strigolactone analog) 独脚金内酯

41012ES

近年来发现的一种植物激素或其前体,能够抑制植物的分枝和侧芽的生长。

抗生素

(抗细菌

抗真菌

抗性筛选)

 

 

Timentin 特美汀

60230ES

特美汀对革兰阳性菌、阴性菌、需氧及厌氧菌的抗菌范围甚广。

Gentamicin Sulfate Salt 硫酸庆大霉素

60214ES

实验室中应用非常普遍:微生物学研究,细胞培养内抑制细菌污染,分子生物学研究

Penicillin G,Sodium Salt青霉素G钠盐

60208ES

主要对革兰氏阳性菌有效,作用于细菌的细胞壁,对人类的毒性较小。

Penicillin-Streptomycin,青霉素-链霉素

60162ES

有效抑制多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长,从而有效控制细胞被细菌污染。

Rifampicin 利福平

60234ES

有效的广谱抗菌抗生素。

Kanamycin Sulfate 硫酸卡那霉素

60206ES

对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有抑制作用。

Aureobasidin A(AbA)金担子素A

60231ES

一种环状肽、抗真菌的抗生素,具有很强的抗真菌能力,主要抗酵母菌。

Hygromycin B 潮霉素B

60225ES

用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。

G418 Sulfate(Geneticin) 遗传霉素

60220ES

将抗性基因导入细胞,使其获得对G418的耐药性,从而用来筛选携带抗性基因的细胞。

除草剂

Glyphosate 草甘膦(甘草磷),95%

41011ES

对多年生的恶习性杂草如茅草、香附子、狗牙根有很好的防除效果。

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毒性低,活性高,广谱的非选择性除草剂,其有效成分是草丁膦。

Bialaphos 双丙氨膦

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用于筛选含有抗性基因的基因工程细胞系,且在玉米培养中比草铵膦的活性强。

 

 

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入1 mL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成100 mg/mL(即100×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1)使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2)利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3)加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4)于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5) 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1)向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2)按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3)将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

 

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HB220705

 

Collagenase III 胶原酶III型 蛋白酶 肽链内切酶

暂无内容

[1] Wu B, Qiang L, Zhang Y, et al. The deubiquitinase OTUD1 inhibits colonic inflammation by suppressing RIPK1-mediated NF-κB signaling. Cell Mol Immunol. 2022;19(2):276-289. doi:10.1038/s41423-021-00810-9(IF:11.530)

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Exonuclease III是一种核酸外切酶,该酶作用于双链DNA,从3’OH末端方向逐步切去单核苷酸。该酶最适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此该酶难以切割3'突出末端。3'到5'外切酶活性对底物的消化程度随3'突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端难以被切割。这种特

性可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端),此时Exonuclease III将仅消化一条链。

Exonuclease III的活性部分依赖DNA双螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。此外,该酶也有RNase H、3’-磷酸酶、脱嘌呤/嘧啶(AP)位点特异性核酸内切酶活性。

 

产品信息

货号

14525ES90 / 14525ES96

规格

5,000 U / 25,000 U

 

组分信息

组分编号

组分名称

14525ES90

14525ES96

14525-A

Exonuclease III (100 U/μL)

50 μL

5×50 μL

14525-B

10× Exo III Buffer

500 μL

500 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用说明

酶切反应操作步骤

1. 于冰上配置如下反应体系

组分

使用量

DNA

~ 5 μg

10× Exo III Buffer

5 μL

Exonuclease III (100 U/μL)

0.5 μL

Nuclease-Free Water

to 50 μL

2. 37℃孵育30 min。

3. 加入终浓度为11 mM的EDTA终止反应或70℃孵育30 min使Exonuclease III失活

4. 琼脂糖电泳检测双链DNA酶切结果。

 

注意事项

1. Exonuclease III 不能切割硫代磷酸酯键。因此,也可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端保护起来,以

进行单向切割。这种特性可以用于对一端为钝化末端(3’突出端),另一端是敏感末端(平端或 5’突出端)的线性DNA分子进行单方向切割。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅用作科研用途。

Ver.CN20231212

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

暂无内容

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暂无内容

 

