小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

产品说明书

FAQ

COA

已发表文献

 

肿瘤坏死因子α(TNF-α),也称为恶病质素,又名TNFSF1A,是一种多效细胞因子,在炎症、细胞凋亡和免疫系统发育中起核心作用,可由多种免疫细胞、上皮细胞、内皮细胞和肿瘤细胞产生。TNF-α受体主要是TNFR1和TNFR2,其信号可以激活caspase 8、转录因子NF-κB和激酶JNK等。人TNF-α的氨基酸组成与小鼠TNF-α有79%的同源性,TNF-α的生物学功能似乎没有明显的种属特异性。研究表明TNF-α一方面对某些类型的感染具有抵抗力,另一方面又引起炎症,在病理过程中起着矛盾的作用。TNF-α也可能影响葡萄糖摄取与胰岛素抵抗密切相关。同时TNF-α在肿瘤增殖、迁移、侵袭和血管生成中也起着关键作用。

翌圣Mouse TNF-α ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的小鼠肿瘤坏死因子α(Mouse TNF-α)。特异性抗小鼠肿瘤坏死因子α抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的小鼠肿瘤坏死因子α与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠肿瘤坏死因子α的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 – 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

98029ES48 / 98029ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

31.25-2000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

小鼠

检测时长

4.5小时

灵敏度

7.82 pg/mL

稀释线性

84 – 124%

回收率

81 – 119%

板内差

3.8%

板间差

5.3%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。标准曲线图

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

  1. 灵敏度检测

TNF-α的最低检测限为7.82 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

8

8

8

24

24

24

平均值

940.0

241.4

57.9

942.6

236.5

59.6

标准差

40.0

9.5

1.9

64.0

9.2

3.2

变异系数%

4.3

3.9

3.3

6.8

3.9

5.3

  1. 回收率检测

 通过不同水平的TNF-α添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

112.3

103.0-119.1

血浆

94.0

81.0-104.5

细胞培养上清

90.0

82.6-98.0

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

104.4

102.0-107.1

1:04

106.0

98.0-112.4

1:08

116.9

108.1-122.1

1:16

97.6

88.1-108.7

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

107.1

95.2-115.2

1:04

109.4

105.2-114.0

1:08

118.1

118.2-124.2

1:16

107.2

99.8-113.9

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

107.1

94.5-122.9

1:04

104.0

88.3-120.2

1:08

104.7

84.3-123.2

1:16

94.2

85.7-106.1

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

4

n.d.

n.d.

血浆

4

n.d.

n.d.

细胞培养上清

4

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得31.25 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠肿瘤坏死因子α。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant Mouse:

IL-1α

IL-10

IL-1α

IL-10

IL-1β

IL-12

IL-1β

IFN-γ

IL-2

IFN-γ

IL-2

VEGF

IL-4

TNF-α

IL-4

RANKL

IL-5

LIF

IL-5

TRAIL

IL-6

RANKL

IL-6

 

IL-8

TRAIL

 

 

检测简图

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

暂无内容

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

暂无内容

 

肿瘤坏死因子α(TNF-α),也称为恶病质素,又名TNFSF1A,是一种多效细胞因子,在炎症、细胞凋亡和免疫系统发育中起核心作用,可由多种免疫细胞、上皮细胞、内皮细胞和肿瘤细胞产生。TNF-α受体主要是TNFR1和TNFR2,其信号可以激活caspase 8、转录因子NF-κB和激酶JNK等。人TNF-α的氨基酸组成与小鼠TNF-α有79%的同源性,TNF-α的生物学功能似乎没有明显的种属特异性。研究表明TNF-α一方面对某些类型的感染具有抵抗力,另一方面又引起炎症,在病理过程中起着矛盾的作用。TNF-α也可能影响葡萄糖摄取与胰岛素抵抗密切相关。同时TNF-α在肿瘤增殖、迁移、侵袭和血管生成中也起着关键作用。