Exonuclease III是一种核酸外切酶,该酶作用于双链DNA,从3’OH末端方向逐步切去单核苷酸。该酶最适底物是平末端或5'末端突出的DNA,但也可以作用于双链DNA切刻位点产生单链缺口。由于对单链DNA无活性,因此该酶难以切割3'突出末端。3'到5'外切酶活性对底物的消化程度随3'突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端难以被切割。这种特

性可以用于生产特定方向的单链DNA,将线性化DNA设计成为一端为不切割末端(3'突出端),另一端则设计为易切割末端(平端或5'突出端),此时Exonuclease III将仅消化一条链。

Exonuclease III的活性部分依赖DNA双螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。此外,该酶也有RNase H、3’-磷酸酶、脱嘌呤/嘧啶(AP)位点特异性核酸内切酶活性。

 

产品信息

货号

14525ES90 / 14525ES96

规格

5,000 U / 25,000 U

 

组分信息

组分编号

组分名称

14525ES90

14525ES96

14525-A

Exonuclease III (100 U/μL)

50 μL

5×50 μL

14525-B

10× Exo III Buffer

500 μL

500 μL

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

使用说明

酶切反应操作步骤

1. 于冰上配置如下反应体系

组分

使用量

DNA

~ 5 μg

10× Exo III Buffer

5 μL

Exonuclease III (100 U/μL)

0.5 μL

Nuclease-Free Water

to 50 μL

2. 37℃孵育30 min。

3. 加入终浓度为11 mM的EDTA终止反应或70℃孵育30 min使Exonuclease III失活

4. 琼脂糖电泳检测双链DNA酶切结果。

 

注意事项

1. Exonuclease III 不能切割硫代磷酸酯键。因此,也可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将DNA分子的一端保护起来,以

进行单向切割。这种特性可以用于对一端为钝化末端(3’突出端),另一端是敏感末端(平端或 5’突出端)的线性DNA分子进行单方向切割。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3. 本产品仅用作科研用途。

Ver.CN20231212

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

暂无内容

Exonuclease III 核酸外切酶(100 U/μL)

暂无内容

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

Hifair®III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)是含有gDNA去除步骤的cDNA第一链合成试剂盒。该试剂盒基于Hifair®III Reverse Transcriptase而开发。该酶cDNA合成速度快,且热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair®III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可合成长达19.8 kb的cDNA。

该试剂盒包含gDNA digester Mix,可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。该试剂盒提供两种cDNA合成引物:Random Primers N6和Oligo (dT)18,用户可根据需要,选择Random Primers N6,Oligo (dT)18Gene Specific Primers作为逆转录引物,合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR或者qPCR反应。

 

产品信息

货号

11139ES10 / 11139ES60

规格

10 T / 100 T

 

组分信息

组分编号

组分名称

11139ES10

11139ES60

11139-A

RNase-free H2O

1 mL

2×1 mL

11139-B

5×gDNA Digester Mix

30 μL

300 μL

11139-C

10×Hifair® III Super Buffer*

20 μL

200 μL

11139-D

Hifair® III RT Enzyme Mix**

10 μL

100 μL

11139-E

Random Primers N6 (50 μM)

10 μL

100 μL

11139-F

Oligo (dT)18 (50 μM)

10 μL

100 μL

*10×Hifair® III Super Buffer 包含gDNA digester抑制剂和dNTPs。

** Hifair® III RT Enzyme Mix 包含RNase inhibitor。

 

储存条件

-25~-15℃避光储存,有效期18个月。

 

使用说明

1.关于逆转录引物的选择

1)如果模板为真核生物来源,建议选择Oligo (dT)18 ,与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对,可获得最高产量的全长cDNA。

2)原核生物RNA的反转录请选用Random Primers N6或者基因特异性引物。

3)Random Primers N6适用性较广,适用于mRNA、rRNA、tRNA、small RNA和LncRNA等模板。

2.第一链cDNA合成操作步骤

1)若实验需要去除残留基因组DNA

a.  gDNA消化

RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min。

组分

使用量

RNase-free H2O

To 15 μL

5×gDNA Digester Mix

3 μL

Total RNA

10 pg-5 μg*

or mRNA

10 pg-500 ng*

1 gDNA消化体系*

*若后续实验为qPCR,Total RNA投入量为10 pg -1 μg;mRNA的投入量为10 pg-100 ng。若基因的表达丰度很低,最多可投入5 ug Total RNA或500 ng mRNA。

b. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

15 μL

10×Hifair® III Super Buffer

2 μL

Hifair® III RT Enzyme Mix

1 μL

Random Primers N6 (50 μM)

1 μL

or Oligo (dT)18 (50 μM)

or Gene Specific Primer (2 μM)

or 1 μL

or 1 μL

RNase-free H2O

to 20 μL

2逆转录体系(以20 μL为例)*

*使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

1)逆转录引物:后续进行qPCR时,推荐Random Primers N6与Oligo (dT)18 1:1混合使用。

2)建议先加入10×Hifair® III Super Buffer混匀后再添加逆转录引物,以保证完全抑制gDNA digester的活性。

3)体系配制完成后,请用移液器轻轻吹打混匀。

c. 逆转录标准程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15 min

85℃

5 min

3逆转录标准程序*

*标准程序设置建议。

1)逆转录温度:推荐使用55℃。对于高GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃。

2)逆转录时间:后续进行qPCR时,推荐15 min;若后续用于PCR时,推荐30 min-60 min。

d. 逆转录快速程序设置

温度

时间

55℃

15 min

85℃

5 sec

4逆转录快速程序*

*逆转录快速程序适用于中低GC含量(≤55%)或者常规模板后续的荧光定量实验。

e. 产物保存

逆转录产物可以-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

2)若实验无需去除残留基因组DNA

a. RNA模板变性

RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。65℃孵育5 min,迅速置于冰上,并静置3 min。

组分

使用量

RNase-free H2O

To 17 μL

Total RNA

10 pg -5 μg

or mRNA

10 pg-500 ng

Random Primers N6 (50 μM)

1 μL

or Oligo (dT)18 (50 μM)

or Gene Specific Primer (2 μM)

or 1 μL

or 1 μL

5 RNA模板变性体系

b. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

17 μL

10×Hifair® III Super Buffer

2 μL

Hifair® III RT Enzyme Mix

1 μL

6逆转录体系(以20 μL为例)*

c. 逆转录标准程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15 min

85℃

5 min

7逆转录标准程序*

*标准程序设置建议。

1)逆转录温度:推荐使用55℃。对于高GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃。

2)逆转录时间:后续进行qPCR时,推荐15 min;若后续用于PCR时,推荐30 min-60 min。

d. 逆转录快速程序设置

温度

时间

55℃

15 min

85℃

5 sec

8逆转录快速程序*

*逆转录快速程序适用于中低GC含量(≤55%)或者常规模板后续的荧光定量实验。

e. 产物保存

逆转录产物可以-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

3)miRNA第一链cDNA茎环法合成操作步骤

a.  gDNA消化

RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min。

组分

使用量

RNase-free H2O

To 15 μL

5×gDNA Digester Mix

3 μL

Total RNA

10 pg -5 μg

9 gDNA消化体系

b.  miRNA逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

15 μL

10×Hifair® III Super Buffer

2 μL

Hifair® III RT Enzyme Mix

1 μL

Gene Specific Primer (10 μM)

1 μL

RNase-free H2O

to 20 μL

10 miRNA逆转录体系(以20 μL为例)*

*1)建议先加入10×Hifair® III Super Buffer混匀后再添加逆转录引物,以保证完全抑制gDNA digester的活性。

*2)体系配制完成后,请用移液器轻轻吹打混匀。

c.  miRNA逆转录标准程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15 min

85℃

5 min

11 miRNA标准扩增程序*

*a. 逆转录时间:后续进行qPCR时,推荐15 min;若后续用于PCR时,推荐30 min-60 min。

 

注意事项

  1. 反应液的配制应在冰上操作完成,操作过程应避免RNase污染。
  2. 建议RNA是溶于水而不是TE中,因为TE会干扰gDNA去除以及逆转录反应。
  3. 5×gDNA digester Mix、10×Hifair® III Super Buffer、Hifair® III RT Enzyme Mix使用前请轻轻上下颠倒混匀,并小心离心至底部。吸取液体时请使用量程合适的移液器,枪头不要插入液面下过深。
  4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
  5. qPCR实验推荐基因组去除步骤,保证结果更加真实可靠。
  6. 本产品仅作科研用途!