翌圣Mouse TNF-α ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种体外酶联免疫吸附测定试剂盒,用于定量测定血清、血浆中的小鼠肿瘤坏死因子α(Mouse TNF-α)。特异性抗小鼠肿瘤坏死因子α抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本,经过孵育,样本中存在的小鼠肿瘤坏死因子α与固相抗体结合。洗涤去除未结合的物质后,加入检测抗体孵育结合,经洗涤,再加入酶结合物(Streptavidin-HRP)孵育结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中小鼠肿瘤坏死因子α的浓度成正比。加入终止液终止反应,在450 nm 波长(参考波长570 – 630 nm)测定吸光度值。

 

产品信息

货号

98029ES48 / 98029ES96 

规格

48 T / 96 T

检测范围

31.25-2000 pg/mL

检测方法

双抗夹心法

检测物种

小鼠

检测时长

4.5小时

灵敏度

7.82 pg/mL

稀释线性

84 – 124%

回收率

81 – 119%

板内差

3.8%

板间差

5.3%

 

实验数据

  1. 标曲数据

数据拟合绘制标准曲线,生成的标曲用于实验数据分析。标准曲线图

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

  1. 灵敏度检测

TNF-α的最低检测限为7.82 pg/mL,通过使用重复检测20次零孔OD值的均值与标准差计算得出。

  1. 精密度检测

酶标板内精密度

3个已知浓度的样本酶标板内重复测定8次,评估酶标板内的精密度。

酶标板间精密度

3个已知浓度的样本酶标板间重复检测24次,评估酶标板间的精密度。

项目

板内精密度

板间精密度

样本

1

2

3

1

2

3

8

8

8

24

24

24

平均值

940.0

241.4

57.9

942.6

236.5

59.6

标准差

40.0

9.5

1.9

64.0

9.2

3.2

变异系数%

4.3

3.9

3.3

6.8

3.9

5.3

  1. 回收率检测

 通过不同水平的TNF-α添加于样本中来测定回收率,其回收率如下:

样本类型

平均回收率(%)

范围(%)

血清

112.3

103.0-119.1

血浆

94.0

81.0-104.5

细胞培养上清

90.0

82.6-98.0

  1. 稀释线性检测

血清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

104.4

102.0-107.1

1:04

106.0

98.0-112.4

1:08

116.9

108.1-122.1

1:16

97.6

88.1-108.7

 

血浆稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

107.1

95.2-115.2

1:04

109.4

105.2-114.0

1:08

118.1

118.2-124.2

1:16

107.2

99.8-113.9

 

细胞培养上清稀释比例

平均期望值(%)

范围(%)

1:02

107.1

94.5-122.9

1:04

104.0

88.3-120.2

1:08

104.7

84.3-123.2

1:16

94.2

85.7-106.1

  1. 样本值

应用本试剂盒,检测若干健康志愿者的样本,志愿者的用药史不详。

样本类型

样本数目

平均值(pg/mL)

样本值(pg/mL)

血清

4

n.d.

n.d.

血浆

4

n.d.

n.d.

细胞培养上清

4

n.d.

n.d.

n.d. 指样本浓度值低于检测范围内得31.25 pg/mL

  1. 测定特异性

本试剂盒识别天然和重组小鼠肿瘤坏死因子α。下述因子进行了特异性的评估,没有观察到明显的交叉反应和干扰影响。

Recombinant human:

Recombinant Mouse:

IL-1α

IL-10

IL-1α

IL-10

IL-1β

IL-12

IL-1β

IFN-γ

IL-2

IFN-γ

IL-2

VEGF

IL-4

TNF-α

IL-4

RANKL

IL-5

LIF

IL-5

TRAIL

IL-6

RANKL

IL-6

 

IL-8

TRAIL

 

 

检测简图

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

 

疑问解答

问题

造成原因

解决方法

标曲不好

移液量不准确

检查移液器,按时校准,仔细操作,充分混匀时盖紧管口并尽量避免泡沫。

稀释方法不恰当

显色值偏低

孵育时间太短

给予足够的孵育时间,样本和溶解的标准品隔夜后更换。

移液量不足或稀释不当

校准移液器和规范操作

CV偏高

酶标板清洗不当

使用正确的洗涤工序;如果使用洗板机,检查所有的端口是否堵塞。

受污染的洗液

准备新鲜洗液

灵敏度较低

试剂盒储存不当

按照产品组分表进行保存。

 

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

暂无内容

小鼠TNF-αELISA试剂盒 Mouse TNF-α ELISA Kit

暂无内容