 

Ver.CN20230407

Q逆转录反应中的引物如何选择?

A根据实验目的不同,可按下列建议选择选择指南可见下表

a)对于全长第一链 cDNA 合成,且模板为真核生物来源,推荐选择Oligo (dT)引物。b)当目标区域具有复杂二级结构或模板为原核生物来源,推荐选择 Random Primers 引物。

c)基因特异性引物(GSP)是与模板序列互补的引物,适用于目的序列已知的情况。d)若逆转录后续为 qPCR 实验,可将 Oligo (dT)与Random Primers 混合使用。

逆转录引物选择指南

 

特征

优点

缺点

结合方式

Oligo (dT)

1)12-20 个

T;

2)与真核生 mRNA 3 ’ Poly A 尾配对。

全长 cDNA。

1   polyA

mRNA; 2  对模板 高。

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

Random Primers

1)6-9 个碱基;

2)可随机识别模板并结合。

杂结

量模板。

特异性低, 小片段多。

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

基因特异    

GSP)

识别特定模板序列。

特异性强, 灵敏度高。

特定的序列。

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

Q能否用来做 miRNA/circRNA/lncRNA 的逆转录?

A A 尾的 lncRNA 用预混液和 KIT  11123/11141/11121/11139) 都可以, circRNAmiRNA 和无 A 尾的 lncRNA   KIT11121/11139microRNA 需要特殊的茎环引物,需特别针对的逆转录试剂盒。

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

Q克隆逆转和定量逆转有什么区别?克隆逆转产物和定量逆转产物可以相互吗?

Aa)目的不同:克隆逆转后的 cDNA 后续用于基因克隆,后续实验以普通 PCR 为主; 定量逆转后的 cDNA 后续用于基因定量,后续实验以qPCR 为主。

  1. 逆转录过程不同:克隆逆转使用 Oligo dT,保证合成的长度。随机引物使用较少; 定量逆转使用 Oligo dT 或随机引物,或两者混合使用。
  2. 克隆逆转产物可用于 qPCR,但定量逆转产物不推荐用于普通 PCR,定量逆转试剂中含 Oligo (dT)与 Random Primers 混合引物,产物长度较短,可做短片段 PCR,过长的不适合。

Q逆转录试剂盒可以逆转真菌(或其他物种)RNA 吗?有没有专门针对真菌(或其他物种)的RNA 逆转录的试剂盒呢?

ARNA 的物种与逆转录没有很大关系,RNA 质量与逆转录有关。所以,得到 RNA 后, 逆转录试剂盒都可以用,没有特别针对的。

QRNase 残留降解RNA?

A原因:若去除试剂中残留 RNase,会使 RNA 发生降解,减少了 RNA 模板量,导致效果差。

检测方法:RNA 去除试剂前后分别进行电泳检测,检测RNA 完整性。优化方法:选用无RNase 级别的 gDNA 去除试剂。

Q: miRNA茎环法逆转录可以用这款产品吗?

A: 可以的,设计特异性引物替代试剂盒中的引物加入到程序中。参考程序如下:

茎环引物(10uM) :1ul

上一步的反应液:15ul

10×super buffer:2ul

RT enzyme mix: 1ul

ddH2O:  1ul

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[2] Zhang Y, Ding H, Wang X, et al. MK2 promotes Tfcp2l1 degradation via β-TrCP ubiquitin ligase to regulate mouse embryonic stem cell self-renewal. Cell Rep. 2021;37(5):109949. doi:10.1016/j.celrep.2021.109949(IF:9.423)
[3] Liu X, Zhan T, Gao Y, et al. Benzophenone-1 induced aberrant proliferation and metastasis of ovarian cancer cells via activated ERα and Wnt/β-catenin signaling pathways. Environ Pollut. 2022;292(Pt B):118370. doi:10.1016/j.envpol.2021.118370(IF:8.071)
[4] Li C, Song J, Guo Z, et al. EZH2 Inhibitors Suppress Colorectal Cancer by Regulating Macrophage Polarization in the Tumor Microenvironment. Front Immunol. 2022;13:857808. Published 2022 Apr 1. doi:10.3389/fimmu.2022.857808(IF:7.561)
[5] Wu Z, Lu Z, Li L, et al. Identification and Validation of Ferroptosis-Related LncRNA Signatures as a Novel Prognostic Model for Colon Cancer. Front Immunol. 2022;12:783362. Published 2022 Jan 26. doi:10.3389/fimmu.2021.783362(IF:7.561)
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[11] Wang G, Wang X, Ma H, et al. PcWRKY11, an II-d WRKY Transcription Factor from Polygonum cuspidatum, Enhances Salt Tolerance in Transgenic Arabidopsis thaliana. Int J Mol Sci. 2022;23(8):4357. Published 2022 Apr 14. doi:10.3390/ijms23084357(IF:5.924)
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Hifair®III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (gDNA digester plus)是含有gDNA去除步骤的cDNA第一链合成试剂盒。该试剂盒基于Hifair®III Reverse Transcriptase而开发。该酶cDNA合成速度快,且热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair®III Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可合成长达19.8 kb的cDNA。

该试剂盒包含gDNA digester Mix,可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。该试剂盒提供两种cDNA合成引物:Random Primers N6和Oligo (dT)18,用户可根据需要,选择Random Primers N6,Oligo (dT)18Gene Specific Primers作为逆转录引物,合成的单链cDNA产物可直接用来进行后续PCR或者qPCR反应。

 

产品信息

货号

11139ES10 / 11139ES60

规格

10 T / 100 T

 

组分信息

组分编号

组分名称

11139ES10

11139ES60

11139-A

RNase-free H2O

1 mL

2×1 mL

11139-B

5×gDNA Digester Mix

30 μL

300 μL

11139-C

10×Hifair® III Super Buffer*

20 μL

200 μL

11139-D

Hifair® III RT Enzyme Mix**

10 μL

100 μL

11139-E

Random Primers N6 (50 μM)

10 μL

100 μL

11139-F

Oligo (dT)18 (50 μM)

10 μL

100 μL

*10×Hifair® III Super Buffer 包含gDNA digester抑制剂和dNTPs。

** Hifair® III RT Enzyme Mix 包含RNase inhibitor。

 

储存条件

-25~-15℃避光储存,有效期18个月。

 

使用说明

1.关于逆转录引物的选择

1)如果模板为真核生物来源,建议选择Oligo (dT)18 ,与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对,可获得最高产量的全长cDNA。

2)原核生物RNA的反转录请选用Random Primers N6或者基因特异性引物。

3)Random Primers N6适用性较广,适用于mRNA、rRNA、tRNA、small RNA和LncRNA等模板。

2.第一链cDNA合成操作步骤

1)若实验需要去除残留基因组DNA

a.  gDNA消化

RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min。

组分

使用量

RNase-free H2O

To 15 μL

5×gDNA Digester Mix

3 μL

Total RNA

10 pg-5 μg*

or mRNA

10 pg-500 ng*

1 gDNA消化体系*

*若后续实验为qPCR,Total RNA投入量为10 pg -1 μg;mRNA的投入量为10 pg-100 ng。若基因的表达丰度很低,最多可投入5 ug Total RNA或500 ng mRNA。

b. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

15 μL

10×Hifair® III Super Buffer

2 μL

Hifair® III RT Enzyme Mix

1 μL

Random Primers N6 (50 μM)

1 μL

or Oligo (dT)18 (50 μM)

or Gene Specific Primer (2 μM)

or 1 μL

or 1 μL

RNase-free H2O

to 20 μL

2逆转录体系(以20 μL为例)*

*使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

1)逆转录引物:后续进行qPCR时,推荐Random Primers N6与Oligo (dT)18 1:1混合使用。

2)建议先加入10×Hifair® III Super Buffer混匀后再添加逆转录引物,以保证完全抑制gDNA digester的活性。

3)体系配制完成后,请用移液器轻轻吹打混匀。

c. 逆转录标准程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15 min

85℃

5 min

3逆转录标准程序*

*标准程序设置建议。

1)逆转录温度:推荐使用55℃。对于高GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃。

2)逆转录时间:后续进行qPCR时,推荐15 min;若后续用于PCR时,推荐30 min-60 min。

d. 逆转录快速程序设置

温度

时间

55℃

15 min

85℃

5 sec

4逆转录快速程序*

*逆转录快速程序适用于中低GC含量(≤55%)或者常规模板后续的荧光定量实验。

e. 产物保存

逆转录产物可以-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

2)若实验无需去除残留基因组DNA

a. RNA模板变性

RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。65℃孵育5 min,迅速置于冰上,并静置3 min。

组分

使用量

RNase-free H2O

To 17 μL

Total RNA

10 pg -5 μg

or mRNA

10 pg-500 ng

Random Primers N6 (50 μM)

1 μL

or Oligo (dT)18 (50 μM)

or Gene Specific Primer (2 μM)

or 1 μL

or 1 μL

5 RNA模板变性体系

b. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

17 μL

10×Hifair® III Super Buffer

2 μL

Hifair® III RT Enzyme Mix

1 μL

6逆转录体系(以20 μL为例)*

c. 逆转录标准程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15 min

85℃

5 min

7逆转录标准程序*

*标准程序设置建议。

1)逆转录温度:推荐使用55℃。对于高GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃。

2)逆转录时间:后续进行qPCR时,推荐15 min;若后续用于PCR时,推荐30 min-60 min。

d. 逆转录快速程序设置

温度

时间

55℃

15 min

85℃

5 sec

8逆转录快速程序*

*逆转录快速程序适用于中低GC含量(≤55%)或者常规模板后续的荧光定量实验。

e. 产物保存

逆转录产物可以-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

3)miRNA第一链cDNA茎环法合成操作步骤

a.  gDNA消化

RNase-free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min。

组分

使用量

RNase-free H2O

To 15 μL

5×gDNA Digester Mix

3 μL

Total RNA

10 pg -5 μg

9 gDNA消化体系

b.  miRNA逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

15 μL

10×Hifair® III Super Buffer

2 μL

Hifair® III RT Enzyme Mix

1 μL

Gene Specific Primer (10 μM)

1 μL

RNase-free H2O

to 20 μL

10 miRNA逆转录体系(以20 μL为例)*

*1)建议先加入10×Hifair® III Super Buffer混匀后再添加逆转录引物,以保证完全抑制gDNA digester的活性。

*2)体系配制完成后,请用移液器轻轻吹打混匀。

c.  miRNA逆转录标准程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15 min

85℃

5 min

11 miRNA标准扩增程序*

*a. 逆转录时间:后续进行qPCR时,推荐15 min;若后续用于PCR时,推荐30 min-60 min。

 

注意事项

  1. 反应液的配制应在冰上操作完成,操作过程应避免RNase污染。
  2. 建议RNA是溶于水而不是TE中,因为TE会干扰gDNA去除以及逆转录反应。
  3. 5×gDNA digester Mix、10×Hifair® III Super Buffer、Hifair® III RT Enzyme Mix使用前请轻轻上下颠倒混匀,并小心离心至底部。吸取液体时请使用量程合适的移液器,枪头不要插入液面下过深。
  4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
  5. qPCR实验推荐基因组去除步骤,保证结果更加真实可靠。
  6. 本产品仅作科研用途!

 

Ver.CN20230407

Q逆转录反应中的引物如何选择?

A根据实验目的不同,可按下列建议选择选择指南可见下表

a)对于全长第一链 cDNA 合成,且模板为真核生物来源,推荐选择Oligo (dT)引物。b)当目标区域具有复杂二级结构或模板为原核生物来源,推荐选择 Random Primers 引物。

c)基因特异性引物(GSP)是与模板序列互补的引物,适用于目的序列已知的情况。d)若逆转录后续为 qPCR 实验,可将 Oligo (dT)与Random Primers 混合使用。

逆转录引物选择指南

 

特征

优点

缺点

结合方式

Oligo (dT)

1)12-20 个

T;

2)与真核生 mRNA 3 ’ Poly A 尾配对。

全长 cDNA。

1   polyA

mRNA; 2  对模板 高。

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

Random Primers

1)6-9 个碱基;

2)可随机识别模板并结合。

杂结

量模板。

特异性低, 小片段多。

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

基因特异    

GSP)

识别特定模板序列。

特异性强, 灵敏度高。

特定的序列。

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

Q能否用来做 miRNA/circRNA/lncRNA 的逆转录?

A A 尾的 lncRNA 用预混液和 KIT  11123/11141/11121/11139) 都可以, circRNAmiRNA 和无 A 尾的 lncRNA   KIT11121/11139microRNA 需要特殊的茎环引物,需特别针对的逆转录试剂盒。

Hifair® III cDNA第一链合成试剂盒(含gDNA去除)|Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA digester plus)

Q克隆逆转和定量逆转有什么区别?克隆逆转产物和定量逆转产物可以相互吗?

Aa)目的不同:克隆逆转后的 cDNA 后续用于基因克隆,后续实验以普通 PCR 为主; 定量逆转后的 cDNA 后续用于基因定量,后续实验以qPCR 为主。

  1. 逆转录过程不同:克隆逆转使用 Oligo dT,保证合成的长度。随机引物使用较少; 定量逆转使用 Oligo dT 或随机引物,或两者混合使用。
  2. 克隆逆转产物可用于 qPCR,但定量逆转产物不推荐用于普通 PCR,定量逆转试剂中含 Oligo (dT)与 Random Primers 混合引物,产物长度较短,可做短片段 PCR,过长的不适合。

Q逆转录试剂盒可以逆转真菌(或其他物种)RNA 吗?有没有专门针对真菌(或其他物种)的RNA 逆转录的试剂盒呢?

ARNA 的物种与逆转录没有很大关系,RNA 质量与逆转录有关。所以,得到 RNA 后, 逆转录试剂盒都可以用,没有特别针对的。

QRNase 残留降解RNA?

A原因:若去除试剂中残留 RNase,会使 RNA 发生降解,减少了 RNA 模板量,导致效果差。

检测方法:RNA 去除试剂前后分别进行电泳检测,检测RNA 完整性。优化方法:选用无RNase 级别的 gDNA 去除试剂。

Q: miRNA茎环法逆转录可以用这款产品吗?

A: 可以的,设计特异性引物替代试剂盒中的引物加入到程序中。参考程序如下:

茎环引物(10uM) :1ul

上一步的反应液:15ul

10×super buffer:2ul

RT enzyme mix: 1ul

ddH2O:  1ul

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BHC-III苏洁*

BHC-III苏洁*

品牌

BHC-III苏洁*具有全封闭、全负压和全排放的特点。的空气经两道过滤后全排放到实验室系统的排风系统集中处理。符合YY0569标准和美国NSF/ANSI49标准中的三级生物安全柜的要求。

现货,!

BHC-III苏洁*

产品简述:
 
BHC-III苏洁*是用于微生物学,生物医学,生物安全实验室和其它实验室的生物安全防护隔离设备。它采用了的空气净化技术和负压箱体设计,实现了对环境,人员和样品的保护,可以防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散;对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护,是实验室生物安全一级防护屏障中基本的安全防护设备。采用支架式结构,支架与箱体可分离,便于搬运和就位。

产品特点: 
◎符合YY0569标准和美国NSF/ANSI49标准中的三级生物安全柜的要求。 
◎0%气体循环,适用于挥发性有毒、放射性物质的样品。 
◎具有全封闭、全负压和全排放的特点。的空气经两道过滤后全排放到实验室系统的排风系统集中处理。 
◎符合人体工学原理的10°倾斜角设计,操作感受更佳。 
◎工作区内部为整体优质不锈钢板制成,便于清洁、消毒和灭菌。 
◎全封闭式加强型安全玻璃前窗,用严格的物理方法通过隔离手套进行柜内操作。 
◎安全柜右侧设有传递窗,内有紫外线杀菌灯,使产品在传递窗中就可杀菌。 
◎空气经高质量的ULPA超高效过滤器,针对>0.12微米颗粒具有99.999%的截流效率,双重过滤后外排,确保产品样品、实验室工作人员以及实验室环境的安全防护。 
◎内外隔离阀门,适合内部的灭菌处理。 
◎柜体外部采用抗菌涂层,可抑制细菌在表面的滋生。 
◎支架式的安全柜,支架与上箱体可以分离,便于搬运与就位。

型号及技术参数:

参数/型号 BHC-III
洁净等级 HEPA:ISO 5级(100级Class100)/ULPA:ISO 4级(10级Class 10)
过滤器级别/过滤效率 HEPA:≥99.995%,@0.3μm/ULPA:≥99.999%,@0.12μm
平均送风风速 0.35m/s
吸入口风速 0.6m/s
噪   音 58-65dB(A)
振动半峰值 ≤3μm
光照度 ≥300Lx
   
大功耗 0.6KW
内部压力 -125
电源 -220V,50Hz
重量 340 kg 380 kg
手套口数量 2只 4只
工作区尺寸 1000×600×600 mm 1300×600×600 mm
外形尺寸 1600×660×1980mm 1800×660×1980 mm
日光灯/紫外灯规格及数量 30①/30① 30×②
   
适用人数 单人 双人

BHC-III苏洁*

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

Ⅲ型胶原蛋白,是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白,与I型胶原蛋白比例为4比1。Ⅲ型胶原蛋白较细小,存在于表皮层和真皮层之间,称之为“婴儿胶原蛋白”,在婴儿时期含量高达80%,是维持皮肤弹性的重要蛋白质。微胶原层主要由Ⅲ型胶原蛋白构成,是指位于表皮层与真皮层之间的组织结构,是撑起表皮的关键,也是肌肤塌陷的第一步。人体无法通过自身合成产生Ⅲ型胶原蛋白。

本公司生产的重组人III型胶原蛋白片段通过基因重组技术,在大肠杆菌中发酵表达,经过多种分离纯化方法得到,高纯度、低内毒素的类人III型胶原蛋白。

 

性能参数

表达宿主

E.coli

分子量

约为10 kDa

纯度

> 90%SDS-PAGE检测

内毒素

< 1.0 EU/μg

保存缓冲液

20 mM Tris.Cl, 100 mM Nacl, pH8.0

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期3年。

一般应避免反复冻融,建议将蛋白分装成小份保存。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver. CN20240219

 

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

暂无内容

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

暂无内容

 

Ⅲ型胶原蛋白,是人体皮肤、筋膜、肌腱中主要的胶原蛋白,与I型胶原蛋白比例为4比1。Ⅲ型胶原蛋白较细小,存在于表皮层和真皮层之间,称之为“婴儿胶原蛋白”,在婴儿时期含量高达80%,是维持皮肤弹性的重要蛋白质。微胶原层主要由Ⅲ型胶原蛋白构成,是指位于表皮层与真皮层之间的组织结构,是撑起表皮的关键,也是肌肤塌陷的第一步。人体无法通过自身合成产生Ⅲ型胶原蛋白。

本公司生产的重组人III型胶原蛋白片段通过基因重组技术,在大肠杆菌中发酵表达,经过多种分离纯化方法得到,高纯度、低内毒素的类人III型胶原蛋白。

 

性能参数

表达宿主

E.coli

分子量

约为10 kDa

纯度

> 90%SDS-PAGE检测

内毒素

< 1.0 EU/μg

保存缓冲液

20 mM Tris.Cl, 100 mM Nacl, pH8.0

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期3年。

一般应避免反复冻融,建议将蛋白分装成小份保存。

 

注意事项

1. 本产品仅作科研用途

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

Ver. CN20240219

 

重组人III型胶原蛋白 Recombinant Human Type III Collagen Protein

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